(雅安市疾病預(yù)防控制中心，四川 雅安 625000)

1 采樣要求

1.1 采樣器具的準(zhǔn)備 器具：可用玻璃瓶或聚乙烯塑料瓶，必須能夠用塞或蓋緊密密封，用前無(wú)碘化處理：10%鹽酸浸泡(必要時(shí)還可用硫代硫酸鈉溶液泡)，然后用自來(lái)水和去離子水沖洗，晾干備用。

1.2 采樣量 推薦50～100mL

1.3 樣品的采集與保存

1.3.1 依據(jù)GB/T5750.5～2006

1.3.2 采樣后應(yīng)盡快送實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)，不能盡快檢測(cè)可4℃冰箱保存，若超過(guò)一周需低溫冷凍保存。

2 實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備

2.1 實(shí)驗(yàn)環(huán)境 防止碘污染，實(shí)驗(yàn)室環(huán)境嚴(yán)格避免碘污染，實(shí)驗(yàn)室內(nèi)不允許常量碘測(cè)定或用存放其他碘試劑，實(shí)驗(yàn)室與采血室間也要保持足夠距離，避免碘消毒劑影響。為防止碘污染，實(shí)驗(yàn)前用1%硫代硫酸鈉溶液擦拭桌面。

2.2 儀器試劑

2.2.1 玻璃器皿的清洗 初次使用或長(zhǎng)時(shí)間不用的玻璃器皿經(jīng)1+1硝酸 浸泡24h后，先用去離子水沖洗2～3遍，再將這些玻璃器皿用1%硫代酸鈉溶液浸泡12h以上，然后用去離子沖洗干凈，在溫室下晾干備用。所有的玻璃皿不能用鉻酸洗液浸泡，同時(shí)還要慎用消毒劑和清洗劑。

2.2.1.1 器皿注意切不可與測(cè)定碘鹽的玻璃器皿混用；另外水質(zhì)衛(wèi)生檢驗(yàn)的氨氮納氏比色法、砷的銀鹽比色法使用的試劑含高濃度的碘離子，這些檢驗(yàn)工作所用的器皿不可與尿碘檢驗(yàn)的混用，對(duì)此還須注意避免這些試劑對(duì)光度計(jì)比色皿的污染

2.2.1.2 配制試劑所用的氫氧化鈉、氯化鈉較可能碘雜質(zhì)較高，所以宜選用合適的并留用(專用)；亦有發(fā)現(xiàn)某一過(guò)硫酸銨固體、三氧化二砷試劑中含較高碘雜質(zhì)。

2.2.1.3 過(guò)硫酸銨的性質(zhì)不是太穩(wěn)定，見(jiàn)光容易分解，應(yīng)該存放在4℃冰箱內(nèi)；硫酸鈰試劑較易受潮，會(huì)影響配制濃度，將試劑放于干燥內(nèi)或經(jīng)100℃干燥后配制使用；三氧化二砷有劇毒，剩余的試劑不要隨便廢棄，溶液污染環(huán)境；碘標(biāo)準(zhǔn)使用液最好在臨用前配制，以防止低濃度的碘被存放容器吸附引起偏差，存放盡量不要與其他試劑一起存放。

2.2.1.4 試劑的純度要符合測(cè)定方法的要求，同批樣品的測(cè)定所用試劑必須是同一批號(hào)，且最好嚴(yán)格按要求一次性配好，而每一次試劑的配制做好由專人負(fù)責(zé)，盡可能避免配制條件的差異帶來(lái)的誤差。

2.2.2 實(shí)驗(yàn)用水：建議使用電阻高于100萬(wàn)歐姆的去離子水，而蒸餾水需要進(jìn)行無(wú)碘化處理。

2.2.3 器皿校準(zhǔn) 刻度吸管、移液管、加樣槍使用前要校準(zhǔn)，才能保證結(jié)果準(zhǔn)確。

3 分析過(guò)程的控制

3.1 水浴溫度 30℃，波動(dòng)范圍正負(fù)1℃。

3.2 排管 因?yàn)樯殁嫹磻?yīng)時(shí)褪色反應(yīng)，碘濃度越高，褪色越快，因此將標(biāo)準(zhǔn)系列溶液按碘濃度由高到低排列，各試劑均按此順序加入。

3.3 取樣 取250ul尿樣最好用刻度吸管吸取，用加樣槍取樣尿液有可能打不干凈，塑料吸頭有時(shí)會(huì)吸附少許尿液，導(dǎo)致測(cè)定結(jié)果不準(zhǔn)確。

3.4 消化 盡可能使用消解儀中部消化樣品，最好對(duì)全部消解儀孔進(jìn)行溫度檢測(cè)，溫度相差大于1℃時(shí)應(yīng)標(biāo)出不用。

3.4.1 樣品消化時(shí)的消化管孔徑大小、管壁薄厚盡可能一致；以減輕少因受熱不均勻而產(chǎn)生的誤差；消解儀消化溫度適中，過(guò)高消化樣液損失過(guò)多，過(guò)低消化不完全；條件不允許時(shí)刻采用電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱進(jìn)行消化，因?yàn)橄潴w內(nèi)裝有鼓風(fēng)系統(tǒng)，樣品消化后消化液的最終體積也非常接近。

3.4.2 因消化過(guò)程無(wú)終點(diǎn)指示以及消化時(shí)間、溫度又批間差異，每批樣品消化要與標(biāo)準(zhǔn)系列及空白試驗(yàn)同時(shí)進(jìn)行，以減少誤差，提高試驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)性。如果兩臺(tái)恒溫消解儀同時(shí)消化，每臺(tái)消解儀應(yīng)分別設(shè)置一套空白盒標(biāo)準(zhǔn)系列。

3.5 (1)加入硫酸鈰銨溶液時(shí)，要求準(zhǔn)確、快速，加樣槍要求校準(zhǔn)。由于硫酸鈰溶液容易附壁，所以加入時(shí)不能使硫酸鈰試劑接觸反應(yīng)管內(nèi)壁，加后必須立即充分搖勻放回水浴中，在吸取該溶液的時(shí)候要防止產(chǎn)生氣泡，以免影響加入量。(2)加入硫酸鈰銨溶液后的砷鈰反應(yīng)還可在20～35℃之間的某一穩(wěn)定的室溫(或控溫)條件中可進(jìn)行；每管加入硫酸鈰銨的時(shí)間間隔不需要固定為30s,亦可以是1min，只要時(shí)間間隔保持一致即可，如果人手少，每次做樣不要超過(guò)80份，加入硫酸鈰銨溶液時(shí)間間隔大于30s,不超過(guò)1min，因?yàn)楹竺娴墓茏釉诩恿蛩徕嬩@溶液時(shí)，前面的標(biāo)準(zhǔn)已經(jīng)到比色時(shí)間。

3.6 終點(diǎn)判斷 反應(yīng)時(shí)間以監(jiān)控碘標(biāo)準(zhǔn)濃度300ug/L管的吸光度達(dá)到0.15～0.20時(shí)，依順序進(jìn)行廣度測(cè)定[3]。實(shí)際操作時(shí)過(guò)早比色碘標(biāo)準(zhǔn)濃度300ug/L管的吸光度大于0.20，標(biāo)準(zhǔn)曲線相關(guān)系數(shù)r有可能達(dá)不到0.999，過(guò)遲比色碘標(biāo)準(zhǔn)濃度300ug/L管的顏色有可能退完，標(biāo)準(zhǔn)曲線做不出來(lái)，整個(gè)試驗(yàn)得重做。

3.6.1 建議標(biāo)準(zhǔn)曲線碘標(biāo)準(zhǔn)濃度300ug/L做平行樣，筆者發(fā)現(xiàn)25分鐘時(shí)要密切注意300ug/L管顏色深淺，過(guò)深繼續(xù)在水浴反應(yīng)，當(dāng)300ug/L管淡黃色拿出來(lái)比色，如果吸光度在0.15～0.20時(shí)，開(kāi)始比色；如果300ug/L管的吸光度大于0.20，重新把它放到水浴中繼續(xù)反應(yīng)；如果300ug/L管的吸光度小于0.15，將這管舍去馬上將另一管300ug/L作為第一管開(kāi)始比色。

3.7 比色 比色時(shí)，每管檢測(cè)的時(shí)間間隔應(yīng)與加硫酸鈰銨溶液的時(shí)間間隔一致。

3.8 當(dāng)按照尿碘測(cè)定方法操作結(jié)果出現(xiàn)工作曲線碘空白管的吸光值很小時(shí)(例如30℃條件下砷鈰反應(yīng)30min時(shí)碘空白管的測(cè)定吸光度<0.7)。先檢查光度計(jì)波長(zhǎng)是否準(zhǔn)確；是否使用了已風(fēng)化或潮解的過(guò)硫酸銨固體試劑；是否配制得的Ce4+溶液濃度偏低；再檢查檢測(cè)體系是否存在碘污染，并予以消除。這里的檢測(cè)體系包括：所用試劑、水、所用器皿、實(shí)驗(yàn)室環(huán)境。

3.9 重視利用國(guó)家凍干尿碘標(biāo)準(zhǔn)物進(jìn)行檢測(cè)質(zhì)量控制，以便發(fā)現(xiàn)誤差，采取措施消除誤差。

4 總結(jié)

尿碘砷鈰催化分光光度法測(cè)定干擾因素很多，實(shí)驗(yàn)前一定要保證環(huán)境無(wú)碘，所用的器具要進(jìn)行無(wú)碘化處理，所用的試劑和水不得含碘，保持消化溫度100℃，過(guò)高過(guò)低測(cè)得的碘含量都會(huì)偏低，每管比色的時(shí)間間隔應(yīng)與加硫酸鈰銨溶液的時(shí)間間隔一致，碘標(biāo)準(zhǔn)濃度300ug/L做平行樣，終點(diǎn)判斷在加入硫酸鈰銨25分鐘時(shí)密切觀察300ug/L管顏色深淺，以它的吸光度達(dá)到0.15～0.20時(shí)開(kāi)始比色，每次實(shí)驗(yàn)要帶內(nèi)部質(zhì)控[4]，這樣才能保證檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確可靠。

[1]李紅梅. 尿碘測(cè)定的質(zhì)量控制— 過(guò)硫酸銨消化砷鈰催化分光光度法[J].基層醫(yī)學(xué)論壇，2009, 13(17) : 1672-1673.

[2] 孫亞維,陳科杰,等. 尿碘檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室的質(zhì)量控制分析[J].中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2011(4):1016-1016.

[3]中國(guó)疾病預(yù)防控制中心地方病控制中心 WS/T107-2006尿中碘的砷鈰催化分光光度測(cè)定方法[R].地方病學(xué)，2008.6.102-104.

[4] 顧儀, 郭威. 尿碘實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)質(zhì)量保證的現(xiàn)狀及對(duì)策[J].中國(guó)公共衛(wèi)生2001.17(3)：268-268.