王德化李洋

（1，廣東省乳源瑤族自治縣畜牧獸醫(yī)水產局 512600；2，華南農業(yè)大學動物科學學院 510642）

唾液腺特異性表達木聚糖酶轉基因豬檢測

王德化1李洋2*

（1，廣東省乳源瑤族自治縣畜牧獸醫(yī)水產局 512600；2，華南農業(yè)大學動物科學學院 510642）

研究分別測定11頭唾液腺特異性表達木聚糖酶（xynB）轉基因豬的飼料表觀消化率和38頭木聚糖酶（xynB）轉基因豬的生長性能指標。結果表明，與非轉基因豬相比，轉xynB基因豬對飼料營養(yǎng)成分的表觀消化率和生長性能均無顯著差異。

木聚糖酶；轉基因豬；表觀消化率；生長性能

近年來，隨著轉基因技術的迅速發(fā)展和國家對環(huán)保排放要求的提高，各種與提高生豬消化率相關的基因正在被研究鑒定和改造，用于生產出能有效減少氮磷排放的環(huán)境友好型轉基因豬育種新材料，不僅能從根源上解決養(yǎng)豬業(yè)造成的環(huán)境污染問題，也將大幅度提高我國畜牧科技的自主創(chuàng)新和國際競爭力，為我國豬種改良和種質資源創(chuàng)新提供技術支撐。本研究通過檢測F1代轉xynB基因豬飼料消化代謝和對其生長性能的影響，為驗證轉基因豬的實際效果提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 消化代謝試驗

將體重大小一致、健康的11頭轉xynB基因杜洛克公豬和8頭試驗對照非轉基因豬分別放入代謝籠中，使用未添加木聚糖酶制劑的全價飼糧預飼，預飼期1周，正式試驗期5d，每天記錄每頭豬的采食量。采用全收糞法，每天取尿液1/10體積收集記錄，并把糞尿置于-20℃冰箱保存。試驗結束后，分別檢測糞尿中能量、粗蛋白、粗脂肪、粗纖維、粗灰分、水分、干物質、鈣和磷。

1.2 生長性能測定

參考《全國種豬遺傳評估方案》，再根據(jù)實際測定條件共測定11組性狀。分別是初生重、眼肌面積、肌肉厚度、料肉比、體重、體高、體長、管圍、乳頭數(shù)、校正100kg體重日齡、校正100kg體重背膘厚。

2 結果與分析

2.1 消化代謝試驗結果

由圖1可以看出，轉xynB基因903504家系和950901家系轉基因組與非轉基因組在能量、氮、粗脂肪、粗纖維、粗灰分、Ca、P的表觀消化率之間均沒有顯著差異（P＞0.05）。

2.2 生長性能測定結果

由表2可以看出，除轉xynB基因公豬的體長顯著高于非轉基因豬外（P＜0.05），其余指標均無顯著差異。轉xynB基因母豬與非轉基因母豬在11個生長性能指標上均無顯著差異。

圖2 轉xynB基因的質粒結構圖

表1 試驗飼料營養(yǎng)有效成分

表2 轉木聚糖酶基因公豬和母豬30～100kg生長性能測定指標數(shù)據(jù)分析

3 討論

本研究所使用的轉xynB基因豬是利用豬的腮腺分泌蛋白（PSP）基因調控區(qū)構建豬腮腺組織表達載體制備而成 (圖2)。本試驗所選的豬采用的PSP啟動子僅為轉錄起始位點上游10Kb區(qū)域，在其上游或下游可能存在尚未發(fā)現(xiàn)的增強子等重要調控元件序列，這也許是轉入基因木聚糖酶表達水平低的重要原因。此外，其密碼子沒有根據(jù)豬密碼子偏好性優(yōu)化，而影響該基因在豬體內的轉錄效率。另外也有可能與日糧的設計有關，曾有報道利用含植酸磷53%的豆粕作為唯一磷來源的飼料飼喂轉植酸酶基因斷奶仔豬和生長豬，結果顯示轉基因斷奶仔豬和生長豬的糞磷含量與非轉基因豬相比分別減少75%和56%[1]。本試驗設計的日糧營養(yǎng)成分表（見附表），滿足豬的生長需求，在未添加木聚糖酶的情況，兩者表觀消化率和生長性能并無顯著差異。

[1]Golovan S P,Meidinger R G,Ajakaiye A,et al.Pigs expressing salivary phytase produce low-phosphorus manure[J].Nature Biotechnology,2001,19(8):741-745.

*通訊作者：李洋（1989-)，男，碩士，從事動物遺傳育種與繁殖工作。