鄧娜 吳振山

摘要：為成功提取盜竊案件中現場遺留指印的DNA，用502膠熏顯指印，用棉簽二次轉移法提取檢材上顯現的指印痕跡，再使用硅珠法提取脫落細胞DNA，經AmpFISTR IdentifilerPlus試劑盒復合擴增，3500XL遺傳分析儀電泳檢測和GeneMapperID-X軟件基因分型，成功對502膠熏顯的指印DNA做出了STR分型，確定了2起盜竊案件的嫌疑人。

關鍵詞：指??；脫落細胞；STR分型

中圖分類號：D919文獻標識碼：A文章編號：2095-4379-（2018）32-0152-02

作者簡介：鄧娜（1989-），女，漢族，河南鄭州人，本科，鄭州鐵路公安局刑事技術處，法醫(yī)師，研究方向：DNA檢驗；吳振山（1972-），男，漢族，河南鄭州人，本科，鄭州鐵路公安局刑事技術處，副主任法醫(yī)師，研究方向：DNA檢驗。

Application of touch DNA testing into Unearthing Theft Cases

DENG Na，WU Zhen-shan

Forensic Science Institute of Zhengzhou Railway Public Security Bureau，Henan，Zhengzhou 450000，China

Abstract：This paper introduces analysis of fingerprint DNA collected from theft cases.Fingerprint was developed with 502 glue，and the double swab technique was used to collect the shed cells.DNA，individually extracted from swabs collected in theft cases by an improved silica-bead method，was amplified by AmpFISTR Identifiler？ Plus system，followed to conduct electrophoresis by 3500XL genetic analyzer，and finally undergone the genotyping by GeneMapper？ ID-X software.STR pro？les were determined.This method had been successfully applied in 2 theft cases.

Key words：Finger print；Touch DNA；STR typing

在鐵路盜竊案件中，潛在生物物證，尤其脫落細胞的發(fā)現難、提取難是制約DNA證據使用的瓶頸。近年來，隨著DNA檢驗技術的不斷發(fā)展，微量痕跡物證發(fā)現、提取等方法的日趨成熟，為鐵路公安偵破案件提供了突破口。本文結合筆者日常工作中的實際案例，在經過502膠熏顯后的指印處，使用棉簽二次轉移法提取指印表面脫落細胞，并用硅珠法提取純化DNA，獲得STR分型，比中嫌疑人，成功破獲案件。一、案例資料

（一）2017年2月，某地火車站內旅客攜帶的現金被盜，報警后勘查現場，提取到被透明膠帶纏繞的書籍一本，送檢要求做DNA檢驗。

（二）2017年4月，某鐵路沿線鋁錠被盜，現場遺留長條狀鋁錠捆扎帶數根，提取遺留的金屬捆扎帶送檢，要求做DNA檢驗鑒定。二、檢驗方法

（一）痕跡檢驗人員首先對送檢的檢材進行502膠熏顯，但熏顯出的指印痕跡殘缺不全，不具備指紋檢驗鑒定和入庫比對條件。

（二）法醫(yī)物證檢驗人員在熏顯出的指印痕跡處，使用棉簽二次擦拭轉移，先取一根棉簽，將其頭部蘸取少量蒸餾水，擦拭指印處，再用另一根干棉簽頭部擦拭同一部位。將棉簽拭子用硅珠法提取純化DNA，使用D盾超敏提取試劑盒。

步驟為：①剪取棉簽擦拭子適量放入離心套管內，緩慢向套管中滴加裂解混合液（裂解液 A：裂解液 B=5：1）200μL，56℃溫浴45min，再99℃裂解10min；②將離心管投入-20℃冰箱內迅速降溫至常溫，再加吸附液200μL，后放入離心機內13000r/min離心2min，開蓋后去離心套管，再加入吸附液800μL，吸附珠懸液20μL混合均勻，室溫靜置15min；③8000r/min離心1min，除去上清液，向沉淀物加入-20℃漂洗液800μL，充分混勻；④8000r/min離心1min，去漂洗液；⑤開啟管蓋56℃烘干吸附珠2min；⑥加洗脫液20μL，充分混勻后56℃保溫15min，4℃保存待擴增用。

采用AmpFISTR IdentifilerPlus試劑盒 在 9700 型擴增儀上對 16 個基因座進行復合擴增，體系為 20μL，其中 DNA 模板8μL，28個循環(huán)反應。取 30μL 內標 LIZ500 和1000μL 去離子甲酰胺混合，取混合物10μL 加入1μL 擴增產物，以 3500XL 遺傳分析儀毛細管電泳，Collection 軟件收集數據，GeneMapperID-X軟件做等位基因分型。三、結果

在兩個案例中，均獲得完整STR分型，圖譜峰高均在1500以上，均衡性較好，質量高；將結果導入DNA數據庫，案例1比中本地庫人員；案例2比中全國庫人員。據此，抓獲上述犯罪嫌疑人，相關案件告破。

四、討論

由于鐵路流動性大、人員密集，發(fā)生在鐵路上的盜竊案件，尤其是列車上的財物被盜案件通常不能明確案發(fā)時間和具體地點，沒有傳統(tǒng)意義上的現場，只遺留少量犯罪嫌疑人觸摸過的物品（如錢包、捆扎物等），故在這些物品上發(fā)現提取到嫌疑人的指紋和脫落細胞成為偵破案件的關鍵。脫落細胞提取過程中肉眼很難發(fā)現，具體位置不能確定，如果盲目提取，難以獲得所需要的靶DNA；如果大面積擦拭，靶DNA的濃度就會下降，且可能會遭到外來污染或干擾。為解決上述問題，在非滲透客體上遺留的汗?jié)撝赣√幪崛∶撀浼毎?，是一種針對性強且又簡單易行的方法。

痕跡檢驗時，常用502膠熏顯法顯現指印，但不是每一份檢材均可顯現出清晰、有比對鑒定價值的指紋。有一部分檢材熏顯后只能看到模糊不清或殘缺不全的指印，這類指印在比對檢驗時沒有利用價值，但卻給DNA檢驗人員提取脫落細胞指明了方向，在指印處轉移提取脫落細胞比盲目提取的檢出率要高出很多。本文中的兩例案件，都是在502膠熏顯后的模糊指印處，利用擦拭轉移法提取脫落細胞，最終獲得較好的STR分型圖譜。從圖譜的峰值結果來看，經502膠熏顯后的檢材樣本DNA的含量并不低，均能獲得理想的STR分型。

根據筆者的實踐經驗，在轉移提取時采用棉簽二次擦拭轉移法效果更佳，因為指印處的脫落細胞在502膠熏顯過程中，發(fā)生了離子聚合，可將脫落細胞封在檢材上，二次擦拭轉移法通過反復擦拭、干濕結合，能最大限度地提取到脫落細胞。同時，由于檢材上脫落細胞數量本來就少，轉移提取后數量更少，為提高檢出率，在提取純化環(huán)節(jié)，可使用靈敏度更高的D盾試劑盒硅珠法進行提純，并在復合擴增時適當調整模板DNA的用量及體系以獲得較好的分型數據。

綜上所述，經過502膠熏顯后的檢材仍可通過檢驗人體脫落細胞，獲得STR分型，進行比對認定或入庫查詢，最大限度利用物證，為偵查破案提供證據。[參考文獻]

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