李 娟,田 萍,李建設(shè),高艷明,任 慧,劉夢錦(寧夏大學(xué) 農(nóng)學(xué)院,寧夏 銀川 750021)
目前淡水資源不足成為限制農(nóng)業(yè)可持續(xù)發(fā)展的一個重要因素,為緩解水資源供需矛盾,微咸水的開發(fā)利用已在世界各國引起廣泛關(guān)注[1]。我國將礦化度在2~5 g/L的水資源稱為微咸水[2],微咸水鹽分含量高于淡水,用其灌溉一方面會導(dǎo)致土壤鹽分積累影響作物正常生長,但另一方面也可以顯著改善果實品質(zhì),尤其是果實中的糖分含量[3-4]。微咸水灌溉利用方式主要有3種,即直接灌溉、咸淡水混灌和咸淡水輪灌[5]。對于同一種礦化度的灌溉用水來說,灌水方式不同,其灌水效果也不同[6]。
番茄作為我國栽培面積最大的果類蔬菜,富含多種維生素和礦物質(zhì),深受廣大消費(fèi)者喜愛。但隨著設(shè)施農(nóng)業(yè)的快速發(fā)展,菜農(nóng)大水大肥追求產(chǎn)量的同時卻顯著降低了番茄品質(zhì),糖分含量作為番茄果實品質(zhì)的一個重要衡量指標(biāo),一直以來關(guān)注度很高[7-8]。蔗糖是番茄光合產(chǎn)物運(yùn)轉(zhuǎn)的主要形式,番茄果實中主要含有果糖和葡萄糖,其中以果糖為最甜,果糖的甜度是葡萄糖的2倍,是蔗糖的1.8倍[9],3種糖含量的高低對果實品質(zhì)影響很大。與蔗糖代謝密切相關(guān)的酶主要有酸性轉(zhuǎn)化酶(AI)、中性轉(zhuǎn)化酶(NI)、蔗糖合成酶(SS)和蔗糖磷酸合成酶(SPS),這4種酶在糖的積累和消耗之間起著重要的調(diào)節(jié)作用[10-11]。蔗糖代謝相關(guān)酶對環(huán)境條件比較敏感,可以利用各種手段有效地進(jìn)行環(huán)境調(diào)控[12],進(jìn)而達(dá)到提高番茄果實品質(zhì)的目的。關(guān)于番茄果實糖含量及蔗糖代謝相關(guān)酶活性的變化前人已有研究,但主要集中于氮鉀肥、灌溉水量及光照等方面,而微咸水灌溉方式對番茄果實糖積累及蔗糖代謝影響機(jī)理的研究尚未見報道。
本試驗在前人關(guān)于微咸水研究的基礎(chǔ)上,結(jié)合當(dāng)?shù)厮|(zhì)、土壤理化性質(zhì),分析微咸水(EC=3 mS/cm)不同灌溉方式對番茄果實不同部位糖含量及蔗糖代謝相關(guān)酶活性的影響,以揭示微咸水灌溉方式影響番茄果實糖積累的生理機(jī)理,為合理、高效利用微咸水提供理論參考。
試驗所用番茄品種為‘京番301’,屬于無限生長型,粉果,中熟品種。供試土壤為取自銀川市良田鎮(zhèn)植物園村的沙土。試驗所用地下淡水(EC=1.07 mS/cm)為原溫室井水,微咸水(EC=3.0 mS/cm)是根據(jù)寧夏銀川地區(qū)微咸水的離子成分,在原溫室地下淡水的基礎(chǔ)上添加4種工業(yè)鹽(NaHCO3、MgSO4·7H2O、CaCl2、K2SO4)配制而成。地下淡水、所配微咸水水質(zhì)及沙土理化性質(zhì)見表1。
表1 供試地下淡水、微咸水水質(zhì)及沙土的理化性質(zhì)Table 1 Quality of fresh water,saline water and physicochemical properties of sandy soil in the experiment
試驗于2016年2-7月在寧夏大學(xué)農(nóng)科實訓(xùn)基地5號日光溫室進(jìn)行,在防滲措施與灌水定額相同的條件下共設(shè)5個處理,分別為:微咸水直接灌溉(CK)、地下淡水灌溉(T1)、混合水灌溉(V(微咸水)∶V(地下淡水)=1∶1,T2)、微咸水與地下淡水按生育期輪灌(苗期、開花期為地下淡水處理,果實發(fā)育期微咸水處理,T3)、微咸水與地下淡水按次輪灌(第1天微咸水灌溉,第2天地下淡水灌溉,依次循環(huán),T4),每處理3次重復(fù),隨機(jī)區(qū)組排列。各處理均用容積約180 L的黑色水桶儲水,滴灌供液,每小區(qū)安置2根滴灌帶。2月23日番茄4葉1心時定植,定植時澆透清水促進(jìn)緩苗,緩苗10 d后開始不同灌溉方式處理,單稈整枝,留5穗果,每穗留4~5個果實。在番茄第1穗花開花期及每穗果坐果期,各處理均隨滴灌追施沃夫特大量元素水溶肥料(含N 16%(硝態(tài)N占9%),P2O56%,K2O 36%,B 0.2%,Cu、Zn、Fe、Mn各0.05%,),每次每桶追施500 g。所有處理施用的底肥均相同,分別為生物有機(jī)肥8 kg/m2,活力木素0.4 kg/m2,尿素0.01 kg/m2,撒可富磷酸二銨0.1 kg/m2,沃夫特硫酸鉀型復(fù)合肥(總養(yǎng)分≥51%)0.11 kg/m2,重過磷酸鈣0.13 kg/m2。7月6日拉秧,拉秧前5 d停止灌水。
1.3.1 果實不同部位糖含量 在番茄第2穗果白熟期、轉(zhuǎn)色期、成熟期,每處理采集6~8個大小相似的鮮果,洗凈后解剖成果皮、果肉、心室隔壁、膠質(zhì)胎座4個部位,測定其糖分組成和含量。糖的提?。焊鞑课蝗』旌蠘? g置于研缽中,加少量石英砂和20 mL體積分?jǐn)?shù)為80%的乙醇快速充分研磨,轉(zhuǎn)入離心管,80 ℃水浴提取30 min,離心,過濾至50 mL容量瓶,并用體積分?jǐn)?shù)為80%的乙醇定容至刻度。其中葡萄糖、果糖、蔗糖含量的測定參考張志良等[13]的方法,淀粉含量的測定采用高氯酸水解法[14]。
1.3.2 果實不同部位蔗糖代謝相關(guān)酶活性 采集果實樣品的時期及數(shù)量同1.3.1。將果實快速洗凈,解剖成所需部位(果皮、果肉、心室隔壁、膠質(zhì)胎座),液氮速凍后存于-80 ℃冰箱中,用于蔗糖代謝相關(guān)酶活性的測定。酶的提取:參考齊紅巖等[10]的方法,稱取冷凍的樣品1 g,加少量石英砂和10 mL HEPES緩沖液(50 mmol/L HEPES-NaOH(pH 7.5),10 mmol/L MgCl2,10 mmol/L的Vc,2.5 mmol/L DTT,1 mmol/L EDTA,質(zhì)量分?jǐn)?shù)5%的不溶性PVPP),冰浴研磨成勻漿,4層紗布過濾,12 000×g(4 ℃)離心30 min,棄上清液,用HEPES緩沖液5 mL溶解沉淀,再用稀釋10倍的HEPES緩沖液(不含PVPP)透析20 h。以上所有操作均在0~4 ℃進(jìn)行。轉(zhuǎn)化酶(AI、NI)活性的測定參考齊紅巖等[10]的方法,蔗糖合成酶(SS)及蔗糖磷酸合成酶(SPS)活性的測定參考於新建[15]的方法進(jìn)行。
1.3.3 產(chǎn) 量 各處理產(chǎn)量按小區(qū)實際測量而來。每次采收時記錄各小區(qū)果實質(zhì)量、果實個數(shù),計算平均單果質(zhì)量及平均單株產(chǎn)量,最后按照單位面積番茄株數(shù)計算總產(chǎn)量。
數(shù)據(jù)整理與圖表繪制用Excel 2007完成,多元方差分析和相關(guān)性分析用SPSS 17.0軟件完成。
2.1.1 葡萄糖和果糖含量 由圖1和2可知,同一處理下,白熟期-轉(zhuǎn)色期-成熟期,番茄果實的果皮、果肉、心室隔壁及膠質(zhì)胎座4個部位中葡萄糖和果糖含量均呈逐漸增加的趨勢,至果實成熟,糖分含量達(dá)到最高。同一時期,果實各部位葡萄糖含量差異不大,果糖含量以果皮和膠質(zhì)胎座中較高。T4處理白熟期果實各部位葡萄糖含量最高,CK處理轉(zhuǎn)色期、成熟期葡萄糖含量最高。整體來看,T1、T2處理3個生育期果實各部位葡萄糖含量均較低,T3處理最低。果實3個生育期各部位果糖含量總體上仍以T4和CK處理較高,除膠質(zhì)胎座外,在其他部位二者差異不顯著。T1處理果肉、心室隔壁中果糖含量最低,且與CK處理差異顯著;T3處理果皮和膠質(zhì)胎座中果糖含量較低,且與T4處理差異顯著。以成熟期番茄果肉為例,CK和T4處理葡萄糖含量分別比T1提高了31.55%和30.17%,果糖含量分別比T1處理提高了107.31%和50.57%。
圖中小寫字母表示在P<0.05水平差異顯著。下同Lowercase letters show significant difference at P<0.05 level.The same below圖1 微咸水灌溉方式對不同生育期番茄果實各部位葡萄糖含量的影響Fig.1 Effect of different irrigation methods with saline water on contents of glucose of tomato different parts at different growth periods
圖2 微咸水灌溉方式對不同生育期番茄果實各部位果糖含量的影響Fig.2 Effect of different irrigation methods with saline water on contents of fructose of tomato different parts at different growth periods
2.1.2 蔗糖含量 由圖3可知,隨著番茄果實生育期的推進(jìn),果實各部位蔗糖含量逐漸降低,成熟期降至最低。T4處理3個時期番茄果實果皮和膠質(zhì)胎座中蔗糖含量均最高,顯著高于T1、T3處理,CK、T2處理蔗糖含量居中。果肉和心室隔壁中蔗糖含量以CK處理最高,且在白熟期和轉(zhuǎn)色期與其他處理總體上差異顯著; T1處理蔗糖含量總體最低。以成熟期番茄果肉為例,CK和T4處理蔗糖含量分別比T1提高了70.53%和47.35%。
2.1.3 淀粉含量 由圖4可知,番茄果實各部位淀粉含量隨生育期的推進(jìn)逐漸降低,白熟期至轉(zhuǎn)色期,降低幅度最大,至果實成熟期,各部位淀粉含量均降至最低。就果實不同部位而言,膠質(zhì)胎座中淀粉含量略高于其他3個部位,這與膠質(zhì)胎座中含有番茄種子有關(guān)。白熟期T3處理果皮和果肉中淀粉含量均最高;該時期心室隔壁和膠質(zhì)胎座中淀粉含量均以CK最高。轉(zhuǎn)色期、成熟期T1處理果實各部位淀粉含量最高,CK和T4處理均較低,其中成熟期CK和T4處理番茄果肉中淀粉含量分別比T1處理降低了33.81%和24.15%。
圖3 微咸水灌溉方式對不同生育期番茄果實各部位蔗糖含量的影響Fig.3 Effect of different irrigation methods with saline water on contents of sucrose of tomato different parts at different growth periods
圖4 微咸水灌溉方式對不同生育期番茄果實各部位淀粉含量的影響Fig.4 Effect of different irrigation methods with saline water on contents of starch of tomato different parts at different growth periods
2.2.1 AI和NI活性 由圖5和6可知,從白熟期-轉(zhuǎn)色期-成熟期,番茄果實各部位AI、NI活性均逐漸升高,至果實成熟,活性達(dá)到最高,但AI活性遠(yuǎn)高于NI活性。白熟期果皮、果肉中AI活性以T4處理最高,轉(zhuǎn)色期、成熟期以CK處理最高。不同處理心室隔壁和膠質(zhì)胎座中AI活性與果皮和果肉相比略有不同,總體上以CK和T4處理較高。3個生育期番茄果實果肉、成熟期心室隔壁及白熟期、成熟期果皮和膠質(zhì)胎座中CK處理NI活性最高,其余時期及部位均以T4處理最高。除成熟期果皮、果肉、膠質(zhì)胎座外,其余時期番茄果實各部位NI活性均以T1、T3處理較低,且與CK或T4處理差異顯著。
2.2.2 SS和SPS活性 由圖7和8可知,隨著果實生育期的推進(jìn),番茄果實各部位SS、SPS活性均逐漸降低,至果實成熟期,SS和SPS活性降至最低,但SPS活性變化幅度較SS小。白熟期番茄果實4個部位SS活性大小順序為果皮>果肉>膠質(zhì)胎座>心室隔壁,SPS活性大小順序為膠質(zhì)胎座>果肉>果皮>心室隔壁;轉(zhuǎn)色期、成熟期SS活性以果肉、心室隔壁高于果皮和膠質(zhì)胎座,SPS活性以膠質(zhì)胎座中較高,果肉和心室隔壁中差異不大,果皮較低。果皮和膠質(zhì)胎座中SS活性以T4處理最高,果皮中CK、T3處理次之,T1、T2處理最低,且與T4處理差異顯著;膠質(zhì)胎座中T2次之,T3最低。果肉和心室隔壁中以CK處理SS活性最高,T4、T2次之,T1、T3較低且顯著低于CK處理。3個生育期番茄果皮及白熟期、轉(zhuǎn)色期果肉和膠質(zhì)胎座中SPS活性以CK處理最高,T4、T2、T3較低,T1最低且顯著低于CK處理;3個生育期心室隔壁及成熟期果肉和膠質(zhì)胎座中,T4處理SPS活性最高,CK次之,T2居中,三者間的差異不顯著,T1、T3處理較低,除成熟期外均與T4處理差異顯著。
圖5 微咸水灌溉方式對不同生育期番茄果實各部位酸性轉(zhuǎn)化酶(AI)活性的影響Fig.5 Effect of different irrigation methods with saline water on AI activities of tomato different parts at different growth periods
圖6 微咸水灌溉方式對不同生育期番茄果實各部位中性轉(zhuǎn)化酶(NI)活性的影響Fig.6 Effect of different irrigation methods with saline water on NI activities of tomato different parts at different growth periods
圖7 微咸水灌溉方式對不同生育期番茄果實各部位蔗糖合成酶(SS)活性的影響Fig.7 Effect of different irrigation methods with saline water on SS activities of tomato different parts at different growth periods
圖8 微咸水灌溉方式對不同生育期番茄果實各部位蔗糖磷酸合成酶(SPS)活性的影響Fig.8 Effect of different irrigation methods with saline water on SPS activities of tomato different parts at different growth periods
在番茄果實發(fā)育過程中,果實中葡萄糖、果糖、蔗糖及淀粉含量與糖代謝相關(guān)酶活性的相關(guān)性見表2。由表2可以看出,葡萄糖和果糖含量均與AI、NI活性呈極顯著正相關(guān),與SS活性呈極顯著負(fù)相關(guān),與SPS相關(guān)性不顯著。蔗糖和淀粉含量與AI、NI活性呈極顯著負(fù)相關(guān),與SS、SPS活性呈極顯著正相關(guān),但其與SS的相關(guān)系數(shù)遠(yuǎn)大于與SPS的相關(guān)系數(shù),說明番茄果實中SS對蔗糖合成所起的作用更大。綜上可知,本試驗條件下,番茄果實中糖的積累與蔗糖代謝相關(guān)的4種酶均有顯著相關(guān)關(guān)系,但主要受AI、NI和SS活性的調(diào)控,這與齊紅巖等[10]的研究結(jié)果一致。
表2 番茄果實糖含量與蔗糖代謝關(guān)鍵酶活性的相關(guān)性Table 2 Correlation among the carbohydrate contents and activities of enzymes relating to sucrose metabolism of tomato fruits
注:** 表示在P<0.01水平(雙側(cè))上顯著相關(guān)。Note:** shows significant difference at theP<0.01 level(bilateral).
微咸水不同灌溉方式對番茄產(chǎn)量的影響如表3所示。由表3可知,T1處理番茄總果數(shù)、平均單果質(zhì)量、平均單株產(chǎn)量及總產(chǎn)量均最高;T2處理番茄總果數(shù)僅次于T1,但平均單果質(zhì)量、平均單株產(chǎn)量及總產(chǎn)量均最低,且除總果數(shù)外均與T1處理差異極顯著(P<0.01);T3處理番茄總果數(shù)居中,總產(chǎn)量僅次于T1處理;CK和T4處理番茄總果數(shù)及總產(chǎn)量均較低,二者之間無顯著差異,但總產(chǎn)量顯著低于T1處理(P<0.05)??梢姡叵碌喔瓤梢燥@著提高番茄產(chǎn)量。與地下淡水灌溉相比,微咸水參與灌溉番茄總產(chǎn)量均有不同程度降低,混合水灌溉下番茄總產(chǎn)量最低。
表3 微咸水不同灌溉方式對番茄產(chǎn)量的影響Table 3 Effect of different irrigation methods with saline water on yield of tomato
注:同列數(shù)據(jù)后標(biāo)不同大寫字母表示在P<0.01水平差異顯著,小寫字母表示在P<0.05水平差異顯著。
Note:Capital letters show significant difference atP<0.01 level,while lowercase letters show significant difference atP<0.05 level.
糖種類和含量是評價果實品質(zhì)的重要依據(jù)[8],而蔗糖代謝相關(guān)酶的活性又直接影響著果實中糖的積累[16],不同植株或同一植株的不同生育期、不同部位蔗糖代謝相關(guān)酶的催化活性均有所不同[12]。齊紅巖等[10]研究了番茄果實中糖含量的變化與相關(guān)酶活性的關(guān)系,表明AI、NI在番茄果實中主要起分解蔗糖的作用;SS對番茄果實庫構(gòu)建起重要作用,且與蔗糖含量呈顯著正相關(guān)關(guān)系;相比較而言,SPS在普通栽培型番茄糖的積累和代謝中的作用較小。本研究得到的結(jié)果與此類似,隨著番茄生育期的推進(jìn),果實中葡萄糖和果糖含量不斷升高,至果實成熟期,二者含量達(dá)到最高,而蔗糖和淀粉含量的變化趨勢與之相反,這與番茄果實中蔗糖代謝相關(guān)酶活性隨生育期推進(jìn)的變化有關(guān)。白熟期果實各部位SS及SPS活性相對較高,催化蔗糖合成,使果實中蔗糖和淀粉含量較高;隨著果實生育期的推進(jìn),SS、SPS活性明顯降低,蔗糖合成減少,果實中蔗糖和淀粉含量降低,與此同時AI、NI活性迅速升高,貯存的淀粉被分解,運(yùn)輸?shù)焦麑嵵械恼崽潜淮罅克獬善咸烟呛凸?,使得果實各部位己糖含量增加,果實甜度增加。同時本試驗結(jié)果也表明,同一生育期果實不同部位NI、SS和SPS活性差異不大,AI活性以膠質(zhì)胎座中略高。果實各部位葡萄糖含量差異不大,果糖含量以果皮和膠質(zhì)胎座中較高,果皮中蔗糖含量較低,相比果糖和葡萄糖而言,果實各部位蔗糖含量均較低,膠質(zhì)胎座中淀粉含量較高,這與齊紅巖等[11]關(guān)于番茄不同部位糖含量和相關(guān)酶活性的研究結(jié)果類似。
關(guān)于果實糖積累及蔗糖代謝相關(guān)酶活性的影響因素,前人也做了相關(guān)研究,主要包括虧缺灌溉[17]、葉面噴肥[18]、氮鉀處理[19-20]、光氮互作[12]、單鹽脅迫等[21]。而微咸水灌溉方式對番茄果實糖分變化的影響研究目前還集中于可溶性總糖含量方面。陶君[22]研究表明,咸淡混合水灌溉可以提高甜瓜果實的可溶性固形物和可溶性總糖含量。楊潔[23]、汪洋等[24]認(rèn)為,微咸水直接灌溉下番茄果實可溶性固形物、可溶性總糖的含量可以顯著提高,果實品質(zhì)得到明顯改善。魯少尉等[21]研究發(fā)現(xiàn),鹽脅迫下完熟期番茄果實中葡萄糖和果糖含量增加,AI、NI活性增強(qiáng),且各處理果實可溶性糖與葡萄糖、果糖等己糖的含量變化及蔗糖轉(zhuǎn)化酶活性的變化成正比。本研究結(jié)果表明,微咸水灌溉方式對不同生育期(白熟期、轉(zhuǎn)色期、成熟期)番茄果實不同部位(果皮、果肉、心室隔壁、膠質(zhì)胎座)糖積累及蔗糖代謝相關(guān)酶活性的影響較大;微咸水直接灌溉、微咸水淡水按次輪灌及微咸水與淡水按1∶1體積比混合水灌溉在一定程度上均可以提高番茄果實4個部位葡萄糖、果糖及蔗糖含量,且以前兩種灌溉方式果實糖含量提高幅度較大。微咸水淡水按生育期輪灌及整個生育期地下淡水灌溉下番茄果實各部位3種糖含量相對較低,這與汪洋等[24]對微咸水不同灌溉方式下番茄果實可溶性總糖含量的研究結(jié)果一致。淀粉是植物體內(nèi)最重要的貯藏性多糖,也是葡萄糖多聚物,其可經(jīng)過一系列運(yùn)輸及生化反應(yīng)后用于蔗糖的合成。因此,果實發(fā)育早期積累的淀粉可以為后期糖的合成儲備碳源[9]。不同微咸水灌溉方式處理白熟期番茄果實各部位淀粉含量差異不大,果實轉(zhuǎn)色后各處理果實4個部位淀粉含量均迅速下降,以微咸水直接灌溉及微咸水淡水按次輪灌處理下降幅度最大,至果實成熟期淀粉含量降至最低,且與地下淡水直接灌溉差異顯著,說明微咸水以這兩種方式灌溉更能促進(jìn)果實早期積累的淀粉分解成可溶性糖,提高番茄果實品質(zhì)。就蔗糖代謝相關(guān)酶活性而言,微咸水直接灌溉、微咸水淡水按次輪灌及混合水灌溉均提高了3個生育期番茄果實各部位AI、NI、SS及SPS 活性,所以微咸水這3種灌溉方式下番茄果實各部位果糖、葡萄糖和蔗糖含量也較高。微咸水淡水按生育期輪灌及淡水灌溉下4種蔗糖代謝相關(guān)酶活性較低,這與3個生育期果實各部位3種可溶性糖含量較低相對應(yīng)。另外,就本試驗條件下番茄總產(chǎn)量而言,地下淡水灌溉下番茄總產(chǎn)量最高,為9.01 kg/m2,微咸水參與的4種灌溉方式處理番茄總產(chǎn)量較地下淡水灌溉處理均有不同程度的降低,這與微咸水參與灌溉引起的番茄單果質(zhì)量減小關(guān)系密切,其中混合水灌溉總產(chǎn)量降低幅度最大,總產(chǎn)量僅為6.05 kg/m2,這是因為該處理下番茄平均單果質(zhì)量降低幅度最大,且與該處理番茄生長期間果實臍腐果率最高有關(guān)。
本試驗條件下,相比地下淡水灌溉而言,微咸水直接灌溉和微咸水淡水按次輪灌提高了白熟期、轉(zhuǎn)色期和成熟期3個生育期番茄果實各部位SS和SPS 的活性,促進(jìn)了蔗糖的合成及積累;提高了AI、NI活性,蔗糖分解增加,果實中葡萄糖、果糖積累,且降低了轉(zhuǎn)色期、成熟期果實各部位淀粉含量,與此同時果實總產(chǎn)量也顯著降低?;旌纤喔认拢魃诠麑嵏鞑课惶呛考懊富钚跃又?,番茄總產(chǎn)量最低;微咸水淡水按生育期輪灌果實各部位糖含量及酶活性與地下淡水灌溉處理相差不大,不利于番茄果實各部位糖的積累,但地下淡水灌溉下番茄總產(chǎn)量最高。
綜上分析認(rèn)為,微咸水以適當(dāng)?shù)姆绞絽⑴c灌溉提高了品質(zhì)形成期番茄果實各部位的糖分含量,改善了番茄果實品質(zhì),但同時也降低了番茄單果質(zhì)量及總產(chǎn)量,所以在實際生產(chǎn)中應(yīng)用時應(yīng)結(jié)合生產(chǎn)條件和消費(fèi)群體選擇合適的微咸水灌溉方式,在改善番茄果實品質(zhì)的同時盡可能保證番茄產(chǎn)量。
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