張建逵　李云靜　孫智　王冰　康廷國

[摘要]通過測量30批條芩飲片斷面色澤指標(biāo)和黃芩苷含量，計算二者的相關(guān)性，篩選出能表征條芩內(nèi)在質(zhì)量的色澤指標(biāo)，并以此為基礎(chǔ)，建立一種新的條芩飲片等級劃分方法。結(jié)果表明，同時滿足ΔL≥-37，Δb≥45的條芩飲片，是為選裝，其黃芩苷量一定≥200 mg·g-1；與上述2指標(biāo)其中之一不符者，均為統(tǒng)貨。研究表明指標(biāo)ΔL和Δb能夠同時表征飲片色澤和內(nèi)在質(zhì)量，能夠準(zhǔn)確簡便并客觀的劃分條芩飲片等級。研究結(jié)果可為中藥飲片的分級提供新的思路和參考。

[關(guān)鍵詞]黃芩； 色澤； 飲片； 分級

[Abstract]By determination the section color and lustre indexes as well as the content of baicalin in 30 batches of Scutellariae Radix slices， calculate the correlation of these two， screen the color and lustre indexes which could represent their intrinsic quality， and establish a new grade classification method based on the results The results showed that samples met the conditions of △L≥-37， △b≥45 simultaneously were picked grade and the content of baicalin was of ≥200 mg·g-1 definitely； Samples inconsistent with any one of above conditions were general grade This research indicated that indexes of △L and △b could characterize both the color and luster of slice and intrinsic quality， so that could be used as the indexes to classify the grades of Scutellariae Radix slices accurately， easily and objectively The research results would provide new ideas and references for grade classification of traditional Chinese medicine slices.

[Key words]Scutellariae Radix； color； slice； grade classification

黃芩為我國傳統(tǒng)、常用中藥，來源于唇形科植物黃芩Scutellaria baicalensis Georgi 的干燥根，具有清熱燥濕、瀉火解毒、止血安胎等功效。臨床上常用于濕溫、黃疸、瀉痢、肺熱咳嗽、癰腫瘡毒、胎動不安等癥[1]?，F(xiàn)代藥理研究表明，黃芩具有解熱、抗炎、抗微生物、抗腫瘤、抗氧化等藥理作用，對消化系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)等疾病具有一定的治療作用。其主要有效成分為黃芩苷等黃酮類化合物[2]。目前市場上對黃芩的需求量逐年增加。

黃芩飲片的不同規(guī)格等級體現(xiàn)了其不同的內(nèi)在質(zhì)量，亦是實現(xiàn)藥材市場按質(zhì)論價、臨床按效用量的重要依據(jù)。目前市售的黃芩飲片主要有條芩和枯芩2種商品規(guī)格，其中條芩多為栽培品，且大部分為統(tǒng)貨，少部分分為選裝和統(tǒng)貨2個等級。這些分級方法沒有考慮到外觀性狀與內(nèi)在品質(zhì)的相關(guān)性。缺乏相關(guān)實驗數(shù)據(jù)及臨床應(yīng)用的支持，原有的分級標(biāo)準(zhǔn)已不適應(yīng)黃芩飲片流通現(xiàn)狀[3]?，F(xiàn)急需將能反映藥材內(nèi)在質(zhì)量的現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)和方法與傳統(tǒng)的中藥材品質(zhì)評價經(jīng)驗相結(jié)合，來劃分條芩飲片的等級。

近年來，飲片的分級研究也是中藥材方面的研究熱點。特別是近5年來，國內(nèi)外關(guān)于該方面的研究報道多篇，如丹參、厚樸、附子、紅芪、白芍、天麻、石膏等 [410]。這些研究為中藥飲片的規(guī)格等級的劃分提供了思路和方法。盡管這些研究都采用了現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)和方法，但由于多數(shù)未與傳統(tǒng)的中藥材質(zhì)量中藥材品質(zhì)評價經(jīng)驗相結(jié)合，因此在技術(shù)操作上較為繁瑣，因此并未在實際中得到廣泛運用。如何運用現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)建立飲片等級標(biāo)準(zhǔn)，量化并簡化其操作過程，一直是飲片分級研究的難點。本研究基于條芩的色澤與其內(nèi)在化學(xué)成分的相關(guān)性，來對條芩飲片進行分級，以期推進中藥飲片規(guī)格等級的研究。

1材料

SC10型色差儀（深圳三恩馳科技有限公司），1100型高效液相色譜儀（美國Agilent公司），包括G1314A型VWD檢測器，G1311A型四元泵。AT130 型柱溫箱（大連中匯達科學(xué)儀器有限公司），KQ250 型超聲清洗器（昆山超聲儀器有限公司），F(xiàn)W100型高速萬能粉碎機（天津市泰斯特儀器有限公司），011163型電子天平（沈陽龍騰電子有限公司），CP225D型電子天平（德國Sartorius公司）。

甲醇，色譜純及分析純，天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司；乙醇和磷酸，分析純，天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司。水為純凈水，杭州娃哈哈集團有限公司。黃芩苷對照品，批號ZN1114LA13，上海源葉生物科技有限公司，純度>98%。

在2014年10月—2016年10月，收集了30批次不同產(chǎn)地的黃芩飲片或藥材（自采藥材按2015年版《中國藥典》一部方法加工成飲片），藥材經(jīng)遼寧中醫(yī)藥大學(xué)康廷國教授鑒定為唇形科植物黃芩S baicalensis根的干燥飲片，且均為條芩，根據(jù)相關(guān)參考文獻，將片大、色黃者視為選裝，余者視為統(tǒng)貨。具體情況見表1。endprint

2方法與結(jié)果

21黃芩苷的含量測定

采用2015年版《中國藥典》一部中黃芩【含量測定】項下的方法測定，色譜圖見圖1。

22色澤的測定[11]

測定的可選光源為D65；色彩空間為CIE，Lab；測量幾何結(jié)構(gòu)8°/d；偵測器為硅光電二極管；測量孔徑Φ=4 mm；定位方式為光照定位和十字架定位；光源為LED藍光激發(fā)。為減少不同儀器間產(chǎn)生的誤差，故選定一張白紙為標(biāo)準(zhǔn)樣品，測定的色度值為L=9385，a=-002，b=067。用標(biāo)準(zhǔn)樣品的色度值分別與供試樣品色度值作差，所得差值即為

該樣品的色度值。每批樣品隨機篩選出30片橫斷面光滑平整的飲片進行色澤測定，并取其每批結(jié)果的平均值，計算即得。

上述指標(biāo)中，L為顏色的明度。不同顏色明度不同，決定于照明的光源的強度和物體表面的反射系數(shù)。L=0指示為黑色，L=100指示為白色，ΔL=L樣品-L標(biāo)樣。a為紅色到綠色之間的位置a負(fù)值指示為綠色，正值時指示為紅色，Δa=a樣品-a標(biāo)樣。b為黃色到藍色之間的位置，b負(fù)值指示為藍色，正值時指示為黃色，Δb=b樣品-b標(biāo)樣。E為顏色的總色差。E=（L2+a2+b2）1/2。

23結(jié)果

各指標(biāo)測定結(jié)果見表2。應(yīng)用SPSS160分析軟件，對表2中的數(shù)據(jù)進行相關(guān)性分析[10]，結(jié)果表明，黃芩苷與ΔL 呈極顯著性相關(guān) （P<001），r=0892；與Δb呈極顯著性相關(guān) （P<001），r=0858。因此選擇色澤ΔL，Δb值作為條芩飲片等級劃分的外在依據(jù)。

231聚類分析以黃芩苷含量為指標(biāo)，采用系統(tǒng)聚類分析方法，對30個樣品進行聚類分析，結(jié)果表明，所有樣品可按黃芩苷的含量不同，在閾值10處聚為2類，其中S4，S8，S21，S23，S25，S26，S27，S28，S29，S30聚為選裝類，其余聚為統(tǒng)貨類。2類樣品黃

性狀特征選裝統(tǒng)貨

ΔL-3930～-2208-5007～-3448

Δb4367～60673196～4753

黃芩苷/mg·g-120073～232909507～16661

芩苷質(zhì)量分?jǐn)?shù)分別為20073～23290，9507～16661 mg·g-1，證明所測樣品質(zhì)量存在一定差別。從30個樣品中分別提取ΔL，Δb 2個指標(biāo)的取值范圍，見表3。

232ΔL等級劃分界限的確定從聚類分析可以看出，ΔL取值范圍選裝和統(tǒng)貨存在重疊，不能通過ΔL將選裝和統(tǒng)貨分開來，可按下式計算ΔL界限。DΔL=（T1D小+T2D大）/2=（-3930-3448）/2=-3689，式中T1D小為選裝ΔL界限下限，T2D大為統(tǒng)貨ΔL界限上限。

以ΔL為-3689為等級劃分界限，將30個條芩樣品劃分成選裝和統(tǒng)貨，獲得選裝11個、統(tǒng)貨19個。采用2獨立樣本t檢驗方法，對選裝和統(tǒng)貨黃芩苷含量進行統(tǒng)計分析，結(jié)果表明，僅以ΔL為條芩飲片標(biāo)準(zhǔn)，所得條芩飲片選裝和統(tǒng)貨之間黃芩苷含量具有極顯著差異，P<001，因此ΔL可作為條芩飲片等級劃分標(biāo)準(zhǔn)。

233Δb等級劃分區(qū)間的確定從聚類分析結(jié)果可以看出，Δb取值范圍選裝和統(tǒng)貨存在重疊，不能通過Δb將選裝和統(tǒng)貨分開來，可按下式計算Δb界限。DΔb=（T1D小+T2D大）/2=（4367+4753）/2=4560，式中T1D小為選裝Δb界限下限，T2D大為統(tǒng)貨Δb界限上限。

以Δb為4560為等級劃分界限，將30個條芩樣品劃分成選裝和統(tǒng)貨，獲得選裝11個、統(tǒng)貨19個。采用兩獨立樣本t檢驗方法，對選裝和統(tǒng)貨黃芩苷含量進行統(tǒng)計分析，結(jié)果表明，僅以Δb為條芩飲片標(biāo)準(zhǔn)，所得條芩飲片選裝和統(tǒng)貨之間黃芩苷含量具有極顯著差異，P<001，因此Δb可作為條芩飲片等級劃分標(biāo)準(zhǔn)。

234條芩飲片等級劃分時各指標(biāo)取值范圍的確定根據(jù)上述分析結(jié)果，為方便操作，提高標(biāo)準(zhǔn)的可執(zhí)行性，結(jié)合2015年版《中國藥典》一部之標(biāo)準(zhǔn)，對各指標(biāo)取值范圍進行調(diào)整，結(jié)果見表4。

235不同等級條芩飲片的最終劃分結(jié)果按表4中性狀特征修正后的取值范圍，將同時符合選裝要求的2個連續(xù)型變量形狀特征的飲片劃分為選裝，其余為統(tǒng)貨。共篩選出S4，S8，S23，S25，S27，S28，S29，S30等選裝8個，統(tǒng)貨22個。采用獨立樣本t檢驗方法，對上述條芩飲片選裝和統(tǒng)貨黃芩苷含量進行統(tǒng)計學(xué)比較，結(jié)果表明，條芩飲片選裝和統(tǒng)貨樣品黃芩苷含量存在極顯著差異（P<001）。說明該等級劃分法法合理，可通過飲片斷面色澤反映飲片的內(nèi)在質(zhì)量。

3討論

傳統(tǒng)的中藥品質(zhì)評價多采用“辨狀論質(zhì)”的方法，即根據(jù)藥材外觀性狀所表現(xiàn)出來的特點來鑒別其真?zhèn)蝺?yōu)劣[12]。如黃芩以“色黃者為佳”[13]。本實驗的結(jié)果表明，條芩飲片斷面越亮，顏色越黃，其黃芩苷含量越高。這與黃芩的傳統(tǒng)鑒別經(jīng)驗相符，其原因可能與黃芩苷等黃酮類化合物是黃色結(jié)晶狀物質(zhì)有關(guān)。

由實驗結(jié)果可知，原先被認(rèn)定為統(tǒng)貨的樣品，其黃芩苷含量仍然存在較大差異，重新分級后，部分含量高的樣品被歸為選裝，使得這種差異有所減?。怀缺徽J(rèn)定的選裝樣品外，另有3個原先被認(rèn)定為統(tǒng)貨的樣品被劃分為選裝。這充分體現(xiàn)了本實驗依據(jù)色澤指標(biāo)與黃芩苷含量相關(guān)性劃分等級的科學(xué)性與合理性。

目前用于檢測黃芩質(zhì)量的指標(biāo)性成分較多，如黃芩苷、黃芩素、漢黃芩苷、漢黃芩素、千層紙素A等[14]。但用于分級的指標(biāo)性成分應(yīng)該能代表樣品的內(nèi)在質(zhì)量，最好是法定質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中所選的指標(biāo)，黃芩苷為2015年版《中國藥典》一部中規(guī)定檢測的指標(biāo)，基于此，條芩的等級劃分選擇了黃芩苷作為指標(biāo)成分。此外，此外，用于分級等級的樣品，其前提條件是合格樣品，本實驗所用樣品均按照2015年版《中國藥典》一部中之規(guī)定進行了檢測，均符合相關(guān)要求。

目前市售的黃芩飲片主要有條芩和枯芩2種商品規(guī)格，枯芩斷面中間呈暗棕色或棕黑色，枯朽狀或已成空洞，不易測其色澤，且枯芩一般不分等級，因此本實驗未對其分級進行研究。endprint

鄧哲等建立了基于質(zhì)量常數(shù)的黃芩飲片等級評價方法[15]，與之相比，本實驗建立的方法更易操作，又避免了復(fù)雜的計算，更易于推廣，還為黃芩藥材質(zhì)量評價提供了新的量化指標(biāo)，可供其他中藥飲片等級的劃分提供參考。

[參考文獻]

[1]中國藥典一部[S]. 2015：301.

[2]鄭勇鳳，王佳婧，傅超美，等黃芩的化學(xué)成分與藥理作用研究進展[J]. 中成藥，2016，38 （1）：141.

[3]李先端，顧雪竹，程立平，等黃芩飲片規(guī)格分級市場情況調(diào)查及有關(guān)古今文獻論述[J]. 中藥材，2014，37 （1）：150.

[4]李佩，舒成仁，劉瑩，等丹參飲片高效液相指紋圖譜及其分級研究[J]. 湖北中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報，2015，17（5）：50.

[5]陳斯，李佩，沈雨，等厚樸飲片有效成分含量測定與分級標(biāo)準(zhǔn)研究[J]. 時珍國醫(yī)國藥，2014，25（8）：1964.

[6]陳苡然，汪云偉，黃永亮，等基于“三步”理念的附片（黑順片）分級的思路與實踐[J]. 中國實驗方劑學(xué)雜志，2013，19（16）：77.

[7]陳志珍，馮旭，郭乾乾隴南紅芪飲片的三A分級標(biāo)準(zhǔn)及應(yīng)用研究[J]. 中國當(dāng)代醫(yī)藥，2015，22（22）：161.

[8]陳麗麗，程顯隆，韓立煒，等 UPLCQTOFMS結(jié)合主成分分析法用于白芍飲片的分級科學(xué)性研究[J]. 藥物分析雜志，2013，33（5）：794.

[9]仲瑞雪，鐘戀，萬軍，等天麻飲片分級的研究[J]. 中成藥， 2014，36（1）：135.

[10]孫曉靜，楊柳，鄒戩，等石膏飲片分級的研究[J]. 中國藥師， 2016， 19（3）：491.

[11]侯偉龍，竇德強甘草的色澤與甘草苷、甘草酸含量的相關(guān)性研究[J]. 中國實驗方劑學(xué)雜志，2013，19（15）：130.

[12]杜丹，蔣淼，劉?！氨鏍钫撡|(zhì)”發(fā)微[J]. 中藥與臨床，2012，3（6）：6.

[13]康廷國中藥鑒定學(xué)[M]. 北京：中國中醫(yī)藥出版社，2016：148.

[14]李云靜，張建逵，王冰，等不同產(chǎn)地黃芩藥材中黃芩苷等5種黃酮類成分含量的比較[J]. 時珍國醫(yī)國藥，2016，27（12）：59.

[15]鄧哲，章軍，焦夢姣，等以質(zhì)量常數(shù)為核心的黃芩飲片等級評價研究[J]. 中國中藥雜志，2017，42（9）：1673

[責(zé)任編輯孔晶晶]endprint