黃平全 鐘 飛 尹念春 鄧伶寧

（1.蓬溪縣畜牧食品局，四川蓬溪 629100；2.遂寧市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，四川遂寧 629000）

自2013年我國(guó)發(fā)現(xiàn)首例人感染H7N9流感病例以來(lái)，每年冬春季節(jié)都會(huì)出現(xiàn)一波人感染H7N9流感疫情。有研究表明，該病毒可通過(guò)基因重配或適應(yīng)性突變，演變成可引起流感大流行的病毒。在2016年至2017年第五波疫情前，H7N9病毒只是低致病性禽流感病毒，禽類感染后不會(huì)出現(xiàn)臨床癥狀。但據(jù)中國(guó)疾控中心2017年2月19日從廣東分離的H7N9流感病毒株的測(cè)序結(jié)果提示，該病毒已經(jīng)變異為高致病性禽流感病毒，并在禽類中出現(xiàn)病死等情況，需要引起動(dòng)物防疫部門和家禽養(yǎng)殖戶高度重視。本文結(jié)合H7N9流感病毒最新疫情流行特征，對(duì)其病原學(xué)、流行病學(xué)、疫苗研發(fā)及綜合防控措施等進(jìn)行了探討。

1 病原學(xué)

禽流感病毒屬正粘病毒科甲型流感病毒屬。該型病毒顆粒呈多形性，其中球形直徑80～120nm，有囊膜?；蚪M為分節(jié)段單股負(fù)鏈RNA。依據(jù)其外膜血凝素（H）和神經(jīng)氨酸酶（N）蛋白抗原性不同，目前可分為16個(gè)H亞型（H1～H16）和9個(gè)N亞型（N1～N9）。H7N9流感病毒是禽流感病毒的一種亞型。H7N9病毒是新型重配病毒，可能由感染鴨的H7N3禽流感病毒與感染野鳥的H7N9禽流感病毒、感染雞的H9N2禽流感病毒重配而來(lái)[1]。由于人感染H7N9毒株出現(xiàn)了適應(yīng)性變異，導(dǎo)致該病毒可從禽向人跨種傳播[2]。

2 流行特征

H7N9流感病毒的主要宿主和傳播者是雞和鵪鶉?，F(xiàn)在的病毒主要在活禽交易市場(chǎng)的雞和環(huán)境中分離得到。雖然個(gè)別雞場(chǎng)發(fā)現(xiàn)有血清學(xué)或病原學(xué)陽(yáng)性的樣品，但絕大多數(shù)養(yǎng)禽場(chǎng)檢測(cè)為陰性。H7N9病毒2014年分離的毒株與2013年的分離毒株沒(méi)有明顯的變異，但從家禽上分離到的H7N9和病人分離到的H7N9在序列和致病型上，還是存在一些差異。2017年以前未見(jiàn)H7N9流感引起的禽群大量發(fā)病的報(bào)道，但其變異毒株在禽類感染后死亡率大幅上升，已經(jīng)成為高致病性禽流感毒株。

3 檢測(cè)方法

未發(fā)生變異的H7N9病毒對(duì)禽類具有低致病性，不會(huì)引起禽類死亡，導(dǎo)致在禽類檢測(cè)H7N9病毒比較困難，因此在不同類型的家禽樣本中迅速識(shí)別H7N9病毒的檢測(cè)方法用以控制對(duì)人類的潛在傳播是至關(guān)重要的。目前，檢測(cè)家禽H7N9病毒的方法有雞胚病毒分離、血凝及血凝抑制實(shí)驗(yàn)、反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)、核酸等溫?cái)U(kuò)增、新一代測(cè)序和免疫層析技術(shù)等。由于H7N9病毒會(huì)引起人嚴(yán)重疾病和死亡，并且在雞胚病毒分離的H7N9病毒可增加實(shí)驗(yàn)室人員感染的風(fēng)險(xiǎn)，因此需要比典型的流感病毒的生物安全水平更高的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方法。自從人感染H7N9流感暴發(fā)以來(lái)，實(shí)時(shí)反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（rRT-PCR）方法因其具有高度靈敏性和周轉(zhuǎn)時(shí)間短的特點(diǎn)而被廣泛用于家禽H7N9病毒的檢測(cè)[3]。此外血凝及血凝抑制實(shí)驗(yàn)也廣泛應(yīng)用于家禽血清H7N9抗體檢測(cè)，但由于HA-HI實(shí)驗(yàn)容易受到補(bǔ)體等雜蛋白的影響，所以實(shí)驗(yàn)可能會(huì)出現(xiàn)不同程度的假陽(yáng)性，尤其水禽樣品的假陽(yáng)性率更為突出，在實(shí)際操作可將血清樣品56℃溫浴30min，用以降低樣品假陽(yáng)性率[4]。

4 疫苗研究

由于H7N9禽流感病毒特別是變異后的新型H7N9流感病毒已經(jīng)是高致病性禽流感病毒，有必要對(duì)家禽進(jìn)行免疫預(yù)防，這對(duì)我國(guó)家禽H7N9流感疫苗的研發(fā)提供了挑戰(zhàn)。近幾年，不斷有機(jī)構(gòu)和學(xué)者對(duì)H7N9流感疫苗進(jìn)行開(kāi)發(fā)研究。目前，公開(kāi)報(bào)道的H7N9亞型禽流感疫苗主要有重組禽流感病毒滅活疫苗、DNA疫苗、基因工程疫苗等。對(duì)于該H7N9禽流感疫苗的制備方法也有較多探索。另外，無(wú)針皮內(nèi)注射免疫甲型H7N9裂解流感疫苗安全、有效，且抗原用量是有針肌肉注射免疫抗原用量的1/5量，將為流感疫苗免疫防控提供新的技術(shù)策略。

5 綜合防控

5.1 加強(qiáng)疫情監(jiān)測(cè)，完善疫情上報(bào)制度

各級(jí)防疫部門要嚴(yán)格執(zhí)行農(nóng)業(yè)部H7N9流感監(jiān)測(cè)剔除計(jì)劃，認(rèn)真開(kāi)展家禽H7N9監(jiān)測(cè)，對(duì)檢出病原學(xué)陽(yáng)性的養(yǎng)殖場(chǎng)（戶）家禽，按照《動(dòng)物H7N9流感應(yīng)急處置指南》要求，立即進(jìn)行撲殺和無(wú)害化處理。同時(shí)，要落實(shí)專人在陽(yáng)性場(chǎng)所在地、周邊地區(qū)和流行病學(xué)相關(guān)區(qū)域開(kāi)展家禽監(jiān)測(cè)排查，及時(shí)發(fā)現(xiàn)和清除隱患，做到“早發(fā)現(xiàn)、早報(bào)告、早處置”，并且建立全國(guó)跨部門的野鳥遷移、帶毒監(jiān)測(cè)預(yù)警機(jī)制，切實(shí)提高預(yù)警預(yù)報(bào)能力。

5.2 加強(qiáng)動(dòng)物檢疫，搞好流通管控

防疫檢疫部門要切實(shí)加強(qiáng)動(dòng)物檢疫監(jiān)管，嚴(yán)把動(dòng)物檢疫關(guān)，切斷病原傳播途徑。要嚴(yán)格執(zhí)行“檢疫申報(bào)制”，把好關(guān)口，規(guī)范落實(shí)《家禽產(chǎn)地檢疫規(guī)程》。對(duì)未經(jīng)檢疫或檢疫不合格的一律禁止向外調(diào)運(yùn)，杜絕病源的相互傳播。要嚴(yán)把種禽引入關(guān)，凡引入種禽進(jìn)行飼養(yǎng)的，要從嚴(yán)審批。同時(shí)強(qiáng)化活禽運(yùn)輸監(jiān)管，堅(jiān)決杜絕病害和檢疫不合格的禽類產(chǎn)品流入市場(chǎng)，確保動(dòng)物衛(wèi)生安全。要規(guī)劃建設(shè)主城區(qū)活禽集中交易和屠宰場(chǎng)所，全面推行“規(guī)模養(yǎng)殖、集中屠宰、冷鏈運(yùn)輸、冰鮮上市”。

5.3 構(gòu)建養(yǎng)殖場(chǎng)生物安全體系，做好消毒滅源免疫工作

養(yǎng)殖場(chǎng)（戶）要做好家禽的日常飼養(yǎng)管理與定期清潔消毒，搞好養(yǎng)殖場(chǎng)環(huán)境衛(wèi)生，做好防止飛鳥措施，積極開(kāi)展疫苗免疫。

參考文獻(xiàn)

[1]張繼榮，姚青，高玉婧，等.基于家禽和人感染H7N9禽流感病毒血凝素及其表達(dá)特性分析[J].黑龍江畜牧獸醫(yī)，2016，（9）：13-15.

[2]龍?jiān)畦T，唐雨新，李丹，等. H7N9禽流感病毒基因變異分析與活禽市場(chǎng)管理研究[J].湖南中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2016，（A01）：26-27.

[3]XU X，BAO H，MA Y，et al. Simultaneous detection of novel H7N9 and other influenza A viruses in poultry by multiplex real-time RTPCR[J].Virol J，2015，12（1）：69.

[4]蔡文杰，邱立新，邱美珍，等.血凝和血凝抑制試驗(yàn)常見(jiàn)問(wèn)題及解決方法[J].湖南畜牧獸醫(yī)，2012，（5）：39-41.

[5]H7亞型重組禽流感病毒滅活疫苗研制成功[J].今日畜牧獸醫(yī).2014，（11）：67.

[6]單繼艷，劉兵，柳金雄，等.表達(dá)H7N9亞型禽流感病毒HA基因DNA疫苗對(duì)雞免疫保護(hù)效力的研究[J].中國(guó)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào)，2014，（6）：467-470.

[7]蔣文明，侯廣宇，李金平，等.H7N9亞型流感候選疫苗株的構(gòu)建及免疫效力試驗(yàn)[J].中國(guó)動(dòng)物檢疫，2017，（6）：86-89.

[8]葉文佳，陳溥，丁亞紅，等.甲型H7N9流感疫苗的臨床研究進(jìn)展[J].激光生物學(xué)報(bào)，2017，（3）：198-204.

[9]萬(wàn)紅.H7亞型禽流感滅活疫苗的研究[D].華南農(nóng)業(yè)大學(xué)，2016.

[10]郭琦，廖國(guó)陽(yáng).人用H7N9禽流感疫苗的研究進(jìn)展[J].中國(guó)生物制品學(xué)雜志，2017，（2）：210-214.

[11]陳繼明.H7N9流感疫苗研制新策略[J].中國(guó)家禽，2014，（20）：1.

[12]任天宇，張肖，邢麗，等.無(wú)針皮內(nèi)注射免疫甲型H7N9流感裂解疫苗的免疫效果評(píng)價(jià)[J].免疫學(xué)雜志，2015，（5）：386-390.