金如意，郭崇炎，王志龍，陳秋紅，胡方志

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南高叢藍(lán)莓快繁體系的建立

金如意，郭崇炎#，王志龍*，陳秋紅*，胡方志

(湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)院，湖南長沙 410128)

為建立一套完整、高效的藍(lán)莓快繁體系，以南高叢藍(lán)莓‘南金’的幼嫩枝條為試驗材料，取帶腋芽的莖段為外植體，分別進(jìn)行外植體消毒、叢生芽誘導(dǎo)、組培苗繼代增殖、組培苗生根和組培苗移栽試驗。結(jié)果表明：用5% NaClO溶液消毒10 min、用0.1% HgCl2溶液消毒7 min時外植體的消毒效果最好；藍(lán)莓莖段誘導(dǎo)形成叢生芽的最佳培養(yǎng)基是改良WPM+ZT 4.0 mg/L，增殖倍數(shù)達(dá)3.86，平均芽高為19.4 mm；組培苗最佳繼代增殖培養(yǎng)基是改良WPM+ZT 1.0 mg/L，增殖倍數(shù)為1.82，平均株高達(dá)44.7 mm；組培苗最佳生根培養(yǎng)基組合是改良1/4 WPM+IBA 0.5 mg/L+NAA 1.0 mg/L；組培苗最佳移栽基質(zhì)是蛭石+草炭土(體積比1∶1)，移栽成活率可達(dá)96.95%。

南高叢藍(lán)莓；誘導(dǎo)培養(yǎng)；繼代培養(yǎng)；生根培養(yǎng)；植物激素

藍(lán)莓為杜鵑花科(Ericaceae)越橘屬()植物[1]。中國對藍(lán)莓的研究始于20世紀(jì)80年代初。自2000年產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)栽培以來，中國的藍(lán)莓種植面積迅速增加，優(yōu)質(zhì)藍(lán)莓種苗的市場需求不斷擴(kuò)大[2]。藍(lán)莓的繁殖方法較多，生產(chǎn)中常用的有種子育苗、綠枝扦插、分株嫁接等[3–5]，但這些方法的繁殖較慢，品種容易退化。采用組織培養(yǎng)技術(shù)可以對藍(lán)莓苗木進(jìn)行規(guī)?；a(chǎn)，提高效率，降低成本，保持品種的優(yōu)良特性[6]。該技術(shù)是當(dāng)前藍(lán)莓大量繁殖的重要技術(shù)之一。

南高叢藍(lán)莓‘南金’為早熟品種，其樹勢強(qiáng)，為開張型，枝梢多，花芽多；單株可以結(jié)果，無需授粉樹；其葉片窄小，適宜在南方高溫、高濕條件下生長；其果肉緊實，果粉多，含糖量高，酸甜比適中，風(fēng)味濃郁，果蒂痕小而干，耐貯藏，耐運(yùn)輸。‘南金’藍(lán)莓在江西、湖南等地區(qū)5月上中旬即可成熟，適宜在長江中下游地區(qū)種植[7]。目前，藍(lán)莓組織培養(yǎng)育苗仍存在繁殖系數(shù)較低、生根率不高等問題[8]。筆者通過‘南金’藍(lán)莓的組織培養(yǎng)試驗，旨在建立一套較完整的藍(lán)莓苗木快繁體系。

1　材料與方法

1.1　材料

試驗材料為從浙江引進(jìn)的南高叢藍(lán)莓品種‘南金’。以春天新生的帶腋芽半木質(zhì)化幼嫩莖段為外植體。

1.2　方法

1.2.1培養(yǎng)條件

以改良WPM為基礎(chǔ)培養(yǎng)基，通過改變激素種類及其濃度來配置不同的誘導(dǎo)、繼代、生根培養(yǎng)基。各培養(yǎng)基中瓊脂糖最終質(zhì)量濃度為6 g/L，蔗糖最終質(zhì)量濃度為30 g/L，pH值為5.2。各培養(yǎng)基均在121 ℃、131 kPa條件下滅菌20 min。試驗植物進(jìn)行組織培養(yǎng)的室內(nèi)溫度為(25±2)℃，光照度為2 000~ 2 500 lx，每天光照14 h。試驗中用于組培苗誘導(dǎo)和繼代的植物激素為6–BA(6–芐氨基腺嘌呤)、ZT(玉米素)、TDZ(噻二唑苯基脲)，用于生根的植物激素為IBA(吲哚丁酸)和NAA(1–萘乙酸)。

1.2.2外植體消毒處理

剪取外植體，立即用洗潔精溶液清洗其表面灰塵等污物，用自來水沖洗3 h，接著用無菌水漂洗5次。將外植體鋪于超凈工作臺上，吹干其表面水分，剪除外植體所有葉片。在超凈工作臺上進(jìn)行消毒處理：將外植體剪成各含1個腋芽的小莖段(10~15 mm)，將小莖段在75%乙醇中浸泡30 s，再在5% NaClO溶液中分別浸泡5、10、15 min，在0.1% HgCl2溶液中分別浸泡3、5、7 min，用無菌水清洗4遍。用濾紙吸干其表面水分，將每個外植體的兩端各剪去1~2 mm莖段，接種于改良WPM培養(yǎng)基上(無任何激素添加)，5 d后統(tǒng)計外植體的污染率和存活率。

1.2.3組培苗誘導(dǎo)培養(yǎng)

將成功消毒后的外植體分別接種到含不同激素種類、不同激素濃度的改良WPM誘導(dǎo)培養(yǎng)基上。按6–BA質(zhì)量濃度0.5、1.0、2.0、3.0 mg/L，TDZ質(zhì)量濃度0.005、0.050、0.100、1.000 mg/L，ZT質(zhì)量濃度0.5、2.0、3.0、4.0 mg/L進(jìn)行組合，共設(shè)置12個處理。每個處理設(shè)置3次重復(fù)。每次重復(fù)接種1瓶培養(yǎng)基。每瓶培養(yǎng)基接種15個外植體。60 d后統(tǒng)計不同處理對外植體誘導(dǎo)分化的影響。

1.2.4組培苗繼代培養(yǎng)

將誘導(dǎo)培養(yǎng)中得到的生長健康、長勢相近的不定芽分別剪成10 mm左右的莖段，分別接種到含不同激素種類、不同激素濃度的改良WPM繼代培養(yǎng)基上。按6–BA質(zhì)量濃度0.25、0.50、1.00、1.50、2.00 mg/L，TDZ質(zhì)量濃度0.000 5、0.001 0、0.005 0、0.010 0、0.050 0 mg/L，ZT質(zhì)量濃度0.25、0.50、1.00、1.50、2.00 mg/L進(jìn)行組合，共設(shè)置15個處理。每個處理設(shè)置3次重復(fù)。每次重復(fù)接種1瓶培養(yǎng)基。每瓶培養(yǎng)基接種15個外植體。60 d后統(tǒng)計不同處理對外植體繼代培養(yǎng)的影響。

1.2.5組培苗生根培養(yǎng)

將健壯、長勢相近的藍(lán)莓繼代無菌苗剪成20 mm左右含頂端的莖段，分別豎直扦插入固體生根培養(yǎng)基中。選取培養(yǎng)基、IBA濃度、NAA濃度進(jìn)行三因素三水平正交試驗(表1)，每個處理接種25~30個莖段。60 d后統(tǒng)計相關(guān)數(shù)據(jù)，觀察組培苗生長狀況。

表1　生根培養(yǎng)正交試驗的因素與水平

1.2.6組培苗煉苗與移栽

在室溫環(huán)境下，將生根培養(yǎng)50 d后的組培瓶瓶蓋揭開，向瓶中加入適量無菌水進(jìn)行煉苗。煉苗4 d后，將組培苗根部的培養(yǎng)基用自來水洗凈除掉，之后將組培苗分別移栽于3種不同栽培基質(zhì)中，每天噴適量自來水保持基質(zhì)濕潤。30 d后統(tǒng)計組培苗移栽成活率及植株生長情況。3種栽培基質(zhì)分別為：1)體積比1∶1的河沙和草炭土；2)體積比1∶1的菜園土和草炭土；3)體積比1∶1的蛭石和草炭土。

1.2.7統(tǒng)計分析

用SPSS 22軟件和Excel 2013進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。

2　結(jié)果與分析

2.1　外植體消毒結(jié)果

由表2不同消毒處理對藍(lán)莓外植體消毒的效果可見，當(dāng)5% NaClO溶液和0.1% HgCl2溶液對外植體的消毒處理時間較短時，外植體的污染率較高，存活率較低；隨著5% NaClO溶液和0.1% HgCl2溶液消毒處理時間的增加，外植體的污染率隨之下降；但當(dāng)對外植體的消毒處理時間過長時，外植體的存活率隨之下降。在9個消毒處理方式中，當(dāng)5% NaClO溶液處理時間為15 min、0.1% HgCl2溶液處理時間為7 min時藍(lán)莓外植體的污染率最低，為30.11%，但此時外植體的存活率并非最高，為57.82。當(dāng)5% NaClO溶液處理時間為10 min、0.1% HgCl2溶液處理時間為7 min時藍(lán)莓外植體的存活率最高，達(dá)66.47%，因此認(rèn)為此方式是適宜消毒方式。

表2　不同消毒方式的消毒效果

2.2　誘導(dǎo)培養(yǎng)結(jié)果

由表3可見：當(dāng)6–BA濃度從0.5 mg/L增大至3.0 mg/L時，叢生芽平均增殖倍數(shù)呈先升高后降低趨勢，平均芽高亦呈現(xiàn)出先升高后降低的趨勢；當(dāng)6–BA濃度為1.0 mg/L時，叢生芽的平均增殖倍數(shù)達(dá)3.26，平均芽高為12.4 mm，叢芽較高，量較多，長勢良好；當(dāng)ZT濃度從0.5 mg/L增大至4.0 mg/L時，叢生芽平均增殖倍數(shù)明顯升高，平均芽高亦保持在較高水平；當(dāng)ZT濃度為4.0 mg/L時，叢生芽的平均增殖倍數(shù)達(dá)3.86(所有處理中最高)平均芽高達(dá)19.4 mm，叢生芽高，量多且長勢好。當(dāng)TDZ濃度從0.005 mg/L增大至1.000 mg/L時，叢生芽平均增殖倍數(shù)明顯降低，平均芽高亦明顯降低；當(dāng)TDZ濃度為0.005 mg/L時，叢生芽的增殖倍數(shù)為3.21，平均芽高為11.5 mm，叢芽較高，量多，長勢良好。當(dāng)TDZ濃度大于0.050 mg/L時有無效芽產(chǎn)生。

表3　不同激素處理藍(lán)莓叢生芽的誘導(dǎo)效果

同列數(shù)據(jù)后小寫字母示＜0.05水平差異。

由圖1可以看出，隨著6–BA濃度的增加，誘導(dǎo)出叢生芽的數(shù)量呈現(xiàn)先增加后減少的趨勢，且叢生芽的高呈遞減趨勢。由圖2可以看出，4種不同濃度的ZT所誘導(dǎo)的叢生芽形態(tài)相近，株高接近，節(jié)間長，生長勢旺，但叢生芽數(shù)量隨著ZT濃度的升高而增多，高濃度ZT促進(jìn)藍(lán)莓莖段叢生芽的誘導(dǎo)和生長。由圖3可以看出，隨著TDZ濃度的增加，誘導(dǎo)出叢生芽的數(shù)量急劇減少，芽高呈快速遞減趨勢；當(dāng)TDZ濃度大于0.050 mg/L時只可見一些小芽突形成的無效芽，高濃度的TDZ抑制藍(lán)莓莖段叢生芽的誘導(dǎo)和生長。

當(dāng)6–BA濃度為1.0 mg/L時，藍(lán)莓叢生芽增殖倍數(shù)較高，長勢優(yōu)良；隨著6–BA濃度升高，叢生芽明顯矮化，增殖倍數(shù)降低(圖1)。隨著ZT濃度的升高，叢生芽增殖倍數(shù)有所增加，長勢也有所提升；當(dāng)ZT濃度為4.0 mg/L時，叢生芽的長勢最好，植株健壯(圖2)。隨著TDZ濃度的升高，叢生芽生長明顯受到抑制，逐漸矮化，在基部形成愈傷組織(圖3)。綜合考慮叢生芽誘導(dǎo)的增殖倍數(shù)和長勢，本試驗中較適宜的藍(lán)莓誘導(dǎo)培養(yǎng)基為改良WPM + ZT 4.0 mg/L。

A、B、C、D分別為6–BA 質(zhì)量濃度0.5、1.0、2.0、3.0 mg/L。

A、B、C、D分別為ZT質(zhì)量濃度0.5、2.0、3.0、4.0 mg/L。

A、B、C、D分別為TDZ質(zhì)量濃度0.005、0.050、0.100、1.000 mg/L。

2.3　繼代培養(yǎng)結(jié)果

由表4可以看出，繼代培養(yǎng)中隨著6–BA濃度的增加，藍(lán)莓組培苗平均增殖倍數(shù)升高，但增殖組培苗的平均株高遞減；當(dāng)6–BA濃度為0.25 mg/L時，增殖組培苗的平均株高達(dá)各處理的最大值，為28.0 mm，但組培苗基部有少量叢芽生成，植株較矮，長勢一般。隨著ZT濃度的增加，藍(lán)莓組培苗平均增殖倍數(shù)升高，增殖組培苗的平均株高先上升后降低；當(dāng)ZT質(zhì)量濃度為1.00 mg/L時，平均株高達(dá)到最大值，為44.7 mm，植株基部有較多叢芽，組培苗健壯，長勢優(yōu)良；隨著TDZ濃度的增加，藍(lán)莓組培苗平均增殖倍數(shù)明顯升高，但增殖組培苗的平均株高明顯降低，長勢變差；當(dāng)TDZ濃度為0.001 0 mg/L，平均株高為33.9 mm，植株分枝數(shù)較多，較高，長勢良好，但當(dāng)TDZ濃度大于0.001 0 mg/L時，植株平均株高快速降低，長勢差。較低濃度的6–BA、ZT和TDZ都有利于提高藍(lán)莓組培苗的質(zhì)量。綜上所述，本試驗中較適宜的藍(lán)莓繼代培養(yǎng)基是改良WPM+ ZT 1.00 mg/L。

表4　不同激素處理下藍(lán)莓繼代增殖的效果

同列數(shù)字后英文字母示＜0.05水平差異。

2.4　生根培養(yǎng)

將繼代后的藍(lán)莓組培苗段接種于生根培養(yǎng)基上，培養(yǎng)10 d后基部切口處開始膨大，產(chǎn)生少量愈傷組織并有根形成。培養(yǎng)60 d后觀察組培苗生長狀況，統(tǒng)計相關(guān)數(shù)據(jù)。從表5可知，當(dāng)培養(yǎng)基為改良WPM時，無論培養(yǎng)基中激素如何改變，藍(lán)莓組培苗的生根率都很低，且在基部形成大量愈傷組織，根系短、弱、少。當(dāng)培養(yǎng)基濃度降低至改良1/2 WPM和改良1/4 WPM的濃度時，生根率有明顯提升，組培苗都能很好地生根且長勢良好(圖4)。

表5　藍(lán)莓生根培養(yǎng)正交試驗結(jié)果

A　改良WPM+IBA 0.5 mg/L +NAA 1.0 mg/L；B　改良1/2 WPM+IBA 1.0 mg/L +NAA 1.0 mg/L；C　改良1/4 WPM+IBA 0.5 mg/L +NAA 0.5 mg/L。

由表5生根率極差分析結(jié)果可知，試驗因素培養(yǎng)基、IBA濃度、NAA濃度對藍(lán)莓組培苗‘南金’生根率的影響依次減小。較佳的生根培養(yǎng)試驗組合為1/4WPM(培養(yǎng)基)+IBA 0.5 mg/L+NAA 1.0 mg/L。

由表6方差分析結(jié)果可知，培養(yǎng)基對藍(lán)莓組培苗生根率的影響很大，具有極顯著差異(<0.01)；IBA濃度、NAA濃度對藍(lán)莓組培苗生根率的影響不大(>0.05)。通過比較值可知，培養(yǎng)基、IBA濃度、NAA濃度對生根率的影響依次減小。

表6　單變量多因素試驗的方差分析

綜上可知，最適宜藍(lán)莓組培苗生根的培養(yǎng)基組合是改良1/4 WPM+IBA 0.5 mg/L +NAA 1.0 mg/L。

2.5　煉苗與移栽結(jié)果

藍(lán)莓組培苗經(jīng)煉苗移栽后培養(yǎng)30 d，以移栽基質(zhì)蛭石+草炭土(體積比1∶1)的移栽成活率最高，達(dá)96.95%，藍(lán)莓苗葉色濃綠，長勢健壯；菜園土+草炭土(體積比1∶1)的次之，為94.64%，藍(lán)莓苗長勢良好；河沙+草炭土(體積比1∶1)的最差，為88.96%，藍(lán)莓苗長勢較好，但有少量植株葉色泛黃?？梢?，蛭石+草炭土(體積比1∶1)為藍(lán)莓組培苗的較佳移栽基質(zhì)。

3　結(jié)論與討論

目前，部分藍(lán)莓的組培快繁體系已經(jīng)在MS、WPM、改良WPM等基本培養(yǎng)基基礎(chǔ)上成功建立。高叢藍(lán)莓‘Bluecrop’在WPM培養(yǎng)基上有較高的增殖系數(shù)和株高[9]。改良WPM具有更好的增殖效果[10–12]，所以，本試驗中采用改良WPM作為基本培養(yǎng)基。

選擇適宜的消毒劑種類和消毒時間是獲得良好消毒效果的重要因素。以藍(lán)莓莖段為外植體，先用75%乙醇消毒15 s，再用0.1% HgCl2消毒8 min，藍(lán)莓莖段成活率最高，達(dá)85.7%[13]。藍(lán)莓外植體采用70%乙醇浸泡30 s，2% NaClO溶液浸泡10 min，0.1% HgCl2溶液浸泡10 min后，污染率最低，成活率最高[14]。NaClO溶液屬于綠色消毒劑，對外植體的損傷小，易清洗掉，但對病菌的殺滅能力不強(qiáng)，消毒時間過短對病菌殺滅不徹底；升汞是外植體消毒中最常用的消毒試劑，毒力強(qiáng)，對病菌有強(qiáng)大殺滅作用，但升汞消毒時間過長，易損傷、殺死外植體，且消毒后難以去除殘余的汞[15]。本研究中采用5% NaClO溶液和0.1% HgCl2溶液作為組合消毒劑，隨著這2種消毒劑消毒時間的延長，外植體污染率均下降，且0.1% HgCl2溶液的消毒時間對污染率的影響明顯，但消毒時間過長時出現(xiàn)外植體褐化死亡，存活率降低，故認(rèn)為5% NaClO溶液消毒10 min、0.1% HgCl2溶液消毒7 min時藍(lán)莓外植體的消毒效果最好。

細(xì)胞分裂素對藍(lán)莓組培苗腋芽的誘導(dǎo)及繼代培養(yǎng)起重要作用[16]。本試驗中，6–BA對促進(jìn)藍(lán)莓生長、增殖的效果不明顯。這與李森等的研究結(jié)論[17]一致。TDZ作為一種人工合成激素，主要是通過調(diào)節(jié)內(nèi)源激素起作用[18]，具有細(xì)胞生長素和分裂素的雙重功能。TDZ對不定芽的誘導(dǎo)、增殖和愈傷組織形成等具有明顯的促進(jìn)作用[19–20]，且TDZ具有最適濃度效應(yīng)，濃度過低時作用效果不明顯，濃度過高時易產(chǎn)生毒害[21–22]。本研究結(jié)果表明，較低濃度的TDZ對藍(lán)莓的誘導(dǎo)和繼代能產(chǎn)生明顯的促進(jìn)作用。低濃度的TDZ可能通過去除頂端優(yōu)勢誘導(dǎo)器官發(fā)生，從而使得不定芽或側(cè)芽直接在培養(yǎng)的莖尖上形成[23]。在本試驗誘導(dǎo)培養(yǎng)過程中，TDZ的最適濃度為0.005 mg/L；在繼代培養(yǎng)過程中，TDZ的最適濃度為0.001 mg/L。高于這2個最適濃度時，藍(lán)莓叢生芽過度地呈簇狀生長，且植株明顯矮化，甚至在外植體基部形成大量愈傷組織，生長停滯。這可能是由過高濃度的TDZ使得植物體內(nèi)細(xì)胞分裂素與生長素失衡所致[24]?？梢姡谒{(lán)莓腋芽誘導(dǎo)、繼代培養(yǎng)時，使用較低濃度的TDZ就可以達(dá)到預(yù)期目標(biāo)。ZT對藍(lán)莓叢生芽的誘導(dǎo)和增殖具有顯著效果。ZT的使用一般可以讓植株長勢更為優(yōu)良，如玉米素能明顯影響藍(lán)莓離體繁殖的增殖效率和植株長勢[25–26]。本研究結(jié)果表明，最適宜的藍(lán)莓叢生芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基是改良WPM+ZT 4.0 mg/L，最適宜的藍(lán)莓繼代增殖培養(yǎng)基是改良WPM+ZT 1.0 mg/L。

生根難是藍(lán)莓組織培養(yǎng)過程中經(jīng)常面臨的一個關(guān)鍵問題。影響藍(lán)莓生根培養(yǎng)的因素有很多，比如基礎(chǔ)培養(yǎng)基組分、激素種類與濃度、光溫條件等，各因素間的作用復(fù)雜多變[27]。試驗結(jié)果表明，采用改良1/2 WPM、改良1/4 WPM培養(yǎng)基時的生根效果明顯好于改良WPM，這可能是由于過高濃度的鹽離子造成了較高的滲透壓，從而影響了植物細(xì)胞的分裂分化[17,28–29]。除培養(yǎng)基種類外，培養(yǎng)基中生長素的種類、濃度對組培苗生根也具有重要作用。本試驗中，IBA和NAA對藍(lán)莓生根都有一定的影響，IBA相比NAA更利于藍(lán)莓組培苗的生根。這和鄭理喬等的結(jié)論[30]相似。本研究中經(jīng)正交試驗優(yōu)化篩選后得到的最適藍(lán)莓組培苗生根培養(yǎng)基組合是改良1/4 WPM+IBA 0.5 mg/L+NAA 1.0 mg/L。

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責(zé)任編輯：王賽群

英文編輯：王庫

Rapid propagation system establishment for southern highbush blueberry

JIN Ruyi, GUO Chongyan#, WANG Zhilong*, CHEN Qiuhong*, HU Fangzhi

(College of Agricultural, Hunan Agriculture University, Changsha 410128, China)

In order to figure out the best experimental conditions and to establish a complete and efficient system for rapid propagation of blueberry, a series of experiments were conducted on explant sterilization, buds induction, subculture of tissue–cultured seedlings, rooting and transplanting of tissue–cultured seedlings by employed twigs of ‘South Golden’, a variety of southern highbush blueberries, stems with axillary buds were used as explants. The results indicated that the explants soaked in 5% NaClO solution for 10 min, then in 0.1% HgCl2solution for 7 min displayed the best effect in disinfection. Modified WPM with 4.0 mg/L ZT was the best medium for inducing buds, and the multiplication coefficient reached to 3.86, the average height of buds was 19.4 mm; modified WPM with 1.0 mg/L ZT was the best subculture medium, the multiplication coefficient was 1.82 and the average height of seedlings on this medium reached to 44.7 mm; modified 1/4WPM with 0.5 mg/L IBA and 1.0 mg/L NAA was considered as the best medium for inducing roots of tissue–cultured seedlings; vermiculite mixed with peat soil (the proportion of them was 1∶1) was the most appropriate substrate for transplanting and cultivating tissue–cultured seedling, the survival rate reached up to 96.95%.

southern highbush blueberry; induced culture; subculture; rooting culture; phytohormone

S663.9

A

1007-1032(2017)05-0504-08

2017–03–14

2017–05–05

教育部創(chuàng)新團(tuán)隊發(fā)展計劃項目(IRT1239)

金如意(1990—)，女，湖北黃梅人，碩士研究生，主要從事植物分子生物學(xué)及遺傳轉(zhuǎn)化研究，jry813@yeah.net；#共同第一作者，郭崇炎(1991—)，男，江西贛州人，碩士研究生，主要從事植物遺傳學(xué)及分子生物學(xué)研究，2413254779@qq.com；*通信作者，王志龍，博士，教授，主要從事水稻分子生物學(xué)及植物遺傳轉(zhuǎn)化研究，zhilongwang@126.com；*通信作者，陳秋紅，博士，講師，主要從事植物分子生物學(xué)及遺傳轉(zhuǎn)化研究，cqh924@163.com

投稿網(wǎng)址：http://xb.hunau.edu.cn