韋云路，劉 義，王 瑤，孟祥飛，李平蘭*

（中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科學(xué)與營(yíng)養(yǎng)工程學(xué)院，北京食品營(yíng)養(yǎng)與人類健康高精尖創(chuàng)新中心，教育部-北京市共建功能乳品重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，北京 100083）

3 株益生菌體外降膽固醇能力及體內(nèi)降血脂效果評(píng)價(jià)

韋云路，劉 義，王 瑤，孟祥飛，李平蘭*

（中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科學(xué)與營(yíng)養(yǎng)工程學(xué)院，北京食品營(yíng)養(yǎng)與人類健康高精尖創(chuàng)新中心，教育部-北京市共建功能乳品重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，北京 100083）

為探討動(dòng)物雙歧桿菌LPL-RH、長(zhǎng)雙歧桿菌TTF及植物乳桿菌LPL-1作為降血脂益生菌的潛力，測(cè)定3 株益生菌的體外膽固醇脫除率和膽鹽水解酶活力，同時(shí)以益生菌灌胃高脂飲食大鼠6 周后測(cè)定大鼠血脂含量變化。研究結(jié)果表明：菌株LPL-RH、TTF、LPL-1的體外膽固醇脫除率分別為23.8%、24.5%、20.9%，無(wú)顯著差異（P＞0.05）；且3 株菌均有膽鹽水解酶活性。菌株LPL-RH、TTF、LPL-1干預(yù)分別使高脂大鼠血清膽固醇含量分別降低17.3%、11.4%、10.1%；血清甘油三酯含量降低19.1%、16.8%、11.5%；血清低密度脂蛋白膽固醇含量降低24.0%、20.0%、10.0%；血清高密度脂蛋白膽固醇含量升高10.3%、5.2%和1.7%。綜合而言，3 株益生菌在體內(nèi)對(duì)高脂飲食大鼠血脂有調(diào)節(jié)作用，均有開(kāi)發(fā)為降血脂益生菌的潛力，其中動(dòng)物雙歧桿菌LPL-RH的體內(nèi)降脂能力最為突出。

益生菌；降膽固醇；降血脂

近年來(lái)，動(dòng)脈粥樣硬化、冠心病、腦卒中等心腦血管疾病的發(fā)病人群數(shù)量不斷增加，已經(jīng)成為嚴(yán)重威脅人類健康的一種常見(jiàn)疾病。據(jù)不完全統(tǒng)計(jì)，每年全球約有1 750萬(wàn) 人死于心腦血管疾病，約占死亡總?cè)藬?shù)的33%[1]。動(dòng)脈粥樣硬化是導(dǎo)致心腦血管疾病的重要原因，而高脂血癥是導(dǎo)致動(dòng)脈粥樣硬化的重要危險(xiǎn)因素之一。高脂血癥是指血液中的一種或幾種脂質(zhì)水平異常。流行病學(xué)和臨床研究表明，血清膽固醇水平和心腦血管疾病的發(fā)生呈明顯正相關(guān)性，血清膽固醇水平每高出正常水平1 mmol，導(dǎo)致心血管疾病的風(fēng)險(xiǎn)便增加約35%[2]；同時(shí)，血清甘油三酯、低密度脂蛋白膽固醇（low density lipoprotein cholesterol，LDL-C）水平增高或高密度脂蛋白膽固醇（high density lipoprotein cholesterol，HDL-C）水平降低也會(huì)增加心血管疾病發(fā)生的風(fēng)險(xiǎn)[3]。目前，臨床上常采用藥物治療和飲食干預(yù)的方法控制和降低血脂水平。但是藥物治療費(fèi)用相對(duì)較高，且會(huì)存在不同程度的副作用[4]。飲食控制雖然能夠在一定程度上起到調(diào)節(jié)機(jī)體內(nèi)脂質(zhì)代謝的作用，但長(zhǎng)期往往控制效果欠佳。相比之下，食用降血脂功能性食品可能是長(zhǎng)期控制血脂更理想的方法。

益生菌通常被定義為當(dāng)機(jī)體從膳食中攝入一定量后，能夠?qū)λ拗鹘】诞a(chǎn)生有益影響的一類具有活性的微生物[5]。目前，益生菌主要包括乳桿菌、鏈球菌和雙歧桿菌等，這些益生菌不僅在人體腸道內(nèi)起著營(yíng)養(yǎng)、激活免疫及抗感染、調(diào)節(jié)腸道菌群平衡等作用[6-8]，而且還具有抗過(guò)敏[9]、抗腫瘤[10]、治療炎癥性腸病[11]和改善酒精性脂肪肝[12]等多種益生功效。值得關(guān)注的是，研究表明一些益生菌如植物乳桿菌、嗜酸乳桿菌、雙歧桿菌和鼠李糖乳桿菌等及含益生菌的發(fā)酵制品有降膽固醇和調(diào)節(jié)血脂作用[13-16]。適量攝入這些益生菌可有效調(diào)節(jié)體內(nèi)血脂水平，對(duì)預(yù)防心血管疾病的發(fā)生很有意義[17]。益生菌作為藥物輔助治療劑，還具有安全性高、副作用小等優(yōu)點(diǎn)，頗具市場(chǎng)開(kāi)發(fā)潛力。

鑒于目前降血脂益生菌的報(bào)道有限，開(kāi)發(fā)更多的降血脂益生菌并評(píng)價(jià)其體內(nèi)外活性，將為降血脂益生菌的開(kāi)發(fā)與應(yīng)用奠定重要基礎(chǔ)。本實(shí)驗(yàn)室經(jīng)過(guò)篩選，獲得了3 株有降血脂潛力的益生菌。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)測(cè)定3 株菌體外降膽固醇能力和膽鹽水解酶（bile salt hydrolase，BSH）活力，初步確定其降脂能力，進(jìn)一步研究3 株菌對(duì)高脂飲食大鼠血脂的調(diào)節(jié)作用，為其作為降血脂益生菌的應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 菌株、動(dòng)物與試劑

動(dòng)物雙歧桿菌（Bifidobacterium animalis）LPL-RH、長(zhǎng)雙歧桿菌（B. longum）TTF、植物乳桿菌（Lactobacillus plantarum）LPL-1，由本課題組凍干保存并提供。

SD大鼠，45 只，SPF級(jí)，雄性，5 周齡，購(gòu)于北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司（合格證號(hào)：SCXK（京）2016-0011），飼養(yǎng)于中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物平臺(tái)（合格證號(hào)：SYXK（京）2015-0028）。

鄰苯二甲醛、冰乙酸、濃硫酸、膽固醇、牛膽鹽、巰基乙酸鈉、氯化鈣、氯化鈉等 北京易秀博谷生物科技有限公司；膽固醇測(cè)定試劑盒、甘油三酯測(cè)定試劑盒、HDL-C測(cè)定試劑盒、LDL-C測(cè)定試劑盒 北京中生北控生物公司；基礎(chǔ)飼料、高脂飼料 北京華阜康生物有限公司。

1.2 儀器與設(shè)備

3K15高速臺(tái)式冷凍離心機(jī) 美國(guó)Sigma公司；AU480全自動(dòng)生化分析儀 美國(guó)貝克曼公司；UV-1800紫外分光光度計(jì) 上海美譜達(dá)儀器有限公司；恒溫培養(yǎng)箱 上海精宏實(shí)驗(yàn)公司。

1.3 方法

1.3.1 體外降膽固醇能力測(cè)定

改良MRS培養(yǎng)基配制：在MRS培養(yǎng)基中添加L-半胱氨酸鹽酸鹽，使終質(zhì)量濃度為0.04 g/100 mL。根據(jù)文獻(xiàn)[18]方法配制MRS高膽固醇培養(yǎng)基：在MRS培養(yǎng)基中添加膽鹽（終質(zhì)量濃度為3 mg/mL）和膽固醇（終質(zhì)量濃度為0.1 mg/mL）。將活化好的菌株，接種于MRS高膽固醇液體培養(yǎng)基，37 ℃厭氧培養(yǎng)16 h，菌液于9 000 r/min離心10 min，收集上清液，采用鄰苯二甲醛法測(cè)定膽固醇含量[19]，并根據(jù)公式（1）計(jì)算膽固醇脫除率。

式中：m1、m2分別為發(fā)酵前、后上清液中的膽固醇質(zhì)量/μg。

1.3.2 菌株BSH活力測(cè)定

菌株BSH活力根據(jù)文獻(xiàn)[20]的方法測(cè)定。BSH篩選培養(yǎng)基配制：在MRS瓊脂平板的基礎(chǔ)上添加牛膽鹽（終質(zhì)量濃度為2 g/L）、巰基乙酸鈉（終質(zhì)量濃度為2 g/L）以及CaCl2（終質(zhì)量濃度為0.37 g/L）。將滅菌的BSH篩選培養(yǎng)基傾入無(wú)菌的平板中，待培養(yǎng)基凝固后將無(wú)菌濾紙片均勻放在培養(yǎng)基上。吸取活化好的待測(cè)菌株菌液10 μL緩慢加在直徑約3～4 mm的濾紙片上，待菌液不再流動(dòng)后，于37 ℃厭氧條件下培養(yǎng)72 h，觀察培養(yǎng)后濾紙片周?chē)欠裼邪咨恋砦锂a(chǎn)生，若出現(xiàn)白色沉淀則可初步驗(yàn)證該菌含有BSH。

1.3.3 益生菌菌懸液的制備

取動(dòng)物雙歧桿菌LPL-RH、長(zhǎng)雙歧桿菌TTF和植物乳桿菌LPL-1凍干菌粉，用無(wú)菌生理鹽水重懸使菌體濃度約為109CFU/mL，每只大鼠灌胃1 mL重懸菌液。為保證灌胃益生菌活性，需每天灌胃前用生理鹽水制備灌胃菌液，現(xiàn)配現(xiàn)用。

1.3.4 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組及處理

實(shí)驗(yàn)用大鼠按照SPF級(jí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的要求在屏障環(huán)境中進(jìn)行飼喂和管理。飼養(yǎng)條件：動(dòng)物房溫度為（22±2）℃，相對(duì)濕度為（50±10）%，嚴(yán)格按照12 h光照/黑暗循環(huán)，大鼠自由采食和進(jìn)水。

大鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)1 周后，隨機(jī)分為5 組，每組9 只，飼喂不同飲食，分別為正常對(duì)照（ND）組：給予基礎(chǔ)飼料正常飲食；高脂（HFD）組：給予高脂飼料飲食；LPL-RH干預(yù)（HFD+RH）組：給予高脂飼料飲食+動(dòng)物雙歧桿菌LPL-RH；TTF干預(yù)（HFD+TTF）組：給予高脂飼料飲食+長(zhǎng)雙歧桿菌TTF；LPL-1干預(yù)（HFD+LPL-1）組：給予高脂飼料飲食+植物乳桿菌LPL-1（HFD+LPL-1）。干預(yù)組每天定時(shí)灌胃相應(yīng)的益生菌懸液，連續(xù)灌胃6 周。

1.3.5 體質(zhì)量增加量及攝食量的測(cè)定

實(shí)驗(yàn)開(kāi)始和結(jié)束時(shí)稱取各組大鼠體質(zhì)量，計(jì)算大鼠體質(zhì)量增加量；每2～3 d，記錄一次大鼠的攝食量，并按照公式（2）計(jì)算食物利用率。

1.3.6 大鼠血脂水平檢測(cè)

實(shí)驗(yàn)結(jié)束前，大鼠禁食不禁水12 h后，眼眶采血約1.5 mL，分離血清，-80 ℃保存，用于相關(guān)指標(biāo)檢測(cè)。參考膽固醇、甘油三酯、HDL-C、LDL-C測(cè)定試劑盒的說(shuō)明書(shū)測(cè)定血清中膽固醇、甘油三酯、HDL-C、LDL-C含量。按公式（3）計(jì)算動(dòng)脈硬化指數(shù)（atherogenic index，AI）。

式中：cTC為血清膽固醇濃度/（mmol/L）；cHDL-C為血清HDL-C濃度/（mmol/L）。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

數(shù)據(jù)結(jié)果以 ±s表示，采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件，對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析，以p＜0.05表示組間具有顯著差異。

2 結(jié)果與分析

2.1 益生菌的體外膽固醇脫除率

體外降膽固醇實(shí)驗(yàn)是初步判定菌株是否具有潛在降脂能力的重要標(biāo)準(zhǔn)。由圖1可知，在培養(yǎng)16 h后，動(dòng)物雙歧桿菌LPL-RH、長(zhǎng)雙歧桿菌TTF和植物乳桿菌LPL-1的體外膽固醇脫除率分別可達(dá)到（23.8±1.9）%、（24.5±1.9）%、（20.9±3.6）%，且統(tǒng)計(jì)學(xué)分析結(jié)果表明，菌株之間膽固醇脫除率無(wú)顯著性差異（P＞0.05）。

目前報(bào)道中，各菌株的體外膽固醇脫除率各異。劉麗莉等[21]報(bào)道了來(lái)源于發(fā)酵果蔬食品中的6 種乳酸菌的體外膽固醇脫除率，在18.5%～28%之間不等。林斌等[22]從自然發(fā)酵的酸乳中分離得到一株植物乳桿菌HLX37，在培養(yǎng)24 h后，其膽固醇脫除率可達(dá)（37.33±2.55）%。Dilmi-Bouras[23]報(bào)道的來(lái)源于酸奶的幾株嗜熱鏈球菌和保加利亞乳桿菌也具有降低培養(yǎng)基中總膽固醇的能力。相比之下，本研究所選取的3 株益生菌的體外降膽固醇能力處于一般水平。

圖1 菌株體外膽固醇脫除率Fig. 1 Cholesterol removal rates of the strains in vitro

2.2 益生菌的BSH活性

圖2 菌株BSH平板檢測(cè)結(jié)果Fig. 2 Determination of bile salt hydrolase activity

BSH能夠?qū)⒔Y(jié)合態(tài)的膽鹽水解為非結(jié)合態(tài)的膽鹽，而非結(jié)合態(tài)的膽鹽在水中的溶解性較低，在酸性條件下能夠與培養(yǎng)基中的Ca2+結(jié)合形成沉淀。因此，若菌株具有BSH活性，就能夠在BSH篩選培養(yǎng)基中觀察到沉淀[24]。從圖2中結(jié)果可以觀察到動(dòng)物雙歧桿菌LPL-RH、長(zhǎng)雙歧桿菌TTF和植物乳桿菌LPL-1周?chē)籍a(chǎn)生了白色沉淀，且菌落周?chē)梢钥吹矫黠@的顆粒狀沉淀，說(shuō)明所選取的這3 株益生菌都具有BSH活性。

有報(bào)道稱，益生菌尤其是乳桿菌屬和雙歧桿菌屬作為生物治療劑，可以通過(guò)產(chǎn)生BSH來(lái)直接影響宿主膽鹽代謝，從而調(diào)節(jié)血清膽固醇水平[25]。菌株所產(chǎn)生的BSH能夠解離腸道中的膽汁鹽，導(dǎo)致氨基酸殘基的釋放和解偶聯(lián)的膽汁酸的形成。而解偶聯(lián)的膽汁酸的溶解性較低，能夠共沉淀膽固醇并與膳食纖維結(jié)合，隨糞便排出體外，從而降低體內(nèi)膽固醇水平[26]。同時(shí)，能夠產(chǎn)生BSH的菌株具有存活和定植于腸道中的優(yōu)勢(shì)。因此，BSH活性也可以作為體外評(píng)價(jià)菌株降脂能力的一個(gè)重要指標(biāo)。本研究中，3 株益生菌都具有BSH活性，具有調(diào)節(jié)血脂水平的潛力。

2.3 益生菌對(duì)高脂飲食大鼠體質(zhì)量及攝食量的影響

表1 各組大鼠體質(zhì)量增加量、攝食量及食物利用率情況Table 1 Body weight gain, total food intake and eff i ciency of conversion of ingested food of rats in each group

由表1可知，與ND相比，HFD大鼠體質(zhì)量顯著增加（p＜0.05）；與HFD組相比，HFD+RH組、HFD+TTF組大鼠的最終體質(zhì)量都明顯降低（p＜0.05），且與ND組（P＞0.05）相當(dāng)。各組的攝食量間沒(méi)有顯著性差異（P＞0.05），說(shuō)明益生菌干預(yù)不會(huì)影響大鼠的攝食量；與ND組相比，HFD組的食物利用率顯著增加（p＜0.05），HFD+RH組、HFD+TTF組和HFD+LPL-1組的食物利用率較HFD組低，接近ND組（P＞0.05）。

2.4 益生菌對(duì)高脂飲食大鼠血脂的影響

2.4.1 益生菌對(duì)大鼠血清中膽固醇的影響

圖3 各組大鼠血清膽固醇水平Fig. 3 Serum total cholesterol levels of rats in each group

如圖3所示，高脂飲食誘導(dǎo)可以使血清膽固醇濃度顯著升高（p＜0.05），益生菌干預(yù)后，大鼠血清膽固醇濃度明顯下降（p＜0.05）。與HFD組相比，HFD+RH組、HFD+TTF組和HFD+LPL-1組的大鼠血清膽固醇濃度分別下降了17.3%、11.4%和10.1%，且均有顯著性差異（p＜0.05）。但是，HFD+RH組、HFD+TTF組和HFD+LPL-1組的大鼠血清膽固醇濃度仍然高于ND組。因此，3 種益生菌干預(yù)都能使高脂大鼠血清中膽固醇濃度降低，但無(wú)法降低至正常水平。

膽固醇為機(jī)體必需營(yíng)養(yǎng)成分，不僅是細(xì)胞膜的組成部分，同時(shí)在體液免疫、神經(jīng)傳導(dǎo)及物質(zhì)代謝中起著重要的生理作用。但當(dāng)外源性膽固醇攝入過(guò)多時(shí)，易在血管壁上沉積，形成斑塊使血管管腔狹窄，阻礙血液循環(huán)，心腦組織長(zhǎng)期缺氧便可引發(fā)心腦血管疾病，因此，控制血清膽固醇含量在正常范圍具有重要的意義。本研究中，3 株菌均有降低膽固醇的效果，同時(shí)體外結(jié)果表明3 株菌具有一定的膽固醇脫除率和BSH活性。因此，推測(cè)其降膽固醇的作用主要來(lái)源于兩方面：一方面是益生菌能夠吸收或同化去除膽固醇[27]；另一方面，菌株通過(guò)產(chǎn)生BSH，將結(jié)合膽酸分解為游離膽酸，游離膽酸可與膽固醇結(jié)合形成復(fù)合物，沉淀下來(lái)，進(jìn)而起到降低膽固醇含量的作用[28]。

2.4.2 益生菌對(duì)大鼠血清中甘油三酯的影響

圖 4 各組大鼠血清甘油三酯水平Fig. 4 Serum triglycerides levels of rats in each group

圖4 結(jié)果表明，高脂飲食誘導(dǎo)可使大鼠血清甘油三酯濃度升高。與ND組相比，HFD組大鼠血清中甘油三酯濃度升高了45.6%，差異顯著（p＜0.05）。與HFD組相比，HFD+RH組、HFD+TTF組和HFD+LPL-1組大鼠血清甘油三酯濃度分別下降19.1%、16.8%和11.5%，其中HFD+TTF組與HFD組相比，差異顯著（p＜0.05）。但是各干預(yù)組大鼠血清甘油三酯濃度顯著高于ND組（p＜0.05），因此，3 株益生菌都具有降低血清甘油三酯濃度的效果，但無(wú)法降低至正常水平。甘油三酯主要存在于乳糜微粒和極低密度脂蛋白中，后者居多[29]。

研究發(fā)現(xiàn)，極低密度脂蛋白及乳糜微粒對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞具有細(xì)胞毒性作用、能夠促進(jìn)泡沫細(xì)胞的形成和誘發(fā)炎癥反應(yīng)，使甘油三酯沉積在血管壁中，促進(jìn)動(dòng)脈粥樣硬化形成，進(jìn)而引發(fā)心腦血管疾病。Al-Sheraji等[15]研究表明含有B. pseudocatenulatum G4和B. longum BB536的發(fā)酵乳能夠有效降低高脂飲食大鼠血清甘油三酯含量。一些研究表明，益生菌可以利用碳水化合物生成短鏈脂肪酸及其鹽類，如丙酸鹽、醋酸鹽等，起到抑制和降低脂肪酸合成的效果[30]。

2.4.3 益生菌對(duì)大鼠血清中LDL-C的影響

LDL被稱為是動(dòng)脈硬化因子，其作用是將肝臟內(nèi)合成的膽固醇運(yùn)送到肝臟外圍細(xì)胞。LDL-C是臨床檢驗(yàn)的指標(biāo)，它代表了血清中LDL的水平。益生菌干預(yù)6 周后，各組大鼠血清中LDL-C濃度變化情況如圖5所示。與ND組相比，HFD組大鼠血清中LDL-C濃度顯著性升高（p＜0.05）。與HFD組相比，3 種益生菌干預(yù)使高血脂大鼠血清中LDL-C濃度降低，HFD+RH組、HFD+TTF組和HFD+LPL-1組大鼠血清LDL-C濃度分別下降24.0%、20.0%和10.0%，其中，HFD+RH組、HFD+TTF組與HFD組相比，差異顯著（p＜0.05）。

圖5 各組大鼠血清LDL-C水平Fig. 5 Serum LDL-C levels of rats in each group

LDL為血清中膽固醇的主要攜帶者，可通過(guò)不同方式發(fā)生氧化修飾，轉(zhuǎn)變?yōu)檠趸兔芏戎鞍譡31]。氧化低密度脂蛋白是誘導(dǎo)血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷及功能障礙的一個(gè)重要因素，可通過(guò)激活細(xì)胞特異受體、誘導(dǎo)相關(guān)基因和蛋白的表達(dá)，破壞內(nèi)皮屏障作用和加重血管炎癥反應(yīng)[32]，在動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中起著重要的作用。Shrivastava等[33]研究發(fā)現(xiàn)，嗜酸乳桿菌可顯著降低血清中LDL-C含量；含有植物乳桿菌K12的發(fā)酵乳也能夠顯著降低高脂飲食小鼠的血清LDL-C含量[34]，這與本研究結(jié)果一致。因此，3 株益生菌對(duì)大鼠血清LDL-C的升高具有緩解作用。

2.4.4 益生菌對(duì)大鼠血清中HDL-C的影響

HDL可介導(dǎo)膽固醇的逆轉(zhuǎn)運(yùn)，將血液中多余的膽固醇從周?chē)M織轉(zhuǎn)運(yùn)至肝臟進(jìn)行再循環(huán)，減少脂質(zhì)在血管壁的沉積[35]。HDL還可調(diào)節(jié)內(nèi)皮細(xì)胞NO的生成和活性，改善血管內(nèi)皮功能[36]；通過(guò)抗氧化、抗炎、抗血栓、促纖溶以及清除毒性磷脂等作用，起到保護(hù)血管功能的作用[37]。研究表明，HDL對(duì)動(dòng)脈壁具有直接保護(hù)作用，并能使動(dòng)脈粥樣硬化病變消退，因此，HDL被稱為“抗動(dòng)脈硬化因子”。HDL-C是臨床檢驗(yàn)的指標(biāo)，它代表了血清中HDL的水平[38]。

益生菌干預(yù)6 周后，各組大鼠血清中HDL-C濃度變化情況如圖6所示。與ND組相比，HFD組大鼠血清中HDL-C濃度顯著性降低（p＜0.05）。與HFD組相比，3 種益生菌干預(yù)使高脂大鼠血清中HDL-C濃度有不同程度的升高，HFD+RH組、HFD+TTF組和HFD+LPL-1組大鼠血清HDL-C含量分別升高10.3%、5.2%和1.7%，其中，HFD+RH組與HFD組相比，差異顯著（p＜0.05）。因此，動(dòng)物雙歧桿菌LPL-RH能夠使高血脂大鼠血清HDL-C濃度有一定程度升高，保護(hù)血管功能。

圖6 各組大鼠血清HDL-C水平Fig. 6 Serum HDL-C levels of rats in each group

2.5 益生菌對(duì)高脂飲食大鼠AI的影響

圖7 益生菌對(duì)大鼠AI的影響Fig. 7 Effect of probiotics on AI of rats in each group

AI是國(guó)際醫(yī)學(xué)界制定的一個(gè)衡量動(dòng)脈粥樣硬化程度的指標(biāo)，AI數(shù)值越小動(dòng)脈粥樣硬化的程度就越輕，引發(fā)心腦血管病的危險(xiǎn)性就越低[39]。由圖7可知，高脂飲食可誘導(dǎo)AI升高，與ND組相比，HFD組大鼠AI顯著升高（p＜0.05），患心血管疾病的風(fēng)險(xiǎn)很高。與HFD組相比，HFD+RH組、HFD+TTF組和HFD+LPL-1組使大鼠AI分別降低了32.3%、19.4%和9.7%，其中HFD+RH組效果最明顯（p＜0.05）。張澤生等[16]采用4 種不同益生菌灌胃高脂飲食大鼠6 周后，發(fā)現(xiàn)益生菌干預(yù)能夠顯著降低大鼠AI，預(yù)防和減少動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生。與本研究結(jié)果相似，說(shuō)明益生菌干預(yù)可降低機(jī)體動(dòng)脈粥樣硬化的患病風(fēng)險(xiǎn)。

3 結(jié) 論

本研究選取的3 株益生菌，動(dòng)物雙歧桿菌LPL-RH、長(zhǎng)雙歧桿菌TTF和植物乳桿菌LPL-1的體外膽固醇脫除率分別為（23.8±1.9）%、（24.5±1.9）%、（20.9±3.6）%，都具有BSH活性。3 株菌在體內(nèi)對(duì)高脂飲食大鼠血脂有調(diào)節(jié)作用，其中動(dòng)物雙歧桿菌LPL-RH調(diào)節(jié)大鼠血清脂質(zhì)水平的效果好，能夠使高脂大鼠血清膽固醇、甘油三酯和LDL-C分別降低17.3%、19.1%和24.0%，HDL-C升高10.3%。3 株益生菌均有作為功能性食品用益生菌，調(diào)節(jié)血脂和預(yù)防心血管疾病的潛力，值得進(jìn)一步研究和開(kāi)發(fā)。

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Cholesterol-Lowering Ability in Vitro and Hypolipidemic Effect in Vivo of Three Probiotic Strains

WEI Yunlu, LIU Yi, WANG Yao, MENG Xiangfei, LI Pinglan*
(Key Laboratory of Functional Dairy, Co-Constructed by Ministry of Education and Beijing Government, Beijing Advanced Innovation Center for Food Nutrition and Human Health, College of Food Science and Nutritional Engineering,China Agricultural University, Beijing 100083, China)

This study aimed to investigate the hypolipidemic potential of Bifidobacterium animalis LPL-RH, B. longum TTF and Lactobacillus plantarum LPL-1. The cholesterol-lowering ability and bile salt hydrolase activity were determined.Then, the effect of probiotic intervention on blood lipids in high-fat diet fed SD rats was examined. The results showed that the cholesterol removal rates of B. animalis LPL-RH, B. longum TTF and L. plantarum LPL-1 were 23.8%, 24.5% and 20.9%, respectively, with no signif i cant differences among them. All three probiotics had bile salt hydrolase activity. The assays in vivo showed that intervention with LPL-RH, TTF and LPL-1 decreased serum cholesterol by 17.3%, 11.4% and 10.1%, triglycerides by 19.1%, 16.8% and 11.5%, and low-density lipoprotein cholesterol by 24.0%, 20.0% and 10.0%, and increased high-density lipoprotein cholesterol by 10.3%, 5.2% and 1.7% in hyperlipidemia rats, respectively. In summary,the three strains have the potential to be developed as lipid-lowering probiotics, with B. animalis LPL-RH having the best lipid-lowering ability.

probiotics; cholesterol-lowering; hypolipidemic

10.7506/spkx1002-6630-201723021

TS201.3

A

1002-6630（2017）23-0129-06

韋云路, 劉義, 王瑤, 等. 3 株益生菌體外降膽固醇能力及體內(nèi)降血脂效果評(píng)價(jià)[J]. 食品科學(xué), 2017, 38(23): 129-134.

DOI:10.7506/spkx1002-6630-201723021. http://www.spkx.net.cn

WEI Yunlu, LIU Yi, WANG Yao, et al. Cholesterol-lowering ability in vitro and hypolipidemic effect in vivo of three probiotic strains[J]. Food Science, 2017, 38(23): 129-134. (in Chinese with English abstract) DOI:10.7506/spkx1002-6630-201723021. http://www.spkx.net.cn

2017-04-14

國(guó)家自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目（31271827；31671831）

韋云路（1991—），女，碩士研究生，研究方向?yàn)槭称肺⑸?。E-mail：495680187@qq.com

*通信作者：李平蘭（1964—），女，教授，博士，研究方向?yàn)槭称肺⑸?。E-mail：lipinglan@cau.edu.cn