師延娟

（青海省海東市中心血站，青海 海東 810600）

酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）是常用血液檢測(cè)方法，通過(guò)酶復(fù)合物與抗體相結(jié)合而顯色，具有良好的保持免疫活性的功能，且靈敏性較高，價(jià)格低廉等優(yōu)勢(shì)在臨床中應(yīng)用廣泛。核酸檢測(cè)法（NAT）可有效縮短檢測(cè)窗口期，針對(duì)隱匿性乙肝病毒具有良好的檢測(cè)效果，還可降低輸血時(shí)病原體的傳播風(fēng)險(xiǎn)[1]。為明確兩種檢測(cè)方式對(duì)乙肝病毒診斷效果，特開展相應(yīng)研究，現(xiàn)匯報(bào)如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

于2018年1月至2018年5月隨機(jī)抽取1128份無(wú)償獻(xiàn)血者的血液標(biāo)本，ALT化學(xué)檢測(cè)結(jié)果顯示初篩合格。

1.2 儀器設(shè)備與方法

檢測(cè)方法：將每份標(biāo)本平均分為兩份，一份裝入抗凝真空管中行ELISA檢測(cè)；一份裝入分離膠抗凝真空管中行NAT檢測(cè)。每個(gè)試管均貼唯一條形碼。使用離心機(jī)對(duì)標(biāo)本進(jìn)行離心處理，后將其放置于溫度為4℃的環(huán)境中靜置待檢，所有標(biāo)本檢測(cè)均需于48 h內(nèi)完成。

試劑與儀器：ELISA檢測(cè)設(shè)備選擇瑞士哈密頓公司生產(chǎn)的全自動(dòng)酶聯(lián)免疫分析儀；NAT檢測(cè)設(shè)備選擇美國(guó)羅氏公司生產(chǎn)的實(shí)時(shí)熒光定量檢測(cè)系統(tǒng)。乙肝病毒檢測(cè)試劑選擇廈門英科新創(chuàng)公司生產(chǎn)的常規(guī)血清篩查試劑盒及配套試劑。

1.3 質(zhì)量控制方法

標(biāo)本采集后直至開展NAT檢測(cè)過(guò)程中，按照生化實(shí)驗(yàn)室SOP標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行相關(guān)操作，根據(jù)試劑盒內(nèi)標(biāo)、實(shí)驗(yàn)室內(nèi)質(zhì)控品、檢測(cè)結(jié)果陰陽(yáng)性質(zhì)控品全程對(duì)NAT操作質(zhì)量進(jìn)行控制。同時(shí)本次研究所在實(shí)驗(yàn)室為定期參加國(guó)家衛(wèi)生部門臨床檢驗(yàn)中心開展的國(guó)家國(guó)際輸液感染防控質(zhì)量評(píng)價(jià)環(huán)節(jié)，結(jié)果顯示質(zhì)量測(cè)評(píng)合格。同時(shí)參與國(guó)家血站核酸擴(kuò)增檢測(cè)相關(guān)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量評(píng)價(jià)環(huán)節(jié)，結(jié)果顯示質(zhì)量測(cè)評(píng)合格。

1.4 觀察指標(biāo)

①記錄兩種檢測(cè)方法對(duì)血液標(biāo)本中乙肝病毒的陽(yáng)性檢出率，以1g HBV-DNA水平超過(guò)2.7可標(biāo)記為陽(yáng)性[2]，乙肝病毒HBV標(biāo)志物主要包含乙型肝炎表面抗原及抗體（HBsAg、HBsAb）、乙肝e抗原及抗體（HBeAg、HBeAb）以及乙肝核心抗體（HBcAb）。②同時(shí)記錄并比較兩種檢測(cè)方法對(duì)乙肝病毒檢測(cè)的窗口期。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

本次實(shí)驗(yàn)過(guò)程中擇取SPSS 17.0版本的統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，計(jì)量資料以“±s”表示，采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以百分?jǐn)?shù)（%）表示，采用x2檢驗(yàn)；以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 兩種檢測(cè)方法陽(yáng)性率比較

ELISA法陽(yáng)性標(biāo)本10份，陽(yáng)性率（0.89%）；NAT法陽(yáng)性標(biāo)本16份，陽(yáng)性率（1.42%），組間數(shù)據(jù)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（x2=1.4008，P＞0.05）。

其中，ELISA法檢測(cè)呈陽(yáng)性，而NAT檢測(cè)呈陰性標(biāo)本3份，ELISA法檢測(cè)呈陰性，而NAT檢測(cè)呈陽(yáng)性標(biāo)本5份。

2.2 兩種檢測(cè)方法敏感性、特異性比較

ELISA法敏感性96.81%（1092/1128），NAT法敏感性98.49%（1111/1128），組間數(shù)據(jù)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（x2=6.9752，P＞0.05）；ELISA法特異性96.54%（1089/1128），NAT法敏感性98.22%（1108/1128），組間數(shù)據(jù)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（x2=6.2830，P＞0.05）。

2.3 兩種檢測(cè)方法窗口期及漏診率比較

ELISA法窗口期（35.12±1.08）d，NAT法窗口期（20.35±1.04）d，組間數(shù)據(jù)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（T=330.8544，P＜0.05）。

ELISA法漏診率0.62%（7/1128），NAT法漏診率0.09%（1/1128），組間數(shù)據(jù)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（x2=4.5160，P＞0.05）。

3 討 論

乙肝病毒（HBV）可通過(guò)血液傳播，患者感染后可引發(fā)乙型肝炎疾病，屬于病毒性傳染疾病之一[3]。大年我國(guó)HBV流行度較高，受到多種因素的影響乙肝在我國(guó)發(fā)病率有著不斷上升的趨勢(shì)。HBV傳播預(yù)防的有效措施是加強(qiáng)獻(xiàn)血人群的血液篩查，其中ELISA是檢測(cè)HBV常見方法，主要以HBsAg為常規(guī)檢測(cè)指標(biāo)，操作簡(jiǎn)單、檢測(cè)快捷，價(jià)值檢測(cè)費(fèi)用較低等優(yōu)勢(shì)具有廣泛的應(yīng)用。但是HBV感染有一定的隱匿性和窗口期，因此其漏檢率較高。而NAT是血清學(xué)檢測(cè)的補(bǔ)充方法之一，屬于分子生物學(xué)診斷方法。NAT可對(duì)HBV-DNA含量進(jìn)行測(cè)定，以直觀對(duì)感染情況進(jìn)行反映，具有較高的靈敏度，在獻(xiàn)血人群血液篩查中的應(yīng)用較多[4]。

在本次研究中，隨機(jī)抽取1128份血液標(biāo)本進(jìn)行ELISA及NAT檢測(cè)，結(jié)果顯示二者HBV陽(yáng)性率無(wú)顯著差異，而NAT相比ELISA具有更高的檢測(cè)敏感性和特異性，窗口期更短，可見NAT的應(yīng)用價(jià)值更高。其中ELISA法檢測(cè)呈陽(yáng)性，而NAT檢測(cè)呈陰性標(biāo)本3份，造成這種情況的原因可能與患者在臨床治療過(guò)程中，使用藥物方案，導(dǎo)致其血液中有一定量的HBsAg殘留所致，因?yàn)镠BsAg中無(wú)病毒DNA，且其傳染性偏低，復(fù)制率不高，因此檢測(cè)在NAT中呈陰性[5]。另有ELISA法檢測(cè)呈陰性，而NAT檢測(cè)呈陽(yáng)性標(biāo)本5份，經(jīng)分析造成該種情況出現(xiàn)的原因，可能與HBV早期感染時(shí)只有較少的病毒數(shù)量，ELISA法檢測(cè)指標(biāo)為HBsAg，對(duì)其無(wú)法檢測(cè)，而在血清中存在一定的DAN，因此導(dǎo)致NAT檢測(cè)結(jié)果呈陽(yáng)性[6]。有研究結(jié)果顯示，NAT檢測(cè)可有效縮短窗口期，在本次研究中，該結(jié)論也被證明。

綜上，NAT及ELISA針對(duì)HBV陽(yáng)性具有良好一致性，但是相對(duì)來(lái)講NAT可靠性更高，針對(duì)HBV傳播具有良好的控制效果，因此可在各地區(qū)血液篩查中開展NAT檢測(cè)，有效控制乙肝發(fā)病率。