(大英縣畜牧食品局,四川大英 629300)
豬附紅細(xì)胞體?。≒orcine eperythrozoonosis,PE)是由豬附紅細(xì)胞體(Eperythrozoon suis,E.suis)寄生于紅細(xì)胞表面或游離于血漿和骨髓中而引起的一種以貧血、黃疸、發(fā)熱為主要臨床特征的人畜共患病。該病常與其他豬病混合感染,表現(xiàn)出多種臨床癥狀,而且該病的隱性感染率高,潛在的危害性很大,是嚴(yán)重威脅養(yǎng)豬業(yè)和公共衛(wèi)生安全的傳染病之一。
附紅細(xì)胞體的分類一直存有爭(zhēng)議,1993年,《伯吉氏細(xì)菌鑒定手冊(cè)》依據(jù)生物學(xué)特性及表型特征,將附紅細(xì)胞體屬(Eperythrozoon)和血巴爾通體屬(Haemobartonella)作為母血營(yíng)養(yǎng)的微生物劃分為微粒孢子科(Anaplasmataceae),該科與立克次氏體科(Rickettsiaceae)、巴爾通體科(Bartonellaceae)一起被劃分為立克次氏體目(Rickettsiales)。然而,有學(xué)者認(rèn)為附紅細(xì)胞體和血巴爾通體不屬于立克次氏體,更接近于軟體綱動(dòng)物,因?yàn)樗鼈儧](méi)有細(xì)胞內(nèi)寄生能力,個(gè)體小,無(wú)細(xì)胞壁,無(wú)鞭毛,對(duì)青霉素及其類似物具有抵抗力,對(duì)四環(huán)素敏感,這些特點(diǎn)都與支原體相似。
豬附紅細(xì)胞體光鏡下形態(tài)呈小球狀、卵圓形、桿狀或環(huán)形等多種形態(tài),大小為0.3~1.3×0.5~2.6 μm,平均直徑0.2~2 μm,它們單獨(dú)或成簇附著于紅細(xì)胞表面,或游離于血漿中(見(jiàn)圖1),附著于紅細(xì)胞表面時(shí)看不到運(yùn)動(dòng),游離狀態(tài)下則可作搖擺、扭轉(zhuǎn)、翻滾等運(yùn)動(dòng)。豬附紅細(xì)胞體可被多種染料染色,經(jīng)姬姆薩或瑞氏染色后為藍(lán)紫色,革蘭氏染色陰性。電鏡觀察豬附紅細(xì)胞體有單層膜,無(wú)細(xì)胞壁,無(wú)明顯細(xì)胞器,無(wú)核狀結(jié)構(gòu),可見(jiàn)顆粒狀物分布在胞質(zhì)內(nèi),整個(gè)細(xì)胞呈圓盤狀,一面凹陷,一面凸出,單個(gè)或成簇以凹面附著在紅細(xì)胞表面,較大的成熟附紅細(xì)胞體可使附著處的紅細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)改變、變形,甚至產(chǎn)生空洞,有些附紅細(xì)胞體可伸出纖絲,嵌在細(xì)胞膜上,被寄生的紅細(xì)胞變形為錘狀、星芒狀、齒輪狀或不規(guī)則形狀。
圖1 豬附紅細(xì)胞體吖啶橙染色照片(100×)
豬附紅細(xì)胞體多呈隱性感染,感染動(dòng)物可能不表現(xiàn)任何臨床癥狀,但卻可以引起豬免疫抑制。豬附紅細(xì)胞體病的發(fā)生很大程度上取決于個(gè)體的易感性和環(huán)境因素的作用,正常豬通過(guò)靜脈注射感染后,3~7d可以在血液中檢出附紅細(xì)胞體,而去脾豬感染后2 d即可檢出。哺乳仔豬和保育豬感染后病死率較高,急性發(fā)病一般表現(xiàn)為精神沉郁,食欲不振,皮膚發(fā)紅,高熱稽留,耐過(guò)后常常生長(zhǎng)停滯而成為僵豬;成年豬病死率較低,但可導(dǎo)致母豬生殖機(jī)能下降,繁殖障礙,不發(fā)情,流產(chǎn)和死胎等。貧血和黃疸是豬附紅細(xì)胞體病特征性病理變化,病豬血液稀薄如水,凝固不良,紅細(xì)胞比容降低,肝臟腫大,呈棕黃色,脾臟腫大,質(zhì)地柔軟,全身淋巴結(jié)腫大出血,心臟擴(kuò)張,心包內(nèi)有淡紅色液體,心冠脂肪黃染,肺水腫,骨髓液和腦積液增多。
豬附紅細(xì)胞體病慢性病例一般表現(xiàn)為皮膚蒼白,生長(zhǎng)遲滯,同時(shí)由于附紅細(xì)胞體抑制機(jī)體免疫機(jī)能,容易誘發(fā)混合感染,使疾病復(fù)雜化,給診斷和治療帶來(lái)困難。筆者查閱了中國(guó)1990~2008年公開(kāi)發(fā)表的98篇豬附紅細(xì)胞體病病例報(bào)告,混合感染為86篇,占報(bào)告總數(shù)的87.75%,其中豬附紅細(xì)胞體與豬瘟病毒、豬鏈球菌、豬繁殖與呼吸綜合征病毒、弓形體、大腸桿菌、圓環(huán)病毒、偽狂犬病毒等的混合感染較多見(jiàn)。目前國(guó)內(nèi)養(yǎng)豬業(yè),特別是規(guī)?;B(yǎng)豬場(chǎng),在飼料中添加藥物的“保健”措施比較普遍,在大量使用藥物的壓力下,附紅細(xì)胞體感染后,機(jī)體往往處于亞臨床狀態(tài),自身的抗病能力減弱,在受到其他病原體侵襲后,極易發(fā)生混合感染,這對(duì)豬群的安全是十分嚴(yán)重的威脅。
附紅細(xì)胞體附著在紅細(xì)胞膜上后,機(jī)體產(chǎn)生冷凝集素(Cold agglutinins,CAs),冷凝集素攻擊被感染的紅細(xì)胞而發(fā)生溶血,同時(shí)附紅細(xì)胞體感染還能夠誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生自體免疫抗體,導(dǎo)致過(guò)敏反應(yīng),進(jìn)一步引起免疫性溶血,使紅細(xì)胞數(shù)減少,血紅蛋白降低,導(dǎo)致機(jī)體出現(xiàn)貧血。研究顯示,在感染豬表現(xiàn)典型附紅細(xì)胞體病臨床癥狀的階段,機(jī)體內(nèi)附紅細(xì)胞體特異性免疫反應(yīng)反而減弱,而自體免疫反應(yīng)卻在增強(qiáng),這種現(xiàn)象的發(fā)生機(jī)制及其與冷凝集素的關(guān)系目前尚不清楚。附紅細(xì)胞體附著在紅細(xì)胞上,不僅可改變紅細(xì)胞表面結(jié)構(gòu),致使其膜抗原發(fā)生改變,并導(dǎo)致紅細(xì)胞的變形性、可塑性消失,因而在脾竇內(nèi)滯留時(shí)間延長(zhǎng),得以被免疫活性細(xì)胞吞噬和清除。當(dāng)脾臟被切除后,這一功能喪失,加之術(shù)后應(yīng)激狀態(tài)下全身免疫機(jī)能整體下降,豬附紅細(xì)胞體極易感染并迅速繁殖,導(dǎo)致臨床癥狀兇險(xiǎn),也加劇了溶血性貧血的發(fā)生和黃疸及血紅蛋白尿的形成。
由于附紅細(xì)胞體的大量繁殖,宿主動(dòng)物機(jī)體的糖分解迅速增加,附紅細(xì)胞體通過(guò)糖酵解消耗糖,同時(shí)產(chǎn)生大量乳酸,因此豬附紅細(xì)胞體急性感染可導(dǎo)致嚴(yán)重的低血糖癥和酸中毒。隱性感染動(dòng)物的血糖濃度可比正常下降25%左右,急性發(fā)病則更嚴(yán)重得多,患病動(dòng)物由于血液中乳酸和丙酮酸含量上升而出現(xiàn)酸中毒,同時(shí),被感染的紅細(xì)胞攜氧能力降低,影響肺臟氣體交換,導(dǎo)致機(jī)體呼吸困難。
根據(jù)1990~2008年間公開(kāi)發(fā)表的豬附紅細(xì)胞體病的流行病學(xué)調(diào)查和病例報(bào)告,全國(guó)已有26個(gè)省區(qū)存在豬附紅細(xì)胞體病,在中國(guó)的東北、華北、西北、中南、西南、東南均存在豬附紅細(xì)胞體流行地區(qū),這說(shuō)明,豬附紅細(xì)胞體病在中國(guó)的地域分布十分廣泛。在22篇豬附紅細(xì)胞體病流行病學(xué)調(diào)查中,樣品感染率在50%以上的有19篇,占總篇數(shù)的86.36%,雖然感染率極高,但所檢出的附紅細(xì)胞體陽(yáng)性豬大多數(shù)為隱性感染。隱性感染豬不表現(xiàn)臨床癥狀,但卻可以持續(xù)傳播病原體,導(dǎo)致更多的豬感染,另外,由于附紅細(xì)胞體可以寄生在藥物無(wú)法到達(dá)的骨髓中,病豬“康復(fù)”后仍然攜帶蟲(chóng)體,這同樣可以造成病原體傳播,且“康復(fù)豬”容易出現(xiàn)附紅細(xì)胞體病的反復(fù)發(fā)作。
多篇流行病學(xué)調(diào)查顯示,中國(guó)人群的附紅細(xì)胞體感染率較高,且與職業(yè)呈現(xiàn)一定的相關(guān)性,經(jīng)常與動(dòng)物或動(dòng)物制品接觸的人群(如:養(yǎng)殖場(chǎng)飼養(yǎng)員、牧民、獸醫(yī)、屠宰廠工人、餐飲業(yè)者等)感染率高于其他人群。附紅細(xì)胞體感染與年齡相關(guān)性不明顯,但機(jī)體免疫機(jī)能發(fā)育不完全或衰退者(如:兒童、老人及免疫機(jī)能障礙者)更容易發(fā)病,尚德秋等推測(cè)附紅細(xì)胞體病的發(fā)生主要與機(jī)體的免疫狀況有關(guān)。
目前,獸醫(yī)臨床診斷豬附紅細(xì)胞體病的主要方法是臨床癥狀觀察結(jié)合血涂片染色鏡檢,常用的染色方式為吉姆薩染色或瑞氏染色,這種方法快速、簡(jiǎn)便,對(duì)檢測(cè)條件要求很低,國(guó)內(nèi)流行病學(xué)調(diào)查絕大多數(shù)以臨床癥狀觀察結(jié)合血涂片法作為診斷依據(jù),有學(xué)者對(duì)此提出異議,認(rèn)為正常紅細(xì)胞在血涂片制作過(guò)程中,也可能發(fā)生變形,變形率約為1%~3%,這降低了血涂片法的準(zhǔn)確性、敏感性和特異性,使得假陽(yáng)性增多。
近年來(lái),隨著豬附紅細(xì)胞體病在全球的蔓延,豬附紅細(xì)胞體的研究漸成熱點(diǎn),但是由于其體外培養(yǎng)困難,至今尚未建立成熟的培養(yǎng)方法,這給進(jìn)一步開(kāi)展豬附紅細(xì)胞體生物學(xué)特性研究、篩選有效藥物、制備診斷抗原及研制疫苗造成了困難。豬附紅細(xì)胞體病的防治主要依靠藥物,有關(guān)豬附紅細(xì)胞體疫苗的研制報(bào)道極少,曾有文獻(xiàn)報(bào)道將豬附紅細(xì)胞體滅活后免疫仔豬,結(jié)果顯示所制疫苗保護(hù)期可達(dá)6~8個(gè)月,但未見(jiàn)后續(xù)相關(guān)報(bào)道。