張河 張竹 張嘉勝
【摘要】目的 研究枸杞對果蠅壽命及生殖力的影響。方法 應(yīng)用野生型果蠅,在培養(yǎng)基中加入枸杞煎劑、鉛,觀察并記錄果蠅存活時間和產(chǎn)生后代(F1代)數(shù)目。結(jié)果 枸杞組其后代數(shù)、平均壽命都比對照組高,而鉛組、鉛+枸杞組的后代數(shù)、平均壽命比枸杞組低。結(jié)論 鉛會降低果蠅的平均壽命和生殖力;枸杞會提高果蠅的平均壽命和生殖力;枸杞可緩解果蠅的鉛中毒。
【關(guān)鍵詞】枸杞;鉛;果蠅;壽命;生殖力
【中圖分類號】R114 【文獻標識碼】B 【文章編號】ISSN.2095-6681.2018.3..02
果蠅細胞在代謝途徑、生理功能、發(fā)育、衰老等方面與哺乳動物基本相似。摩爾根[1]等從研究黑腹果蠅中發(fā)現(xiàn)了“伴性遺傳”、“連鎖與互換”等現(xiàn)象和規(guī)律,從而發(fā)展了染色體遺傳學說的。果蠅又具有高度純種性,繁殖快,管理方便,生存期短,所以果蠅生存試驗是國內(nèi)外常用的檢驗藥物延壽效應(yīng)的可靠方法。
枸杞子含有胡蘿卜素,硫胺素、核黃素、鹽酸、抗壞血酸等多種有益人體的維生素。研究證明,枸杞具有抑制脂肪在纖維內(nèi)蓄積、促進肝細胞的新生、降低血糖、降低膽固醇等作用。趙琦等[2]研究表明枸杞子具有一定的延緩衰老作用。陶大勇等[3]用半乳糖對小鼠制造衰老模型,發(fā)現(xiàn)灌胃黑果枸杞色素小鼠的血清和各器官組織中SOD活性皆高于衰老模型組,MDA含量顯著低于衰老模型組。陶少武等[4]發(fā)現(xiàn):含有枸杞子的培養(yǎng)基對果蠅性活力無有效作用,但能有效延長果蠅壽命。
鉛是一種積累性毒物。人類通過食物鏈攝取鉛,也能從被污染的空氣中攝取鉛。過量接觸、吸入鉛化合物或含鉛中藥,如樟丹、黑錫丹、羊癲瘋丸等,以及使用含鉛化妝品等也可引起中毒。孟金萍等[5]指出:鉛對生物體具有多方面的毒性,可導致智力低下、造血機能障礙、高血壓、腎病等并介紹了鉛對各個系統(tǒng)如神經(jīng)系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)、泌尿系統(tǒng)、生殖系統(tǒng)以及個體發(fā)育的毒性效應(yīng)。
本文基于果蠅試驗系統(tǒng),為科學地了解枸杞的藥物作用提供參考。
1 材料和方法
1.1 一般材料
野生型紅眼黑腹長翅果蠅由南京曉莊學院生命科學系遺傳實驗室提供。收集8 d內(nèi)羽化未交配的成蟲,雌雄分開,用普通培養(yǎng)基在溫度為(25±1)℃,相對濕度在50%~70%的環(huán)境中培養(yǎng)備用。
果蠅培養(yǎng)基:蔗糖、瓊脂、蒸餾水、玉米粉、酵母粉、丙酸。中草藥:枸杞購自當?shù)刂兴幏俊T噭阂宜徙U(pb(CH3COO)2·3H2O)分析純、丙酸。實驗儀器:恒溫生化培養(yǎng)箱(25±1)℃;相對濕度50%~70%;平底培養(yǎng)瓶。
1.2 實驗設(shè)計與方法
1.2.1 實驗分組
果蠅隨機分成四組,分別為:枸杞、枸杞+鉛、鉛、對照組。
1.2.2 制中藥煎劑
煎藥用具:沙罐。(1)先用冷水浸泡一小時左右,水高過藥面;(2)煮沸后火減小煎15 min;(3)頭煎藥汁倒下;(4)藥渣再加冷水煎15 min(文火)[6]。
1.2.3 果蠅培養(yǎng)基的配制。普通玉米粉培養(yǎng)基的配方[6]如下。A:糖6.2,瓊脂0.62 g,水38 ml煮沸溶解;B:玉米粉8.25 g,水38 ml,酵母粉0.7 g。A和B混合加熱后成糊粉狀,加0.5 ml丙酸,按比例配制,分裝到不同的培養(yǎng)基中。本實驗中用中草藥煎劑代替以上配方中的水。
1.2.4 果蠅壽命的測定
收集8 h內(nèi)羽化的果蠅成蟲,乙醚麻醉后雌雄分管培養(yǎng),對照組用基礎(chǔ)培養(yǎng)基,實驗組為用不同中草藥煎劑及鉛配制的培養(yǎng)基,每組雌雄各75只,每管可放25只,于溫度25℃,濕度65%培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)。每組全部果蠅死亡天數(shù)的算術(shù)平均數(shù)為該組的平均壽命,每組最后死亡的5只果蠅存活天數(shù)的平均數(shù)為該組的最高壽命。
1.2.5 果蠅生殖力的測定
收集8 h內(nèi)羽化的果蠅成蟲,乙醚麻醉后雌雄分管培養(yǎng),對照組用基礎(chǔ)培養(yǎng)基,實驗組為用中草藥煎劑及鉛配制的培養(yǎng)基,每組雌雄各20只,共分四管,每管放入5對果蠅,觀察產(chǎn)生的F1代個數(shù)。
1.3 統(tǒng)計學處理
采用單因素方差分析[7]。
2 結(jié) 果
2.1 枸杞和鉛對果蠅壽命的影響(見表1,表2)
3 討 論
對照組雌果蠅的平均壽命為57.7±1.2天;鉛組雌果蠅的平均壽命最低,為50.4±3.9天;說明鉛的存在會顯著降低雌果蠅的平均壽命。枸杞+鉛組雌果蠅的平均壽命為52.2±3.9天;表明枸杞可小幅度緩解鉛對雌果蠅的平均壽命的影響。枸杞組雌果蠅的平均壽命為61.0±3.0天,為各組最高,表明枸杞可延長雌果蠅的平均壽命、最高壽命。
對照組雄果蠅的平均壽命為63.4±6.2天;鉛組雄果蠅的平均壽命最低,為52.1±5.5天;說明鉛的存在會顯著降低雄果蠅的平均壽命。枸杞+鉛組雄果蠅的平均壽命為53.7±1.9天;表明枸杞可小幅度緩解鉛對雄果蠅的平均壽命的影響。枸杞組雄果蠅的平均壽命為63.9±2.1天,為各組最高,表明枸杞可延長雄果蠅的平均壽命、最高壽命。
對照組F1代果蠅數(shù)目為326.3±51.9;鉛組F1代果蠅數(shù)目最低,為55.7±11.7只;說明鉛的存在會顯著降低F1代果蠅數(shù)。枸杞+鉛組果蠅的F1代果蠅數(shù)目為77.9±3.4只;表明枸杞可小幅度緩解鉛對果蠅的生殖力的影響。枸杞組果蠅的F1代果蠅數(shù)目為382.0±26.7只,為各組最高,表明枸杞可顯著促進果蠅生殖力。鉛組的生殖高峰明顯推遲,出現(xiàn)于第3次統(tǒng)計;其它的組生殖高峰都出現(xiàn)于第2次統(tǒng)計。
綜上所述,鉛會顯著降低果蠅的平均壽命、生殖力;枸杞會顯著延長果蠅的平均壽命、生殖力;枸杞可緩解鉛對生物體的毒性影響。
參考文獻
[1] 劉祖洞,江紹慧.遺傳學實驗[M].北京:高等教育出版社,1987.
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[3] 陶大勇,陳佳娟,陳 瑛,白紅進.黑果枸杞色素對小鼠抗衰老作用的研究[J].中獸醫(yī)醫(yī)藥雜志,2008,(1):11-13.
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[6] 王俊林,宋高臣.黃芪對果蠅壽命影響的實驗研究[J].中醫(yī)藥學報,2005,33(4):34~35.
[7] 杜榮騫.生物統(tǒng)計學[M].北京:高等教育出版社,1985.
本文編輯:吳宏艷