趙 爽，劉志高，馮 彬，季夢(mèng)成

（浙江農(nóng)林大學(xué) 風(fēng)景園林與建筑學(xué)院,浙江 臨安311300）

山木通扦插繁殖及生根機(jī)制

趙 爽，劉志高，馮 彬，季夢(mèng)成

（浙江農(nóng)林大學(xué) 風(fēng)景園林與建筑學(xué)院,浙江 臨安311300）

以山木通Clematis finetiana 1年生枝條為材料，針對(duì)植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)種類(lèi)和質(zhì)量濃度、浸泡時(shí)間、扦插基質(zhì)等4個(gè)因素，采用L9（34）正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)扦插試驗(yàn)，研究山木通扦插繁殖技術(shù)及生根過(guò)程中相關(guān)氧化酶［氧化物酶（POD），吲哚乙酸氧化酶（IAAO），多酚氧化酶（PPO）］活性，可溶性糖、可溶性蛋白、淀粉質(zhì)量分?jǐn)?shù)的動(dòng)態(tài)變化。結(jié)果表明：山木通屬于皮部生根類(lèi)型，不同外源植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)及質(zhì)量濃度、浸泡時(shí)間和扦插基質(zhì)4個(gè)因素對(duì)山木通插穗生根的影響均達(dá)到極顯著水平（P＜0.01），以河沙扦插基質(zhì)，100 mg·L－1吲哚丁酸（IBA）浸泡2 h處理的山木通扦插的生根質(zhì)量最佳，生根率達(dá)21.67%。生根過(guò)程中，可溶性糖質(zhì)量分?jǐn)?shù)在不定根誘導(dǎo)期和根系生長(zhǎng)期下降，根系表達(dá)期和生長(zhǎng)后期糖質(zhì)量分?jǐn)?shù)有所回升；淀粉質(zhì)量分?jǐn)?shù)持續(xù)下降；可溶性蛋白質(zhì)量分?jǐn)?shù)在扦插后逐漸下降，插穗大量生根期達(dá)到谷值，然后又逐漸上升。插穗內(nèi)POD，PPO，IAAO活性的變化均呈現(xiàn) “上升—下降”的趨勢(shì)，在不定根表達(dá)初期達(dá)到峰值。經(jīng)IBA處理的插穗營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)變化幅度較對(duì)照組顯著，且酶活性到達(dá)峰值時(shí)間較對(duì)照組早10 d，說(shuō)明外源生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)能夠提高營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的利用率和氧化酶活性。圖3表4參20

園藝學(xué)；山木通；扦插繁殖；營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)；氧化酶

Abstract:To study cutting propagation techniques with one-year-old cuttings of Clematis finetiana and to investigate the dynamic changes in activity of related oxidative enzymes ［peroxidase （POD）,indoleacetic acid oxidase （IAAO）,and polyphenol oxidase （PPO）］ as well as the content of soluble sugar,soluble protein,and starch,an L9（34） orthogonal experiment was conducted with four treatments of exogenous hormones,hormone concentration,soaking time,and cutting matrix.Results indicated that rooting of C.finetiana was derived from the cortex.The effects of different exogenous hormones,hormone concentration,soaking time,and cutting matrix on rooting were notable by variance analysis.The best rooting formula was as follows:a matrix of river sand processed with Indole-3-butyric acid （1H-Indole-3-butanoic acid （IBA） 100 mg·L－1for 2 h producing a rooting rate of 22.7%.In the rooting process,the content of soluble sugar increased during the induction and root growth periods,but decreased during the expression period and the late growth stage.Soluble protein content decreased gradually after cutting reaching a low point when most cuttings rooted.Starch content declined throughout the process.Also,the POD,IAAO,and PPO activities all increased first and then decreased reaching a peak in the early stages of expression.Additionally,greater nutrient content for the test group was found than the control,and peak oxidase activities of test groups arrived 10 d earlier than the control.This demonstrated that exogenous hormones could improve the nutrient utilization and oxidase activities of cuttings.［Ch,3 fig.4 tab.20 ref.］

Key words:horticulture;Clematis finetiana;cutting propagation;nutrients;oxidases

毛茛科Ranunculaceae鐵線(xiàn)蓮屬Clematis植物是一類(lèi)具有觀(guān)賞和藥用價(jià)值的植物，攀援性強(qiáng)，花型多變，花色豐富，花期長(zhǎng)，也是優(yōu)良的垂直綠化材料［1］。由于鐵線(xiàn)蓮屬植物多數(shù)存在結(jié)實(shí)少，種子萌發(fā)率低或萌發(fā)時(shí)間長(zhǎng)等問(wèn)題，不宜采用有性繁殖，園林栽培應(yīng)用受到限制。鐵線(xiàn)蓮屬植物的無(wú)性繁殖研究已成為園林領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)，為擴(kuò)大鐵線(xiàn)蓮屬植物在園林中的應(yīng)用，許多學(xué)者也陸續(xù)開(kāi)展了相關(guān)研究［2－3］。鐵線(xiàn)蓮扦插繁殖研究以栽培品種為主，對(duì)鐵線(xiàn)蓮屬野生種的研究甚少，與栽培品種相比，野生種適應(yīng)性好，利用前景廣闊。山木通Clematis finetiana為鐵線(xiàn)蓮屬多年生藤本植物，花期4－5月，花色潔白，小而繁茂，栽培適應(yīng)性佳，但其自然結(jié)實(shí)率和種子繁殖系數(shù)均偏低［4］。同時(shí)，山木通野生群體中存在花色、花型自然變異的單株，是優(yōu)良的觀(guān)賞種質(zhì)資源，唯有通過(guò)無(wú)性繁殖才能實(shí)現(xiàn)品種化。目前，對(duì)山木通的研究主要集中在化學(xué)成分及藥用價(jià)值方面［5－6］，有關(guān)繁殖技術(shù)研究的報(bào)道較少。本研究以山木通1年生枝條作為試材，探究適宜的扦插條件組合，并對(duì)其扦插生根機(jī)制進(jìn)行系統(tǒng)研究，以期為山木通的繁殖及在園林中的應(yīng)用提供理論支持。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

試驗(yàn)插條選自浙江農(nóng)林大學(xué)鐵線(xiàn)蓮種質(zhì)資源圃，選取母株長(zhǎng)勢(shì)旺盛，腋芽飽滿(mǎn)，無(wú)病害的1年生枝條中上部作為插穗。剪取插條長(zhǎng)為5～6 cm，含芽1對(duì)·插條－1，保留1～2片葉子，上切口距芽1 cm，下切口距芽約4～5 cm。采集插條后浸泡在清水中，避免失水，隨后根據(jù)試驗(yàn)要求進(jìn)行扦插處理。

1.2 最佳扦插生根方案的選擇

采用4因素3水平的L9（34）正交試驗(yàn)，研究植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)種類(lèi)和質(zhì)量濃度、處理時(shí)間和扦插基質(zhì)對(duì)山木通扦插生根的影響。通過(guò)多重比較分析，篩選出最適宜山木扦插生根的組合。具體因素和水平見(jiàn)表1，插穗20個(gè)·處理－1，重復(fù)3次。扦插試驗(yàn)于2015年5月22日在浙江農(nóng)林大學(xué)溫室內(nèi)進(jìn)行，白天25～29℃，晚間23～25℃，白天用75%遮陽(yáng)網(wǎng)遮陽(yáng)。扦插后每天早晚各噴水1次以保持基質(zhì)和枝條濕潤(rùn)，噴水約10 min·次－1，插穗生根后適當(dāng)減少?lài)娝螖?shù)和時(shí)間。

表1 山木通扦插正交試驗(yàn)表Table1 Orthogonal test of Clematis finetiana cutting

1.3 扦插生根機(jī)理研究

1.3.1 樣品采集 于2016年5月19日在浙江農(nóng)林大學(xué)溫室內(nèi)進(jìn)行扦插生根機(jī)制試驗(yàn)，設(shè)置對(duì)照與處理2組試驗(yàn)，插穗200個(gè)·組－1，以清水作為對(duì)照。自扦插之日起隔10 d取樣1次，共6次，取樣部位為插穗基部2～3 cm莖段，同年7月8日結(jié)束取樣。采樣后用冰桶迅速帶回實(shí)驗(yàn)室，清水沖洗并置于－79℃低溫冰箱內(nèi)保存?zhèn)溆谩?/p>

1.3.2 插穗生根的形態(tài)解剖學(xué)研究 剪取0.5～1.0 cm長(zhǎng)莖段，用體積分?jǐn)?shù)為70%的甲醛-乙醇-醋酸混合固定液（FAA）固定，常規(guī)石蠟切片法制片，番紅-固綠對(duì)染，Axio lmager A2正置熒光顯微鏡觀(guān)察拍照。

1.3.3 扦插生根過(guò)程中生理指標(biāo)的測(cè)定 剪取插穗基部2～3 cm莖段0.2 g，3次重復(fù)?？扇苄蕴呛偷矸鄣臏y(cè)定采用蒽酮比色法［7］，可溶性蛋白測(cè)定采用考馬斯亮藍(lán)G-250染色法［7］，過(guò)氧化物酶（POD）活性的測(cè)定采用愈創(chuàng)木酚法［7］，多酚氧化酶（PPO）活性測(cè)定采用鄰苯二酚比色法［8］，吲哚乙酸氧化酶（IAAO）活性測(cè)定采用二氯酚比色法［9］。

1.4 數(shù)據(jù)處理方法

采用Microsoft Excel和SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，用Origin作圖軟件進(jìn)行繪圖。

2 結(jié)果與分析

2.1 最佳扦插生根方案的選擇

山木通扦插各處理生根情況見(jiàn)表2。從生根率來(lái)看，處理3、處理8與其他組處理差異極顯著，處理3與處理8之間也存在極顯著差異（P＜0.01），以處理8生根率效果最好；平均根長(zhǎng)以處理1，處理2和處理3為最好，與其他處理差異極顯著（P＜0.01），處理8次之；處理8平均根數(shù)與其他處理組差異極顯著（P＜0.01），根數(shù)量最多，處理9次之。綜合3項(xiàng)生根指標(biāo)，處理8扦插生根效果最好，生根率達(dá)21.67%，平均根長(zhǎng)為2.63 cm，平均生根數(shù)量達(dá)10條。方差分析（表3）表明，不同植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)種類(lèi)、植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)濃度、外源植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)的處理時(shí)間及扦插基質(zhì)對(duì)山木通扦插生根率具有極顯著影響（P＜0.01）。

表2 山木通扦插生根情況Table 2 Rooting results of Clematis finetiana cutting

表3 山木通扦插正交試驗(yàn)各因素對(duì)生根率影響的方差分析Table 3 Variance analysis for 5 factors of Clematis finetiana cutting on orthogonal test

表4多重比較分析表明：在不同質(zhì)量濃度IBA與ABT處理生根率無(wú)顯著差異，但與NAA+IBA形成極顯著差異 （P＜0.01），生根率僅為IBA處理的29.5%；植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)質(zhì)量濃度以100 mg·L－1效果最好，與300，0 mg·L－1形成極顯著差異，生根率較后2種處理高4.82%～5.00%；插穗浸泡時(shí)間以2 h為宜，扦插基質(zhì)以為河沙最佳，與其他2種基質(zhì)形成極顯著差異（P＜0.01），約為2種基質(zhì)的2倍，說(shuō)明山木通扦插以透水性好、質(zhì)地疏松的基質(zhì)為宜。因此，山木通最佳扦插生根方案為處理8，即扦插基質(zhì)為河沙，100 mg·L－1IBA處理2 h，生根率可達(dá)21.67%。

表4 不同因素和水平對(duì)山木通生根率影響Table 4 Multiple comparisons for different factors and levels on rooting rates of Clematis finetiana

2.2 山木通扦插生根過(guò)程中插穗生理生化指標(biāo)的變化

2.2.1 可溶性糖質(zhì)量分?jǐn)?shù)與生根的關(guān)系 山木通扦插生根過(guò)程中，處理8（100 mg·L－1IBA處理2 h，扦插基質(zhì)為河沙）與對(duì)照插穗可溶性糖質(zhì)量分?jǐn)?shù)變化規(guī)律一致，均呈現(xiàn) “下降—上升—下降—上升”趨勢(shì)，但處理8插穗變化幅度較對(duì)照組顯著（圖1A）。處理8和對(duì)照前10 d可溶性糖質(zhì)量分?jǐn)?shù)緩慢下降，10～20 d 顯著下降并達(dá)到谷值， 分別為 33.48 mg·L－1，59.90 mg·L－1。 10～20 d 處于不定根誘導(dǎo)期，插穗內(nèi)代謝旺盛，營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)被大量消耗；對(duì)照組可溶性糖質(zhì)量分?jǐn)?shù)約為處理組的2倍，說(shuō)明IBA處理能夠促進(jìn)插穗對(duì)可溶性糖的利用。20～30 d可溶性糖質(zhì)量分?jǐn)?shù)稍有回升，可能是由于可溶性糖的急劇降低，促使插穗內(nèi)淀粉酶活性增強(qiáng)，淀粉加速水解，增加了可溶性質(zhì)量分?jǐn)?shù)；隨著淀粉質(zhì)量分?jǐn)?shù)的持續(xù)降低，轉(zhuǎn)化為可溶性糖的量減少，此時(shí)根系突破皮層進(jìn)入伸長(zhǎng)生長(zhǎng)階段需消耗大量養(yǎng)分，導(dǎo)致可溶性糖質(zhì)量分?jǐn)?shù)再次下降。40 d后插穗逐步具備產(chǎn)生營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的能力，可溶性糖質(zhì)量分?jǐn)?shù)又回升。

2.2.2 淀粉質(zhì)量分?jǐn)?shù)與生根的關(guān)系 圖1B顯示，處理8與對(duì)照的淀粉質(zhì)量分?jǐn)?shù)持續(xù)下降，前期下降較快，后期緩慢，但處理8插穗內(nèi)淀粉質(zhì)量分?jǐn)?shù)下降速度大于對(duì)照，說(shuō)明IBA處理能夠促進(jìn)插穗淀粉降解。扦插前期，不定根發(fā)育和愈傷組織的形成需消耗大量的可溶性糖，淀粉下降速度快，隨著淀粉的大量消耗，下降速度減緩。

2.2.3 可溶性蛋白質(zhì)量分?jǐn)?shù)與生根的關(guān)系 處理8與對(duì)照可溶性蛋白質(zhì)量分?jǐn)?shù)呈現(xiàn) “下降—上升”的趨勢(shì)（圖1C）。前30 d處理8可溶性蛋白質(zhì)量分?jǐn)?shù)低于對(duì)照組，40 d后，處理8高于對(duì)照，且對(duì)照降到谷值的時(shí)間較處理8晚10 d，處理8與對(duì)照達(dá)到谷值時(shí)的可溶性蛋白質(zhì)量分?jǐn)?shù)分別為12.33，15.00 mg·g－1。綜合山木通扦插生根外部形態(tài)觀(guān)察可知，前30 d為插穗不定根誘導(dǎo)與表達(dá)期，同時(shí)伴隨著愈傷組織的形成，需消耗大量的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，可溶性蛋白質(zhì)量分?jǐn)?shù)大幅下降。不定根形成后，由于水分、營(yíng)養(yǎng)的供應(yīng)及光合作用的進(jìn)行，可溶性蛋白質(zhì)量分?jǐn)?shù)逐漸上升，對(duì)照組可溶性蛋白質(zhì)量分?jǐn)?shù)的變化滯后于處理組，說(shuō)明IBA處理促進(jìn)了不定根的提前表達(dá)。

2.2.4 過(guò)氧化物酶（POD）活性與生根的關(guān)系 由圖1D可見(jiàn)：處理8與對(duì)照插穗POD活性均在扦插前期升高，處理8在20 d達(dá)到峰值，對(duì)照在30 d達(dá)到峰值，之后開(kāi)始下降。扦插前期，POD活性高有助于消除植物體內(nèi)多余的氧化氫及酚類(lèi)物質(zhì)，降低IAA質(zhì)量濃度，利于根源基的誘導(dǎo)。隨著根系伸出和愈傷的形成，POD活性顯著下降，IAA質(zhì)量濃度升高，有利于根系突破皮層。與對(duì)照相比，處理8插穗POD活性達(dá)到峰值時(shí)間早于對(duì)照，且活性高于對(duì)照，說(shuō)明IBA處理提高了POD的活性，對(duì)生根有一定的促進(jìn)作用。

2.2.5 吲哚乙酸氧化酶（IAAO）與生根的關(guān)系 在扦插生根過(guò)程中，處理8與對(duì)照IAAO酶活性呈先上升后下降的趨勢(shì)，處理8到達(dá)峰值時(shí)間較對(duì)照組早10 d，且峰值較對(duì)照高說(shuō)明處理組生根較對(duì)照早（圖1E）。在不定根表達(dá)期，插穗IAAO活性雖有下降，但下降幅度較小，仍維持在較高水平，這可能是抑制山木通插穗生根的原因之一。生長(zhǎng)期IAAO活性降低幅度大，此時(shí)根系已突破皮層，利于根系的發(fā)育與生長(zhǎng)。

2.2.6 多酚氧化酶（PPO）與生根的關(guān)系 由圖1F可見(jiàn)：山木通扦插生根過(guò)程中，PPO活性與POD和IAAO活性的變化規(guī)律基本相同，處理8與對(duì)照的PPO活性變化均呈現(xiàn) “上升—下降”的趨勢(shì)，在不定根形成期達(dá)到峰值。處理8插穗PPO活性在20 d達(dá)到峰值，對(duì)照在30 d達(dá)到峰值，且處理8活性高于對(duì)照，說(shuō)明外源植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)處理提高了PPO的活性，對(duì)插穗生根起到促進(jìn)作用。在愈傷組織與根源基形成時(shí)期，PPO活性升高，有利于催化酚類(lèi)物質(zhì)與IAA結(jié)合，形成 “IAA-酚酸復(fù)合物”，促進(jìn)不定根的發(fā)生。20 d后根系伸出體外，PPO活性下降，IAA質(zhì)量濃度升高，有助于根系伸長(zhǎng)生長(zhǎng)。

2.3 扦插生根過(guò)程中的解剖學(xué)研究

2.3.1 扦插生根過(guò)程中的外部形態(tài)觀(guān)察 扦插后20 d，處理組大多數(shù)插穗基部切口處凸起，少數(shù)皮部出現(xiàn)白色小凸起；扦插后30 d，處理組多數(shù)插穗已生根，約3～5條，均著生在插穗基部2～3 cm處（圖2A），對(duì)照組生根數(shù)量較少，且根系較短（圖2B）。插穗的大量生根期，即生根表達(dá)期，伴隨著愈傷組織的大量形成（圖2C，2D），且形成愈傷組織的插穗未有根系長(zhǎng)出。與對(duì)照生根插穗相比，處理8插穗根系數(shù)量多，根系長(zhǎng)，生根質(zhì)量明顯優(yōu)于對(duì)照（圖2E，2F）。50 d時(shí)處理組插穗已有葉片長(zhǎng)出（圖2G）。

2.3.2 扦插生根過(guò)程的解剖學(xué)觀(guān)察 扦插后20 d對(duì)插穗基部膨大處橫切面進(jìn)行觀(guān)察，發(fā)現(xiàn)膨大的插穗基部有根源基細(xì)胞的出現(xiàn)（圖3A），根源基細(xì)胞較其他細(xì)胞染色較深。隨著根源基細(xì)胞的不斷發(fā)育分裂，將周?chē)?xì)胞擠向外端（圖3B），并進(jìn)行伸長(zhǎng)生長(zhǎng)，迫使插條皮部開(kāi)裂，不定根伸出體外（圖3C，3D）。扦插后30 d，對(duì)愈傷組織進(jìn)行橫切面觀(guān)察，發(fā)現(xiàn)山木通插穗雖能形成愈傷組織（圖3E），但在愈傷組織中未發(fā)現(xiàn)根原始體。

圖1 山木通扦插生根過(guò)程中生理指標(biāo)的變化Figure 1 Changes of physiological index during rooting cuttings of Clematis finetiana

圖2 山木通扦插生根過(guò)程的形態(tài)觀(guān)察Figure 2 Morphological observation of C.finetiana’s rooting process

3 討論

本研究結(jié)果表明：外源植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)及其質(zhì)量濃度、處理時(shí)間、扦插基質(zhì)等4個(gè)因素對(duì)山木通扦插生根率的影響達(dá)到極顯著差異（P＜0.01），100 mg·L－1IBA浸泡2 h后扦插于河沙中為山木通扦插生根的最佳處理組合，生根效果最好，生根率可達(dá)22.67%。外源植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)以IBA生根質(zhì)量最好，ABT次之，NAA+IBA最差。這可能是由于IBA被植物吸收后不易轉(zhuǎn)移，存留在插穗基部促進(jìn)生根。植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)質(zhì)量濃度和插穗浸泡時(shí)間對(duì)生根的影響是相互的，當(dāng)質(zhì)量濃度大于100 mg·L－1時(shí)，山木通的生根質(zhì)量隨質(zhì)量濃度的增加而降低，當(dāng)質(zhì)量濃度低于100 mg·L－1時(shí)，其生根品質(zhì)隨質(zhì)量濃度的升高而增加；處理時(shí)間長(zhǎng)于2 h時(shí)，高質(zhì)量濃度植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)抑制生長(zhǎng)，山木通生根質(zhì)量下降，短于2h時(shí)，低質(zhì)量濃度植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)浸泡不充分，生根質(zhì)量欠佳?；|(zhì)在扦插過(guò)程中除對(duì)植物起到支持和固定作用外，還為植物提高一個(gè)穩(wěn)定的生根環(huán)境［10］。本研究中，河沙進(jìn)行山木通扦插生根質(zhì)量最佳，河沙+泥炭+蛭石次之，泥炭+珍珠巖生根質(zhì)量最差，這可能與基質(zhì)的通氣性、透水性有關(guān)。目前，對(duì)鐵線(xiàn)蓮屬植物扦插繁殖技術(shù)也有一定的研究，如對(duì)粗齒鐵線(xiàn)蓮Clematis grandi-dentata扦插研究表明：400 mg·L－1NAA處理插穗10 min，生根效果最佳［11］； 6-BA較NAA能更好地促進(jìn)圓錐鐵線(xiàn)蓮Clematis terniflora生根，以50 mg·L－16-BA效果最好［12］。本試驗(yàn)植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)種類(lèi)與質(zhì)量濃度僅有3個(gè)水平，對(duì)不同植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)下更多質(zhì)量濃度對(duì)山木通扦插生根質(zhì)量的影響還有待進(jìn)一步研究。

圖3 山木通扦插生根過(guò)程的解剖學(xué)特征Figure 3 Anatomical features of Clematis finetiana rooting process

營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)是插穗生根的必要條件之一，也是插穗維持機(jī)體平衡的重要能源，早有研究發(fā)現(xiàn)母株的營(yíng)養(yǎng)水平對(duì)插穗生根及產(chǎn)生新梢具有顯著影響。本試驗(yàn)研究表明：山木通插穗可溶性糖質(zhì)量分?jǐn)?shù)雖有波動(dòng)，但整體變化趨勢(shì)與可溶性蛋白質(zhì)量分?jǐn)?shù)一致，均在生根誘導(dǎo)和形成期下降明顯，消耗的糖類(lèi)和蛋白質(zhì)一方面用于維持插穗的生活力和物質(zhì)轉(zhuǎn)化的能量，一方面用于根源基的發(fā)生。不定根形成后插穗吸收營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的能力增強(qiáng)，伴隨著新葉的長(zhǎng)出，插穗自身能夠合成營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，糖和蛋白質(zhì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)回升。此結(jié)論與梁文斌等［13］對(duì)短梗大參Macropanax rosthornii生根理化性質(zhì)分析的結(jié)果一致。插穗中淀粉質(zhì)量分?jǐn)?shù)則呈持續(xù)下降趨勢(shì)，淀粉只有水解為糖類(lèi)才能被植物體吸收，是插穗內(nèi)可溶性糖的補(bǔ)充來(lái)源。經(jīng)100 mg·L－1IBA處理的山木通插穗可溶性糖、淀粉及可溶性蛋白質(zhì)量分?jǐn)?shù)變化幅度均較對(duì)照組大，說(shuō)明IBA處理有利于插穗中可溶性糖和蛋白質(zhì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)的積累，提高營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)利用率，對(duì)山木通扦插生根有一定的促進(jìn)作用，這與柚木Tectona grandis嫩枝扦插研究中IBA處理插穗的可溶性糖質(zhì)量分?jǐn)?shù)顯著增加［14］相符合。另外，本研究中發(fā)現(xiàn)山木通扦插生根過(guò)程中伴隨愈傷組織的形成，且形成愈傷組織的插穗未有根系長(zhǎng)出，同時(shí)皮部生根也會(huì)受到影響，這可能是因?yàn)橛鷤M織形成與不定根發(fā)生之間存在競(jìng)爭(zhēng)關(guān)系，養(yǎng)分的供應(yīng)難以支撐兩者的同時(shí)發(fā)生，因此，形成愈傷的插穗皮部生根不會(huì)發(fā)生或很少發(fā)生，進(jìn)而導(dǎo)致山木通插穗生根率低。且有研究表明，插穗愈傷組織的形成及發(fā)育對(duì)不定根的產(chǎn)生有抑制作用。

POD，PPO和IAAO酶通過(guò)調(diào)節(jié)插穗體內(nèi)生長(zhǎng)素IAA的含量參與山木通扦插生根過(guò)程，但作用機(jī)制各不相同，三者通過(guò)相互作用影響插穗生根。POD作用的某些產(chǎn)物可能是不定根發(fā)生所必須的輔助因子，促進(jìn)不定根的形成［15］。在山木通扦插生根過(guò)程中，POD活性在不定根誘導(dǎo)期上升，生根期逐漸下降，這是因?yàn)楦呋钚缘腜OD氧化較多的內(nèi)源IAA，利于根源基的誘導(dǎo)，低活性的POD減少I(mǎi)AA的分解，促進(jìn)不定根的形成。這與宋麗紅等［15］的研究結(jié)論相一致。PPO能夠催化酚類(lèi)物質(zhì)和IAA形成 “酚酸復(fù)合物”，同時(shí)增強(qiáng)插穗呼吸作用，使插穗生理狀態(tài)活躍，促進(jìn)不定根的發(fā)生［16］。在本研究中，PPO在生根誘導(dǎo)期活性升高，大量生根期即生根表達(dá)期達(dá)到峰值，與前人的研究結(jié)論一致［17］。生根后期活性下降，IAA質(zhì)量濃度增加，利于根系的伸長(zhǎng)生長(zhǎng)。IBA處理使插穗中PPO活性較對(duì)照組高，生根效果也較對(duì)照組好，這一結(jié)果與劉玉民等［18］對(duì)馬尾松Pinus massoniana扦插所得的結(jié)論基本一致。離體生根過(guò)程中，高活性的IAAO使內(nèi)源IAA水平降低是生根誘導(dǎo)期的特點(diǎn)之一，質(zhì)量濃度低的IAA利于不定根的誘導(dǎo)，IAAO活性升高，高質(zhì)量濃度的IAA利于根系的萌發(fā)與生長(zhǎng)，IAAO活性下降。這與本研究中不定根誘導(dǎo)期和表達(dá)期插穗表現(xiàn)出高的IAAO活性，不定根生長(zhǎng)期插穗IAAO活性下降的結(jié)論基本一致。另外，本研究發(fā)現(xiàn)山木通插穗內(nèi)IAAO活性變化不顯著，與其他生根率較高的插穗相比［19-20］，山木通插穗內(nèi)IAAO在不定根誘導(dǎo)期上升幅度較小，酶活狀態(tài)不活躍可能是導(dǎo)致山木通插穗生根率低的另一原因。由于實(shí)驗(yàn)本身的局限性，山木通插穗生根特性與酶活性變化的關(guān)系還有待進(jìn)一步研究。

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Cutting propagation technology and rooting of Clematis finetiana

ZHAO Shuang,LIU Zhigao,FENG Bin,JI Mengcheng
（College of Landscape Architecture,Zhejiang A&F University,Lin’an 311300,Zhejiang,China）

S723.1；S615

A

2095-0756（2017）05-0955-08

2016-10-10；

2016-12-07

浙江省農(nóng)業(yè)（林木）新品種選育重大科技專(zhuān)項(xiàng)（2016C02056-13-4）

趙爽，從事野生園林植物資源分類(lèi)與應(yīng)用研究。E-mail:185937456@qq.com。通信作者：季夢(mèng)成，教授，從事植物分類(lèi)與觀(guān)賞應(yīng)用研究。E-mail：mchji@zafu.edu.cn