劉玲玲，張貞霞，李冰寧，武彥文,*

（1.北京市理化分析測(cè)試中心，北京市食品安全測(cè)試工程技術(shù)研究中心，北京市科學(xué)技術(shù)研究院分析測(cè)試技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，北京 100089；2.國(guó)防科技大學(xué)西安通信學(xué)院，陜西 西安 710106）

離線SPE-LVI-GC-FID法分析嬰兒配方奶粉中的飽和烴類礦物油

劉玲玲1，張貞霞2，李冰寧1，武彥文1,*

（1.北京市理化分析測(cè)試中心，北京市食品安全測(cè)試工程技術(shù)研究中心，北京市科學(xué)技術(shù)研究院分析測(cè)試技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，北京 100089；2.國(guó)防科技大學(xué)西安通信學(xué)院，陜西 西安 710106）

建立嬰兒配方奶粉中飽和烴類礦物油（mineral oil saturated hydrocarbons，MOSH）的離線固相萃?。╯olid phase extraction，SPE）結(jié)合大體積進(jìn)樣-氣相色譜-氫火焰離子化檢測(cè)器（large volume injection-gas chromatographyflame ionization detection，LVI-GC-FID）的分析方法。該方法以正己烷為提取溶劑，提取液經(jīng)硝酸銀漬硅膠SPE柱凈化；通過(guò)比較不同長(zhǎng)徑比SPE柱的凈化效果，確定以5 m L玻璃注射器作為分離MOSH的SPE柱，收集洗脫液5 m L，濃縮后注入LVI-GC-FID測(cè)定。GC的進(jìn)樣口升溫程序?yàn)椋撼跏紲囟?5 ℃，保持1 m in（分流比200∶1），以250 ℃/m in升溫至360 ℃（分流閥關(guān)閉2 m in），并保持27 m in（分流比為100∶1）；柱溫箱升溫程序?yàn)椋?5 ℃保持3 m in，以25 ℃/m in升溫至350 ℃，再以5 ℃/m in升溫至370 ℃，保持10 m in；FID溫度380 ℃；進(jìn)樣量40 μL。結(jié)果表明：MOSH的標(biāo)準(zhǔn)品液體石蠟在2～500 mg/kg范圍內(nèi)呈良好線性關(guān)系，相關(guān)系數(shù)為0.999，方法的定量限為0.05 mg/kg，加標(biāo)回收率在92.62%～102.86%之間，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差在0.85%～2.57%之間，適用于嬰兒配方奶粉中MOSH的定量分析。應(yīng)用該方法檢測(cè)市售10 種嬰兒配方奶粉中的MOSH含量，其結(jié)果在0.24～1.30 mg/kg之間，其中MOSH（C16～C35）含量在0.12～0.85 mg/kg之間，表明有必要對(duì)嬰兒配方奶粉中的礦物油污染進(jìn)行監(jiān)管。

嬰兒配方奶粉；飽和烴類礦物油（MOSH）；固相萃?。⊿PE）；大體積進(jìn)樣-氣相色譜-氫火焰離子化檢測(cè)器（LVI-GC-FID）

礦物油是從石油原油分離得到的碳數(shù)為C10～C50的復(fù)雜烴類化合物，主要包括直鏈、支鏈烷烴和烷基取代的環(huán)烷烴（m ineral oil saturated hydrocarbons，MOSH）以及烷基取代的芳香烴（m ineral oil aromatic hydrocarbons，MOAH）兩大類[1]。食品中礦物油污染由來(lái)已久[2]，主要來(lái)源于包裝遷移、環(huán)境污染、食品加工過(guò)程等[1,3-4]。礦物油毒理學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，人體皮下脂肪、淋巴結(jié)、脾臟、肝臟、肺、腎臟等器官中均含有相當(dāng)數(shù)量的MOSH，其中以淋巴結(jié)和脾臟中MOSH含量最高，卻未檢測(cè)到MOAH[5]。歐洲食品安全局的研究顯示，MOSH（C16～C35）經(jīng)膳食攝入后在體內(nèi)積聚，會(huì)導(dǎo)致淋巴結(jié)、脾臟和肝臟等器官產(chǎn)生肉芽腫和慢性炎癥[1]。有研究發(fā)現(xiàn)，MOSH是人體內(nèi)累積量最大的污染物[6]，其主要來(lái)源于食物攝入。因此，食品中MOSH的污染物值得關(guān)注[7]。在各類食品中，嬰兒食品最受重視，原因是嬰兒各臟器發(fā)育尚不成熟，如果長(zhǎng)期食用受MOSH污染的食品，很可能產(chǎn)生健康危害。隨著社會(huì)發(fā)展，越來(lái)越多的嬰兒配方奶粉幫助嬰兒成長(zhǎng)。因此，加強(qiáng)嬰兒配方奶粉中MOSH的監(jiān)測(cè)非常必要。

MOSH化學(xué)組成復(fù)雜，其定量分析一般采用氣相色譜-氫火焰離子化檢測(cè)（gas chrom atography-flame ionization detection，GC-FID）。原因是FID系唯一對(duì)所有礦物油組分響應(yīng)完全一致的檢測(cè)器，GC是與FID聯(lián)用的理想分離方式[8]。MOSH的GC譜圖是一個(gè)類似“駝峰”的寬峰，寬峰上方的尖峰為食品中的天然正構(gòu)烷烴，定量計(jì)算時(shí)需要扣除，即MOSH含量通過(guò)計(jì)算GC譜圖的基線與駝峰之間的“空白”面積得到。然而，F(xiàn)ID的靈敏度低、選擇性差，需要高度地凈化與富集目標(biāo)物[4]。目前，液相色譜（liquid ch rom atog raphy，LC）與氣相色譜聯(lián)用（LC-GC）是最為常用的礦物油分析技術(shù)，它通過(guò)LC與GC的接口技術(shù)實(shí)現(xiàn)在線凈化、富集，有效提高了礦物油的純度與濃度[9-11]。然而，LC-GC儀器昂貴，無(wú)法普及，離線凈化技術(shù)成為另外一種解決途徑[12-14]。

目前，已有文獻(xiàn)主要集中在食用油、谷物、餅干、面包和巧克力等食品中MOSH的分析[15-27]，嬰兒配方奶粉中的礦物油調(diào)查尚未見報(bào)道。由于礦物油組成復(fù)雜，不同樣品基質(zhì)中的干擾成分不同，因此，分析不同食品樣品中礦物油的具體方法不盡相同。本實(shí)驗(yàn)采用配備了大體積進(jìn)樣系統(tǒng)（large volume injection，LVI）的GC-FID建立嬰兒奶粉中MOSH的檢測(cè)方法，其創(chuàng)新之處在于：1）采用了操作簡(jiǎn)便的固相萃?。╯olid phase extraction，SPE）柱凈化方法并優(yōu)化了分離條件；2）通過(guò)優(yōu)化LVIGC-FID條件將方法的定量限降低至0.05 mg/kg；3）根據(jù)奶粉基質(zhì)的干擾特點(diǎn)，選擇了合適的內(nèi)標(biāo)（環(huán)己基環(huán)己烷（cyclohexyl cyclohexane，Cycy））進(jìn)行準(zhǔn)確定量。該方法操作簡(jiǎn)便、實(shí)驗(yàn)條件要求不高，適用于市售奶粉中MOSH含量的日常檢測(cè)。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

嬰兒配方奶粉樣品10 個(gè) 市購(gòu)。

硝酸銀（優(yōu)級(jí)純） 天津佳燁貴研科技有限公司；正己烷、丙酮（均為色譜純） 美國(guó)Fisher Scientific公司；硅膠（0.063～0.200 mm，600 ℃烘烤6 h后置于干燥器中備用） 美國(guó)M erck公司；MOSH標(biāo)準(zhǔn)液體石蠟（paraffin oil，PO）、內(nèi)標(biāo)Cycy、正十八烷烴（n-octadecane，C18）、MOSH洗脫終止標(biāo)記物膽甾烷（5-α-cho lestane，Cho）、MOAH洗脫開始標(biāo)記物1,3,5-三叔丁基苯（1,3,5-tri-tert-butylbenzene，TBB）、C7～C40正構(gòu)烷烴混合標(biāo)準(zhǔn)溶液（均為色譜純） 美國(guó)Sigma-A ldrich公司。

1.2 儀器與設(shè)備

GC-2010 p lus氣相色譜儀（配備程序升溫蒸發(fā)進(jìn)樣器和FID） 日本Shimadzu公司；N-EVAP氮?dú)獯蹈蓛x美國(guó)Organom ation公司；M illi-Q超純水設(shè)備 美國(guó)M illipore公司；HY-5A型回旋式振蕩器 江蘇省金壇市榮華儀器制造有限公司；5 m L玻璃注射器（內(nèi)徑13 mm） 上海玻利鴿工貿(mào)有限公司。

1.3 方法

1.3.1 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制

分別配制10 mg/m L的C18、Cho、TBB、Cycy貯備液。各取0.5 m L C18、Cho、TBB貯備液置于50 m L容量瓶，用正己烷定容得到100 m g/L混合標(biāo)準(zhǔn)溶液；取Cycy貯備液1 m L置于50 m L容量瓶，用正己烷定容得到200 mg/L內(nèi)標(biāo)溶液。

配制50 g/L液體石蠟貯備液，然后分別取2、5、10、20、50、100、500 μL于50 m L容量瓶中，正己烷定容得到質(zhì)量濃度為2、5、10、20、50、100、500 mg/L的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液。

1.3.2 樣品提取

分別稱取嬰兒配方奶粉樣品10.0 g于50 m L具塞錐形瓶中，加入60 μL 200 mg/L Cycy內(nèi)標(biāo)溶液，20 m L正己烷溶劑，振蕩2 h后靜置過(guò)夜。取10 m L上清液氮吹濃縮，并定容至1 m L備用。

1.3.3 樣品純化

1.3.3.1 0.3%硝酸漬硅膠制備

稱取99 g硅膠于1 000 m L鋁箔紙包裹外壁的圓底燒瓶中，用玻璃滴管逐滴加入1%硝酸銀溶液100 m L，然后用旋蒸儀繼續(xù)混勻2～3 h，靜置12 h后放入125 ℃烘箱干燥12 h。稱取37 g上述銀漬硅膠與63 g活化硅膠混勻得到0.3%硝酸銀漬硅膠，干燥器內(nèi)避光保存，2 周內(nèi)使用。

1.3.3.2 SPE柱制備

取5 m L玻璃注射器（外層包裹鋁箔紙），底部放入圓形玻璃纖維濾紙（經(jīng)正己烷浸泡過(guò)夜），裝填3 g銀漬硅膠，輕輕敲實(shí)，上面再放入一層濾紙。用10 m L正己烷預(yù)淋洗SPE柱，棄去流出液，待液面近干時(shí)，加入1 m L上清液（1.3.2節(jié)），待上清液近干時(shí)，用10 m L正己烷洗脫，棄去先前流出的2 m L死體積洗脫液，收集后續(xù)的5 m L洗脫液，濃縮至0.2 m L，備用。

1.3.4 色譜條件

色譜柱：A g i len t D B-5H T石英毛細(xì)管柱（15 m×0.25 mm，0.1 μm）；載氣為高純氮?dú)?，恒壓模式，壓?0 kPa；進(jìn)樣量40 μL。

PTV參數(shù)：初始溫度45 ℃，保持1 m in（分流閥打開，分流比200∶1），以250 ℃/m in升溫至360 ℃并保持27 m in，分流閥關(guān)閉2 m in，使目標(biāo)組分進(jìn)入分析柱；隨后打開分流閥，分流比為100∶1，吹走襯管中殘留物質(zhì)。

GC分析條件：起始溫度35 ℃，保持3 m in，然后以25 ℃/m in升溫至350 ℃，再以5 ℃/m in升溫至370 ℃，保持10 m in；FID溫度380 ℃。

2 結(jié)果與分析

2.1 樣品提取

MOSH是非極性有機(jī)物，根據(jù)相似相溶原理，常用正己烷、異辛烷、正庚烷或者正構(gòu)烷烴混合物（沸點(diǎn)65～75 ℃）提取食品中的MOSH。異辛烷、正庚烷沸點(diǎn)高于正己烷，樣品提取液濃縮時(shí)需要更長(zhǎng)的揮發(fā)時(shí)間，因此選取正己烷作為樣品中MOSH提取溶劑。奶粉中的脂肪被酪蛋白包裹，須用堿性乙醚法或者酸水解法破壞酪蛋白使脂肪游離出來(lái)后實(shí)現(xiàn)脂肪的完全提取，但本實(shí)驗(yàn)主要關(guān)注嬰兒配方奶粉中外部引入（食品包裝、加工等）的MOSH的污染情況，因此，采用正己烷浸泡過(guò)夜法對(duì)奶粉中MOSH進(jìn)行提取[8]。

2.2 樣品凈化

SPE柱凈化的關(guān)鍵是填料。硅膠能夠有效吸附甘油三酯，是去除樣品中油脂的首選填料。此外，硅膠經(jīng)過(guò)活化（400～600 ℃灼燒4～6 h）不僅可以增大吸附容量，而且能夠消除外來(lái)干擾。同時(shí)，硝酸銀漬硅膠具有吸附角鯊烯等烯烴干擾物的作用[13]。因此，采用的3 g的銀漬硅膠（0.3%）作為SPE柱填料（1.3.3.1節(jié)）用于吸附奶粉提取液中的油脂和烯烴，從而達(dá)到凈化礦物油的目的。

SPE柱的長(zhǎng)徑比（即分離塔板數(shù)）對(duì)于分離效果也會(huì)產(chǎn)生影響。由于目前尚沒(méi)有凈化食品中礦物油的商品化SPE柱，本實(shí)驗(yàn)參考Fiselier等[14]應(yīng)用的內(nèi)徑11 mm玻璃柱，定制了同樣內(nèi)徑的玻璃分離柱，并同時(shí)比較了5 m L玻璃注射器（內(nèi)徑13 mm）制備的SPE柱對(duì)1 m L奶粉基質(zhì)下混和標(biāo)準(zhǔn)溶液（C18、Cho、TBB）的分離效果。實(shí)驗(yàn)方法為將0.1 m L混和標(biāo)準(zhǔn)溶液（1.3.1節(jié)）加入奶粉提取液并定容至1 m L，分別上樣至兩種內(nèi)徑的SPE柱，采用正己烷洗脫，洗脫液每流出1 m L即注入GC分析。結(jié)果表明：兩種內(nèi)徑SPE柱的死體積均為2 m L，隨后都流出了MOSH的標(biāo)記物C18和Cho，然后均在第8管開始流出MOAH前端的標(biāo)記物TBB（圖1）。通常，同等量的柱填料裝入不同內(nèi)徑的SPE柱中，柱管內(nèi)徑越小，填料長(zhǎng)度越長(zhǎng)，相應(yīng)的塔板數(shù)越高，分離效果越好。實(shí)驗(yàn)結(jié)果也表明：內(nèi)徑11 mm的SPE柱在第7管完成了MOSH的全部分離，即C18和Cho全部流出（圖1A）；然而，內(nèi)徑13 mm凈化柱到7管也收集到了99%以上MOSH，僅有極少量（1%以下）C18和Cho在第8管與TBB共流出（圖1B）。由于實(shí)際應(yīng)用中玻璃注射器方便易得、價(jià)格便宜。因此，本實(shí)驗(yàn)采用5 m L玻璃注射器作為凈化礦物油的SPE柱。

圖1 混合標(biāo)準(zhǔn)溶液經(jīng)過(guò)內(nèi)徑11 mm（A）和內(nèi)徑13 mm（B）SPE柱的洗脫順序Fig. 1 Selective elution of m ixture standard solution through SPE column w ith 11 mm and 13 mm i.d.

2.3 樣品分析

2.3.1 PTV初始溫度的確定

圖2 PTV優(yōu)化條件下C10～C40的峰面積Fig. 2 Peak areas of n-alkanes (C10–C40）in GC chromatogram under optimal PTV conditions

MOSH由不同碳數(shù)的烷烴組成，碳數(shù)越低，沸點(diǎn)越低，如若PTV進(jìn)樣口的溫度過(guò)高則會(huì)造成低沸點(diǎn)物質(zhì)的揮發(fā)損失。本實(shí)驗(yàn)采用C7～C40正構(gòu)烷烴標(biāo)準(zhǔn)溶液（2 mg/L）直接注入GC，考察進(jìn)樣過(guò)程的揮發(fā)損失。由圖2可見，正構(gòu)烷烴中C10～C40的峰面積基本一致，說(shuō)明C10之后的烷烴幾乎沒(méi)有揮發(fā)損失。即進(jìn)樣口初始溫度設(shè)為45 ℃時(shí)可以有效抑制低沸點(diǎn)物質(zhì)的分流逸出。因此，本實(shí)驗(yàn)選用該進(jìn)樣條件用于奶粉中MOSH的定量分析。此外，該實(shí)驗(yàn)結(jié)果也表明可以選擇C10或碳數(shù)更高的烷烴作為MOSH的定量?jī)?nèi)標(biāo)。

2.3.2 GC升溫速率的確定

MOSH的GC譜圖為跨度較長(zhǎng)保留時(shí)間的一個(gè)寬峰（或“駝峰”），為了縮短保留時(shí)間，增大寬峰的高度便于定量。通常，程序升溫的速率越快，寬峰越“尖銳”，分析靈敏度越高。文獻(xiàn)中大多采用的升溫速率為20～25℃/m in，有的高達(dá)50℃/m in[8]。為了保持譜圖的基線穩(wěn)定，本實(shí)驗(yàn)優(yōu)化GC的升溫程序?yàn)椋浩鹗紲囟?5 ℃（保持3 m in），選擇25 ℃/m in升溫至350 ℃，再以5 ℃/m in升溫至370 ℃（保持10 m in）。

2.3.3 定量方法的確定

內(nèi)標(biāo)法定量可以有效避免進(jìn)樣量與樣品制備過(guò)程對(duì)分析準(zhǔn)確度的影響[8]。一般內(nèi)標(biāo)法要求內(nèi)標(biāo)物應(yīng)不受待測(cè)樣品中各組分的干擾，保留時(shí)間相近，但又必須可以完全分開。然而，由于MOSH呈寬峰形式，不同樣品MOSH寬峰位置會(huì)有偏左或偏右的位移（因?yàn)椴煌瑏?lái)源MOSH的組成不盡相同，其碳數(shù)范圍也略有差異），因此，選擇一個(gè)與之完全分離的內(nèi)標(biāo)物較為困難。

圖3 嬰兒配方奶粉提取液中MOSH的GC譜圖Fig. 3 GC chromatogram of MOSH in supernatant of infant formula

測(cè)定食用油中的MOSH的國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)（ISO 17780）的定量?jī)?nèi)標(biāo)采用C18[28]。由圖3可知，奶粉提取液的GC譜圖中存在C18的共流出物，因此，不能采用C18作為奶粉中MOSH的定量?jī)?nèi)標(biāo)。而MOSH寬峰右邊的高沸點(diǎn)烷烴（如C40）的溶解性較差[8]。經(jīng)過(guò)反復(fù)實(shí)驗(yàn)，本實(shí)驗(yàn)選取Cycy作為奶粉提取液中MOSH的定量?jī)?nèi)標(biāo)，其出峰位置在C13附近，樣品的共流出干擾物較少，且不存在揮發(fā)損失。

2.4 方法學(xué)考察

2.4.1 線性范圍

將1.3.1節(jié)配制的液體石蠟系列工作溶液，在1.3.4節(jié)條件下分析。以GC譜圖中的寬峰面積（y）與相應(yīng)質(zhì)量濃度（x）繪制曲線，所得標(biāo)準(zhǔn)曲線為y = 47 554x-37 294，相關(guān)系數(shù)0.999，說(shuō)明液體石蠟在2～500 mg/L質(zhì)量濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

2.4.2 定量限

定量限根據(jù)注入GC-FID的MOSH的濃度和體積確定。一般經(jīng)驗(yàn)認(rèn)為注入FID的MOSH為50 ng以上時(shí)，其形成的GC寬峰才能滿足定量要求[8]。本實(shí)驗(yàn)將5.0 g奶粉上清液濃縮至1 m L，經(jīng)SPE柱凈化，將5 m L洗脫液濃縮至0.2 m L，注入GC-FID分析的體積為40 μL，即1.0 g奶粉被注入FID分析，因此對(duì)應(yīng)的奶粉中MOSH的LOQ為0.05 mg/kg。

2.4.3 回收率實(shí)驗(yàn)結(jié)果

任意選取一種奶粉作為樣品基質(zhì)，分別添加液體石蠟標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行回收率實(shí)驗(yàn)，添加量為0.5、1.0、2.0 mg/kg。提取液經(jīng)3 g銀漬硅膠SPE柱凈化，每個(gè)試樣及空白分別平行測(cè)定3 次，計(jì)算平均加標(biāo)回收率和相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（表1）。結(jié)果表明，加標(biāo)回收率在92.62%～102.86%之間，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差在0.85%～2.57%之間，該方法的回收率和相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差均符合檢測(cè)要求。

表1 液體石蠟的加標(biāo)回收率和相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（n= 3）Table 1 Recoveries and RSD of paraffin oil (n= 3)

2.5 實(shí)際樣品的檢測(cè)

表2 市售嬰兒配方奶粉中的MOSH含量Table 2 Contents of MOSH in commercial in fant formu la

本實(shí)驗(yàn)采用上述方法，檢測(cè)了市售不同廠家與品牌嬰兒配方奶粉中MOSH含量，結(jié)果見表2。結(jié)果表明，10 個(gè)嬰兒配方奶粉中只有樣品4和5未檢出MOSH，其余8 個(gè)樣品的MOSH含量在0.24～1.30 mg/kg之間，其中4 個(gè)樣品的C16～C35含量在0.12～0.30 mg/kg之間，其余4 個(gè)樣品的含量為0.66～0.85 mg/kg。按照聯(lián)合國(guó)糧農(nóng)組織和世界衛(wèi)生組織的食品添加劑聯(lián)合專家委員會(huì)規(guī)定的中低黏度礦物油（Ⅱ類和Ⅲ類）的每日容許攝入量（acceptable daily intake，ADI）0.01 mg/kg bw估算[29-30]，如果液體配方奶中含10%奶粉，嬰兒每日奶量800 m L，那么對(duì)于一個(gè)5 kg的嬰兒，每日即攝入80 g配方奶粉，對(duì)應(yīng)的礦物油的特定遷移量（specific m igration lim it，SML）為0.625 mg/kg。參照此限量，粗略估計(jì)我國(guó)市售嬰兒配方奶粉中的40%（4/10）超過(guò)了食品添加劑聯(lián)合專家委員會(huì)的ADI值，因此我國(guó)奶粉中的MOSH污染情況不容忽視。

嬰兒配方奶粉中MOSH來(lái)源廣泛，主要污染可能來(lái)自于使用了含礦物油顏料印刷的回收包裝紙，也可能源于奶粉生產(chǎn)過(guò)程中添加的各種組分（如食用油）和生產(chǎn)過(guò)程中使用的潤(rùn)滑油等[1]。本實(shí)驗(yàn)僅選取我國(guó)市場(chǎng)上的10 個(gè)嬰兒配方奶粉作為樣本，后續(xù)將加大樣本量并判斷可能的污染來(lái)源，從而為監(jiān)管嬰兒配方奶粉安全提供技術(shù)基礎(chǔ)。

3 結(jié) 論

建立一種離線SPE結(jié)合LVI-GC-FID法測(cè)定嬰兒配方奶粉中MOSH的方法，正己烷作為提取溶劑，凈化采用市售5 m L玻璃注射器裝填3 g銀漬硅膠SPE柱，凈化洗脫液經(jīng)濃縮后注入LV I-GC-FID分析，其結(jié)果滿足方法學(xué)考察要求。與在線聯(lián)用的HPLC-GC-FID相比，離線SPE-LVI-GC-FID方法操作簡(jiǎn)單、成本低，適用于普通實(shí)驗(yàn)室對(duì)嬰兒配方奶粉中MOSH的檢測(cè)。本實(shí)驗(yàn)測(cè)定了10 個(gè)市售嬰兒配方奶粉中MOSH的含量，結(jié)果表明：僅有2 個(gè)樣品未檢出，其中40%的樣品中MOSH（C16～C35）的含量超過(guò)了食品添加劑聯(lián)合專家委員會(huì)規(guī)定的ADI值，因此建議相關(guān)部門加強(qiáng)嬰兒配方奶粉中礦物油污染物的監(jiān)管。

[1] European Food Safety Authority (EFSA). Scientific opinion on m ineral oil hydrocarbons in food[J]. EFSA Journal, 2012, 10(6): 2704.DOI:10.2903/j.efsa.2012.2704.

[2] GROB K, BIEDERMANN M, GARAMASCHI A, et al. LC-GC analysis of the aromatics in a m ineral oil fraction: batching oil for jute bags[J]. Journal of High Resolution Chromatography, 1991, 14(1):33-39. DOI:10.1002/jhrc.1240140109.

[3] 張閩, 曹萬(wàn)新, 史宣明, 等. 食用油脂生產(chǎn)中礦物油污染及檢測(cè)方法的研究進(jìn)展[J]. 中國(guó)油脂, 2015, 40(3): 62-65.

[4] 武彥文, 王穎, 李冰寧, 等. 定量分析食品中的礦物油污染物[J].食品安全質(zhì)量檢測(cè)學(xué)報(bào), 2015, 6(6): 2145-2150.

[5] BARP L, KORNAUTH C, WUERGER T, et al. M ineral oil in human tissues, Part I: Concentrations and molecular mass distributions[J].Food Chem ical Toxicology, 2014, 72: 312-321. DOI:10.1016/j.fct.204.04.029.

[6] GROB K. Update on recycled paperboard and its compliance for food contact[J]. Journal of Consumer Protection and Food Safety, 2014,9(3): 213-219. DOI:10.1007/s00003-014-0903-y.

[7] VOLLMER A, BIEDERMANN M, GRUNDB?CK F, et al. M igration of m ineral oil from printed paperboard into dry foods: survey of the German market[J]. European Food Research and Technology, 2011,232(3): 175-182. DOI:10.1007/s00217-010-1376-6.

[8] BIEDERMANN M, GROB K. On-line coup led high performance liquid chromatography-gas chromatography for the analysis of contamination by mineral oil. Part 1: Method of analysis[J]. Journal of Chromatography A, 2012, 1255(17): 56-75. DOI:10.1016/j.chroma.2012.05.095.

[9] MORET S, GROB K, CONTE L S. On-line high-performance liquid chromatography-solvent evaporation-high-performance liquid chromatography-capillary gas chromatography-flame ionisation detection for the analysis of m ineral oil polyaromatic hydrocarbons in fatty foods[J]. Journal of Chromatography A, 1996, 750(1/2): 361-368.DOI:10.1016/0021-9673(96)00453-0.

[10] BARP L, PURCARO G, MORET S, et al. A high-sample-throughput LC-GC method for m ineral oil determ ination[J]. Journal Separation Science, 2013, 36(18): 3135-3139. DOI:10.1002/jssc.201300114.

[11] PURCARO G, ZOCCALI M, TRANCHIDA P Q, et al. Comparison o f tw o different multidimensional liquid-gas chromatography interfaces for determ ination of m ineral oil saturated hydrocarbons in foodstuffs[J]. Analytical and Bioanalytical Chem istry, 2013, 405(2/3):1077-1084. DOI:10.1007/s00216-012-6535-0.

[12] MORET S, BARP L, GROB K, et al. Optimised off-line SPE-GC-FID method for the determination of m ineral oil saturated hydrocarbons(MOSH) in vegetab le oils[J]. Food Chem istry, 2011, 129(4):1898-1903. DOI:10.1016/j.foodchem.2011.05.140.

[13] MORET S, BARP L, PURCARO G, et al. Rapid and sensitive solid phase extraction-large volume injection-gas chromatography for the analysis of m ineral oil saturated and aromatic hydrocarbons in cardboard and dried foods[J]. Journal of Chromatography A, 2012,1243(12): 1-5. DOI:10.1016/j.chroma.2012.04.040.

[14] FISELIER K, GRUNDB?CK F, SCH?N K, et al Development of a manual method for the determ ination of m ineral oil in foods and paperboard[J]. Journal of Chromatography A, 2013, 1271(1): 192-200.DOI:10.1016/j.chroma.2012.11.034.

[15] TRANCHIDA P Q, ZOCCALI M, PURCARO G, et al. A rapid multidimensional liquid-gas chromatography method for the analysis of m ineral oil saturated hydrocarbons in vegetable oils[J]. Journal of Chromatography A, 2011, 1218(48): 7476-7480. DOI:10.1016/j.chroma.2011.06.089.

[16] FIORINI D, FISELIER K, BIEDERMANN M, et al. Contam ination of grape seed oil w ith m ineral oil paraffins[J]. Journal of Agricultural and Food Chemistry, 2008, 56(23): 11245-11250. DOI:10.1021/jf802244r.

[17] 劉玲玲, 武彥文, 李冰寧, 等. 固相萃取-大體積進(jìn)樣-氣相色譜法定量分析油茶籽油中的礦物油[J]. 分析化學(xué), 2016, 44(9): 1419-1424.DOI:10.11895/j.issn.0253-3820.160138.

[18] ZOCCALI M, BARP L, BECCARIA M, et al. Im provement of m ineral oil saturated and aromatic hydrocarbons determ ination in edible oil by liquid-liquid-gas chromatography w ith dual detection[J].Journal Separation Science, 2016, 39(3): 623-631. DOI:10.1002/jssc.201501247.

[19] LI B N, WU Y W, LIU L L, et al. Determination of mineral oil-saturated hydrocarbons (MOSH) in vegetable oils by large scale off-line SPE Combined w ith GC-FID[J]. Journal of the American Oil Chem ists’Society, 2017, 94(2): 215-223. DOI:10.1007/s11746-016-2936-0.

[20] BIEDERMANN M, GROB K. Is recycled newspaper suitable for food contact materials? Technical grade m ineral oils from printing inks[J].European Food Research and Technology, 2010, 230(5): 785-796.DOI:10.1007/s00217-010-1223-9.

[21] BARP L, SUMAN M, LAMBERTINI F, et al. M igration of selected hydrocarbon contam inants into dry semolina and egg pasta packed in direct contact w ith virgin paperboard and polypropylene fi lm[J]. Food Additives & Contam inants: Part A, 2015, 32(9): 1542-1551. DOI:10.1 080/19440049.2015.1075176.

[22] BIEDERMANN-BREM S, GROB K. Removal of m ineral oil m igrated from paperboard packing during cooking of foods in boiling water[J].European Food Research and Technology, 2011, 232: 1035-1041.DOI:10.1007/s00217-011-1478-9.

[23] 安紅梅, 柯潤(rùn)輝, 劉秀, 等. 固相萃取結(jié)合氣相色譜-火焰離子化檢測(cè)器分析面包中飽和烴類礦物油的方法研究[J]. 食品與發(fā)酵工業(yè),2016, 42(1): 152-156. DOI:10.13995/j.cnki.11-1802 /ts.201601028.

[24] CONCIN N, HOFSTETTER G, PLATTNER B, et al. M ineral oil paraffins in human body fat and m ilk[J]. Food and Chem ical Toxicology, 2008, 46(2): 544-552. DOI:10.1016/j.fct.2007.08.036.

[25] NOTI A, GROB K, BIEDERMANN M, et al. Exposure of babies to C15-C45m ineral paraffins from human m ilk and breast salves[J].Regulatory Toxicology and Pharmacology, 2003, 38(3): 317-325.DOI:10.1016/S0273-2300(03)00098-9.

[26] MONDELLO L, ZOCCALI M, PURCARO G, et al. Determ ination of saturated-hydrocarbon contam ination in baby foods by using online liquid-gas chromatography and off-line liquid chromatographycom p rehensive gas ch rom atog raphy com bined w ith m ass spectrometry[J]. Journal of Chromatography A, 2012, 1259: 221-226.DOI:10.1016/j.chroma.2012.03.096.

[27] 李冰寧, 劉玲玲, 張貞霞, 等. 銀離子固相萃取-程序升溫大體積進(jìn)樣-氣相色譜法定量分析市售巧克力中的飽和烷烴礦物油[J]. 分析化學(xué), 2017, 45(4): 514-520. DOI:10.11895/j.issn.0253-3820.160828.

[28] International Organization for Standardization. Animal and vegetable fats and oils determination of aliphatic hydrocarbons in vegetable oils:ISO 17780:2015(E)[S]. Sw itzerland: ISO copyright office, 2015: 1-29.

[29] World Health Organization. Evaluation of certain food additives[R].Geneva: WHO, 2002.

[30] Joint FAO/WHO Expert Comm ittee on Food Additives. Summary of evaluations performed by the joint FAO/WHO expert comm ittee on food additives[EB/OL].(2003-04-25). http://www.inchem.org/documents/jecfa/jeceval/jec_1655.htm.

Off-Line Solid Phase Extraction-Large Volume Injection-Gas Chromatography-Flame Ionization Detection(SPE-LVI-GC-FID) for the Analysis of M ineral Oil Saturated Hydrocarbons (MOSH) in Infant Formula

LIU Lingling1, ZHANG Zhenxia2, LI Bingning1, WU Yanwen1,*
(1. Beijing Center for Physical and Chemical Analysis, Beijing Food Safety Analysis and Testing Engineering Research Center,Key Laboratory of Analysis and Testing, Beijing Academy of Science and Technology, Beijing 100089, China;2. Xi’an Communication Institute, National University of Defense Technology, Xi’an 710106, China)

An alternative method based on an off-line solid phase extraction (SPE) combined w ith large volume injection-gas chromatography-flame ionization detection (LVI-GC-FID) was developed to determ ine mineral oil saturated hydrocarbons(MOSH) in infant formula. The MOSH in samples were extracted w ith n-hexane. The extract was purified by solid phase extraction (SPE) on a column packed w ith silica gel impregnated silver nitrate and the optimal SPE cartridge was 5 m L glass syringe as indicated by comparison of different length to diameter ratios. Five m illiliter of the pooled eluate was concentrated and then injected into the LVI-GC-FID system. The PTV parameters were as follows: the initial temperature was set at 45 ℃and held for 1 min (split ratio was 200:1), then increased to 360 ℃ at a linear gradient of 250 ℃/min and held for 27 min (split valve was closed for 2 m in followed by split ratio of 100:1). The GC column was heated from 35 ℃ (3 m in) to 350 ℃ at 25 ℃/min, and then raised to 370 ℃ (10 min) at 5 ℃/min. FID temperature was set at 380 ℃. The GC injection volume was 40 μL. The calibration curve of paraffin oil was linear in the range of 2–500 mg/kg w ith correlation coefficient of 0.999. The quantification limit (LOQ) of MOSH in infant formula was 0.05 mg/kg. The recoveries from spiked samples were between 92.62% and 102.86%, w ith relative standard deviation (RSD) of 0.85%–2.57%. This procedure was appliedto analyze MOSH in 10 commercial infant formula samples and the contam inant levels ranged from 0.24 to 1.30 mg/kg(0.12-0.85 mg/kg of MOSH between C16and C35). The results suggested that it is necessary to routinely detect m ineral oil contamination in infant formula for infant health.

infant formula; m ineral oil-saturated hydrocarbons (MOSH); SPE; LVI-GC-FID

2016-11-14

北京市科技計(jì)劃課題（Z161100000616005）；北京市科學(xué)技術(shù)研究院財(cái)政專項(xiàng)（PXM 2016_178305_000013；PXM 2017_178305_000001）

劉玲玲（1987—），女，碩士，主要從事食品分析方法研究。E-mail：lingling2@163.com

*通信作者：武彥文（1973—），女，研究員，博士，主要從事食品與油脂分析研究。E-mail：wu_yanwen@163.com

10.7506/spkx1002-6630-201722045

TS201.6

A

1002-6630（2017）22-0303-06

劉玲玲, 張貞霞, 李冰寧, 等. 離線SPE-LVI-GC-FID法分析嬰兒配方奶粉中的飽和烴類礦物油[J]. 食品科學(xué), 2017,38(22): 303-308. DOI:10.7506/spkx1002-6630-201722045. http://www.spkx.net.cn

LIU Lingling, WU Yanwen, LI Bingning, et al. Off-line solid phase extraction-large volume injection-gas chromatographyflame ionization detection (SPE-LVI-GC-FID) for the analysis of m ineral oil saturated hydrocarbons (MOSH) in infant formula[J]. Food Science, 2017, 38(22): 303-308. (in Chinese w ith English abstract)

10.7506/spkx1002-6630-201722045. http://www.spkx.net.cn