易興友蔣美山李中偉呂 瑤劉曉燕趙 明顏?zhàn)诩姨破娣逯?強(qiáng)

（1.重慶市開(kāi)州區(qū)動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，重慶 405400 2.重慶市開(kāi)州區(qū)畜牧技術(shù)推廣站，重慶 405400 3.重慶市江北區(qū)鐵山坪畜牧獸醫(yī)站，重慶 400020 4.重慶市開(kāi)州區(qū)渠口鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站，重慶 405400 5.重慶市開(kāi)州區(qū)鐵橋鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站，重慶 405400）

桑葉粉對(duì)蛋雞禽流感和新城疫免疫效果的影響試驗(yàn)

易興友1蔣美山2李中偉1呂 瑤1劉曉燕1趙 明3顏?zhàn)诩?唐奇峰5周 強(qiáng)1

（1.重慶市開(kāi)州區(qū)動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，重慶 405400 2.重慶市開(kāi)州區(qū)畜牧技術(shù)推廣站，重慶 405400 3.重慶市江北區(qū)鐵山坪畜牧獸醫(yī)站，重慶 400020 4.重慶市開(kāi)州區(qū)渠口鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站，重慶 405400 5.重慶市開(kāi)州區(qū)鐵橋鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站，重慶 405400）

本試驗(yàn)旨在探討桑葉粉對(duì)蛋雞禽流感和新城疫免疫效果的影響。試驗(yàn)選擇體重相近、健康的1日齡商品蛋雛雞1600只，隨機(jī)分成4個(gè)組（即添加桑葉粉免疫組、添加桑葉粉不免疫組、不添加桑葉粉免疫組、不添加桑葉粉不免疫組），每組400只，添加桑葉粉試驗(yàn)組從16日齡開(kāi)始在日糧中添加1%桑葉粉進(jìn)行飼喂，41～60日齡時(shí)添加量為2%，60～135日齡時(shí)添加3%，分別在15、27、45、60、75、90、105、120、135日齡隨機(jī)抽取各組30只試驗(yàn)蛋雞的血清進(jìn)行H5亞型禽流感和新城疫免疫抗體檢測(cè)。135日齡時(shí)在400只添加桑葉粉免疫組中選擇體重相近、健康的商品蛋雞270只，隨機(jī)分成3個(gè)處理組，桑葉粉添加量分別為3%、5%、7%；在400只不添加桑葉粉免疫組中同樣挑選90只商品蛋雞作為對(duì)照組；3個(gè)處理組和對(duì)照組都設(shè)置3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)30只。在150～490的不同日齡隨機(jī)抽取各組雞血清30份，進(jìn)行H5亞型禽流感和新城疫免疫抗體檢測(cè)。監(jiān)測(cè)結(jié)果顯示：135日齡前添加桑葉粉免疫組、添加桑葉粉不免疫組、不添加桑葉粉免疫組、不添加桑葉粉不免疫組的H5亞型禽流感和新城疫免疫抗體水平差異不顯著（P＞0.05）；135日齡后對(duì)照組與各處理組之間的H5亞型禽流感抗體水平差異不顯著（P＞0.05），285日齡、300日齡、415日齡7%處理組的新城疫免疫抗體水平顯著低于其他各組（P＜0.05），其他日齡各組之間差異不顯著（P＞0.05）。因此，總體來(lái)看，在蛋雞日糧中添加桑葉粉對(duì)禽流感和新城疫免疫效果均無(wú)顯著影響。

桑葉粉 蛋雞 禽流感 新城疫 免疫效果 飼料添加劑 抗體滴度

桑樹(shù)是一種食藥同源的植物，桑葉中富含多種礦物質(zhì)和維生素，還含有黃酮類、多糖類、植物甾醇、1-脫氧野尻霉素等多種天然活性物質(zhì)，這些物質(zhì)不僅能夠維持動(dòng)物的正常生長(zhǎng)發(fā)育，而且可以提高動(dòng)物免疫力和抗病力。近些年來(lái)，開(kāi)州區(qū)部分規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)發(fā)現(xiàn)添加飼料桑飼喂蛋雞，可增強(qiáng)蛋雞免疫能力。為進(jìn)一步了解飼料桑對(duì)蛋雞免疫效果的影響，本試驗(yàn)以京粉蛋雞為試驗(yàn)對(duì)象，設(shè)計(jì)了不同比例的桑葉粉添加量，比較在日糧中不同比例桑葉粉對(duì)蛋雞H5亞型禽流感和新城疫免疫效果的影響，以期更好地指導(dǎo)養(yǎng)殖戶開(kāi)展蛋雞免疫工作。

1 材料與方法

1.1 材料

試驗(yàn)桑葉粉來(lái)源于重慶海田林業(yè)科技有限公司飼料桑種植基地生產(chǎn)的桑葉粉。試驗(yàn)蛋雞為開(kāi)縣德佳牧業(yè)有限公司飼養(yǎng)的京粉蛋雞。禽流感疫苗：為重組禽流感病毒滅活疫苗（H5N1亞型），遼寧益康生物股份有限公司生產(chǎn)，批號(hào)2015026；新城疫疫苗：浩和利（雞新城疫、傳染性支氣管炎二聯(lián)活疫苗），乾元浩生物股份有限公司生產(chǎn)，批號(hào)20141102；浩倍欣（雞新城疫活疫苗），乾元浩生物股份有限公司生產(chǎn)，批號(hào)20140901；另外還有乾元浩生物股份有限公司南京生物藥廠生產(chǎn)的雞新城疫（La Sota株）、傳染性支氣管炎（H52株）二聯(lián)活疫苗；乾元浩生物股份有限公司鄭州生物藥廠生產(chǎn)的雞新城疫、傳染性支氣管炎、禽流感（H9亞型）三聯(lián)滅活疫苗（La Sota株+M41株+WD株），雞新城疫、傳染性支氣管炎、減蛋綜合征、禽流感（H9亞型）四聯(lián)滅活疫苗（La Sota株+M41株+AV-127株+S2株）等。該批試驗(yàn)蛋雞在35日齡免疫重組禽流感病毒滅活疫苗（H5N1亞型），分別在5、10、35、80、110、120日齡免疫新城疫聯(lián)苗。

診斷（檢測(cè)）試劑：禽流感病毒H5亞型血凝抑制試驗(yàn)抗原，農(nóng)科院哈爾濱獸醫(yī)研究所生產(chǎn)，批號(hào)2015002；禽流感病毒H5亞型陽(yáng)性血清，哈爾濱維科生物技術(shù)開(kāi)發(fā)公司生產(chǎn)，批號(hào)2015010；雞新城疫血凝抑制試驗(yàn)抗原，哈爾濱維科生物技術(shù)開(kāi)發(fā)公司生產(chǎn)，批號(hào)2014M013；雞新城疫血凝抑制試驗(yàn)陽(yáng)性血清，哈爾濱動(dòng)物生物制品國(guó)家工程研究中心有限公司生產(chǎn)，批號(hào)20150721。

1.2 方法

在重慶開(kāi)縣德佳牧業(yè)有限公司蛋雞場(chǎng)選擇體重相近、健康的1日齡商品蛋雛雞1600只，分成4個(gè)組，每組400只（即添加桑葉粉免疫組、添加桑葉粉不免疫組、不添加桑葉粉免疫組、不添加桑葉粉不免疫組），添加桑葉粉試驗(yàn)組從16日齡開(kāi)始在蛋小雞料中添加1%桑葉粉進(jìn)行飼喂，41日齡時(shí)改喂自配料，在41～60日齡時(shí)桑葉粉添加組添加桑葉粉量提高為2%，60～135日齡時(shí)桑葉粉桑添加量為3%，分別在15、27、45、60、75、90、105、120、135日齡隨機(jī)抽取各組30只試驗(yàn)蛋雞的血清進(jìn)行H5亞型禽流感和新城疫免疫抗體檢測(cè)。

135日齡時(shí)在400只添加桑葉粉免疫組中選擇體重相近、健康的商品蛋雞270只，隨機(jī)分成3個(gè)處理組；在400只不添加桑葉粉免疫組中挑選體重相近、健康的商品蛋雞90只作為對(duì)照組；3個(gè)處理組桑葉粉添加量分別為3%、5%、7%，3個(gè)處理組和對(duì)照組都設(shè)置3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)30只。136～150日齡為預(yù)試期，分別在150日齡、170日齡、195日齡、225日齡、255日齡、270日齡、285日齡、300日齡、320日齡、340日齡、355日齡、370日齡、385日齡、400日齡、415日齡、430日齡、450日齡、465日齡、490日齡隨機(jī)抽取各組30只蛋雞的血清進(jìn)行H5亞型禽流感和新城疫免疫抗體檢測(cè)。

1.3 統(tǒng)計(jì)分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)采用 SPSS18的單一ANOVA分析方法進(jìn)行，多重比較采用 Dun-CAN方法，顯著水平取 P＜0.05，極顯著水平取P＜0.01。

2 結(jié)果與分析

2.1 日糧中添加不同比例桑葉粉對(duì)禽流感免疫效果的影響

從表1可以看出，15日齡時(shí)各組H5亞型禽流感母源抗體水平無(wú)顯著差異（P>0.05），27日齡時(shí)各組母源抗體水平皆降為0。35日齡時(shí)對(duì)各組進(jìn)行重組禽流感病毒滅活疫苗（H5N1亞型）免疫，到45日齡時(shí)添加桑葉粉免疫組和不添加桑葉粉免疫組均可檢測(cè)到免疫抗體，其差異不顯著；到75日齡時(shí)H5亞型禽流感免疫抗體滴度都達(dá)峰值10log2；添加桑葉粉組與不添加桑葉粉組抗體滴度差異不顯著（P>0.05）。

表1 不同處理組對(duì)禽流感免疫效果的影響

表2 不同處理組對(duì)禽流感免疫效果的影響

從表2可以看出，各組禽流感免疫抗體水平隨免疫時(shí)間的延長(zhǎng)都逐漸下降，到300日齡時(shí)都同時(shí)降到最低，以后抗體滴度又逐漸回升，到370日齡時(shí)平均免疫抗體水平都可達(dá)到7 log2以上，以后又同時(shí)逐漸下降。對(duì)照組與各處理組，以及各處理組之間在相同日齡時(shí)免疫抗體差異不顯著（P>0.05）。

2.2 日糧中添加不同比例桑葉粉對(duì)新城疫免疫效果的影響

從表3可以看出，添加桑葉粉免疫組和不添加桑葉粉免疫組都同時(shí)在5日齡和10日齡分別免疫了浩和利和浩倍欣后，到15日齡時(shí)測(cè)得兩組新城疫平均免疫抗體水平差異不顯著（P>0.05）；從27～135日齡兩組同時(shí)間免疫了4次雞新城疫聯(lián)苗，同日齡新城疫免疫抗體監(jiān)測(cè)結(jié)果也均無(wú)顯著差異（P>0.05）。

表3 不同處理組對(duì)新城疫免疫效果的影響

表4 不同處理組對(duì)新城疫免疫效果的影響

從表4可以看出，285日齡，3%處理組抗體滴度極顯著高于7%處理組（P<0.01），對(duì)照組、5%處理組抗體滴度顯著高于7%處理組（P<0.05），300日齡、415日齡，對(duì)照組、3%處理組、5%處理組顯著高于7%處理組（P<0.05），其他各日齡，各組之間的差異不顯著（P>0.05）。

3 討論與結(jié)論

從表1和表2可以看出，添加不同比例桑葉粉飼喂蛋雞，對(duì)禽流感免疫效果無(wú)顯著影響（P＞0.05）。從表3和表4可以看出，在大多數(shù)日齡各組對(duì)新城疫免疫效果無(wú)顯著影響，但是在部分日齡，特別是在新城疫抗體滴度下降的日齡，7%處理組顯著低于其他各組，可能原因是桑葉粉中抗?fàn)I養(yǎng)因子影響了蛋雞的正常生理功能，從而影響抗體的生成。因此，總的來(lái)說(shuō)，在蛋雞日糧中添加桑葉粉對(duì)禽流感和新城疫免疫效果均無(wú)顯著影響。