張 麗，成艷波，程煒軒，李 薇，陳金濤，謝黎煒，許國煥

(1.廣東省微生物研究所;省部共建華南應(yīng)用微生物國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室；廣東省微生物應(yīng)用新技術(shù)公共實(shí)驗(yàn)室；廣東省菌種保藏與應(yīng)用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廣州 510070；2.廣東碧德生物科技有限公司，廣州 510070)

組胺對(duì)黃顙魚生長及體色變異的影響

張 麗1,2，成艷波1，程煒軒1，李 薇1，陳金濤1，謝黎煒1，許國煥1

(1.廣東省微生物研究所;省部共建華南應(yīng)用微生物國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室；廣東省微生物應(yīng)用新技術(shù)公共實(shí)驗(yàn)室；廣東省菌種保藏與應(yīng)用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廣州 510070；2.廣東碧德生物科技有限公司，廣州 510070)

試驗(yàn)在基礎(chǔ)飼料中分別添加0、10、100、1 000 mg/kg的組胺，制成4種等氮飼料(分別記為C、H10、H100和H1000)，以黃顙魚(Pelteobagrusfulvidraco)(102.13±0.52) g 為試驗(yàn)對(duì)象，進(jìn)行56 d的養(yǎng)殖試驗(yàn)，研究不同添加水平組胺對(duì)黃顙魚生長、皮膚顯微結(jié)構(gòu)、皮膚黑色素含量、酪氨酸酶活力和腦中黑素皮質(zhì)素受體-1(MC1R)mRNA表達(dá)量的影響。試驗(yàn)采用微流水室內(nèi)養(yǎng)殖系統(tǒng)， 結(jié)果表明：飼料中添加不同量組胺對(duì)黃顙魚生長(增重率和特定生長率)無顯著影響(P>0.05)，而高組胺添加量組(H1000組，組胺含量1 390 mg/kg)黃顙魚皮膚中黑色素含量及腦組織中MC1R mRNA表達(dá)量顯著低于對(duì)照組(P<0.05)，低添加量組(H10和H100)黃顙魚皮膚黑色素含量和腦中MC1R mRNA表達(dá)量與對(duì)照組無差異(P>0.05)。隨著飼料中組胺添加量的增加，皮膚酪氨酸酶活力呈下降趨勢(shì)，但各組間差異不顯著(P>0.05)。結(jié)果表明：組胺對(duì)黃顙魚生長表現(xiàn)無影響，但會(huì)引起黃顙魚體色白化，且白化程度與飼料中組胺含量密切相關(guān)。

組胺；黃顙魚(Pelteobagrusfulvidraco)；黑色素；酪氨酸酶；黑素皮質(zhì)素受體-1

Abstract：Effects of histamine levels on the growth performance and body pigmentation ofPelteobagrusfulvidracowere tested via a 56-day culture trial.Four diets had been formulated，including a basal diet with no exogenous histamine inclusion，three diets with increasing histamine added (10，100 and 1 000 mg/kg，respectively) based on diet C.Each diet had been fed to triplicate tanks ofP.fulvidracowith an initial weight of (102.13±0.52)g which were reared in an in-door micro flow aquaculture system.And the results showed，the histamine level in dietary has no significant effect on growth performance viz.weight gain ratio (WGR，%) and specific growth rate (SGR，%/d).A decreased melanin content in skin and melanocortin 1-receptor (MC1R) mRNA expression quantity in brain were recorded of group fed diet with H1000，though has no significantly change of groups fed with diet H10 and H100，when compared to the group fed with diet C.However，increasing inclusion of histamine has no significant effect on tyrosinase activity of skin，though a decreasing tend was existed with increasing dietary histamine inclusion.To conclude，different histamine inclusion ofP.fulvidracodietary has no significant effect on growth performance，but a dose-dependent effect on skin melanin content and brain MC1R mRNA expression quantity was recorded.

Keywords：histamine；Pelteobagrusfulvidraco；melanin；tyrosinase；MC1R

黃顙魚是我國及廣東省重要的淡水養(yǎng)殖名特優(yōu)品種，隨著集約化養(yǎng)殖的快速發(fā)展，現(xiàn)階段養(yǎng)殖水環(huán)境加劇惡化、飼料品質(zhì)下降、病害、藥害等常會(huì)導(dǎo)致其體色變異(花斑、香蕉黃等)現(xiàn)象發(fā)生[1]，嚴(yán)重影響其商品品質(zhì)和經(jīng)濟(jì)價(jià)值。魚粉是水產(chǎn)飼料尤其是肉食性魚類飼料中傳統(tǒng)的主要蛋白源，其好壞直接影響?zhàn)B殖品種的品質(zhì)[2-3]。魚粉腐敗變質(zhì)會(huì)產(chǎn)生大量組胺：魚粉中的組氨酸被產(chǎn)組氨酸脫羧酶的細(xì)菌(如摩根氏變形桿菌、組胺無色桿菌、埃希氏大腸桿菌、鏈球菌、葡萄糖球菌等)污染后，使魚粉中的游離組氨酸發(fā)生脫羧反應(yīng)生成組胺。組胺是一種生物敏感毒素，同時(shí)也是機(jī)體普遍存在的一種炎性因子，已有研究報(bào)道，其會(huì)引起水產(chǎn)動(dòng)物生長性能下降[4]，組織器官發(fā)生炎癥反應(yīng)，甚至出現(xiàn)損傷[5-6]。然而，組胺在色素沉著中的作用一直以來并不十分清楚。Watanabe等[7]在虹鱒飼料中添加1 000-10 000 mg/kg的外源組胺，10周后發(fā)現(xiàn)魚體體色變黑，相似的結(jié)果在長吻鮠中也有報(bào)道[8]。本試驗(yàn)通過模擬飼料主要蛋白原料-魚粉蛋白質(zhì)腐敗變質(zhì)產(chǎn)生的以組胺為代表的生物胺添加入飼料中飼喂健康的黃顙魚，脅迫黃顙魚體色變異，研究組胺對(duì)黃顙魚體色變異的生理機(jī)制，為解決生產(chǎn)實(shí)際中魚粉變質(zhì)引起的黃顙魚體色變異問題提供技術(shù)支撐。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)飼料

試驗(yàn)以白魚粉和豆粕為蛋白源，魚油為主要脂肪源配制基礎(chǔ)飼料。在基礎(chǔ)飼料中分別添加不同水平組胺(0、1、10、100、1000 mg/kg；組胺購買自北京普博欣生物科技有限責(zé)任公司，純度≥98%)，制成4種等氮飼料，分別記為C、H10、H100、H1000。試驗(yàn)用各原料經(jīng)粉碎、過篩(40目)，逐級(jí)擴(kuò)大混勻后，制成粒徑6 mm的軟顆粒料(風(fēng)采牌絞肉機(jī)，型號(hào)MM12)，-20 ℃保存。試驗(yàn)采用直接干燥法(105 ℃烘干至恒重)測定飼料中的水分含量，采用凱氏定氮法測定粗蛋白含量，索氏抽提法測定粗脂肪含量，直接灼燒法(550 ℃烘干至恒重)測定灰分含量，飼料中組胺的含量的測定方法為分光光度法(GB/T 5009.45—2003/4.4)。試驗(yàn)用基礎(chǔ)飼料配方及化學(xué)組成見表1。

表1 基礎(chǔ)飼料配方及營養(yǎng)成分Tab.1 Feed formulation and analyzed chemicalcomposition %

注：1多維：每kg維生素預(yù)混料中含維生素A 2.2 g、維生素D30.88 g、維生素K32.2 g、維生素E 17.6 g、維生素B12.69 g、維生素B21.38 g、維生素B61.33 g、維生素B121.1 g、煙酰胺 7.78 g、葉酸 0.45 g、D-泛酸鈣 2.24 g、生物素 0.66 g、維生素C磷化脂 314.29 g、肌醇 22.45 g、米糠 622.751 g；2多礦：每kg礦物鹽預(yù)混料中 CoSO40.19 g、FeSO4·H2O 38.13 g、ZnSO4·H2O 19.07 g、 MnSO4·H2O 7.63 g、Na2SeO31.91 g、MgSO4·7H2O 160.45 g、Ca(I03)24.39 g、CuSO4·5H2O 1.33 g、沸石粉766.9 g

1.2 試驗(yàn)魚

試驗(yàn)用黃顙魚取自廣東微生物研究所黃顙魚養(yǎng)殖基地(廣東，花都區(qū))，試驗(yàn)魚入缸前用3% 的食鹽水浸泡10～15 min進(jìn)行體表消毒。暫養(yǎng)期間，每天飽食投喂兩次(09:00和16:00)基礎(chǔ)飼料(C)。暫養(yǎng)15 d后，禁食1 d，選取健康和體格均勻黃顙魚，隨機(jī)分配到12個(gè)圓形玻璃纖維養(yǎng)殖缸中(直徑100 cm，高75 cm；缸內(nèi)壁為銀灰色，試驗(yàn)期間有效水體為缸體積的3/4)，每組飼料設(shè)置3個(gè)平行養(yǎng)殖缸，放養(yǎng)密度為30尾/缸，試驗(yàn)初始時(shí)魚體重為(102.13±0.52) g。

1.3 飼養(yǎng)管理

養(yǎng)殖試驗(yàn)在廣東微生物研究所魚類養(yǎng)殖實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行。試驗(yàn)采用微流水、非循環(huán)養(yǎng)殖系統(tǒng)。養(yǎng)殖試驗(yàn)持續(xù)8周。每天投喂2次(09:00和16:00)，日投喂量為缸魚體總重的3%，每2周進(jìn)行一次魚體稱重，調(diào)整日投喂量。采用少量多次的人工投喂方式，以確保投到缸中的飼料被完全攝食。投喂結(jié)束2 h后用虹吸法對(duì)缸底進(jìn)行吸污。試驗(yàn)結(jié)束后，禁食1 d，進(jìn)行生長指標(biāo)測定及樣品采集。整個(gè)試驗(yàn)周期水溫的變化范圍為28～31 ℃，水體pH變化范圍為7.0～7.5，溶氧> 6.0 mg/L，氨氮小于0.2 mg/L。試驗(yàn)采用人工光照(12 h光照，12 h黑暗)，每天光照時(shí)間為8:00～20:00。

1.4 樣品采集與分析

1.4.1 生長指標(biāo)

試驗(yàn)結(jié)束后，以養(yǎng)殖缸為單位，批量稱重，并核對(duì)每缸中試驗(yàn)魚尾數(shù)，以每尾魚的平均重量代表試驗(yàn)結(jié)束時(shí)魚體重量。試驗(yàn)魚增重率(WGR，%)和特定生長率(SGR，%/ d)的計(jì)算公式分別為：

增重率=100%×(終末體重-初始體重)/初始體重

特定生長率=100%×[ln(終末體重)- ln(初始體重)]/天數(shù)。

1.4.2 組織顯微觀察

試驗(yàn)結(jié)束時(shí)采集試驗(yàn)魚的皮膚組織(5尾/缸)，置于4 ℃ 波恩氏液中固定12～24 h。樣品經(jīng)酒精梯度脫水、二甲苯透明及石蠟包埋后切片，切片厚度為4 μm。切片經(jīng)二甲苯脫蠟、蘇木精-伊紅染色及中性樹膠封片后，光學(xué)顯微鏡下(型號(hào)：OLYMPS CX31)觀察、采集圖像。

1.4.3 皮膚中黑色素含量測定

標(biāo)準(zhǔn)品烏賊黑色素(Sigma M-2649)購自 Sigma公司，試驗(yàn)采用分光光度法檢測黑色素含量[9]，具體操作為：在1.5 mL EP管中，依次加入1 mL 1 mol/L NaOH、0.1g黑色素標(biāo)準(zhǔn)品、10 μL 3% H2O2，沸水浴30 min，混勻，待黑色素標(biāo)準(zhǔn)品完全溶解后，分別按0、5%、10%、15%、20%、30%、40%的比例稀釋，于 402 nm 處測定吸光度值，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。準(zhǔn)確稱取近頭第一背鰭基部皮膚0.1 g (精確到0.000 1 g)，先用95%乙醇固定皮膚樣品24 h，然后用1% HCl 60 ℃水浴1 h以脫鈣。脫鈣的皮膚樣品用蒸餾水反復(fù)沖洗3次，以洗去皮膚表面殘留鹽酸，最后用0.2% NaOH沸水浴1 h，提取黑色素。用紫外分光光度計(jì)測量上清液在402 nm處的吸光度值，與標(biāo)準(zhǔn)曲線比對(duì)算出黑色素的濃度。

1.4.4 皮膚中酪氨酸酶活力的檢測

參考諸葛燕等[10]的測定方法，準(zhǔn)確稱取0.2 g(精確到 0.000 1 g)近頭第一鰭條基部皮膚，按1∶9(質(zhì)量體積比)的比例加入50 mmol/L的磷酸緩沖液(pH 6.8)勻漿，勻漿液5 000 r/min離心 20 min(4 ℃)，取上清檢測酪氨酸酶活力。先將 1 mL 0.5 mmol/L-DOPA加入 5 mL 離心管，再加入 2 mL 組織勻漿上清液并立即混勻，于475 nm 測定吸光度值，記為OD0；將此混勻液于28 ℃水浴中精確反應(yīng) 10 min，并于475 nm再次測定吸光度值，記為OD10，計(jì)算兩次吸光度值之差△OD475=OD10-OD0。酪氨酸酶活力的計(jì)算方法：酪氨酸酶活力(U) =△OD475/(V×T×0.001)

其中：V為組織勻漿液的總體積(mL)，T為反應(yīng)時(shí)間(min)，酶活力單位為U。

1.4.5 腦組織中MC1R基因 mRNA表達(dá)水平的檢測

取各飼料投喂組黃顙魚的腦組織，利用Trizol試劑提取細(xì)胞總RNA，提取的樣品用1%瓊脂糖電泳觀察所提RNA的質(zhì)量，同時(shí)用紫外分光光度計(jì)測260 nm和280 nm的吸光度，以測定RNA純度和濃度。提取的總RNA反轉(zhuǎn)錄，得到cDNA。設(shè)計(jì)MCIR引物，Q-PCR檢測魚腦MC1R的相對(duì)表達(dá)量。引物的信息為：

β-acting F CTGCCTCTTCCTCCTCTCTG

β-acting R GGGATGTGATTTCCTTCTGC

MC1R-F GATGGCACGCTGTGTGGTCATT

MC1R-R TGGTGTCCTCGTTGTCCTTCCT

兩步法進(jìn)行PCR擴(kuò)增，反應(yīng)條件為：95 ℃預(yù)變性30 s，Cycle：1；95 ℃ 5 s，60 ℃20 s，40個(gè)循環(huán)。MC1R基因表達(dá)結(jié)果用2-ΔΔCT表示，其中ΔΔCT=平均ΔCT處理組-平均ΔCT對(duì)照組，MC1R基因的表達(dá)量，經(jīng)內(nèi)參基因β-actin表達(dá)量校正。

1.5 數(shù)據(jù)計(jì)算與統(tǒng)計(jì)分析

采集的試驗(yàn)數(shù)據(jù)使用SPSS15.0進(jìn)行單因素方差分析(One-way ANOVA)，采用Tukey進(jìn)行多重比較分析，且在P<0.05時(shí)認(rèn)為具有顯著性差異。試驗(yàn)結(jié)果用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差(Mean ± SD)的形式表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 添加不同水平組胺對(duì)黃顙魚生長的影響

生長結(jié)果顯示，增重率和特定生長率均為對(duì)照組高于試驗(yàn)組，低濃度組高于高濃度組，但差異不顯著(P>0.05) (表2)。

表2 飼料中添加不同水平組胺對(duì)黃顙魚生長指標(biāo)的影響Tab.2 Effects of dietary histamine levels on the growth of P.fulvidraco

2.2 組胺對(duì)黃顙魚體色及皮膚組織結(jié)構(gòu)的影響

黃顙魚皮膚組織切片結(jié)果如下：對(duì)照組黃顙魚的皮膚組織結(jié)構(gòu)基本完整(圖1a)，可見完整的表皮層和真皮層；組胺處理組的黃顙魚的皮膚組織切片顯示其表皮細(xì)胞增生，表皮增厚、不光滑(圖1A，黑色箭頭所標(biāo)處)。

圖1 對(duì)照組(a)和H1000組(b)的皮膚組織顯微結(jié)構(gòu)(400X)Fig.1 The microstructure of P.fulvidraco skin fed with control(a) or H1000(b)supplemented diet(400X)

2.3 胺對(duì)黃顙魚表皮黑色素含量的影響

添加不同水平組胺對(duì)黃顙魚表皮黑色素含量的影響見圖2。表皮黑色素含量結(jié)果(圖2)顯示，隨著組胺添加水平的增加，黃顙魚表皮黑色素含量呈現(xiàn)降低趨勢(shì)，H1000組黃顙魚表皮黑色素含量顯著低于對(duì)照組和其他兩個(gè)處理組 (P<0.05)。

2.4 胺對(duì)黃顙魚表皮酪氨酸酶含量的影響

添加不同水平組胺對(duì)黃顙魚表皮酪氨酸酶含量的影響見圖3，結(jié)果顯示，隨著組胺添加水平的增加，黃顙魚表皮酪氨酸酶活力呈先增加后降低趨勢(shì)，對(duì)照組與各處理組黃顙魚表皮酪氨酸酶活力差異不顯著(P>0.05)，H1000組黃顙魚表皮酪氨酸酶活力低于對(duì)照組和其他兩個(gè)處理組,但并無顯著差異 (P>0.05)。

圖2 飼料中添加不同水平組胺對(duì)黃顙魚表皮黑色素含量影響Fig.2 Effects of dietary histamine levels on skin melanin content of P.fulvidraco

注：相同字母表示組間差異不顯著(P>0.05)，不同字母表示組

間差異顯著(P<0.05)

圖3 飼料中添加不同水平組胺對(duì)黃顙魚表皮酪氨酸酶含量影響Fig.3 Effects of dietary histamine levels on skin tyrosinase activity of P.fulvidraco

2.5 胺對(duì)黃顙魚腦組織中MC1R mRNA表達(dá)量的影響

添加不同水平組胺對(duì)黃顙魚腦組織中MC1R mRNA表達(dá)量的影響見圖4，結(jié)果顯示，隨著組胺添加水平的增加，黃顙魚腦組織中MC1R mRNA表達(dá)量呈先增加后降低趨勢(shì)，H1000組黃顙魚腦組織中MCIR mRNA表達(dá)量顯著低于對(duì)照組和其他兩個(gè)處理組 (P<0.05)。

圖4 飼料中添加不同水平組胺對(duì)黃顙魚腦組織中MC1R mRNA表達(dá)量的影響Fig.4 Effects of dietary histamine levels on the expression of MC1R mRNA of P.fulvidraco

3 討論

3.1 組胺對(duì)黃顙魚生長的影響

組胺作為生理毒性最強(qiáng)的一種生物胺，是微生物通過組氨酸脫羧作用產(chǎn)生的一種毒素，其含量高低是魚粉新鮮度評(píng)價(jià)的一個(gè)重要指標(biāo)，也是魚粉質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的重要指標(biāo)之一[11]。組胺對(duì)養(yǎng)殖動(dòng)物生長影響研究報(bào)道較多，本研究中，飼料中添加不同水平的組胺(100～1 000 mg/kg)對(duì)黃顙魚生長(增長率和特定生長率)無影響， 相似的結(jié)果在虹鱒[5](組胺添加量2 000 mg/kg)也有報(bào)道。然而，組胺卻引起了羅非魚[4]、大西洋庸鰈[12]生長性能的下降。值得一提的是，董小林[8]研究發(fā)現(xiàn)飼料中添加1 000 mg/kg晶體組胺可以促進(jìn)攝食(攝食率)和生長(SGR)，而更高含量的組胺(6 000 mg/kg)則對(duì)生長性能沒有促進(jìn)作用。低添加量組胺對(duì)養(yǎng)殖動(dòng)物生長的促進(jìn)作用在南美藍(lán)對(duì)蝦中也有報(bào)道[13-14]。組胺對(duì)不同養(yǎng)殖動(dòng)物生長性能的影響存有差異，一方面可能是不同養(yǎng)殖動(dòng)物對(duì)組胺的耐受性和敏感性不同，另一方面可能是養(yǎng)殖環(huán)境的差異或組胺添加量的不同使組胺在機(jī)體中的生理功能不同。

3.2 組胺對(duì)黃顙魚體色變異的影響

魚類體色的豐富多彩是長期自然選擇的結(jié)果，是其對(duì)生態(tài)環(huán)境的適應(yīng)，起著隱蔽、偽裝、警戒、吸引異性等重要作用[15]。黃顙魚體色是評(píng)價(jià)其商品價(jià)值的重要指標(biāo)，其體色的典型特征為背部黑褐色，至腹部漸成黃色，體側(cè)有 2 縱及 2 橫黃色細(xì)帶紋，間隔成暗色縱斑塊。黑色素細(xì)胞和黃色素細(xì)胞及相關(guān)色素體在黃顙魚體色形成中的作用最為重要[16]。前期研究中發(fā)現(xiàn)，在基礎(chǔ)飼料中添加不同量的組胺，發(fā)現(xiàn)高組胺添加量可使黃顙魚體色白化，且白化出現(xiàn)的時(shí)間與組胺添加量呈正相關(guān)。黃顙魚體色變化與皮膚中黑色素含量相關(guān)，而黑色素合成與酪氨酸酶活力及MC1R mRNA表達(dá)量又有關(guān)聯(lián)。當(dāng)α-MSH[17，18]或者ATCH[19]與細(xì)胞膜上的受體G蛋白(MC1R)結(jié)合時(shí)，MC1R被激活，通過G蛋白與腺苷酸環(huán)化酶偶聯(lián)，增加細(xì)胞內(nèi)cAMP含量，cAMP/PKA途徑被激活，酪氨酸酶生成增多，進(jìn)而刺激黑色素細(xì)胞分化、增殖，黑色素生成量增多[20，21]。Yoshida等[22]研究發(fā)現(xiàn)組胺通過H2受體激活PKA誘導(dǎo)黑色素生產(chǎn)，Lassalle等[23]研究發(fā)現(xiàn)組胺通過誘導(dǎo)真黑素和棕黑素合成而促進(jìn)黑色素生成，董小林[8]發(fā)現(xiàn)魚粉中組胺含量會(huì)導(dǎo)致長吻鮠的體色出現(xiàn)一定程度的暗化。

本試驗(yàn)中，隨著組胺添加量的增加，黃顙魚的皮膚黑色素含量及腦組織中MC1R mRNA表達(dá)量均有所降低：高劑量組(1 000 mg/kg)皮膚黑色素含量及腦組織中MC1R mRNA表達(dá)量均顯著低于對(duì)照組和其它組胺添加組，組胺引起了黃顙魚體色的白化。分析可能原因：魚體體色形成及變化受很多因素的影響，如養(yǎng)殖品種、養(yǎng)殖環(huán)境、飼料配方及營養(yǎng)因素、神經(jīng)內(nèi)分泌調(diào)控及病害、藥害等，是一個(gè)十分復(fù)雜的過程。在試驗(yàn)樣品采集過程中發(fā)現(xiàn)，組胺試驗(yàn)組黃顙魚胃腸道呈現(xiàn)不同程度的損傷情況，可能是組胺引起黃顙魚胃腸道病理應(yīng)繳，導(dǎo)致魚體體色發(fā)白。其有關(guān)組胺對(duì)黃顙魚體色變異和胃腸道的損傷機(jī)制有待進(jìn)一步研究。

[1] 賀國龍，劉立鶴.魚類體色成因及其調(diào)控技術(shù)研究進(jìn)展(下)[J].水產(chǎn)科技情報(bào)，2010，37 (03)：115-120，124.

[2] Aksnes A，Izquierdo M S，Robaina L，et al.Influence of fish meal quality and feed pellet on growth，feed efficiency and muscle composition in gilthead seabream (Sparusaurata) [J].Aquaculture，1997，153(3-4)：251-261.

[3] Oliva-Teles A，Cerqueira A L，Gon?alves P.The utilization of diets containing high levels of fish protein hydrolysate by turbot (Scophthalmusmaximus) juveniles[J].Aquaculture，1999，179(1)：195-201.

[4] Reyes-Sosa C F，Castellanos-Molina R.Nutritional evaluation of gizzard erosion positive brown fish meal in starter diets for Nile tilapia，Oreochromisniloticus[J].Aquaculture，1995，138(1-4)：323-329.

[5] Fairgrieve W T，Myers M S，Hardy R W，et al.Gastric abnormalities in rainbow trout (Oncorhynchusmykiss) fed amine-supplemented diets or chicken gizzard-erosion-positive fish meal[J].Aquaculture，1994，127(2)：219-232.

[6] Shiozaki K，Nakano T，Yamaguchi T，et al.The protective effect of stevia extract on the gastric mucosa of rainbow troutOncorhynchusmykiss(Walbaum) fed dietary histamine[J].Aquacul Res，2004，35(15)：1421-1428.

[7] Watanabe T，Takeuchi T，Satoh S，et al.Effect of dietary histidine or histamine on growth and development of stomach erosion in rainbow trout[J].Nippon Suisan Gakkaishi，1987，53(7)：1207-1214.

[8] 董小林.飼料原料品質(zhì)對(duì)長吻鮠和斑點(diǎn)叉尾生長及體色的影響[D].武漢：中國科學(xué)院水生生物研究所，2010.

[9] 林亮全，陳維泰.國產(chǎn)烏骨雞黑色素萃取物的物理化學(xué)特性[J].臺(tái)灣農(nóng)業(yè)化學(xué)與食品科學(xué)，2004，42(5)：335-342.

[10] 諸葛燕，葉元土，高艷玲，等.七種淡水魚類色素含量和酪氨酸酶活力的比較研究[J].上海水產(chǎn)大學(xué)學(xué)報(bào)，2007，16(5)：431-436.

[11] Ricque-Marie D，Abdo-de La Parra M I，Cruz-Suárez L E，et al.Raw material freshness，a quality criterion for fish meal fed to shrimp[J].Aquaculture，1998，165(12)：95-109.

[12] Aksnes A，Mundheim H.The impact of raw material freshness and processing temperature for fish meal on growth，feed efficiency and chemical composition of Atlantic halibut (Hippoglossushippoglossus) [J].Aquaculture，1997，149(1-2)：87-106.

[13] Tapia-Salazar M，Smith T K，Harris A，et al.Effect of dietary histamine supplementation on growth and tissue amine concentrations in blue shrimpLitopenaeusstylirostris[J].Aquaculture，2001,193(3):281-289.

[14] Tapia-Salazar M，Cruz-Suárez L E，Ricque-Marie D，et al.Effect of fishmeal made from stale versus fresh herring and of added crystalline biogenic amines on growth and survival of blue shrimpLitopenaeusstylirostrisfed practical diets [J].Aquaculture，2004，242(1-4)：437-453.

[15] Nilsson Sk?ld H，Aspengren S，Wallin M.Rapid color change in fish and amphibians-function，regulation，and emerging applications[J].Pigment Cell Melanoma Res，2012，26(1)：29-38.

[16] 許 丹，劉興旺.黃顙魚營養(yǎng)需求與體色調(diào)控[J].飼料與畜牧：新飼料，2013 (9)：8-12.

[17] Richardson J，Lundegaard P R，Reynolds N L，et al.mc1r Pathway regulation of zebrafish melanosome dispersion [J].Zebrafish，2009，5(4)：289-295.

[18] 于志慧，白 瑞，范瑞文，等.α-黑素細(xì)胞刺激素(α-MSH)對(duì)羊駝皮膚黑素細(xì)胞增殖和黑素生成的影響[J].畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào)，2010，41(9)：1095-1101.

[19] Klovins J，Haitina T，F(xiàn)ridmanis D，et al.The melanocortin system in Fugu：determination of POMC/AGRP/MCR gene repertoire and synteny，as well as pharmacology and anatomical distribution of the MCRs [J].Mol Biol Evolution，2004，21(3)：563-579.

[20] Hiramoto K，Hashimoto M，Orita K，et al.α-Melanocyte-stimulating hormone plays an important role in the onset of pollinosis in a pollen allergy mouse model [J].International Archives of Allergy and Immunology，2010，153(1)：13-18.

[21] Yamaguchi Y，Hearing V J.Physiological factors that regulate skin pigmentation[J].Biofactors，2009，35 (2)：193-199.

[22] Yoshida M，Takahashi Y，Inoue S.Histamine induces melanogenesis and morphologic changes by protein kinase A activation via H 2 receptors in human normal melanocytes [J].Journal of Investigative Dermatology，2000，114(2)：334-342.

[23] Lassalle M W，Igarashi S，Sasaki M，et al.Effects of Melanogenesis-inducing nitric oxide and histamine on the production of eumelanin and pheomelanin in cultured human melanocytes [J].Pigment Cell & Melanoma Research，2003，16(1)：81-84.

EffectofdietaryhistaminelevelsongrowthperformanceandbodypigmentationofPelteobagrusfulvidraco

ZHANG Li1,2，CHENG Yan-bo1，CHENG Wei-xuan1，LI Wei1，CHEN Jin-tao1，XIE Li-wei1，XU Guo-huan1

(1.GuangdongInstituteofMicrobiology;StateKeyLaboratoryofAppliedMicrobiology，SouthChina(Theministry-ProvinceJointDevelopment);GuangdongOpenLaboratoryofAppliedMicrobiology；GuangdongProvincialKeyLaboratoryofMicrobialCultureCollectionandApplication，Guangzhou510070，China； 2.GuangdongBideBiotechnologyCo.，Ltd，Guangzhou510070，China)

2017-04-28；

2017-07-28

廣東省海洋漁業(yè)科技與產(chǎn)業(yè)發(fā)展專項(xiàng)科技攻關(guān)與研發(fā)項(xiàng)目(A201401B05)；2015年廣州市科技計(jì)劃項(xiàng)目科學(xué)研究專項(xiàng)(一般項(xiàng)目)(201510010239)；廣東省科學(xué)院引進(jìn)高層次領(lǐng)軍人才專項(xiàng)資金項(xiàng)目(2016GDASRC-0202)；2015年廣東省科技計(jì)劃項(xiàng)目應(yīng)用型科技研發(fā)專項(xiàng)資金項(xiàng)目(2015B020235011)

張 麗(1979- )，女，碩士， 助理研究員，主要從事水產(chǎn)動(dòng)物營養(yǎng)的研究。E-mail：zhl9813@163.com

謝黎煒。E-mail：gdbide@163.com

S963.1

A

1000-6907-(2017)05-0079-06