余志龍　劉齊芳　熊隆信

[摘要]目的 探討CD44v6及增殖細(xì)胞核抗原（PCNA）在胃癌組織中的表達(dá)及其與胃癌預(yù)后的關(guān)系。方法 選取2008年1月～2012年12月南昌大學(xué)第三附屬醫(yī)院收治的80例胃癌患者作為研究對象，按照隨機(jī)數(shù)字表法將其分為觀察組與對照組，每組各40例。觀察組患者以CD44v6及PCNA表達(dá)水平檢查為指導(dǎo)進(jìn)行手術(shù)治療，對照組患者主要以手術(shù)者臨床經(jīng)驗(yàn)、術(shù)前影像學(xué)檢查及術(shù)中所見為指導(dǎo)進(jìn)行常規(guī)手術(shù)治療。比較兩組患者的癌組織、癌旁組織、手術(shù)切緣區(qū)CD44v6表達(dá)陽性得分；比較兩組患者的癌組織、癌旁組織、手術(shù)切緣區(qū)PCNA表達(dá)水平；比較兩組患者的手術(shù)切除效果。結(jié)果 兩組患者的癌組織內(nèi)CD44v6表達(dá)陽性得分及PCNA表達(dá)水平比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），觀察組患者的癌旁組織、手術(shù)切緣區(qū)CD44v6表達(dá)陽性得分及PCNA表達(dá)水平均顯著低于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。觀察組患者的R0切除率為97.5%，顯著高于對照組的75.0%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論 對胃癌患者行CD44v6陽性情況及PCNA表達(dá)水平檢測，能有效地指導(dǎo)手術(shù)治療，提高病理性切除率。

[關(guān)鍵詞]CD44v6；增殖細(xì)胞核抗原；胃癌

[中圖分類號(hào)] R735.2 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1674-4721（2017）12（b）-0044-03

[Abstract] Objective To investigate the expression of CD44v6 and PCNA in gastric carcinoma and its relationship with the prognosis of gastric cancer.Methods 80 cases with gastric cancer treated in the Third Affiliated Hospital of Nanchang University from January 2008 to December 2012 were selected as subjects and divided into observation group and control group according to the random numbers table method，40 cases in each group.The patients in the observation group were used surgical treatment under the guidance of CD44v6 and PCNA expression level examination.The control group was treated with routine operation，mainly in the clinical experience，preoperative imaging examination and intraoperative findings.The positive scores of CD44v6 in cancer tissues，adjacent tissues of cancer and surgical margin were compared between the two groups.The level of PCNA expression in cancer tissues，adjacent tissues and surgical margin were compared between the two groups.The surgical excision effect was compared between the two groups.Results The positive scores of CD44v6 and level of PCNA expression in cancer tissues were compared，and the difference was not statistically significant （P>0.05）.While the positive scores of CD44v6 and level of PCNA expression in adjacent tissues and surgical margin in the observation group were significantly lower than those in the control group，and the differences were statistically significant （P<0.05）.The resection rate of R0 in observation group was 97.5%，which was significantly higher than that in the control group，and the difference was statistically significant （P<0.05）.Conclusion The positive rate of CD44v6 and the expression of PCNA in gastric cancer patients can be used to guide the operation and improve the pathologic resection rate.

[Key words]CD44v6；PCNA；Gastric Cancer

胃惡性腫瘤在我國的發(fā)病率及死亡率均處于各種腫瘤首位，其早期診斷是目前研究的重點(diǎn)與熱點(diǎn)[1]。其中胃癌腫瘤細(xì)胞侵襲性相關(guān)因素的研究對于定位癌細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移相關(guān)標(biāo)志物有重要價(jià)值，逐漸成為胃癌研究的重點(diǎn)及熱點(diǎn)[2]。以往研究證實(shí)[3-5]，胃癌惡性腫瘤細(xì)胞侵襲及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移是多步驟、緩慢且復(fù)雜的過程，首先通過腫瘤細(xì)胞與胃粘膜基底層結(jié)合，同時(shí)釋放并激活相關(guān)蛋白水解酶，對胃粘膜基底膜進(jìn)行水解，隨后通過定向運(yùn)動(dòng)透過細(xì)胞膜與細(xì)胞膜缺損空間，從而達(dá)到靶器官，形成胃癌的侵襲與轉(zhuǎn)移。該過程受到多種基因的調(diào)控[6]。本研究通過檢測胃癌組織、癌旁組織和手術(shù)切緣區(qū)正常組織中CD44v6和增殖細(xì)胞核抗原（PCNA）蛋白表達(dá)情況，探討CD44v6和PCNA與胃癌侵襲轉(zhuǎn)移的相關(guān)性，旨在為胃癌患者的預(yù)后提供科學(xué)有效的評價(jià)指標(biāo)，并為將來研究胃癌基因治療提供理論依據(jù)，現(xiàn)報(bào)道如下。endprint

1資料與方法

1.1一般資料

選取2008年1月～2012年12月南昌大學(xué)第三附屬醫(yī)院收治的80例胃癌患者作為研究對象，患者術(shù)前均未經(jīng)放療和化療，手術(shù)切除制作石臘標(biāo)本，連續(xù)切片。納入標(biāo)準(zhǔn)：所有入組者均通過胃鏡下活組織病理檢查確診，結(jié)合臨床表現(xiàn)、CT等進(jìn)行腫瘤分期；年齡18～60歲；均為初診患者；本研究經(jīng)我院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審核及同意，患者均知曉本研究情況并簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：合并嚴(yán)重心肺及肝腎功能不全；處于急性感染期患者；合并凝血功能障礙患者；預(yù)計(jì)生存時(shí)間在3個(gè)月以內(nèi)患者；KPS腫瘤評分<60分患者；簽字拒絕入組者。按照隨機(jī)數(shù)字表法將其分為觀察組與對照組，每組各40例。觀察組男25例，女15例；年齡18～60歲，平均（43.6±2.3）歲；病程1月～3年，平均（1.5±0.2）年。對照組男26例，女14例；年齡18～60歲，平均（43.5±2.4）歲；病程1月～3年，平均（1.5±0.3）年。兩組一般資料比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。

1.2手術(shù)治療方法

觀察組患者以CD44v6及PCNA表達(dá)水平檢查為指導(dǎo)進(jìn)行手術(shù)治療，手術(shù)切除以切口邊緣3 cm內(nèi)無CD44v6表達(dá)陽性為標(biāo)準(zhǔn)。對照組患者主要以手術(shù)者臨床經(jīng)驗(yàn)、術(shù)前影像學(xué)檢查及術(shù)中所見為指導(dǎo)進(jìn)行常規(guī)手術(shù)治療。

1.3觀察指標(biāo)及評價(jià)標(biāo)準(zhǔn)

比較兩組患者的癌組織、癌旁組織、手術(shù)切緣區(qū)CD44v6表達(dá)陽性得分；比較兩組患者的癌組織、癌旁組織、手術(shù)切緣區(qū)PCNA表達(dá)水平；比較兩組患者的手術(shù)切除效果。兩組患者均行免疫組化法檢測癌組織、癌旁組織、手術(shù)切緣區(qū)CD44v6及PCNA表達(dá)水平，儀器及其配套試劑盒均由上海瑞齊生物科技有限公司提供，型號(hào)為96T/48T，并嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行。其中PCNA表達(dá)檢查通過PCNA標(biāo)記指數(shù)PCNA LI表示，指的是每視野1000個(gè)惡性腫瘤細(xì)胞內(nèi)PCNA陽性細(xì)胞的比例。CD44V6陽性結(jié)果分為1～4級(jí)4個(gè)級(jí)別，其中陰性得分0分；強(qiáng)陽性，即陽性細(xì)胞比例>75%得分為3分；陽性細(xì)胞比例在50%～75%為弱陽性，得分為1分；陽性細(xì)胞比例25%～49%為陽性，得分為2分。統(tǒng)計(jì)兩組患者的手術(shù)切除效果，其中病理切除（R0切除）即為顯微鏡下無惡性腫瘤病灶殘留。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，兩組間比較采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料采用率表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1兩組患者癌組織、癌旁組織、手術(shù)切緣區(qū)CD44v6表達(dá)陽性得分的比較

兩組患者的癌組織內(nèi)CD44v6表達(dá)陽性得分比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），觀察組患者的癌旁組織、手術(shù)切緣區(qū)CD44v6表達(dá)陽性得分均顯著低于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）（表1）。

2.2兩組患者癌組織、癌旁組織、手術(shù)切緣區(qū)PCNA表達(dá)水平的比較

兩組患者的癌組織內(nèi)PCNA表達(dá)水平比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），觀察組患者的癌旁組織、手術(shù)切緣區(qū)PCNA表達(dá)水平均顯著低于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）（表2）。

2.3兩組患者手術(shù)切除效果的比較

觀察組患者R0切除為39例（97.5%），顯著高于對照組的30例（75.0%），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=6.746，P<0.05）。

3討論

細(xì)胞黏附分子CD44v6屬于人體內(nèi)分布最為廣泛的細(xì)胞表面跨膜糖蛋白，其能介導(dǎo)細(xì)胞之間、細(xì)胞及其外基質(zhì)之間的相互黏附效應(yīng)[7]。其在惡性腫瘤細(xì)胞中表達(dá)水平較高，可作為惡性腫瘤發(fā)生發(fā)展、侵襲與轉(zhuǎn)移的指標(biāo)[8-9]。CD44分子則屬于單基因編碼特異性單鏈糖蛋白[10]。目前已知的CD44v為常見的選擇性剪接外顯子及變異型外顯子，數(shù)量較多達(dá)到十種[10-12]。其中CD44v6為最常見的變異體，其可編碼CD44基因片段功能區(qū)外的外顯子6，促使其發(fā)生可變性拼接效應(yīng)，且其結(jié)構(gòu)與CD44s最為相似。研究稱CD44v6基因被認(rèn)為是一種腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移有關(guān)基因[13]。同時(shí)PCNA則為細(xì)胞增殖表達(dá)副產(chǎn)物，其作為評估細(xì)胞增殖狀態(tài)相關(guān)指標(biāo)而被人們所認(rèn)識(shí)[14]。PCNA的表達(dá)被認(rèn)為與胃癌的分化程度及相關(guān)淋巴結(jié)陽性率有關(guān)[15-19]。

本研究比較兩組患者的癌組織、癌旁組織、手術(shù)切緣區(qū)CD44v6表達(dá)陽性得分及PCNA表達(dá)水平，結(jié)果提示，兩組患者的癌組織內(nèi)CD44v6表達(dá)陽性得分及PCNA表達(dá)水平比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），觀察組患者的癌旁組織、手術(shù)切緣區(qū)CD44v6表達(dá)陽性得分及PCNA表達(dá)水平均顯著低于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），證實(shí)針對胃癌實(shí)施手術(shù)治療患者，行CD44v6陽性情況及PCNA表達(dá)水平檢測，進(jìn)而指導(dǎo)手術(shù)治療，能夠有效降低癌旁組織、手術(shù)切緣區(qū)中CD44v6陽性情況及PCNA表達(dá)水平。同時(shí)針對兩組患者的手術(shù)切除效果比較發(fā)現(xiàn)，觀察組患者的R0切除率顯著高于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），進(jìn)一步證實(shí)針對胃癌實(shí)施手術(shù)治療患者，行CD44v6陽性情況及PCNA表達(dá)水平檢測，可有效提高手術(shù)效率，提高病理性手術(shù)切除率。

綜上所述，對胃癌患者行CD44v6陽性情況及PCNA表達(dá)水平檢測，能有效指導(dǎo)手術(shù)治療，提高病理性切除率。

[參考文獻(xiàn)]

[1]賈海江，戴林.胃癌患者預(yù)后與癌基因關(guān)系的研究進(jìn)展[J].臨床消化病雜志，2011，30（1）：62-64.

[2]趙魯笳，邢廣瑩，王美華，等.進(jìn)展期胃癌P53蛋白和PCNA/cyclin的表達(dá)[J].大連醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2011，33（3）：220-223.

[3]盧書明，張竹青，劉麗娜，等.P57～（KIP2）和PCNA在胃癌組織中的表達(dá)及意義[J].大連醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2010，32（5）：516-520.endprint

[4]劉輝琦，劉慧，劉杰，王生蘭.胃癌患者血清PCNA蛋白變化及意義[J].青海醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2011，32（3）：179-180.

[5]王志坤，劉啟泉，李博林，等.小歸芍化濁解毒方對胃癌前病變大鼠PCNA及Reg基因干預(yù)作用的實(shí)驗(yàn)研究[J].中成藥，2012，34（8）：1425-1428.

[6]齊鑫，王亮，劉思源，等.全胃切除術(shù)與近端胃切除術(shù)治療胃上部癌術(shù)后發(fā)生反流性食管炎的關(guān)系探討[J].中華胃食管反流病電子雜志，2015，2（1）：18-20.

[7]Zhang JC，Wang ZR，Cheng YJ，et al.Expression of proliferating cell nuclear antigen and CD44 variant exon 6 in primary tumors and corresponding lymph node metastases of colorectal carcinoma with Dukes′ stage C or D[J].World J Gastroenterol，2013，19（7）：1482-1486.

[8]劉志勇，易堅(jiān)，鄒小明.PCNA、E2F-1、RASSF1A蛋白表達(dá)與胃癌生物學(xué)關(guān)系研究[J].黑龍江醫(yī)藥，2013，26（5）：768-771.

[9]崔興俊，洪艷艷，畢學(xué)杰，等.養(yǎng)正消積膠囊對胃癌組織PCNA，p53蛋白，VEGF表達(dá)的影響[J].中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2012，18（22）：304-306.

[10]張翔，周云海，姚路斌，等.YB-1與PCNA在胃癌組織的表達(dá)及其相關(guān)性[J].江蘇醫(yī)藥，2015，41（21）：2544-2547+2647.

[11]董磊.基因治療聯(lián)合化療治療肺癌胸腔積液臨床觀察[J].臨床肺科雜志，2014，18（8）：1481.

[12]杜強(qiáng)強(qiáng)，韓波.CEA、CTC 在胃癌中的研究進(jìn)展[J].癌癥進(jìn)展，2016，14（10）：958-961.

[13]權(quán)琳，王毅，徐玲，等.胃癌患者外周血循環(huán)內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)的臨床價(jià)值探討[J].南京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），2014，34（9）：1228-1231.

[14]蔣磊，李玉強(qiáng)，孫宏治.胃癌患者不同來源生物樣本及臨床病理生理特征對表皮生長因子受體基因突變狀態(tài)的研究[J].生物醫(yī)學(xué)工程與臨床，2017，21（3）：308-314.

[15]萬佳蔚，沈洪遠(yuǎn)，黃紅宇，等.胃癌患者外周血循環(huán)腫瘤細(xì)胞與臨床特征關(guān)系的初步研究[J].臨床與病理雜志，2015，35（1）：43-47.

[16]余朝亞.胃癌組織中nm23、PCNA的表達(dá)及臨床意義[J].中國現(xiàn)代醫(yī)生，2011，49（30）：37-39.

[17]孟凡軍，劉曉波，劉光軍，等.PCNA、P27蛋白在老年胃癌中的表達(dá)及其臨床意義[J].現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展，2013，13（3）：509-511+545.

[18]Kulagin RN.Molecular prognostic markers of lymphogenous metastasis of squamous cell carcinoma of the larynx （an immuno-histochemical study）[J].Vestn Otorinolaringol，2011，11（5）：11-14.

[19]賈海江，戴林.P53、PCNA和PTEN在胃癌組織中的表達(dá)及其臨床意義[J].國際消化病雜志，2012，32（5）：302-305.

（收稿日期：2017-09-06 本文編輯：孟慶卿）endprint