于洋 沈陽市第六人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 (遼寧 沈陽 110006)
內(nèi)容提要: 目的:探究尿液有形成分分析儀在病毒性肝炎檢測(cè)領(lǐng)域的臨床效果評(píng)價(jià)。方法:對(duì)98例病毒性肝炎患者和98例健康體檢者的尿液進(jìn)行尿鐵蛋白含量測(cè)試對(duì)比,分別采用尿液有形成分分析法和ELISA法進(jìn)行測(cè)定和對(duì)比。結(jié)果:病毒性肝炎患者尿液中的尿鐵蛋白含量明顯高于健康體檢者尿液中的尿鐵蛋白含量,說明體內(nèi)尿液中的尿鐵蛋白含量可以作為病毒性肝炎的標(biāo)志物之一,同時(shí),相比于傳統(tǒng)的ELISA法,尿液有形成分分析法測(cè)定的結(jié)果更為精確。結(jié)論:病毒性肝炎的發(fā)生、發(fā)展與尿液中的尿鐵蛋白含量有一定的關(guān)聯(lián),因此,尿液中的尿鐵蛋白含量異??梢宰鳛椴《拘愿窝装l(fā)生、發(fā)展的標(biāo)志物,同時(shí),尿液有形成分分析法測(cè)定尿鐵蛋白相比于ELISA法更為精確。
病毒性肝炎(Viral Hepatitis)是一種由多種肝炎病毒引起的以肝臟病變?yōu)橹鞯膫魅静?,臨床特征主要表現(xiàn)為惡心、食欲下降、渾身無力以及肝區(qū)疼痛等,慢性惡化可能導(dǎo)致肝硬化甚至肝癌的發(fā)生,具有傳染性強(qiáng)、傳播途徑多、發(fā)病率高等特點(diǎn)[1]。從病原學(xué)角度來看,病毒性肝炎可以細(xì)分為甲肝(HAV)、乙肝(HBV)、丙肝(HCV)、丁肝(HDV)和戊肝(HEV),其中,甲、丙、丁戊型肝炎病毒為RNA型,而乙型肝炎病毒為DNA型[2]。目前,中國有超過7億人感染了乙肝,甲肝患者超過10億人,屬于病毒性肝炎高發(fā)地區(qū)。然而,臨床研究顯示,盡早地發(fā)現(xiàn)乙肝病毒并采取恰當(dāng)?shù)闹委熓侄慰梢杂行а泳彶《拘愿窝椎陌l(fā)展,甚至可以徹底治愈病毒性肝炎[3]。通常情況下,病毒性肝炎的檢測(cè)主要采用血液檢測(cè)法。而尿液作為人體代謝產(chǎn)物是除血液以外的另一種疾病檢測(cè)途徑,其中,尿液有形成分檢測(cè)是尿液檢測(cè)的核心部分[4]?;诖?,本研究主要采用AVE-764B尿液有形成分分析儀對(duì)98例病毒性肝炎患者的尿液中的尿鐵蛋白含量,并且與ELISA法檢測(cè)患者尿液中的尿鐵蛋白含量作對(duì)比,以探究患者體內(nèi)尿液中的尿鐵蛋白含量與病毒性肝炎的關(guān)聯(lián)以及AVE-764B尿液有形成分分析儀在病毒性肝炎的臨床應(yīng)用評(píng)價(jià)。
樣品標(biāo)本:本研究所用尿液樣本均來自本院2017年9月~2017年12月確診的98例病毒性肝炎患者以及98例健康體檢者。參與研究的患者的年齡15~79歲,平均42.1歲。
儀器與試劑:本研究所用的ELISA法采用的是美國Bio-Rad伯樂酶標(biāo)儀以及上??迫A全自動(dòng)酶標(biāo)洗板機(jī)ST-96W,其檢測(cè)試劑則是由廈門海菲生物技術(shù)有限公司提供的;而患者尿液中的尿鐵蛋白含量則是通過AVE-764B尿液有形成分分析儀測(cè)試所得,鐵蛋白試劑盒由武漢明德生物科技股份有限公司所提供的。
所有參與研究的患者尿液樣本首先離心去沉淀,其次調(diào)節(jié)尿液pH,每孔加尿液0.1mL,進(jìn)一步進(jìn)行檢測(cè)處理。
1.2.1 ELISA法
按照試劑盒說明書,首先加入已處理過的尿液樣本,并加入聚苯乙烯板包被的抗體,隨后繼續(xù)加入辣根過氧化物,孵育20min后,洗去多余的抗體后,加入適量的顯示劑,利用酶標(biāo)儀讀取吸光值A(chǔ)(Ex/Em=450nm/630nm)。陰性對(duì)照組的臨界值為平均吸光度A*2.1,因此,檢測(cè)結(jié)果大于臨界值為陽性,小于臨界值則為陰性。
1.2.2 尿液有形成分分析法
根據(jù)AVE-764B尿液有形成分分析儀說明對(duì)已處理過的患者的血樣進(jìn)行測(cè)試,確定患者尿液中尿鐵蛋白的含量。
本研究采用SPSS 15.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)兩種檢測(cè)方法的檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行χ2檢驗(yàn)。
98例病毒性肝炎患者以及98例健康體檢者的尿鐵蛋白測(cè)定分析結(jié)果顯示,不管ELISA法還是尿液有形成分分析法,對(duì)于健康者而言,其尿液中的尿鐵蛋白含量均處于較低水平,分別1.89ng/mL和1.93ng/mL,屬于臨床上正常范圍。而對(duì)于98例病毒性肝炎患者,其尿液中的尿鐵蛋白含量明顯增高,其中尿液有形成分分析法測(cè)定的結(jié)果要高于ELISA法的測(cè)定結(jié)果,分別為39.55ng/mL和17.95ng/mL,而且與健康體檢者尿液的尿鐵蛋白含量相比具有顯著的差異性。
酶聯(lián)免疫吸附分析法(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay,ELISA)是實(shí)驗(yàn)室常用的一種檢測(cè)方法,可定性測(cè)定患者血液中的乙肝病毒標(biāo)志物以及尿液中的尿鐵蛋白含量,然而其主要的缺點(diǎn)在于檢測(cè)靈敏度低、精準(zhǔn)性差、可重復(fù)性差,主要用于定性測(cè)試[5]。
尿液中的各種有形成分法分析是研究尿液不可缺少的重要組成部分,對(duì)于疾病的診斷、鑒別以及治療監(jiān)控等具有極其重要的意義[6]?;凇皺C(jī)器視覺”技術(shù),AVE-764B尿液有形成成分分析儀能夠在自動(dòng)識(shí)別下實(shí)現(xiàn)醫(yī)學(xué)影像,主要是低倍鏡頭掃描和定位尿液樣本各組分,高倍鏡頭拍照攝像,并根據(jù)特定的公式計(jì)算出尿液中各組分的含量,因而能夠?qū)颊叩哪蛞焊鞣N成分含量進(jìn)行精確地定量分析[7]。
近年來臨床研究發(fā)現(xiàn),從病毒性肝炎患者的尿液中檢測(cè)出的HBVM及HBV-DNA,說明病毒性肝炎尿液已然成為其傳播的主要媒介[8]。基于此,本研究主要探討病毒性肝炎患者體內(nèi)尿液中尿鐵蛋白含量與病毒性肝炎的關(guān)系,以及基于不同測(cè)試方式的測(cè)試結(jié)果對(duì)比分析。無論ELISA法還是尿液有形成分分析法,相比于健康體檢者,病毒性肝炎患者尿液中的尿鐵蛋白含量明顯高于健康體檢者體內(nèi)尿液的尿鐵蛋白含量;其次,對(duì)比ELISA法和尿液有形成分分析法測(cè)定結(jié)果可以發(fā)現(xiàn),AVE-764B尿液有形成分分析儀測(cè)出的結(jié)果要明顯高于ELISA法的測(cè)定結(jié)果,而且所有測(cè)定結(jié)果均具有可比性。由此可以看出,病毒性肝炎的發(fā)生、發(fā)展與患者尿液中的尿鐵蛋白含量具有一定的關(guān)聯(lián)性,而且使用AVE-764B尿液有形成分分析儀測(cè)定患者尿液中的尿鐵蛋白含量具有更高的精確度,更好的重復(fù)性。
綜上所述,病毒性肝炎患者體內(nèi)尿液中的尿鐵蛋白含量的增加能夠反映出其體內(nèi)病毒性肝炎的發(fā)生、發(fā)展情況,因而可以作為病毒性肝炎的標(biāo)志物進(jìn)行檢測(cè)。而且,與通過血液血清測(cè)定病毒性肝炎標(biāo)志物不同,使用AVE-764B尿液有形成分分析儀可以直接對(duì)尿液中的尿鐵蛋白含量進(jìn)行定量測(cè)試,除了方便有效外,其精確性、敏感性以及重復(fù)性均較ELISA法更加高。