，，

卵黃抗體(Immunoglobulin of egg yolk/egg yolk antibody, IgY)是指特定抗原刺激禽類(lèi)B淋巴細(xì)胞，由B細(xì)胞分化成漿細(xì)胞并由此分泌特異性抗體進(jìn)入血液循環(huán)，當(dāng)血液流經(jīng)卵巢時(shí)在卵細(xì)胞中逐漸蓄積，形成卵黃抗體。卵黃抗體具有性質(zhì)穩(wěn)定、特異性強(qiáng)、制備成本低、口服安全等優(yōu)點(diǎn)在家禽、家畜傳染病的防治中已得到廣泛的應(yīng)用。產(chǎn)品的開(kāi)發(fā)也在生態(tài)農(nóng)業(yè)和食品安全方面產(chǎn)生了良好的經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)效益。在診斷、預(yù)防和治療人類(lèi)和動(dòng)物各種疾病中具有良好的應(yīng)用價(jià)值。IgY的產(chǎn)品在動(dòng)物疾病防治應(yīng)用報(bào)道較多，在醫(yī)學(xué)中產(chǎn)品研發(fā)與應(yīng)用報(bào)道較少，本文就IgY產(chǎn)品研發(fā)及應(yīng)用進(jìn)行綜述。

1 卵黃抗體結(jié)構(gòu)功能及研發(fā)進(jìn)展

1.1IgY的分泌 禽類(lèi)的免疫系統(tǒng)包括細(xì)胞和體液免疫系統(tǒng)，分別受法氏囊和胸腺的控制。當(dāng)機(jī)體受到外來(lái)抗原刺激后，體內(nèi)主要發(fā)生體液免疫，法氏囊內(nèi)的B細(xì)胞活化、分化成為漿細(xì)胞，漿細(xì)胞分泌針對(duì)抗原的特異性抗體進(jìn)入血液循環(huán)，特異性抗體(主要是IgG)隨著血液流經(jīng)卵巢，并在卵細(xì)胞中逐漸蓄積，形成卵黃抗體。流經(jīng)輸卵管的血液中的特異性抗體(主要是IgM)和IgA進(jìn)入卵清中，形成卵清抗體。與卵黃抗體相比，卵細(xì)胞在輸卵管中移行的時(shí)間較短，因而卵清抗體含量極微。

1.2IgY的結(jié)構(gòu) IgY分子結(jié)構(gòu)與哺乳動(dòng)物的IgG相似。lgY是一種7S免疫球蛋白,總分子量約180 kD,由兩條輕鏈和兩重輕鏈組成，分子量分別是22-30 kD、67-70 kD。IgY具有典型的免疫球蛋白的空間構(gòu)象,也可與抗原結(jié)合,但其重鏈上的氨基酸組成與lgG相差很大[1]。IgY的重鏈由4個(gè)恒定區(qū)(Cv1-Cv4)和1個(gè)可變區(qū)組成,沒(méi)有鉸鏈區(qū), Cv 2、Cv 3之間存在兩個(gè)重鏈間二硫鍵。而哺乳動(dòng)物IgG只有3個(gè)恒定區(qū)(Cγ1-Cγ3)。最近的研究表明：IgY的疏水基團(tuán)多于IgG,這恰好使它更適于脂類(lèi)含量豐富的卵黃環(huán)境。比較IgY和IgG的恒定區(qū)發(fā)現(xiàn),IgY的Cv 3、Cv 4區(qū)與IgG的Cv 2、Cv 3區(qū)十分相似,而Cv 2區(qū)可能經(jīng)“壓縮”形成IgG的鉸鏈結(jié)構(gòu)。相對(duì)于重鏈而言,兩者輕鏈結(jié)構(gòu)上差異較小,氨基酸組成的相似性較大。IgY由于結(jié)構(gòu)中比IgG重鏈多了一個(gè)恒定區(qū),但卻沒(méi)有IgG特有的鉸鏈區(qū),所以IgY的分子量較大,擺動(dòng)性、柔韌性下降,穩(wěn)定性較高[2]。

1.3IgY的功能優(yōu)勢(shì) 卵黃抗體與一般哺乳動(dòng)物來(lái)源的抗體相比，具有以下優(yōu)勢(shì)：①經(jīng)濟(jì)易得：實(shí)驗(yàn)動(dòng)物來(lái)源廣泛，制備提取純化過(guò)程簡(jiǎn)單，制備等量的抗體動(dòng)物成本更低，產(chǎn)量高；②性質(zhì)穩(wěn)定：較強(qiáng)的耐酸、耐熱、耐高滲性能和一定的抗酶降解能力。當(dāng)pH為3.5 ～11.0時(shí)，IgY 活性比較穩(wěn)定，高于或低于這個(gè)范圍時(shí)IgY 活性會(huì)迅速下降。當(dāng)溫度低于75 ℃條件下，IgY具有良好的熱穩(wěn)定性。在室溫存放6個(gè)月或在4 ℃條件下存放5年對(duì)其活性無(wú)明顯影響。IgY對(duì)胃蛋白酶也有較好的耐受能力，但對(duì)胰蛋白酶十分敏感，IgY分別與胰凝乳酶和胰蛋白酶溫育8 h，仍能保持一定的活性[3]；③減少假陽(yáng)性和假陰性：IgY 不與血清中的類(lèi)風(fēng)濕因子、人抗鼠抗體、抗-IgG抗體和抗體結(jié)合物發(fā)生交叉反應(yīng)，不激活補(bǔ)體系統(tǒng)等，也不與葡萄球菌蛋白A(SPA) 和鏈狀球菌蛋白G 發(fā)生反應(yīng)，可以明顯減少假陽(yáng)性或假陰性的產(chǎn)生，增強(qiáng)檢測(cè)特異性[4]；④與血清不產(chǎn)生交叉反應(yīng)：由于禽類(lèi)和哺乳動(dòng)物之間存在明顯的種系和基因?qū)W背景差異，IgY 能識(shí)別更多的哺乳動(dòng)物抗原表位，從而增強(qiáng)免疫信號(hào)，提高了IgY靈敏度；⑤特殊抗體形成率高[5]；⑥有診斷、預(yù)防、治療的作用：可以做為食品或者食品添加劑以口服的方式達(dá)到防治疾病的作用，也可以做為診斷試劑檢測(cè)疾病。因此，IgY具有的檢測(cè)特異性強(qiáng)、靈敏度高、性質(zhì)穩(wěn)定、安全等優(yōu)點(diǎn)使其廣泛地應(yīng)用于食品、農(nóng)業(yè)和人及動(dòng)物疾病中。

1.4國(guó)內(nèi)外已開(kāi)發(fā)的IgY專(zhuān)利 從1893年Klemperer發(fā)現(xiàn)IgY，國(guó)外關(guān)于IgY的研究和應(yīng)用較多。根據(jù)初步資料顯示IgY早期專(zhuān)利也集中在動(dòng)物應(yīng)用產(chǎn)品方面。國(guó)外由最開(kāi)始禽病防治，到獸類(lèi)、養(yǎng)殖類(lèi)甚至人類(lèi)疾病、食品工業(yè)及農(nóng)業(yè)等各方面均有涉及。國(guó)外早期將IgY作為飼料添加劑用于動(dòng)物生長(zhǎng)繁殖及各種疾病的預(yù)防防治，后來(lái)研發(fā)出制成口服液、噴霧劑或作為食品添加劑等用于抗炎、抗感染、抗肥胖、抗胃腸道疾病等各個(gè)方面和領(lǐng)域的IgY，并申請(qǐng)相關(guān)專(zhuān)利[6-9]。國(guó)內(nèi)IgY研發(fā)起步比較晚，近年來(lái)快速增長(zhǎng)，國(guó)內(nèi)很多生物技術(shù)公司也開(kāi)始類(lèi)似產(chǎn)品研發(fā)。如重慶和潤(rùn)實(shí)業(yè)有限公司申請(qǐng)了制備抗禽類(lèi)病毒性、細(xì)菌性疫病、抗仔豬黃痢、白痢病原菌、抗奶牛乳腺炎病原菌復(fù)合卵黃抗體的專(zhuān)利并應(yīng)用于治療相關(guān)疾病藥物或飼料添加劑中。中國(guó)在抗寄生蟲(chóng)、細(xì)菌、病毒或其他方面關(guān)于卵黃抗體的專(zhuān)利有300多篇，隨著科技的發(fā)展和進(jìn)步會(huì)有更多的產(chǎn)品研發(fā)并投入實(shí)際應(yīng)用中。

2 卵黃抗體在人及動(dòng)物疾病診斷的應(yīng)用

禽類(lèi)與哺乳系動(dòng)物種系關(guān)系較遠(yuǎn)，卵黃抗體與人和哺乳動(dòng)物免疫球蛋白有許多不同之處，IgY不與金色葡萄球菌A蛋白結(jié)合、哺乳動(dòng)物Fc受體結(jié)合，對(duì)哺乳動(dòng)物補(bǔ)體無(wú)固定作用等，這使得卵黃抗體在檢測(cè)診斷上具有更強(qiáng)的特異性和靈敏度，能避免試驗(yàn)假陽(yáng)性。IgY制備簡(jiǎn)單、產(chǎn)量高，有望取代傳統(tǒng)的多克隆抗體的生產(chǎn)，獲取大量更有效的抗體。IgY可以應(yīng)用于免疫熒光試驗(yàn)、ELISA試驗(yàn)、免疫擴(kuò)散、免疫電泳等。

2.1IgY在病毒感染診斷中的應(yīng)用 趙文思等用純化的HIV-1P15蛋白免疫產(chǎn)蛋雞制備雞卵黃抗體，通過(guò)優(yōu)化組合獲得了高純度的IgY，純化的抗體能夠與HIV-1病毒蛋白P15特異性結(jié)合，為HIV感染患者的診斷提供了新思路[10]。嚴(yán)重急性呼吸綜合征冠狀病毒的核衣殼蛋白(SARS-CoV-NP)可用于判斷個(gè)體是否感染SARS，A. Palaniyappan等用SARS-CoV-NP免疫產(chǎn)蛋雞制備抗SARS-CoV-NP的多克隆抗體IgY，SARS-CoV-NP作為包被抗原，單克隆抗SARS-CoV-NP抗體作為捕獲抗體，IgY作為檢測(cè)抗體，采用ELISA雙抗體夾心法用于SARS疑似個(gè)體的早期診斷[11]。張小鶯等[12]用三種滅活的天花病毒(痘苗病毒，calpox病毒和牛痘病毒)免疫三組蛋雞，制備抗vaccinia virus IgY和抗calpox virus IgY，在高度稀釋的情況下，仍可在免疫熒光實(shí)驗(yàn)中呈陽(yáng)性反應(yīng)，并且特異性卵黃抗體能夠與磁珠結(jié)合用于天花病毒的PCR檢測(cè)，研究表明抗痘病毒IgY有望成為一個(gè)痘病毒的檢測(cè)手段?？袢∈且环N由狂犬病病毒所致的人獸共患病，IgY可用于狂犬病病毒感染的診斷，用直接熒光抗體檢測(cè)方法檢測(cè)狂犬病毒抗原已經(jīng)在世界范圍內(nèi)得到廣泛應(yīng)用。IgY作為替代抗體用于檢測(cè)冰凍肝臟中的甲型肝炎病毒[13]。豬圓環(huán)病毒2型(Porcine circovirus 2,PCV2)是斷奶仔豬多系統(tǒng)衰竭綜合征(PMWS)等相關(guān)疾病的主要病原體，建立豬圓環(huán)病毒2型捕獲ELISA抗體檢測(cè)方法檢測(cè)豬圓環(huán)病毒2型[14]。乙型腦炎是由日本乙型腦炎病毒引起的急性人獸共患傳染病，黃少梅[15]研制豬乙型腦炎病毒ELISA抗體檢測(cè)試劑盒。

2.2IgY在細(xì)菌和寄生蟲(chóng)感染診斷中的應(yīng)用 產(chǎn)志賀毒素大腸桿菌能引起一系列疾病，包括腹瀉、出血性結(jié)腸炎和危及生命的溶血性尿毒綜合癥(HUS)等，將志賀毒素(STX)作為抗原，制備anti-stx2b IgY抗體，采用雙抗體夾心ELISA用于常規(guī)快速診斷產(chǎn)志賀毒素大腸桿菌檢測(cè)的方法[16]。鉤端螺旋體病是由鉤端螺旋體屬的致病性鉤端螺旋體引起的傳染病，抗鉤端螺旋體的單克隆抗體、生物素標(biāo)記的抗鉤端螺旋體IgY抗體采用雙抗體夾心ELISA檢測(cè)待測(cè)血清(疑似含鉤端螺旋體)[17]。弓形蟲(chóng)表面抗原(SAG1)可作為弓形蟲(chóng)的檢測(cè)指標(biāo)，制備出抗SAG1特異性IgY抗體，可用于弓形蟲(chóng)的檢測(cè)[18]。IgY也為血吸蟲(chóng)病的檢測(cè)也提供了一種便捷、無(wú)創(chuàng)傷的新方法[3]。

2.3在腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)中的應(yīng)用 人乳頭瘤病毒( HPV) 16 是高危型HPV，與宮頸癌及宮頸上皮內(nèi)高度病變有著密切的關(guān)系，對(duì)人乳頭瘤病毒(HPV)的基礎(chǔ)和臨床診斷研究有重要意義。楊軍等[19]用人乳頭瘤病毒16L1蛋白(HPV16L1)免疫蛋雞，制備出純度高、特異強(qiáng)的抗HPV16L1 IgY 抗體，用于檢測(cè)HPV16L1。乳腺癌的診斷中最常用的是腫瘤抗原15-3(CA15-3)，制備抗 CA15-3 IgY，建立雙抗體夾心法ELISA 檢測(cè)CA15-3[20]。HER2 和端粒酶是乳腺癌診斷的標(biāo)志因子，Y Xiao等[21]制備抗人HER2和端粒酶單克隆抗體和IgY,采用一種新的量子成像系統(tǒng)，對(duì)特定的細(xì)胞和組織進(jìn)行追蹤，與哺乳動(dòng)物的IgG對(duì)比，前者表現(xiàn)出更高的親和性。Y Xiao等制備抗HER2 IgY結(jié)合納米技術(shù)可用于HER2的檢測(cè)和腫瘤的靶向治療[22]。前列腺特異性抗原(PSA)是一種重要的血清前列腺癌檢測(cè)、監(jiān)測(cè)和分期的標(biāo)記物，Agnieszkaupicka-Sowik等[23]用單克隆抗體夾心/IgY /PSA檢測(cè)ELISA試劑盒，研究結(jié)果表明其可能是一個(gè)替代哺乳動(dòng)物抗體診斷前列腺癌的方法。卵黃抗體還可用于卵巢癌和非霍奇金淋巴瘤患者的檢測(cè)[24]。

2.4其他應(yīng)用 P Jintaridth等[25]采用卵黃抗體技術(shù)是用來(lái)產(chǎn)生抗α血紅蛋白IgY抗體從而建立酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)診斷地中海貧血。轉(zhuǎn)鐵蛋白是血清中結(jié)合并轉(zhuǎn)運(yùn)鐵的β球蛋白，血清轉(zhuǎn)鐵蛋白的含量變化可反映多種疾病，以雞卵黃抗體IgY 代替哺乳動(dòng)物抗體IgG 用于表面等離子體共振技術(shù)對(duì)人血清中轉(zhuǎn)鐵蛋白的實(shí)時(shí)檢測(cè)[26]。

3 卵黃抗體在人及動(dòng)物疾病防治中的應(yīng)用

3.1在病毒性疾病治療預(yù)防方面的應(yīng)用 輪狀病毒(RV)引起的人畜腹瀉在全世界范圍內(nèi)是一個(gè)重要的公共衛(wèi)生問(wèn)題。且特異性IgY口服給藥已報(bào)道有利于抗輪狀病毒感染，實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示口服抗RV IgY降低小鼠RV發(fā)病率，表明其在防治輪狀病毒相關(guān)疾病存在潛在意義[27]。HM Thu等[28]研究口服抗輪狀病毒IgY是治療新生兒輪狀病毒腹瀉一種安全有效的方法。甲型流感病毒感染人的呼吸系統(tǒng)，可引起急性和致命的肺部疾病，耐藥病毒株的出現(xiàn)凸顯替代治療方法的需要，研究顯示高滴度抗甲型H1N1流感病毒IgY抗體能特異性結(jié)合甲型H1N1流感病毒神經(jīng)氨酸酶和血凝素，采用的模型小鼠肺組織保持正常。此外，相比神經(jīng)氨酸酶抑制劑奧司他韋，該抗體還具有保護(hù)活性，因此IgY可以提供一個(gè)有效控制流感的替代方法[29]。IgY不僅應(yīng)用于艾滋病病毒(HIV)的診斷，在治療上也有一定的應(yīng)用，Sri Agus Sudjarwo等[30]通過(guò)模型小鼠研究口服抗HIV IgY對(duì)小鼠急性毒性的影響，總體結(jié)果表明口服抗HIV IgY對(duì)小鼠不會(huì)產(chǎn)生任何明顯的毒性作用，因此，抗HIV抗體可用于對(duì)艾滋病患者的輔助免疫治療。諾如病毒(NoVs)是影響全球數(shù)百萬(wàn)患者患流行性急性胃腸炎的主要原因，目前，還沒(méi)有針對(duì)此病毒有效的疫苗或抗病毒藥物，Ying-Chun Dai等[31]研究中表示特異性抗NoVs IgY可用于可諾如病毒的診斷和治療。

3.2在寄生蟲(chóng)、細(xì)菌性疾病治療預(yù)防方面的應(yīng)用 隱孢子蟲(chóng)可引起免疫功能低下的人和新生動(dòng)物腹瀉，P23是一種屬于23蛋白家族的糖蛋白并表達(dá)于寄生蟲(chóng)不同的生活階段，Zahra Omidian等[32]將小隱孢子蟲(chóng)重組P23應(yīng)用于本研究中，制備的抗重組P23特異性IgY對(duì)隱孢子蟲(chóng)病有抑制作用，可以作為預(yù)防動(dòng)物和免疫功能低下的人感染隱孢子蟲(chóng)的被動(dòng)疫苗。幽門(mén)螺旋桿菌(Hp)感染是胃十二指腸疾病包括急性胃、十二指腸潰瘍、慢性胃炎、慢性萎縮性胃炎的主要病原菌，Baoning Wang等[33]研究表明抗HP IgY對(duì)Hp生長(zhǎng)、HP尿素酶活性具有抑制作用，口服抗HP IgY治療感染幽門(mén)螺桿菌模型小鼠，治愈率可達(dá)到83.3%，該抗體有望成為治療Hp感染有針對(duì)性的新藥物和治療方法。Yun-Hui Yang等[34]組合IgY和蘭索拉唑或者傳統(tǒng)藥物聯(lián)合給藥治療HP，其顯示了一定的優(yōu)越性，此外IgY 克服了抗生素的耐藥性，IgY可能是代替抗生素治療HP引起的胃潰瘍的新選擇。牙齦卟啉單胞菌(GP)是引起牙周炎重要的原因之一，通過(guò)抑制GP而降低其致病性。Kyosuke Yokoyama等[35]研究抗牙齦卟啉單胞菌卵黃抗體(IgY-GP)、齦下刮治術(shù)、根面平整術(shù)(SRP)治療方法與齦下刮治術(shù)、根面平整術(shù)(SRP)治療方法的比較，證明IgY-GP對(duì)牙周炎患者菌群里的GP生長(zhǎng)有抑制作用，臨床上使用含IgY-GP軟膏治療牙周炎進(jìn)一步證明此結(jié)論，IgY-GP可作為一種有效的免疫治療牙周炎的藥物。IgY在艱難梭菌相關(guān)性腹瀉的診斷和治療也有應(yīng)用。IgY口服已經(jīng)證明是成功的用于各種消化道感染的治療，如魯氏耶爾森菌、產(chǎn)腸毒素大腸桿菌、沙門(mén)氏菌、金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、遲鈍愛(ài)德華菌等[36]。

3.3在腫瘤治療預(yù)防方面的應(yīng)用 特異性IgY在腫瘤患者的應(yīng)用還處于初步研究階段，但為腫瘤的治療和預(yù)防提供了一種新的思維。早期李慶昌等[37]從人胃低分化粘液腺癌細(xì)胞MGC-803中分離出一種癌蛋白P110，并用其免疫蛋雞，制備的抗體lgY再與蓖麻毒蛋白的A鏈偶聯(lián)成lgY-RicioA免疫毒(生物導(dǎo)彈)，結(jié)果表明生物導(dǎo)彈lgY-RicinA治療上消化道腫瘤有一定的作用。而且劉連瑞等研究顯示IgY-ricinA能夠選擇性的殺傷MGC-803腫瘤細(xì)胞且IgY只具有特異識(shí)別細(xì)胞、而無(wú)誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的作用，應(yīng)用于消化系統(tǒng)腫瘤的靶向治療有一定的潛能。腦膠質(zhì)瘤是最常見(jiàn)并且多發(fā)的中樞神經(jīng)系統(tǒng)惡性腫瘤。膠質(zhì)瘤 IgY 抗體能特異、選擇性的識(shí)別腦膠質(zhì)瘤組織，因此它可以作為一種小型而高效的導(dǎo)向載體，把毒素有定向地運(yùn)輸?shù)侥[瘤細(xì)胞上，當(dāng)載體識(shí)別腫瘤細(xì)胞后，立即與腫瘤細(xì)胞結(jié)合而釋放毒素，從而達(dá)到殺死腫瘤細(xì)胞而不影響其它正常細(xì)胞的目的。通過(guò)對(duì)人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞系 U251 IgY 抗體的基本特性分析、鑒定等研究，為腦腫瘤的診治提供新的思路[38]。

3.4在其他方面的應(yīng)用 乳糜瀉(CD)是一種由麩質(zhì)引起的小腸自身免疫性疾病，口服卵黃抗角蛋白抗體(AGY)是一種新中和麩質(zhì)的治療CD的方法[39]。腫瘤壞死因子1(TNFR1)能調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡，制備的抗TNFR1 IgY純化后具有較高的特異性，可對(duì)某些生物靶標(biāo)起到快速、直接的保護(hù)作用[40]。IgY還可應(yīng)用于治療肥胖癥，抗脂肪酶IgY可抑制胰脂肪酶活性增加甘油三酯排泄量，達(dá)到抗肥胖的作用[41]。此外，IgY在抗蛇毒[42]和抗蝎子毒素[43]、抗生育制品方面都有應(yīng)用。

IgY研究雖然早，應(yīng)用廣泛，全球?qū)＠暾?qǐng)多，但仍存在很多亟待解決的問(wèn)題，目前卵黃抗體在制備、提純和使用過(guò)程中沒(méi)有統(tǒng)一的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，在實(shí)際應(yīng)用過(guò)程中對(duì)卵黃抗體的使用也常停留在利用粗制品對(duì)相應(yīng)病原進(jìn)行防治，且IgY主要成熟產(chǎn)品是針對(duì)動(dòng)物疾病的，針對(duì)人類(lèi)疾病基本處于制劑研發(fā)、專(zhuān)利申報(bào)，而成熟產(chǎn)品不多。近年來(lái)IgY研發(fā)在腫瘤方面也有涉及，但在臨床應(yīng)用上還存在一系列問(wèn)題，如有效性、安全性以及機(jī)理研究都比較薄弱。這些均嚴(yán)重阻礙卵黃抗體的開(kāi)發(fā)和利用，因此在如何提高抗體的防治效果、降低生產(chǎn)成本以及代替普通抗體發(fā)揮作用的問(wèn)題有必要進(jìn)一步探討和研究。由于IgY 具有性質(zhì)穩(wěn)定、低交叉反應(yīng)性、無(wú)耐藥性、特異性高、可口服等優(yōu)點(diǎn)，隨著對(duì)IgY機(jī)理深入研究和相關(guān)技術(shù)的發(fā)展，在診斷試劑開(kāi)發(fā)、人及動(dòng)物疾病防治、腫瘤靶向治療以及與食品安全的針對(duì)動(dòng)物疾病的產(chǎn)品研發(fā)應(yīng)用等方面有望取得新進(jìn)展。

[1] Mine Y, Kovacsnolan J. Chicken egg yolk antibodies as therapeutics in enteric infectious disease: a review[J]. J Med Food, 2002, 5(3): 159-169. DOI: 10.1089/10966200260398198

[2] Zhen YH. Preparation and efficacy evaluation of egg yolk immunoglobulin(IgY) against dairy cow mastitis[D]. Dalian: Dalian University of Technology, 2008. (in Chinese)

甄宇紅. 抗奶牛乳腺炎特異性卵黃抗體的制備及活性研究[D]. 大連：大連理工大學(xué), 2008.

[3] Zhang L, Liu ZZ, Ning CS, et al. Application progress of IgY in immunoassay and treatment[J]. Progr Vet Med, 2017, 38(1): 78-81. DOI: 10.16437/j.cnki.1007-5038.2017.01.016 (in Chinese)

張璐, 劉珍珍, 寧長(zhǎng)申,等. IgY在免疫檢測(cè)及治療中的應(yīng)用進(jìn)展[J]. 動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展, 2017, 38(1): 78-81.

[4] Zhang JJ, Li MH. Research progress of IgY and its application in immunoassay[J]. J Anhui Agr Sci, 2014, 42(29): 10147-10149. DOI: 10.13989/j.cnki.0517-6611.2014.29.041 (in Chinese)

張靜靜, 李明輝. IgY抗體在免疫檢測(cè)中的應(yīng)用進(jìn)展[J]. 安徽農(nóng)業(yè)科學(xué), 2014,42(29):10147-10149.

[5] Zhou Y, Shen DW. The characteristics and purification of Chicken Egg Yolk antibodies (IgY) apply to parasitology[J]. Chin J Zoonoses, 2011, 27(5): 441-443. (in Chinese)

周彥, 沈定文. 雞卵黃抗體(IgY)的性質(zhì)、提純及應(yīng)用于寄生蟲(chóng)學(xué)的研究[J]. 中國(guó)人獸共患病學(xué)報(bào), 2011, 27(5):441-443.

[6] Pradip M, Hare J. Specific avian egg antibodies for disease prevention and improvement of growth performance: US, US7713527[P]. 2010.

[7] Wolfgang B, Hartmut K. New immunoconjugate comprising egg yolk immunoglobulin Y, useful for treating e.g. inflammation or infection, is derived from specific pathogen-free hens: DE10123505[P]. 2002.

[8] Jang SH, Choi SY, Lee YP, et al. Composition for repression of hyperlipidemia and obesity through suppression of intestinal cholesterol absorption: US, US 8609098 B2[P]. 2013.

[9] Kodama Y, Kimura N. Pharmaceutical composition comprising anti-H.pyloriurease IgY antibodies and an inhibitor of gastric acid secretion: EP, EP1172116[P]. 2009.

[10] Zhou WS, Zhou XH, Shen XL, et al. Preparation of anti-HIV-1 P 15(gag) IgY and detection of its biological activity[J]. Biotechnology, 2012, 22(4): 79-83. DOI: 10.3969/j.issml004-3lIX.2012.04.99 (in Chinese)

趙文思, 鄒曉華, 沈雪蓮,等. 抗HIV-1 p15(gag)IgY抗體的制備及活性檢測(cè)[J]. 生物技術(shù), 2012, 22(4):79-83.

[11] Palaniyappan A, Das D, Kammila S, et al. Diagnostics of severe acute respiratory syndrome-associated coronavirus (SARS-CoV) nucleocapsid antigen using chicken immunoglobulin Y[J]. Poult Sci, 2012, 91(3): 636-642. DOI: 10.3382/ps.2011-01916

[12] Zhang XY, Andreas K, Diana P, et al. Application of high-titred IgY antibodies in orthopox virus diagnostics[J]. J Chin Pharmaceutical Sci, 2008, 17(3): 183-191. (in Chinese)

張小鶯, AndreasKurth, DianaPauly,等. 高滴度特異性卵黃抗體在天花病毒檢測(cè)中的研究(英文)[J]. 中國(guó)藥學(xué), 2008, 17(3):183-191.

[13] Hadinedoushan H, Salmanroghani H, Amirbaigy MK, et al. Hepatitis C virus genotypes and association with viral load in yazd, central province of Iran[J]. Hepatitis Monthly, 2014, 14(3): e11705-e11709.

[14] Zhou SH. Development and clinical application of capture ELISA for detecting antibody against porcine circovirus type2[D]. Wuhan: Huazhong Agricultural University, 2013. (in Chinese)

周松海. 豬圓環(huán)病毒2型捕獲ELISA抗體檢測(cè)方法的建立與臨床應(yīng)用[D]. 武漢：華中農(nóng)業(yè)大學(xué), 2013.

[15] Huang SM. Development of swine jev ELISA antibody detection kit and isolation and identification of jev from swine bacteria comes from pig related zoonosis[D]. Wuhan: HuaZhong Agricultural University, 2013. (in Chinese)

黃少梅. 豬乙型腦炎病毒ELISA抗體檢測(cè)試劑盒的研制及豬源乙型腦炎病毒的分離鑒定[D]. 武漢：華中農(nóng)業(yè)大學(xué), 2013.

[16] Parma YR, Chacana PA, Lucchesi PMA, et al. Detection ofShigatoxin-producingEscherichiacoliby sandwich enzyme-linked immunosorbent assay using chicken egg yolk IgY antibodies[J]. Front Cellular Infect Microbiol, 2012, 2(84): 1-8. DOI: 10.3389/fcimb.2012.00084

[17] Vasconcellos FA, Coutinho ML, éverton F, et al. Testing different antigen capture ELISA formats for detection ofLeptospira, spp. in human blood serum[J]. Transact Royal Soc Trop Med Hyg, 2009, 104(4): 259-264. DOI: 10.1016/j.trstmh.2009.10.005

[18] Cakir-Koc R. Production of anti-SAG1 IgY antibody againstToxoplasmagondii, parasites and evaluation of antibody activity by ELISA method[J]. Parasitol Res, 2016, 115(8): 1-6. DOI: 10.1007/s00436-016-5047-9

[19] Yang J, Zhang MJ, Qiang L, et al. Preparation and activity detection of chicken egg yolk IgY antibody against human papillomavirus 16 type L1 main capsid protein[J]. J Southern Med Univ, 2008, 28(28): 324-327. (in Chinese)

楊軍, 張明娟, 強(qiáng)磊,等. 抗HPV16L1IgY抗體的制備及活性檢測(cè)[J]. 南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào), 2008, 28(3):324-327.

[20] Grzywa R,upicka-Sowik A, Walczak M, et al. Highly sensitive detection of cancer antigen 15-3 using novel avian IgY antibodies[J]. ALTEX, 2014, 31(1): 43-52. DOI: 10.14573/altex.1309181

[21] Xiao Y, Gao X, Gannot G, et al. Quantitation of HER2 and telomerase biomarkers in solid tumors with IgY antibodies and nanocrystal detection[J]. Intl J Cancer, 2008, 122(10): 2178-2186. DOI: 10.1002/ijc.23320

[22] Xiao Y, Gao X, Taratula O, et al. Anti-HER2 IgY antibody-functionalized single-walled carbon nanotubes for detection and selective destruction of breast cancer cells[J]. BMC Cancer, 2009, 9(1): 1-11. DOI: 10.1186/1471-2407-9-351

[24] Kovacsnolan J, Mine Y, Immerseel FV, et al. Using egg IgY antibodies for health, diagnostic and other industrial applications[J]. Woodhead Publishing, 2011, 2(1): 346-373. DOI: 10.1533/9780857093929.3.346

[25] Jintaridth P, Srisomsap C, Vichittumaros K, et al. Chicken egg yolk antibodies specific for the γ chain of human hemoglobin for diagnosis of thalassemia[J]. Intl J Hematol, 2006, 83(5): 408-414. DOI: 10.1532/IJH97.A20515

[26] Wang CY, Feng F, Bai YF, et al. Determination of transferring in human serum samples using chicken egg yolk antibodies(IgY) by surface plasmon resonance[J]. Chemical J Chin Universities, 2012, 33(6): 1177-1181. DOI: 10.3969/ j.issn.0251-0790.2012.06.011

[27] Buragohain M, Dhale GS, Ghalsasi GR, et al. Evaluation of hyperimmune hen egg yolk derived anti-human rotavirus antibodies (anti-HRVIgY) against rotavirus infection[J]. World J Vaccines, 2012, 02(2): 73-84. DOI: 10.4236/wjv.2012.22010

[28] Thu HM, Myat TW, Win MM, et al. Chicken egg yolk antibodies (IgY) for prophylaxis and treatment of rotavirus diarrhea in human and animal neonates: a concise review[J]. Korean J Food Sci Anim Resources, 2017, 37(1): 1-9. DOI:10.5851/kosfa.2017.37.1.1

[29] Yang YE, Wen J, Zhao S, et al. Prophylaxis and therapy of pandemic H1N1 virus infection using egg yolk antibody[J]. J Virological Methods, 2014, 206(7): 19-26. DOI: 10.1016/j.jviro met.2014.05.016

[30] Sudjarwo S, Indriyani W, Nasronudin N, et al. Acute oral toxicity of immunoglobulin Y (IgY) anti HIV in mice[J]. J Appl Pharmaceutical Sci, 2015, 5(2): 123-126. DOI: 10.7324/JAPS.2015.50218

[31] Dai YC, Wang YY, Zhang XF, et al. Evaluation of anti-norovirus IgY from egg yolk of chickens immunized with norovirus P particles[J]. J Virological Methods, 2012, 186(1/2): 126-131. DOI: 10.1016/j.jviromet. 2012.07.002

[32] Omidian Z, Ebrahimzadeh E, Shahbazi P, et al. Application of recombinantCryptosporidiumparvumP23 for isolation and prevention[J]. Parasitol Res, 2014, 113(1): 229-237. DOI: 10.1007/s00436-013-3648-0

[33] Wang B, Yang J, Cao S, et al. Preparation of specific anti-Helicobacterpyloriyolk antibodies and their antibacterial effects[J]. Intl J Clin Exper Pathol, 2014, 7(10): 6430-6437.

[34] Yang YH, Park D, Yang G, et al. Anti-Helicobacterpylorieffects of IgY from egg york of immunized hens[J]. Lab Anim Res, 2012, 28(1): 55-60. DOI: 10.5625/lar.2012.28.1.55

[35] Yokoyama K, Sugano N, Shimada T, et al. Effects of egg yolk antibody against Porphyromonas gingivalis gingipains in periodontitis patients[J]. J Oral Sci, 2007, 49(3): 201-206. DOI: 10.2334/josnusd.49.201

[36] Mine Y, Kovacsnolan J. Chicken egg yolk antibodies as therapeutics in enteric infectious disease: a review[J]. J Med Food, 2002, 5(3): 159-169. DOI: 10.1089/10966200260398198

[37] Li QC, Liu CX, Yao XZ, et al. The treatment of patients with upper digestive tract malignant tumors of middle and late stage with Biological missile IgY-RiCin[J]. World Chin J Digestol, 2000, 8(8): 1-2. DOI: 10.3969/j.issn.1009-3079.2000.z1.001 (in Chinese)

李慶昌, 劉朝興, 姚秀珍,等. 生物導(dǎo)彈IgY-RiCin治療上消化道中晚期惡性腫瘤[J]. 世界華人消化雜志, 2000, 8(8):1-2.

[38] Tian X. Preparation and characterization of IgY against human glioma[D]. Dalian: Dalian Medical University, 2007. (in Chinese)

田笑. 抗人腦膠質(zhì)瘤IgY抗體的制備及其特性分析[D]. 大連：大連醫(yī)科大學(xué), 2007.

[39] Sample DA, Sunwoo HH, Huynh HQ, et al. AGY, a novel egg yolk-derived anti-gliadin antibody, is safe for patients with celiac disease[J]. Digest Dis Sci, 2016, 62(5): 1277-1285. DOI 10.1007/s10620-016-4426-5

[40] Hashemi M, Amirijavid S, Entezari M, et al. Generation and characterization of chicken egg yolk antibodies (IgY) against TNFR1[J]. Bratisl Med J, 2015, 116(5): 316-320. DOI: 10.4149/BLL_2015_059

[41] Hirose M, Ando T, Shofiqur R, et al. Anti-obesity activity of hen egg anti-lipase immunoglobulin yolk, a novel pancreatic lipase inhibitor[J]. Nutrit Metabol, 2013, 10(1): 70-75. DOI: 10.1186/1743-7075-10-70

[42] Liu J, He Q, Wang W, et al. Preparation and neutralization efficacy of IgY antibodies raised againstDeinagkistrodonacutusvenom[J]. J Venomous Anim Toxins Including Trop Dis, 2017, 23(1): 22-30. DOI 10.1186/s40409-017-0112-0

[43] Alvarez A, Montero Y, Parrilla P, et al. Poultry IgY alternatives to antivenom production[J]. Toxinology, 2015, 4(7): 161-178. DOI: 10.1007/978-94-007-6404-0_1