韓 華 邰 亮 李紅梅 楊抗震

1（寶應(yīng)縣產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)所，江蘇寶應(yīng)225800）2（寶應(yīng)縣有機(jī)食品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)中心，江蘇寶應(yīng)225800）

3（國(guó)家有機(jī)食品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)中心（江蘇），江蘇寶應(yīng)225800）

果汁是一種營(yíng)養(yǎng)豐富、有利于人體健康的水果制品，但是在水果生長(zhǎng)過程中，為了保證其產(chǎn)量和品質(zhì)，農(nóng)藥被廣泛使用，因而果汁也不可避免地有農(nóng)藥殘留，果汁中農(nóng)藥殘留的安全問題不容忽視。毒死蜱是世界上應(yīng)用最廣泛的有機(jī)磷殺蟲劑之一，具有高效、低毒等特性，對(duì)害蟲具有觸殺、胃毒和熏蒸作用，作為農(nóng)用殺蟲劑被廣泛應(yīng)用于果樹病蟲害防治中，但是由于果農(nóng)大量使用或使用方法不當(dāng)，造成水果及其制品中的殘留問題也日漸突出。

為了有效控制毒死蜱農(nóng)藥殘留安全問題，進(jìn)一步提高果汁的質(zhì)量安全，開展果汁中毒死蜱殘留的檢測(cè)顯得十分重要，而國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中關(guān)于農(nóng)藥殘留的分析檢測(cè)方法尚未細(xì)化到果汁，因此，本試驗(yàn)通過對(duì)試驗(yàn)條件的選擇和優(yōu)化，建立了一種可快速準(zhǔn)確測(cè)定果汁中毒死蜱殘留量的GC-FPD分析方法，并將建立的方法應(yīng)用于能力驗(yàn)證，取得了滿意的結(jié)果。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 試樣

果汁，能力驗(yàn)證樣品，由中國(guó)檢驗(yàn)檢疫科學(xué)研究院測(cè)試評(píng)價(jià)中心（CNAS認(rèn)可的能力驗(yàn)證提供者）提供。

1.1.2 儀器

7890A氣相色譜儀，配火焰光度檢測(cè)器（FPD）、化學(xué)工作站，美國(guó)Agilent公司；RV10 digtial旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，德國(guó)IKA儀器公司；KQ-500DE超聲波清洗器，昆山市超聲儀器有限公司；MS digtal旋渦混合器，德國(guó)IKA儀器公司；實(shí)驗(yàn)室常用玻璃器皿等。

1.1.3 試劑

乙腈，色譜純，上海安譜實(shí)驗(yàn)科技股份有限公司；氯化鈉，分析純，使用前于140℃烘烤4 h；丙酮，分析純，重蒸，永華化學(xué)科技（江蘇）有限公司；毒死蜱標(biāo)準(zhǔn)溶液，質(zhì)量濃度為100 mg/L，o2si smart solutions提供；實(shí)驗(yàn)室用水為Milli-Q超純水。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 樣品處理

稱取10.0 g左右（精確至0.000 1 g）搖勻后的果汁樣品，置于100 mL比色管中，加入40 mL乙腈，搖勻后放入超聲波清洗器中超聲提取20 min，濾紙過濾，在濾液中加入7 g氯化鈉，用旋渦混合器劇烈震蕩1 min后，室溫下靜置30 min，使乙腈相和水相分層，吸取乙腈相10 mL，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮至近干，丙酮定容到2.0 mL，經(jīng)孔徑0.25 μm濾膜過濾后待測(cè)。

1.2.2 氣相色譜分析條件

HP-5毛細(xì)管氣相色譜柱，30 m×0.32 mm×0.25 μm（膜厚）；進(jìn)樣口溫度200℃；檢測(cè)器溫度230℃；柱溫，采用程序升溫，初始溫度80℃（保持2 min），以25℃/min的升溫速率升溫至230℃（保持10 min）。

載氣為高純氮，流速1.0 mL/min；燃?xì)鉃闅錃?，流?5 mL/min；助燃?xì)鉃榭諝猓魉?00 mL/min。

進(jìn)樣方式為不分流進(jìn)樣，進(jìn)樣體積1.0 μL，以保留時(shí)間定性，峰面積定量。

1.2.3 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制

將100 mg/L毒死蜱標(biāo)準(zhǔn)溶液用丙酮稀釋成10 μg/mL的毒死蜱工作標(biāo)準(zhǔn)溶液，貯存于冰箱中，試驗(yàn)時(shí)根據(jù)實(shí)際需要稀釋成相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)梯度溶液。

2 結(jié)果與討論

2.1 樣品前處理

提取溶劑方面，通過參考國(guó)家農(nóng)業(yè)部標(biāo)準(zhǔn)NY/T 761—2008和徐陸妹、王丹等的文獻(xiàn)，選擇了乙腈作為提取溶劑。乙腈極性較強(qiáng)，可與水互溶，試驗(yàn)中，果汁樣品經(jīng)乙腈溶解，超聲提取一定時(shí)間后加入適量的氯化鈉，通過鹽析作用將水脫去，這樣既可以解決因果汁含水量較高造成提取難的問題，又能有效地減少雜質(zhì)對(duì)檢測(cè)的干擾，試驗(yàn)結(jié)果表明，乙腈的提取效果較好，同時(shí)獲得了較高的回收率。

提取方法方面，試驗(yàn)中使用超聲法代替勻漿法對(duì)樣品進(jìn)行提取，不僅操作簡(jiǎn)單，提取效率高，還可以避免交叉污染。

2.2 色譜條件

色譜柱的選擇，由于毒死蜱極性較弱，根據(jù)氣相色譜分析中色譜柱的“極性相似性”選擇原理，本試驗(yàn)選用了弱極性的HP-5色譜柱；進(jìn)樣口溫度采用了毒死蜱的沸點(diǎn)溫度，程序升溫選擇了低初始柱溫80℃開始，同時(shí)對(duì)載氣流速、檢測(cè)器溫度、柱程序升溫條件進(jìn)行多次試驗(yàn)篩選后，最終確定了1.2.2色譜分析條件。毒死蜱標(biāo)準(zhǔn)溶液（200 ng/mL）色譜圖見圖1，含毒死蜱農(nóng)殘的果汁色譜圖見圖2。由圖1、圖2可知，在該條件下，毒死蜱的響應(yīng)值較高，峰形較為對(duì)稱，基線平穩(wěn)，并且樣品中雜質(zhì)峰較少。

圖1 毒死蜱標(biāo)準(zhǔn)溶液色譜圖（200 ng/mL）

圖2 含毒死蜱農(nóng)藥殘留的果汁的色譜圖

2.3 方法的線性范圍和檢出限

將10 μg/mL毒死蜱標(biāo)準(zhǔn)工作溶液用丙酮逐級(jí)稀釋成 25 ng/mL、50 ng/mL、100 ng/mL、200 ng/mL、400 ng/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液，按照1.2.2色譜分析條件進(jìn)行測(cè)定，以峰面積為縱坐標(biāo)，質(zhì)量濃度（ng/mL）為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，見圖3。試驗(yàn)證明，毒死蜱在25 ng/mL～400 ng/mL之間線性關(guān)系良好，線性方程為y=2.537 44 x+2.213 59，相關(guān)系數(shù)為0.999 91，以信噪比等于3為標(biāo)準(zhǔn)，測(cè)得毒死蜱的檢出限為0.012 mg/kg。

圖3 毒死蜱的標(biāo)準(zhǔn)曲線

2.4 方法精密度

在空白果汁樣品中以100 ng/mL的添加水平加入毒死蜱標(biāo)準(zhǔn)溶液，按照1.2.2色譜分析條件，重復(fù)測(cè)定6次，記錄各測(cè)定次數(shù)的測(cè)定值，分別計(jì)算測(cè)定值的平均值和相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差，測(cè)定結(jié)果如表1所示。由表1可知，測(cè)定結(jié)果的RSD為1.75%，說明精密度良好，準(zhǔn)確度較高。

表1 精密度試驗(yàn)結(jié)果（n=6）

2.5 加標(biāo)回收率

在空白果汁樣品中以50 ng/mL、100 ng/mL、200 ng/mL3個(gè)添加水平加入毒死蜱標(biāo)準(zhǔn)溶液，按照本方法規(guī)定的提取和檢測(cè)條件測(cè)定其回收率，每個(gè)水平平行測(cè)定6次，測(cè)定結(jié)果如表2所示。由表2可知，添加在果汁樣品中毒死蜱農(nóng)藥的回收率在91.3%～94.1%之間，RSD為2.66%～3.38%。

表2 回收率試驗(yàn)（n=6）

2.6 樣品適用性

采用本研究檢測(cè)方法對(duì)能力驗(yàn)證樣品（果汁1，果汁2）中毒死蜱殘留量進(jìn)行檢測(cè)，測(cè)定結(jié)果見表3。能力驗(yàn)證試驗(yàn)取得了滿意的結(jié)果（|Z|≤2），說明該方法有著較好的準(zhǔn)確性和實(shí)用性，適合果汁中毒死蜱農(nóng)藥殘留的檢測(cè)。

表3 果汁中毒死蜱殘留量的測(cè)定結(jié)果

3 結(jié)論

本試驗(yàn)建立了測(cè)定果汁中毒死蜱殘留量的GC-FPD方法。樣品經(jīng)乙腈超聲提取后，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮，選擇HP-5毛細(xì)管氣相色譜柱，用帶火焰光度檢測(cè)器的氣相色譜儀定量測(cè)定。通過試驗(yàn)確證，該方法線性范圍較寬，檢測(cè)靈敏度、準(zhǔn)確度及精密度較好，檢出限較低，符合農(nóng)藥殘留檢測(cè)方法的要求，能夠滿足實(shí)際應(yīng)用的需要。

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