徐潔玲 方運香 余錦燕

[摘要]目的 探討泌尿生殖道感染女性患者宮頸分泌物中淋病奈瑟菌（NG）、沙眼衣原體（CT）、解脲脲原體（UU）與白帶常見病原微生物的感染情況及特點。方法 選擇2015年1月～2017年9月我院收治的100例泌尿生殖道感染女性患者展開研究，采用實時熒光聚合酶鏈反應(yīng)（FQ-PCR）、常規(guī)培養(yǎng)法、革蘭染色法等方法檢測，觀察患者宮頸分泌物中NG、CT、UU和白帶常見病原微生物的感染情況與特點。結(jié)果 UU的陽性檢出率均明顯高于NG、CT，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。在對患者白帶進(jìn)行檢測中，革蘭陽性小桿菌的陽性檢出率更高（P<0.05）。在混合感染陽性檢出率中，僅檢出CT+UU混合感染類型，而在白帶混合感染呈陽性檢測中，相對于其他類型，革蘭陽性小桿菌+革蘭陰性桿菌混合感染陽性檢出率表現(xiàn)更突出（P<0.05）。結(jié)論 泌尿生殖道感染女性患者宮頸分泌物中，NG、CT、UU和白帶常見病原微生物均存在程度不一的感染表現(xiàn)，其檢出率亦存在明顯差異，經(jīng)混合感染后更加復(fù)雜，提示臨床需重視。

[關(guān)鍵詞]泌尿生殖道感染；淋病奈瑟菌；沙眼衣原體；解脲脲原體；白帶病原微生物；感染情況；感染特點

[中圖分類號] R446.5 [文獻(xiàn)標(biāo)識碼] A [文章編號] 1674-4721（2018）3（c）-0120-03

[Abstract]Objective To investigate the infection and characteristics of cervical secretions including Neisseria gonorrhoeae （NG），Chlamydia trachomatis （CT），Ureaplasma urealyticum （UU） and common pathogenic microorganisms from leucorrhea in genitourinary tract infection women.Methods From January 2015 to September 2017，a total of 100 female patients with genitourinary tract infection admitted to our hospital were studied.By real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction （FQ-PCR），conventional culture，Gram staining，the infection and characteristics of cervical secretions including NG，CT，and UU and common pathogenic microorganisms from leucorrhea were observed.Results The positive rate of UU was significantly higher than that of NG and CT，with statistical differences （P<0.05）.In detection of leucorrhea，the positive rate of Gram-positive dialister bacteria was higher （P<0.05）.In the positive detection rate of mixed infection，only mixed type of CT+UU was detected.For positive detection of leucorrhea mixed infection，compared with other types，the positive detection rate of mixed infection of Gram-positive dialister bacteria+Gram-negative bacteria was more prominent （P<0.05）.Conclusion NG，CT，UU of cervical secretions and common pathogenic microorganisms of leucorrhea in female genitourinary tract infection patients all display varying degrees of infection.The detection rate is also significantly different.After mixed infection，it is more complicated，suggesting that it should be paid attention in clinic.

[Key words]Genitourinary tract infection；Neisseria gonorrhoeae；Chlamydia trachomatis；Ureaplasma urealyticum；Leucorrhea pathogenic microorganism；Infection；Infection characteristics

隨著臨床研究的不斷深入，針對性傳播疾病（STD）的病原菌已逐漸清晰，其中淋病奈瑟菌（NG）、沙眼衣原體（CT）、解脲脲原體（UU）是現(xiàn)階段臨床公認(rèn)的主要病原菌，可引起婦女泌尿生殖道感染，是導(dǎo)致不孕的主要因素之一[1-2]。本研究選擇我院收治的100例泌尿生殖道感染女性患者展開研究，探討泌尿生殖道感染女性患者宮頸分泌物中NG、CT、UU與白帶常見病原微生物的感染情況及特點，旨在為臨床治療工作提供參考，現(xiàn)報道如下。

1資料與方法

1.1一般資料

選擇2015年1月～2017年9月我院收治的100例泌尿生殖道感染女性患者展開研究，年齡18～60歲，平均（30.8±5.1）歲；既往無生育史者39例，有生育史者61例。納入標(biāo)準(zhǔn)：本組患者入院均行病理學(xué)、影像學(xué)檢查確診，符合臨床對泌尿生殖道感染的診斷標(biāo)準(zhǔn)，本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會審核批準(zhǔn)，患者對于研究內(nèi)容知情并自愿簽署同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：伴有其他類型陰道疾病者；伴有全身血液性疾病者；伴有精神疾病者；存在意識不清晰或依從性較差者。

1.2方法

①采用熒光定量PCR儀（羅氏LightCycler 480型）行實時熒光定量PCR法，對NG、CT予以檢測，即在PCR反應(yīng)體系中，加入過量SYBR熒光染料，SYBR熒光染料特異性地?fù)饺隓NA雙鏈后，發(fā)射熒光信號，而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會發(fā)射任何熒光信號，從而保證熒光信號的增加與PCR產(chǎn)物的增加完全同步，生成SYBR定量PCR擴(kuò)增熒光曲線圖與PCR產(chǎn)物熔解曲線圖。所用試劑分別為NG、CT核酸檢定試劑盒（上海之江生物科技股份有限公司提供）；陽性判定標(biāo)準(zhǔn)：FAM通道CT不足38，且顯示擴(kuò)增曲線呈“S線”型[3-4]。②采用常規(guī)培養(yǎng)法對UU檢測，選擇鄭州安圖生物工程股份有限公司提供的UU檢測試劑盒，依據(jù)試劑盒說明書內(nèi)容操作；陽性判定依據(jù)：培養(yǎng)液由黃色轉(zhuǎn)變紅色，且培養(yǎng)液保持透明清澈為準(zhǔn)。③采用淋球菌選擇性巧克力平板（法國梅里埃產(chǎn)品）及NH鑒定板條（法國梅里埃產(chǎn)品）對宮頸分泌物進(jìn)行NG的培養(yǎng)及鑒定。④對于白帶的檢測采用革蘭染色法完成，采用無菌棉拭子對患者陰道后穹隆處與宮頸口等部位分泌物采集，隨后將其涂抹玻片，待干染色后鏡檢[5]，染色試劑由珠海貝索有限公司提供。

1.3統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 21.0統(tǒng)計學(xué)軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，正態(tài)分布的計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，采用t檢驗，計數(shù)資料以率表示，采用χ2檢驗，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1患者病原微生物陽性檢出率分析

UU的陽性檢出率均明顯高于CT、NG，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。在對患者進(jìn)行白帶檢測中，革蘭陽性小桿菌的陽性檢出率更高（P<0.05）（表1）。

2.2患者混合感染陽性檢出率分析

本組共檢出27例混合感染陽性，其中僅檢出CT+UU混合感染類型；而在白帶混合感染呈陽性檢測中，相對于其他類型，革蘭陽性小桿菌+革蘭陰性桿菌混合感染陽性檢出率表現(xiàn)更突出（P<0.05）（表2）。

3討論

隨著臨床對泌尿生殖道感染研究的不斷深入，STD致病微生物、病原菌愈發(fā)明確，較為突出表現(xiàn)在NG、CT、UU三種[6]。其中NG又有淋球菌之稱，屬于嚴(yán)格類型的人體寄生菌種類，多見于急性尿道炎、陰道炎等疾病膿性分泌物的白細(xì)胞內(nèi)，此菌種形態(tài)染色與腦膜炎球菌類似，經(jīng)感染后可引起泌尿生殖系統(tǒng)化膿性感染，形成性傳播疾病，即淋病[7]。NG的微生物學(xué)檢查主要采取尿道膿性分泌物涂片，后經(jīng)革蘭染色鏡檢確診，如在中性粒細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)革蘭陰性雙球菌時，診斷價值確切。CT則屬于微生物類型，可經(jīng)性接觸傳播，這與沙眼生物變種D～K血清型機(jī)制有關(guān)[8]?，F(xiàn)階段的研究發(fā)現(xiàn)其存在15個血清型，隨著血清型的不同，可引起不同類型的疾病。人類是沙眼衣原體自然宿主，CT主要寄生于機(jī)體黏膜上皮細(xì)胞內(nèi)，隨著臨床檢驗學(xué)的進(jìn)步，沙眼衣原體可于細(xì)胞培養(yǎng)液中生長，現(xiàn)多采用McCoy或HeLa229細(xì)胞株，在接種衣原體前，以X線照射細(xì)胞，或于細(xì)胞培養(yǎng)中加入代謝抑制如細(xì)胞松弛素B、DEAE葡聚糖呈放線菌酮，其目的在于減緩細(xì)胞生長代謝，以利于衣原體的寄生性生長[9]。UU屬于泌尿生殖道感染的主要病原體之一，多數(shù)患者為表面感染，正常情況下不會侵入血液，但對于其致病機(jī)制尚未完全闡述，目前多數(shù)認(rèn)為可能與侵襲性酶和毒性產(chǎn)物有關(guān)[10]。

本研究中，UU呈陽性檢出率較高，其次為NG，相對而言CT檢出率較低，這與藍(lán)惠華等[10]的研究結(jié)果存在一定差異。分析原因，除了本次研究樣本量較少外，地區(qū)感染、感染情況、病原體不同等因素導(dǎo)致陽性檢出率亦存在一定差異，建議進(jìn)一步大樣本研究證實。此外，在混合病原菌微生物方面，CT+UU檢出呈陽性率更高，這可能與泌尿生殖道微生物與宿主間相互作用有關(guān)，CT多寄生于人體真核細(xì)胞內(nèi)，受到感染后，泌尿生殖道黏膜出現(xiàn)破損，人體抵抗能力逐漸下降，加上UU的黏附，故更易被檢出[11]。兩者持續(xù)感染后，可引起子宮內(nèi)膜炎癥反應(yīng)，吞噬細(xì)胞不斷聚集，加上白細(xì)胞大量浸潤，并不斷吞噬炎性子宮內(nèi)膜細(xì)胞，進(jìn)一步誘發(fā)自身免疫反應(yīng)，引起白帶異常[12]。本組患者白帶方面提示泌尿生殖道混合感染相對復(fù)雜，需要進(jìn)一步深入的微生物學(xué)研究。此外，王麗[13]的研究顯示，在年齡方面，CT、UU感染峰值突出在20～40歲，這與應(yīng)小君等[14-15]的研究結(jié)果一致。分析原因，這與該年齡階段正處于性行為活躍的育齡階段有關(guān)，導(dǎo)致CT、UU感染風(fēng)險增加。

綜上所述，泌尿生殖道感染女性患者宮頸分泌物中NG、CT、UU和白帶常見病原微生物均存在程度不一的感染表現(xiàn)，其檢出率亦存在明顯差異，經(jīng)混合感染后更加復(fù)雜，且各年齡階段感染率均較高，提示臨床需重視。

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