楊 開 王玏縈 徐夢(mèng)婷 孫培龍

(浙江工業(yè)大學(xué)海洋學(xué)院，杭州 310014)

油菜(BrassicacampestrisL.)為十字花科(Brassicacea)，蕓苔屬(Brassica)植物，油菜花粉是我國(guó)來源最多的蜜源蜂花粉[1]。油菜花粉中的主要植物化學(xué)成分是脂肪酸、類黃酮、含氮化合物以及植物甾醇[2-3]。其主要的植物甾醇如β-谷甾醇、豆甾醇和菜油甾醇，是一類廣泛存在于自然界的甾體化合物，為環(huán)戊全氫菲的3-羥基化合物，C-5上有雙鍵的稱甾醇，C-5飽和的稱甾烷醇[4]。研究表明，植物甾醇具有抗氧化[5]、抗癌[6]、防止心血管疾病[7]、促進(jìn)膽固醇降解代謝[8]等多種生理活性，被國(guó)際生命科學(xué)學(xué)會(huì)大力推薦為十大功能性食品配料之一[9]，對(duì)人體非常有益。目前我國(guó)衛(wèi)生部正式批準(zhǔn)植物甾醇、甾醇酯為新資源食品[10]，并且被廣泛應(yīng)用于食品、制藥、保健品等行業(yè)[11-14]。油菜花粉中的甾醇因其天然并具有一系列生理功能而逐漸受到國(guó)內(nèi)外學(xué)者的重視，但國(guó)內(nèi)外至今對(duì)油菜花粉中甾醇的研究較少，尤其缺乏關(guān)于其生物活性的研究。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

油菜(BrassicacampestrisL.)花粉：采自青海門源，經(jīng)浙江中藥與天然藥物研究院品種鑒定，4 ℃冷藏備用；柱層層析硅膠(200～300目)：青島海洋化工廠分廠；硅膠板CF254：青島鼎康硅膠有限公司；DPPH、ABTS、二丁基羥基甲苯(BHT)：美國(guó)Sigma公司；5α-膽甾烷、豆甾醇：東京化成工業(yè)株式會(huì)社；新鮮豬油：市購；正己烷、無水乙醇、氯仿、甲醇、鄰苯三酚、硫代硫酸鈉等均為分析純。

1.2 儀器與設(shè)備

SFP-Prime超臨界CO2萃取儀：美國(guó)Applied Separation有限公司；TU-1900雙光束紫外可見分光光度計(jì)：北京普析通用儀器有限責(zé)任公司；Nicolet 6700傅里葉變換紅外光譜儀，Nicolet Continuμm紅外顯微系統(tǒng)：美國(guó)熱尼高力公司；ISQ單四極桿氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀：美國(guó)Thermo Fisher Scientific公司；DRP-9002電熱恒溫培養(yǎng)箱：上海森信實(shí)驗(yàn)儀器有限公司；PGC12玻璃層析柱:北京滿倉科技有限公司。

1.3 方法

1.3.1 油菜花粉甾醇提取工藝

油菜花粉→機(jī)械粉碎過30目篩→50 ℃干燥→稱取150 g→放入萃取釜，CO2超臨界萃取，萃取壓力為30 MPa，時(shí)間2 h，溫度50 ℃，CO2流速為15 g/min→收集分離釜中棕色油狀萃取物→80 ℃皂化1 h→正己烷萃取3次→水洗至中性→40 ℃旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)→氮吹儀吹干→油菜花粉甾醇粗提取物。

1.3.2 油菜花粉甾醇的純化工藝

1.3.2.1 靜態(tài)吸附單因素實(shí)驗(yàn)

以吸附時(shí)間、吸附溫度、吸附液濃度為考查因素進(jìn)行靜態(tài)吸附單因素實(shí)驗(yàn)，確定純化的最佳條件，采用磷硫鐵顯色法[15]測(cè)總甾醇的含量。

吸附率的測(cè)定[16]：稱取一定量的硅膠裝入三角瓶中，加入甾醇標(biāo)準(zhǔn)溶液中，置于恒溫水浴震蕩器上震蕩，吸附一定時(shí)間后減壓抽濾，測(cè)定濾液中甾醇的濃度，吸附率公式如下所示：

1.3.2.2 洗脫劑(展開劑)比例的確定

以氯仿和甲醇為展開劑，在硅膠板底端1 cm左右點(diǎn)樣，以10%硫酸-乙醇為顯色劑，在小板上噴上顯色劑，置于110 ℃烘箱中3～5 min，觀察在不同比例的洗脫劑中的分離情況，計(jì)算比移值(Rf)，Rf公式如下所示：

1.3.3 動(dòng)態(tài)分離

皂化后的粗制甾醇采用濕法裝柱，根據(jù)靜態(tài)吸附單因素實(shí)驗(yàn)的最佳工藝將粗制甾醇加入硅膠柱中，上樣比例為1:40，用洗脫劑進(jìn)行洗脫，每段洗脫液5.0 mL分管收集，薄層色譜跟蹤檢測(cè)，合并收集相同Rf值組分，在最優(yōu)純化條件下將樣品濃縮后再進(jìn)行第二次硅膠柱層析重復(fù)分離，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)(40 ℃)后得到高純度油菜花粉甾醇，并用氮吹儀吹干。

1.3.4 紫外可見吸收光譜法(UV-VIS)分析

配制一定濃度的油菜花粉甾醇溶液，使用紫外可見分光光度計(jì)進(jìn)行掃描，掃描范圍為190～500 nm。多種甾醇標(biāo)準(zhǔn)品溶液進(jìn)行掃描，不同種類的甾醇最大吸收波長(zhǎng)相同，因此選擇其中一種甾醇(豆甾醇)作為對(duì)照。

1.3.5 傅里葉-紅外光譜法(FTIR)分析

采用KBr壓片法分別對(duì)甾醇類物質(zhì)粉體進(jìn)行FTIR譜圖的測(cè)試，在4 000～400 cm-1波段進(jìn)行掃描。

1.3.6 氣相色譜-質(zhì)譜(GC-MS)測(cè)定

氣相色譜條件：毛細(xì)管柱：TG-5MS柱(30 m×0.25 mm，0.32 μm)；升溫程序：起始溫度150 ℃，保持4 min，以4 ℃/min升至240 ℃，保持2 min，然后以5 ℃/min升至310 ℃，保持13 min。進(jìn)樣口溫度310 ℃；載氣流速1.0 mL/min；分流比20:1。

質(zhì)譜條件：電子轟擊離子源(EI)；電子能量70 eV；離子源溫度230 ℃；接口溫度300 ℃；掃描質(zhì)量范圍20～510 amu。各組分經(jīng)過與標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)照及NIST 2.0標(biāo)準(zhǔn)譜庫檢索相匹配，確定相應(yīng)的物質(zhì)結(jié)構(gòu)。

油菜花粉中的甾醇含量采用內(nèi)標(biāo)法，以5α-膽甾烷為內(nèi)標(biāo)，豆甾醇為標(biāo)準(zhǔn)品建立標(biāo)準(zhǔn)曲線(y=0.006 2x-0.174，x為標(biāo)樣濃度，y為標(biāo)樣峰面積與內(nèi)標(biāo)峰面積之比，相關(guān)系數(shù)R2=0.999 6，甾醇含量以豆甾醇含量計(jì)。

1.3.7 油菜花粉甾醇的體外抗氧化活性分析

1.3.7.1 清除DPPH·的能力

1.3.7.2 清除ABTS+·的能力

參照Ozgen等[18]的ABTS法，3 mL ABTS溶液和1 mL樣品液混合避光反應(yīng)1 h，于λ 734 nm測(cè)定吸光度，用BHT做陽性對(duì)照。

采用鄰苯三酚自氧化法[19]，4.5 mL的Tris-HCl緩沖液(0.05 mol/L)，于25 ℃水浴加熱25 min，分別加入0.1 mL樣品溶液和0.4 mL鄰苯三酚溶液(0.5 mmol/L)，25 ℃水浴中反應(yīng)4.0 min，加入2滴8.0 mol/L的HCl滴終止反應(yīng)，在λ 320 nm處測(cè)定吸光度，用BHT做陽性對(duì)照。

1.3.7.4 還原力的測(cè)定

采用普魯士藍(lán)法[20]測(cè)定樣品的還原能力。0.5 mL樣品溶液中加入2.5 mL磷酸鹽緩沖液(pH 6.6)和質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1%的鐵氰化鉀2.5 mL，混勻后在50 ℃水浴中保溫20 min，冷卻后加入2.5 mL 10%三氯乙酸溶液，3 000 r/min離心10 min，取2.5 mL上清液加2.5 mL蒸餾水和0.5 mL 0.1%三氯化鐵，5 min后在λ 700 nm處測(cè)吸光度，BHT做陽性對(duì)照。

1.3.7.5 豬油體系抗氧化活性研究

將新鮮豬油切成小塊，文火濕法熬煉，雙層紗布過濾除去殘?jiān)?，冷卻密封后保存在-20 ℃冰箱中保存[21]。過氧化值(POV)測(cè)定實(shí)驗(yàn)均按照GB/T 5538—2005《動(dòng)植物油脂過氧化值測(cè)定》[22]進(jìn)行，用Na2S2O3滴定氧化析出的碘，計(jì)算POV值。

采用Schaal烘箱法[23]，將油菜花粉甾醇按照豬油質(zhì)量的0.05%、0.10%、0.15%、0.20%、0.25%、0.30%分別加入到30.0 g豬油中，并將其進(jìn)行編號(hào)，空白油樣作為對(duì)照。將配制好的豬油油樣放入電熱恒溫培養(yǎng)箱中，溫度調(diào)整為(60±1)℃，每隔24 h充分?jǐn)嚢?次，并交換其在培養(yǎng)箱中的位置，測(cè)定其第2、4、6、8、10、20天的POV值。

1.3.8 數(shù)據(jù)處理

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均以origin 8.5軟件處理，以SPSS 13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，每組實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次，取其平均值。

2 結(jié)果與分析

2.1 油菜花粉甾醇純化工藝實(shí)驗(yàn)結(jié)果

2.1.1 吸附時(shí)間對(duì)吸附效果的影響

吸附時(shí)間與吸附率的關(guān)系如圖1所示，由圖可見，隨著吸附時(shí)間的增加，吸附率增加，當(dāng)吸附時(shí)間為2 h時(shí)，吸附率達(dá)到最大，隨后增長(zhǎng)緩慢并逐漸趨于平衡，綜合經(jīng)濟(jì)節(jié)能考慮，最佳的吸附時(shí)間選擇為2 h為宜。

圖1 吸附時(shí)間、吸附溫度、吸附液濃度與吸附率的關(guān)系

2.1.2 吸附溫度對(duì)吸附效果的影響

由圖1可見，隨著溫度的增加，吸附率逐漸增高，當(dāng)溫度為30 ℃時(shí)吸附率達(dá)到最高，為(82.2±1.51)%，之后隨著溫度的增加，吸附率降低。由于溫度低時(shí)分子運(yùn)動(dòng)慢，吸附時(shí)間慢，但溫度高時(shí)有利于解吸，不利于吸附，因此綜合考慮選擇30 ℃為最佳吸附溫度。

2.1.3 吸附液濃度對(duì)吸附效果的影響

由圖1可見，隨著吸附液濃度的升高，吸附率增加，當(dāng)吸附液質(zhì)量濃度達(dá)到0.35 mg/mL時(shí)吸附率達(dá)到最高，當(dāng)質(zhì)量濃度大于0.35 mg/mL時(shí)吸附率達(dá)到飽和并趨于平衡，因此吸附液質(zhì)量濃度選擇0.35 mg/mL。

2.1.4 洗脫劑比例的確定

薄層色譜使各組分在固定相與流動(dòng)相之間借助毛細(xì)作用發(fā)生多次吸附-溶解作用使不同極性的物質(zhì)分離[24]。粗制甾醇在展開劑中分離成3個(gè)組分，其中組分2與標(biāo)準(zhǔn)甾醇溶液對(duì)照Rf值基本一致，由于不同種類的甾醇極性相近，Rf值也相近，因此組分2為甾醇類物質(zhì)。

由表1可知，當(dāng)氯仿和甲醇的體積比為20:1時(shí)，各組分的Rf在0.3～0.8，且Rf值相差較大，分離效果較好，因此采用氯仿和甲醇比例為20:1的溶液作為洗脫劑。

表1 不同比例的洗脫劑中各組分的Rf值

綜上，根據(jù)靜態(tài)吸附單因素實(shí)驗(yàn)的最佳工藝將粗制甾醇加入到硅膠柱中，吸附時(shí)間為2 h，吸附溫度為30 ℃，吸附液質(zhì)量濃度為0.35 mg/mL，用體積比為20:1的氯仿和甲醇溶液進(jìn)行洗脫并富集相同Rf組分，進(jìn)行第2次硅膠柱層析重復(fù)分離實(shí)驗(yàn)。

2.2 UV-VIS測(cè)定結(jié)果分析

經(jīng)測(cè)定，制得的油菜花粉甾醇純度為(93.73±1.06)%，將油菜花粉甾醇溶液與豆甾醇標(biāo)準(zhǔn)溶液(用無水乙醇作溶劑)的紫外可見光掃描，油菜花粉甾醇的紫外吸收曲線如圖2所示，由圖2可得，油菜花粉甾醇與豆甾醇標(biāo)準(zhǔn)溶液的最大吸收峰處的波長(zhǎng)相近，豆甾醇標(biāo)準(zhǔn)溶液的最大吸收峰為波長(zhǎng)204 nm處，油菜花粉甾醇溶液為205 nm，這與文獻(xiàn)[25]報(bào)道的205 nm處為植物甾醇特征吸收峰一致。

圖2 油菜花粉甾醇的紫外吸收曲線

2.3 FTIR結(jié)果分析

圖3 油菜花粉甾醇的紅外分析圖譜

2.4 油菜花粉甾醇GC-MS結(jié)果分析

氣相色譜-質(zhì)譜條件下對(duì)油菜花粉甾醇進(jìn)行分析，油菜花粉甾醇GC-MS總離子色譜圖如圖4所示。其中保留時(shí)間為39.94、40.59、41.47、42.62 min的峰能在質(zhì)譜庫中找到相應(yīng)的甾醇標(biāo)準(zhǔn)物對(duì)照質(zhì)譜，分別為24-亞甲基膽甾醇、β-谷甾醇、菜油甾醇和豆甾醇，且匹配度均超過90%。油菜花粉甾醇結(jié)構(gòu)式如圖5所示。

圖4 油菜花粉甾醇GC-MS總離子色譜圖

圖5 油菜花粉甾醇質(zhì)譜圖及結(jié)構(gòu)式

由表2可知，油菜花粉甾醇中豆甾醇的含量最多，相對(duì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)為47.35%；24-亞甲基膽甾醇、β-谷甾醇和菜油甾醇的相對(duì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)分別為5.11%、15.18%和32.36%。

表2 油菜花粉中甾醇的保留時(shí)間、成分、含量

2.5 抗氧化實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析

2.5.1 清除DPPH·的結(jié)果與分析

DPPH在有機(jī)溶劑中呈現(xiàn)深紫色，可以通過測(cè)定顏色的褪色程度來評(píng)價(jià)油菜花粉甾醇對(duì)DPPH·的清除效果，油菜花粉甾醇對(duì)DPPH·的清除能力如圖6所示，油菜花粉甾醇具有清除DPPH·的能力，且其清除能力隨著甾醇質(zhì)量濃度的不斷增大而增強(qiáng)，在質(zhì)量濃度為3.0 mg/mL時(shí)，其清除率達(dá)(80.75±2.50)%，自由基的半清除率IC50=1.18 mg/mL，增長(zhǎng)趨勢(shì)較BHT明顯。但在同等濃度時(shí)，油菜花粉甾醇的清除率低于BHT，當(dāng)BHT溶液的質(zhì)量濃度為3.0 mg/mL時(shí)，對(duì)DPPH·的清除率達(dá)(98.72±0.48)%。

圖6 油菜花粉甾醇對(duì)DPPH·的清除能力

2.5.2 清除ABTS+·的結(jié)果與分析

通過添加油菜花粉甾醇，能與反應(yīng)體系中的單電子配對(duì)，使其褪色，從而使形成的ABTS+·得到清除[26]。油菜花粉甾醇對(duì)ABTS+·的清除能力如圖7所示，ABTS+·清除率與油菜花粉甾醇濃度之間呈現(xiàn)良好的劑量關(guān)系，隨著甾醇濃度的增加，對(duì)ABTS+·的清除能力增強(qiáng)，在質(zhì)量濃度3.0 mg/mL時(shí)，其清除率達(dá)(72.22±2.85)%，IC50=1.76 mg/mL。與BHT相比，在同等濃度下，油菜花粉甾醇清除ABTS+·的能力相對(duì)較低，當(dāng)BHT溶液的質(zhì)量濃度為3.0 mg/mL時(shí)，對(duì)ABTS+·的清除率達(dá)(97.54±2.43)%。

圖7 油菜花粉甾醇對(duì)ABTS+·的清除能力

2.5.3 清除超氧陰離子的結(jié)果與分析

圖8 油菜花粉甾醇對(duì)的清除能力

2.5.4 還原力實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析

物質(zhì)的抗氧化能力與其還原能力呈正相關(guān)，當(dāng)一種物質(zhì)具有較好的供電子能力時(shí)，可將Fe3+還原成Fe2+，并與自由基反應(yīng)從而中斷自由基反應(yīng)鏈，因此在700 nm處吸光值越大表示還原力越強(qiáng)[28]。油菜花粉甾醇的還原力如圖9所示，隨著油菜花粉甾醇質(zhì)量分?jǐn)?shù)濃度的不斷增加，其還原力逐漸提高，當(dāng)油菜花粉甾醇質(zhì)量濃度為3.0 mg/mL時(shí)，還原力吸光度達(dá)1.55±0.05，相同質(zhì)量濃度時(shí)BHT的還原力吸光度為2.33±0.07。

圖9 油菜花粉甾醇的還原力

2.5.5 油菜花粉甾醇對(duì)豬油體系抗氧化活性研究結(jié)果

不同濃度的油菜花粉甾醇在豬油中的抗氧化活性如圖10所示。添加不同濃度的甾醇到豬油中，經(jīng)過不同天數(shù)的高溫強(qiáng)氧化，豬油的氧化程度逐漸加深，用不同劑量處理的豬油的POV值的差異逐漸增大，空白樣品組的氧化程度最大。比較POV值的變化趨勢(shì)，得出隨著劑量的增大，豬油的POV值上升趨勢(shì)變小，表明油菜花粉甾醇在高溫下對(duì)豬油有一定得抗氧化能力，且油菜花粉甾醇對(duì)豬油的抗氧化能力有劑量效應(yīng)關(guān)系，即油菜花粉甾醇的劑量越大，對(duì)豬油的抗氧化性越好。

圖10 不同濃度的油菜花粉甾醇在豬油中的抗氧化性

3 結(jié)論

[1]楊開,葉興乾,劉東紅,等.油菜花粉中黃酮苷類的制備分離和鑒定[J].中國(guó)糧油學(xué)報(bào),2010,25(8):91-97

YANG K,YE X Q,LIU D H,et al.Separation and identification of flavonoid glycosides fromBrassicanapusL.Pollen[J].Journal of the Chinese Cereals and Oils Association,2010,25(8):91-97

[2]楊必成,楊義芳.花粉治療前列腺疾病的物質(zhì)基礎(chǔ)研究進(jìn)展[J].中草藥,2009,40(1):144-149

YANG B C,YANG Y F.Advances in studies on material basis of pollen used for treatment of prostatic diseases[J].Chinese Traditional and Herbal Drugs,2009,40(1):144-149

[3]WANG R,KOBAYASHI Y,LIN Y,et al.A phytosterol enriched refined extract ofBrassicacampestris,L.pollen significantly improves benign prostatic hyperplasia(BPH)in a rat model as compared to the classical TCM pollen preparation Qianlie Kang Pule’an Tablets[J].Phytomedicine,2015,22(1):145-152

[4]楊春英,劉學(xué)銘,陳智毅,等.氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法測(cè)定14種食用植物油中的植物甾醇[J].中國(guó)糧油學(xué)報(bào),2013,28(2):123-128

YANG C Y,LIU X M,CHEN Z Y,et al.Determination of phytosterols of fourteen edible vegetable oils by gas chromatography-mass spectrometry[J].Journal of the Chinese Cereals and Oils Association,2013,28(2):123-128

[6]XIE X,XIAO N,HE J.Physiological function of phytosterol and its application[J].Animal Husbandry and Feed Science,2015(2):67-69

[7]GYLLING H,PLAT J,TURLEY S,et al.Plant sterols and plant stanols in the management of dyslipidaemia and prevention of cardiovascular disease[J].Atherosclerosis,2014,232(2):346-360

[8]VARADY K A,STPIERRE A C,LAMARCHE B,et al.Effect of plant sterols and endurance training on LDL particle size and distribution in previously sedentary hypercholesterolemic adults[J].European Journal of Clinical Nutrition,2005,59(4):518-25

[9]HOVENKAMP E,DEMONTY I,PLAT J,et al.Biological effects of oxidized phytosterols:A review of the current knowledge[J].Progress in Lipid Research,2008,47(1):37-49

[10]龐敏,姜紹通,潘麗軍,等.不同加熱方式對(duì)脂質(zhì)基質(zhì)中甾醇穩(wěn)定性及其抗氧化性能的影響[J].食品科學(xué),2012,33(21):39-42

PANG M,JIANG S T,PAN L J,et al.Effect of different heating methods on the stability and antioxidant activity of phytosterol in lipid matrix[J].Food Science,2012,33(21):39-42

[11]DAGUST.Phytosterol:highly promising compounds[J].Lipid Technology,2000,12:77-80

[12]SRIGLEYC T,HAILE E A.Quantification of plant sterols/stanols in foods and dietary supplements containing added phytosterols[J].Journal of Food Composition and Analysis,2015,40:163-176

[13]ROSENBLAT,VOLAOVA N,AVIRAM M.Pomegranate phytosterol(β-sitosterol)and polyphenolic antioxidant(punicalagin)addition to statin,significantly protected against macrophage foam cells formation[J].Atherosclerosis,2013,226(1):110-7

[14]KRITCHEVSKY D,CHEN S C.Phytosterols-health benefits and potential concerns:a review[J].Nutrition Research,2005,25(5):413-428

[15]徐小軍,余國(guó)珍,陳鑒東.硫磷鐵法測(cè)定大豆甾醇提取物中總甾醇含量[J].中國(guó)藥業(yè),2010,19(8):35-36

XU X J,YU G Z,CHEN J D.Determination of total sterol in soybean sterol by sulfate-phosphate-ferric method[J].China Pharmaceuticals,2010,19(8):35-36

[16]高麗.中華秋海棠甾醇類化合物的提取、純化及微膠囊化研究[D].武漢:華中農(nóng)業(yè)大學(xué),2010

GAO L.Studies on sterols ofbegoniasinensis extraction,purification and microencapsulation[D].Wuhan:Huazhong Agricultural University,2010

[18]OZGEN M,REESE R N,TUILO A Z,et al.Modified 2,2-azino-bis-3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid(ABTS)method to measure antioxidant capacity of selected small fruits and comparison to ferric reducing antioxidant power(FRAP)and 2,2’-diphenyl-1-picrylhydrazyl(DPPH)methods[J].Journal of Agricultural and Food Chemistry,2006,54(4):1151-1157

[19]冮潔,麥海美,解彬,等.羊肚菌菌絲體富硒條件優(yōu)化及其硒多糖抗氧化活性研究[J].食品與發(fā)酵工業(yè),2016,42(9):120-123

JIANG J,MAI H M,XIE B,et al.Optimization of Se-rich culture conditions and antioxidant activities of polysaccharides fromMorchellaesculentamycelium[J].Food and Fermentation Industries,2016,42(9):120-123

[20]OYAIZU M.Studies on products of browning reaction:Antioxidative activities of products of browning reaction prepared from glucosamine[J].Japanese Journal of Nutrition,1986,44(6):307-316

[21]邱智軍,原江鋒,張國(guó)慶,等.連翹葉中連翹苷和連翹酯苷A對(duì)食用油脂的抗氧化活性[J].食品科學(xué),2015,36(17):39-42

QIU Z J,YUAN J F,ZHANG G Q,et al.Antioxidant activity of forsythin and forsythiaside fromforsythiasuspensaleaves on edible oils[J].Food Science,2015,36(17):39-42

[22]GB/T 5538—2005.動(dòng)植物油脂過氧化值測(cè)定[S]

GB/T 5538—2005.Animal and vegetable fats and oils-Determination of peroxide value[S]

[23]羅家星,張彬,鄧丹雯,等.番茄籽油不皂化物成分分析與分離[J].中國(guó)糧油學(xué)報(bào),2015,30(11):125-128

LUO J X,ZHANG B,DENG D W,et al.Separation and analysis of unsaponifiable matters in tomato seed oil[J].Journal of the Chinese Cereals and Oils Association,2015,30(11):125-128

[24]李靜,姚茂君,李俊,等.幾種天然抗氧化劑對(duì)牡丹籽油氧化穩(wěn)定性的影響[J].食品與發(fā)酵工業(yè),2013,39(8):133-137

LI J,YAO M J,LI J,et al.Effects of nature antioxidants on the stability of paeonia seed oil[J].Food and Fermentation Industries,2013,39(8):133-137

[25]高政.菜籽植物甾醇的提取、純化及抗氧化活性研究[D].武漢:華中農(nóng)業(yè)大學(xué),2009

GAO Z.Study on extraction,purification and anti-oxidation activity of rapeseed phytosterol[D].Wuhan:Huazhong Agricultural University,2009

[26]CHOO W S,BIRCH E J.Radical scavenging activity of lipophilized products from lipase-catalyzed transesterification of triolein with cinnamic and ferulic acids[J].Lipids,2008,44(2):145-52

[27]侯留鑫,王華清,鄭鐵松,等.一種新型茶葉籽黃酮單體的分離鑒定及其抗氧化活性[J].食品科學(xué),2013,34(21):115-120

HOU L X,WANG H Q,ZHENG T S,et al.Iolation and identification of a new flavonoid from tea(Camelliasinensis)seeds and its antioxidant activity[J].Food Science,2013,34(21):115-120

[28]沈軍衛(wèi),樊金玲,朱文學(xué),等.模式美拉德反應(yīng)產(chǎn)物的抗氧化性與反應(yīng)進(jìn)程的關(guān)系研究[J].食品科技,2010,35(3):253-257

SHEN J W,FAN J L,ZHU W X,et al.Antioxidant activity of maillard reaction products as related to the processing of maillard reaction[J].Food Science and Technology,2010,35(3):253-257.