張 蕾 林燕清 - 羅理勇,3 -,3 曾 亮,3 ang,3

(1. 西南大學食品科學學院，重慶 400715；2. 武夷星茶業(yè)有限公司，福建 武夷山 354300;3. 西南大學茶葉研究所，重慶 400715) (1. College of Food Science, Southwest University, Chongqing 400715, China; 2. Wuyi Star Co., Ltd., Wuyishan, Fujian 354300, China; 3. Tea Research Institute, Southwest University, Chongqing 400715, China)

焙火程度對武夷巖茶品質(zhì)特性的影響

張 蕾1ZHANGLei1林燕清2LINYan-qing2羅理勇1,3LUOLi-yong1,3曾 亮1,3ZENGLiang1,3

(1. 西南大學食品科學學院，重慶 400715；2. 武夷星茶業(yè)有限公司，福建 武夷山 354300;3. 西南大學茶葉研究所，重慶 400715) (1.CollegeofFoodScience,SouthwestUniversity,Chongqing400715,China; 2.WuyiStarCo.,Ltd.,Wuyishan,Fujian354300,China; 3.TeaResearchInstitute,SouthwestUniversity,Chongqing400715,China)

以不同焙火程度的武夷巖茶(水仙、肉桂)為研究對象，通過研究感官品質(zhì)、主要生化成分和茶湯物理特性(粒徑、色差、透光率和沉淀量)的變化規(guī)律，分析焙火程度對武夷巖茶品質(zhì)特性的影響。結(jié)果表明：焙火可改善武夷巖茶品質(zhì)，隨焙火程度增加，茶多酚、咖啡堿、游離氨基酸、茶黃素和茶紅素的含量均顯著降低(P<0.05)，可溶性蛋白和可溶性糖的含量變化不顯著(P<0.05)；兒茶素、沒食子兒茶素沒食子酸酯含量增加，表沒食子兒茶素、表沒食子兒茶素沒食子酸酯、表兒茶素、表兒茶素沒食子酸酯的含量均降低；同時，粒徑逐漸減小，透光率、△L、沉淀量逐漸增加，澄清度升高。焙火程度越高，茶湯澄清度越高，但焙火程度過高會導致茶湯產(chǎn)生焦苦味，不利滋味品質(zhì)。輕、中火處理后武夷巖茶茶湯清澈透亮，滋味醇厚回甘，品質(zhì)最優(yōu)。

武夷巖茶；焙火工藝；品質(zhì)特性；生化成分

焙火是茶葉加工中的一個重要環(huán)節(jié)。經(jīng)焙火處理后，茶葉中的一些不溶物質(zhì)發(fā)生裂解和異構(gòu)化對增進滋味醇和、香氣純正有很好的效果[1]。烘焙結(jié)合水分控制能有效改善夏季綠茶的風味品質(zhì)，對去除陳氣味、提高香氣、降低苦澀味具有顯著效果[2]。近年來，已有就烘焙工藝對烏龍茶，包括武夷巖茶品質(zhì)影響的研究報道[3][4]Ⅰ。

冷后渾是指茶湯冷卻后澄清的茶湯變?yōu)榛鞚岬默F(xiàn)象，所形成的沉淀物被稱為茶乳酪。關(guān)于紅茶和綠茶冷后渾方面的研究[5-8]表明，茶乳酪主要是由茶多酚及氧化產(chǎn)物、咖啡堿、蛋白質(zhì)3類物質(zhì)之間的絡合作用所形成。武夷巖茶屬于半發(fā)酵茶，生化成分同時包含了綠茶和紅茶中的特征成分，如綠茶中的茶多酚、紅茶中的茶黃素和茶紅素等，這些多酚類物質(zhì)與咖啡堿、蛋白質(zhì)之間的絡合反應是產(chǎn)生冷后渾的主要方式。

焙火工藝不僅對形成武夷巖茶品質(zhì)有重要作用，而且對茶湯物理特性有一定程度的影響。日常沖泡武夷巖茶過程中發(fā)現(xiàn)不同焙火程度的武夷巖茶湯色澄清度差異較大。為探討焙火對武夷巖茶品質(zhì)特性的影響，本試驗擬以不同焙火程度的武夷巖茶(水仙、肉桂)為研究對象，通過研究感官品質(zhì)、主要生化成分和茶湯物理特性的變化規(guī)律，以期對武夷巖茶加工技術(shù)改進和品質(zhì)提高提供一定的理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 儀器與設備

維力茶葉烘焙機：河北任縣維力機械制造廠；

電子天平：FA1004型，上海舜宇恒平科學儀器有限公司；

精密鼓風干燥箱：BPG-9070A型，上海一恒科學儀器有限公司；

電熱恒溫水浴鍋：HWS-26型，上海一恒科學儀器有限公司；

電位分析儀：ZEN3690 Zeta型，英國Malvern公司；

高效液相色譜儀：LC-20A型，配LC-20AT高壓輸液泵、SPD-20A VP紫外可見檢測器，日本島津公司；

紫外—可見分光光度計：UV-2450型，日本島津公司；

可見分光光度計：722型，上海菁華科技儀器有限公司；

臺式高速冷凍離心機：5810型，德國Eppendorf公司；

真空冷凍干燥機：ALPHA1-4LSC型，德國Christ公司；

測色儀：UltraScan Pro型，上海信聯(lián)創(chuàng)作電子有限公司。

1.2 材料與試劑

1.2.1 材料

茶葉：肉桂、水仙，采摘自武夷星茶業(yè)有限公司基地，采摘標準為開面二、三葉，采摘時間為2015年5月。

1.2.2 試劑

甲醇、冰乙酸：色譜純，成都市科龍化工試劑廠；

碳酸鈉、碳酸氫鈉、磷酸氫二鈉、磷酸二氫鉀、氯化亞錫、無水乙醇、磷酸、濃硫酸、4-甲基-2-戊酮、草酸、沒食子酸標準品、谷氨酸標準品、葡萄糖標準品：分析純，成都市科龍化工試劑廠；

考馬斯亮藍G-250、牛血清蛋白、福林酚試劑：分析純，北京索萊寶科技有限公司；

茚三酮：分析純，天津市瑞金特化學品有限公司；

蒽酮：分析純，上?？曝S實業(yè)有限公司；

二苯基酸：分析純，上海譜振生物科技有限公司；

咖啡堿標準品、表沒食子兒茶素(epigallocatechin，EGC)、兒茶素(catechin，C)、表沒食子兒茶素沒食子酸酯(epigallocatechin-3-gallate，EGCG)、表兒茶素(epicatechin、EC)、沒食子兒茶素沒食子酸酯(gallocatechingallate，GCG)、表兒茶素沒食子酸酯(epicatechingallate ，ECG)：色譜純，上海純優(yōu)生物科技有限公司。

1.3 方法

1.3.1 茶葉制作工藝流程 鮮葉采摘后在武夷星茶業(yè)有限公司茶廠進行加工，制作工藝流程：曬青→晾青→做青→炒青→揉捻→毛火→足火→毛茶。毛茶制作完成后，經(jīng)手工揀剔后，進行焙火處理并取樣。

1.3.2 茶葉焙火取樣方法 以干燥揀剔后的水仙、肉桂茶樣為原料，采用維力茶葉烘焙機進行焙火處理(每籠攤?cè)~1.5 kg，攤?cè)~厚度約5 cm)。焙火處理的程序：

毛茶→半輕火(130 ℃焙火2 h，扦樣)→半輕火(130 ℃焙火2 h 后，再于125 ℃焙火2 h，扦樣)→輕火(140 ℃焙火2 h后，再于145 ℃焙火1 h，再在150 ℃焙火1 h，扦樣)→中火(150 ℃焙火3 h，扦樣)→足火(隔夜后，150 ℃焙火2 h，扦樣)

各焙火程序均為上一個工藝后的延續(xù)工藝。

1.3.3 感官審評 參照GB/T 23776—2009《茶葉感官審評方法》和GB/T 18745—2006《地理標志產(chǎn)品 武夷巖茶》等對茶樣進行審評。采用百分制計分，各審評因子的權(quán)數(shù)為：外形20%，香氣30%，滋味35%，湯色5%，葉底10%。

1.3.4 主要生化成分測定

(1) 干物重：按GB/T 8304—2013中的120 ℃烘干法執(zhí)行。

(2) 茶多酚：按GB/T 8313—2008執(zhí)行。

(3) 游離氨基酸：按GB/T 8314—2013執(zhí)行。

(4) 可溶性總糖：蒽酮比色法[9]。

(5) 可溶性蛋白：考馬斯亮藍法[10]。

(6) 茶黃素和茶紅素：分光光度法[11]。

(7) 兒茶素單體和咖啡堿含量測定：高效液相色譜法[8]。

1.3.5 茶湯物理特性測定

(1) 茶湯制備：稱取5 g干茶，加沸蒸餾水240 mL沖泡5 min，趁熱減壓過濾，濾液冷卻至25 ℃后，純水定容至250 mL，備用[12]。

(2) 粒徑：取適量冷卻至25 ℃的茶湯，使用電位分析儀測量茶湯粒徑[8]。

(3) 色差：取30 mL冷卻至25 ℃的茶湯加入到50 mL離心管，在10 ℃條件下，8 000 r/min離心10 min，得到上清液。使用測色儀分別測量離心前后的茶湯明亮度L、紅綠色度a和黃藍色度b，計算得到△L、△a、△b。

(4) 透光率：同色差操作，得到上清液后，使用可見分光光度計于660 nm波長下測量茶湯的透光率，以離心后上清液為空白對照[13]40-46。

(5) 沉淀量：同色差操作，除去上清液，使用冷凍干燥機將沉淀冷凍干燥至恒重，稱重[8]。

1.4 數(shù)據(jù)分析

2 結(jié)果與分析

2.1 感官審評結(jié)果分析

由武夷巖茶感官審評結(jié)果發(fā)現(xiàn)，隨焙火程度增加，茶湯由黃色較亮變?yōu)槌燃t較亮，是由于焙火增加引起茶黃素和茶紅素進一步氧化聚合，導致茶湯湯色加深[14]31-32；焙至足火，苦澀味有所增加，是因為焙火程度增加，葉溫快速升高，Maillard反應和焦糖化反應過度，產(chǎn)生焦味，造成茶湯苦澀味加重[3,15]；香氣也隨焙火增加逐漸變化，輕、中火時，水仙和肉桂分別呈明顯的特征蘭花香和桂皮香，焙至足火時，高火香顯露，肉桂還帶有明顯的奶香。武夷巖茶的感官審評結(jié)果見表1。

表1 武夷巖茶的感官審評結(jié)果Table 1 Sensory evaluation results of Wuyi Rock Tea

由表1可知，適宜的焙火工藝能有效改善武夷巖茶品質(zhì)，對形成其特有的色、香、味、形發(fā)揮著重要作用，輕、中火處理后的武夷巖茶茶湯清澈透亮，特征香顯露，滋味醇厚回甘，品質(zhì)最優(yōu)。

為了解焙火工藝引起的武夷巖茶感官品質(zhì)差異的緣由，將從生化成分和物理特性2個方面進行闡述；分析感官品質(zhì)與茶湯物理特性之間的相關(guān)性，從而提出武夷巖茶焙火工藝與感官品質(zhì)關(guān)系的關(guān)鍵控制點。

2.2 生化成分分析

2.2.1 主要生化成分含量 由表2可知，茶多酚、游離氨基酸、可溶性蛋白、可溶性糖等含量均隨焙火程度增加而降低。

茶多酚是茶葉中的主要活性成分，具有清除自由基、抗氧化、抗衰老、抗癌變、防輻射等作用[16]。焙火程度增加，茶多酚含量降低，至足火時，供試品種的茶多酚含量均降低了10%以上，這是由多酚類物質(zhì)在焙火時進一步氧化，且與蛋白質(zhì)等絡合成大分子物質(zhì)導致的[6,17]。

在熱的作用下，游離氨基酸脫水形成吡嗪類化合物，又與糖類物質(zhì)發(fā)生Maillard反應，經(jīng)過Strecker反應降解生成醛類、吡咯類香氣物質(zhì)及黑色素[14]214。隨焙火程度增加，Maillard反應和高溫氧化反應加劇，氨基酸的消耗速率大于氨基酸的生成速率，所以氨基酸的含量顯著降低[18]。在焙火過程中，糖類物質(zhì)在熱化學作用下發(fā)生自行轉(zhuǎn)化，形成可溶性糖類物質(zhì)的量與參與香氣物質(zhì)等形成而消耗的量大致相等[19]，因此下降趨勢較小。

隨著焙火程度增加，可溶性蛋白含量逐漸降低，但變化不顯著。在熱和酶的共同作用下，可溶性蛋白逐漸降解生成多肽，進一步水解成游離氨基酸，并與多酚類發(fā)生絡合作用，因此含量下降[14]228[18]。高溫條件下，咖啡堿易升華，隨焙火程度增加，咖啡堿升華速度加快，含量減少[14]36-37。隨著焙火程度增加，茶黃素和茶紅素氧化聚合比例增加，茶黃素和茶紅素含量顯著降低，茶湯逐漸轉(zhuǎn)暗，色澤加深，且作為多酚類物質(zhì)，會與咖啡堿、蛋白質(zhì)發(fā)生絡合作用使含量降低[3][14]31-32。

隨焙火程度增加，各生化成分含量呈不同程度的降低趨勢，焙火至輕、中火時，各生化成分降低到一定程度，此時茶湯滋味甘醇，得分較高；焙至足火時，焙火程度過高產(chǎn)生焦苦味使滋味得分下降。羅學平[3]、翁睿[4]9-12,18-19、江山[19]等研究表明，隨焙火程度增加，各生化成分隨之降低，但感官評價滋味評分并不隨生化成分的降低而單純下降或上升。茶湯滋味是茶葉內(nèi)多種呈味物質(zhì)綜合作用下的結(jié)果，各呈味物質(zhì)之間同時存在協(xié)同和拮抗作用[3,20]，當各種呈味物質(zhì)含量比例恰好協(xié)調(diào)時，茶湯滋味最優(yōu)，因此滋味評分與各呈味物質(zhì)之間的關(guān)系不能用簡單的相關(guān)性進行分析。

2.2.2 兒茶素各組分含量 兒茶素是構(gòu)成茶多酚的主體，占茶多酚總量的70%～80%，是決定茶葉品質(zhì)的重要化學成分之一[21]。由表3可知，焙火后武夷巖茶中GC、NGC含量均顯著降低，由于GC具有一定的苦澀味[4]22，所以適宜的烘焙處理有助于改善武夷巖茶的滋味。EGC、EC、EGCG、ECG等兒茶素成分的含量隨焙火程度增加而下降，而C、GCG的含量隨焙火程度增加而升高，可能是由兒茶素組分之間的異構(gòu)化作用導致[14]11-13。

兒茶素是參與沉淀形成的主要化學成分，特別是GC所含的沒食子?；鶐в懈嗟牧u基，更容易與其它參與沉淀形成的化學物質(zhì)結(jié)合[7]。Chao等[22]研究認為，咖啡堿作為半發(fā)酵茶冷后渾形成的關(guān)鍵化合物，主要與GC通過氫鍵和疏水作用結(jié)合，GC通過沒食子?；江h(huán)上的羥基與咖啡堿或蛋白質(zhì)等發(fā)生絡合作用，其絡合能力明顯大于簡單兒茶素。

2.3 茶湯物理特性分析

表4是對粒徑、明亮度等與茶多酚、咖啡堿、可溶性蛋白含量之間相著性分析結(jié)果。

表2 武夷巖茶的主要生化成分含量?Table 2 Major chemical components of Wuyi Rock Tea

? 同列不同小寫字母表示在0.05水平上差異顯著，相同字母表示差異不顯著。

表3 武夷巖茶兒茶素各組分含量比較?Table 3 Comparison of catechin monomers in Wuyi Rock Tea %

? 同列不同小寫字母表示在0.05水平上差異顯著，相同字母表示差異不顯著；NGC：非酯型兒茶素；GC：酯型兒茶素；TC：總兒茶素。

表4 茶多酚、咖啡堿、可溶性蛋白與各物理特性間的相關(guān)系數(shù)值?Table 4 The phase relationship of tea polyphenols, caffeine, soluble protein between various physical properties

? **表示在0.01水平上顯著相關(guān)，*表示在0.05水平上顯著相關(guān)。

2.3.1 粒徑 蛋白質(zhì)與多酚非共價相互作用是引起茶湯混濁或沉淀最常見、最重要的原因之一[13]15[23]。由圖1可知，粒徑隨焙火程度增加而減小，達到中火后，茶湯的粒徑降低趨勢減小，表明焙火增加到一定程度，其對粒徑的影響越來越小。粒徑隨焙火程度增加而減小，可能是焙火程度不同，參與形成沉淀的蛋白質(zhì)和茶多酚數(shù)量有一定差異，導致不能形成大的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，而形成無數(shù)的二聚體、多聚體，聚合體粒徑減小。

另外，茶湯冷后渾主要是由多酚類物質(zhì)、蛋白質(zhì)、咖啡堿通過氫鍵、疏水作用等方式絡合而成[6-7]，熱是引起蛋白質(zhì)變性最普通的物理因素[24]，焙火程度增加，葉溫升高導致蛋白質(zhì)變性，蛋白質(zhì)變性可能會暴露更多內(nèi)部結(jié)合位點，與多酚類物質(zhì)結(jié)合作用增強，導致茶湯粒徑逐漸減小。后期可繼續(xù)深入探討茶湯粒徑隨焙火程度增加而逐漸減小的機理。

對湯色得分與粒徑進行Pearson分析，得出兩品種(水仙、肉桂)湯色得分與粒徑相關(guān)系數(shù)分別為-0.892，-0.916，均呈現(xiàn)顯著負相關(guān)，粒徑越小，湯色得分越高。

由表4可知，兩品種(水仙、肉桂)茶湯粒徑與茶多酚、咖啡堿、可溶性蛋白含量均呈正相關(guān)，結(jié)合上述分析，這3種生化成分或形成二聚體、多聚體，或相互結(jié)合作用增強，導致粒徑變小[5-8,23-24]。

不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)圖1 武夷巖茶粒徑變化Figure 1 Changes in particle size of Wuyi Rock Tea

2.3.2 色差 焙火到一定程度后，茶黃素和茶紅素聚合比例增加，茶湯色澤加深，對色差(尤其是明亮度L)造成干擾，離心前后色差的差值能夠消除湯色對測定茶湯冷后渾現(xiàn)象的影響[13]40-46，因此茶湯澄清度可以用離心前后的明亮度差值△L定量描述。由表5可知，隨焙火程度逐漸增加，△L、△a、△b值均逐漸增大，表明茶湯色澤隨焙火程度增加逐漸變紅、變黃，明亮度增加。

對湯色得分與△L進行Pearson分析，得出兩品種(水仙、肉桂)湯色得分與△L相關(guān)系數(shù)分別為0.937，0.898，均呈現(xiàn)顯著正相關(guān)，即△L越高，湯色得分越高。

表5 武夷巖茶色差變化?Table 5 Changes in aberration of Wuyi Rock Tea

? 同列不同小寫字母表示在0.05水平上差異顯著，相同字母表示差異不顯著。

由表4可知，兩品種(水仙、肉桂)茶湯△L與茶多酚、咖啡堿、可溶性蛋白含量均呈顯著正相關(guān)。這3種生化成分是茶湯冷后渾的主要形成物質(zhì)，茶湯中含量越少，說明3種化學成分形成冷后渾顆粒的比例越大，但因形成的小分子顆粒粒徑減小，△L越大，澄清度就越高[5-8,23-24]。

2.3.3 透光率 隨焙火程度增加茶湯顏色隨之加深，對透光率測定造成干擾作用，陸建良[13]40-46研究發(fā)現(xiàn)波長660 nm時測得的離心前后透光率的差值△T能夠消除湯色對測定茶湯冷后渾現(xiàn)象的影響，因此以離心后的茶湯為對照測得的原茶湯的透光率可準確反映茶湯澄清度。由圖2可知，茶湯透光率隨焙火程度增加而升高，與2.3.2中△L值的變化趨勢相同，說明隨焙火程度增加，透光率增加，澄清度升高。

不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)圖2 武夷巖茶透光率變化Figure 2 Changes in transmittance of Wuyi Rock Tea

對湯色得分與透光率進行Pearson分析，得出兩品種(水仙、肉桂)湯色得分與透光率相關(guān)系數(shù)分別為0.944，0.938，均呈現(xiàn)顯著正相關(guān)，即透光率越高，湯色得分越高。

由表4可知，兩品種(水仙、肉桂)茶湯透光率與茶多酚、咖啡堿、可溶性蛋白含量均呈顯著正相關(guān)。同2.3.2△L結(jié)果一致，說明3種化學成分形成冷后渾顆粒比例增大使茶湯檢測到的含量降低，但因形成的沉淀顆粒減小，透光率就越大，澄清度越高[5-8,23-24]。

2.3.4 沉淀量 由圖3可知，隨焙火程度增加，武夷巖茶沉淀量呈現(xiàn)上升趨勢。茶多酚及氧化產(chǎn)物、咖啡堿和蛋白質(zhì)是形成茶湯冷后渾的主要成分[5-8]，隨焙火程度增加，茶湯中茶多酚、咖啡堿、可溶性蛋白參與形成冷后渾的比例增加，造成茶湯中的含量降低，離心后測得的沉淀量增加。

不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)圖3 武夷巖茶沉淀量變化Figure 3 Changes in precipitation amount of Wuyi Rock Tea

對湯色得分與沉淀量進行Pearson分析，得出兩品種(水仙、肉桂)湯色得分與沉淀量相關(guān)系數(shù)分別為0.891，0.950，均呈現(xiàn)顯著正相關(guān)，沉淀量越大，湯色得分越高，是因為隨焙火程度增加，形成更多粒徑較小的顆粒，因粒徑減小，茶湯湯色澄清度升高，湯色得分越高，但在外力離心作用下小分子顆粒沉積會使沉淀量增加，這兩者并不矛盾。

由表4可知，兩品種(水仙、肉桂)茶湯沉淀量與茶多酚、咖啡堿、可溶性蛋白含量均呈顯著或極顯著負相關(guān)。茶湯中這3種生化成分含量減少，說明它們形成冷后渾顆粒的比例越大，離心后測得的沉淀量也就越大[57-8,23-24]。

3 結(jié)論

本試驗以不同焙火程度加工的武夷巖茶(水仙、肉桂)為研究對象，將茶湯物理特性與感官品質(zhì)、主要生化成分相結(jié)合，分析焙火程度對武夷巖茶品質(zhì)特性的影響。試驗結(jié)果證明，隨焙火程度增加，茶湯澄清度升高，輕、中火時，武夷巖茶香氣純正持久、滋味醇厚回甘、湯色清澈透亮，“冷后渾”現(xiàn)象相較于毛茶有所改善；但焙至足火后，茶湯澄清度雖高，但易產(chǎn)生焦苦味，不利于滋味品質(zhì)；因此綜合評價輕、中火處理的武夷巖茶品質(zhì)最優(yōu)。

研究結(jié)果對武夷巖茶的加工技術(shù)改進及品質(zhì)改善具有指導作用，而焙火過程中產(chǎn)生的焦苦味物質(zhì)，是后期深入研究焙火對滋味品質(zhì)形成機理的重要方向。

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EffectsofbakingdegreesonqualitycharacteristicsofWuyiRockTea

Wuyi rock teas made from Shuixian or Rougui tea cultivar were baked for different degrees. Their organoleptic properties and principal biochemical components, and the physical properties of tea infusion (aberration, transmittance, precipitation amount and particle size) were determined in this study, to evaluated the effect of different baking technics on the quality of Wuyi rock tea. The results showed that baking process were beneficial to the improvement of Wuyi rock tea quality. The contents of tea polyphenols, caffeine, free amino acids, theafavins and thearubigins significantly decreased with increasing baking degrees. However, there were no significant variations in the contents of soluble protein and soluble sugar. For catechins, the contents of EGC, EGCG, EC, ECG decreased, whereas C and GCG contents increased. With the increase of baking degrees, the particle size of tea infusion was decreased, whereas its transmittance, brightness, precipitation amount and clarity were gradually increased. However, heavy baking degree could cause the scorched and bitter flavor to tea infusion. Therefore, Wuyi rock tea at light and medium baking degree showed the best qualities of brightness and taste.

Wuyi rock tea; baking technics; quality characteristics; biochemical components

西南大學中央高?；究蒲袠I(yè)務費專項資金項目(編號：XDJK2015C136)

張蕾，女，西南大學在讀碩士研究生。

曾亮(1980—)，女，西南大學教授，博士。

E-mail:zengliangbaby@126.com

2017—03—14

10.13652/j.issn.1003-5788.2017.09.009