郝小燕，高紅，王馨影，張廣寧，孫凱晶，劉巖，張永根*

玉米纖維飼料、青貯玉米和苜蓿干草間組合效應(yīng)研究

郝小燕1,2，高紅1，王馨影1，張廣寧1，孫凱晶1，劉巖1，張永根1*

（1.東北農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，哈爾濱150030；2.山西農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，山西太谷030801）

試驗(yàn)旨在研究玉米纖維飼料（DCGF）、青貯玉米、苜蓿干草間組合效應(yīng)，將DCGF與青貯玉米以0：100、15：85、25：75、35：65、45：55、100：0比例組合，利用體外瘤胃發(fā)酵技術(shù)，分析不同組合對(duì)體外發(fā)酵指標(biāo)、單項(xiàng)組合和綜合組合效應(yīng)值影響，選擇DCGF與青貯玉米理想組合比例（X）；再與苜蓿干草以0：100、20：80、40：60、60：40、80：20和100：0組合發(fā)酵，篩選3種飼料間適宜組合比例。結(jié)果表明，DCGF與青貯玉米各組合在產(chǎn)氣參數(shù)上差異顯著（P＜0.05），隨著DCGF比例增加，菌體蛋白、總揮發(fā)性脂肪酸產(chǎn)量逐漸提高；多項(xiàng)組合效應(yīng)指標(biāo)評(píng)定結(jié)果表明DCGF與青貯玉米以35：65組合時(shí)正組合效應(yīng)值最大。DCGF/青貯玉米（35：65）與苜蓿干草以80：20比例組合時(shí)產(chǎn)氣量最大，以60：40比例組合時(shí)氨態(tài)氮組合效應(yīng)值最大，以80：20組合時(shí)總揮發(fā)性脂肪酸組合效應(yīng)值最大。綜合組合效應(yīng)指數(shù)，表明DCGF/青貯玉米（35：65）與苜蓿干草以60：40比例組合時(shí)效應(yīng)值最大。由此可見(jiàn)，DCGF與青貯玉米以35：65比例組合較為適宜，DCGF/青貯玉米（35：65）與苜蓿干草以60：40比例組合效果較好。

玉米纖維飼料；組合效應(yīng)；產(chǎn)氣量；菌體蛋白

粗飼料是反芻動(dòng)物重要營(yíng)養(yǎng)來(lái)源，品質(zhì)直接影響其健康和生產(chǎn)性能。優(yōu)質(zhì)粗飼料資源缺乏是影響我國(guó)奶牛養(yǎng)殖業(yè)持續(xù)發(fā)展主要問(wèn)題之一。因此，開(kāi)發(fā)和利用優(yōu)質(zhì)糧食加工副產(chǎn)物資源對(duì)奶牛養(yǎng)殖具有重要意義。德國(guó)學(xué)者在19世紀(jì)末首次發(fā)現(xiàn)飼料間存在組合效應(yīng)，并得到廣泛認(rèn)同[1-2]。盧德勛指出飼料間互作時(shí)某些養(yǎng)分利用率或采食量高于各飼料加權(quán)值時(shí)即說(shuō)明飼料間產(chǎn)生正組合效應(yīng)，利于提高飼料采食量和利用效率[3]。郭冬生研究表明，由于動(dòng)物消化生理和日糧結(jié)構(gòu)差異，反芻動(dòng)物較單胃動(dòng)物更易受飼料間組合效應(yīng)影響，且在低質(zhì)飼料間組合效應(yīng)更加明顯[4]。

玉米纖維飼料（Dry corn gluten feed，DCGF）是一種富含可消化纖維和蛋白的優(yōu)質(zhì)糧食加工副產(chǎn)物，開(kāi)發(fā)利用前景良好。DCGF是濕磨法生產(chǎn)玉米淀粉過(guò)程中由玉米皮和玉米浸泡水濃縮形成的玉米漿以約2：1比例混合、烘干而成的麩質(zhì)飼料。DCGF中中性洗滌纖維（NDF）含量約45%～52%，粗蛋白（CP）含量約17%～21%[5]。反芻動(dòng)物日糧中添加一定比例DCGF有利于穩(wěn)定瘤胃內(nèi)環(huán)境，有效避免瘤胃酸中毒發(fā)生[6]。目前玉米纖維飼料（濕態(tài)）在國(guó)外奶牛業(yè)應(yīng)用較多，但國(guó)內(nèi)應(yīng)用相對(duì)較少（干、濕態(tài)）。本試驗(yàn)采用體外產(chǎn)氣法研究DCGF與玉米青貯、苜蓿2種常用粗飼料間組合效應(yīng)，綜合評(píng)定3種飼料的適宜組合比例，為DCGF在奶牛日糧中合理應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

DCGF采自嘉吉生化有限公司（吉林），青貯玉米（corn silage，CS）和苜蓿干草（alfalfa hay，AH）均采自齊齊哈爾飛鶴原生態(tài)牧場(chǎng)，樣品經(jīng)65℃烘干48 h制成風(fēng)干樣，粉碎過(guò)40目篩后保存?zhèn)溆?。?jīng)測(cè)定3種飼料原料營(yíng)養(yǎng)成分見(jiàn)表1。

表13 種飼料營(yíng)養(yǎng)成分（干物質(zhì)基礎(chǔ)）Table 1 Nutrient components of three kinds of feeds(DM basis)(%)

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

DCGF與玉米青貯以0：100、15：85、25：75、35：65、45：55、100：0比例組合，通過(guò)測(cè)定發(fā)酵參數(shù)并計(jì)算組合效應(yīng)值，選擇理想組合比例（X）后再與苜蓿干草以0：100、20：80、40：60、60：40、80：20和100：0組合發(fā)酵。每組合3個(gè)重復(fù)。

1.3 測(cè)定指標(biāo)與方法

1.3.1 人工瘤胃液制備及發(fā)酵指標(biāo)測(cè)定

瘤胃液取自3頭裝有永久性瘤胃瘺管的健康荷斯坦奶牛，于晨飼后2 h采集瘤胃不同位點(diǎn)瘤胃液，裝入預(yù)熱并充滿(mǎn)CO2保溫瓶中，立即密封帶回實(shí)驗(yàn)室。將瘤胃液快速經(jīng)4層紗布過(guò)濾后并與緩沖液以1：2（體積比）混合，持續(xù)通入CO2，保持溫度為39℃。緩沖液參照Menke[7]方法配制。預(yù)先準(zhǔn)確稱(chēng)取組合飼料樣品200 mg，裝入4.0 cm×1.5 cm尼龍袋中，置于發(fā)酵管（100 mL注射器）底部。每個(gè)發(fā)酵管中抽取均勻、用CO2氣體飽和處理的人工瘤胃液30 mL，夾緊下端橡膠管置于39℃恒溫水浴搖床中培養(yǎng)，同時(shí)準(zhǔn)備空白發(fā)酵管及空白尼龍袋用于數(shù)據(jù)校正。

分別在2、4、6、8、12、16、24、36、48 h記錄產(chǎn)氣量（Gas production，GP），發(fā)酵結(jié)束后迅速在冷水浴中冷卻，終止發(fā)酵。發(fā)酵液經(jīng)3 500 r·min-1離心15 min后取上清液待測(cè)揮發(fā)性脂肪酸（Volatile fatty acids，VFA）、氨態(tài)氮（Ammonia nitrogen，NH3-N）和菌體蛋白（Microbial crude protein，MCP）濃度。尼龍袋及殘?jiān)米詠?lái)水漂洗直至水清澈無(wú)色，置于65℃烘箱中連續(xù)烘干48 h后，充分回潮、稱(chēng)重。

1.3.1.1 產(chǎn)氣參數(shù)測(cè)定

采用Schofield[8]等的產(chǎn)氣模型擬合不同飼料組合的產(chǎn)氣動(dòng)力學(xué)特征，模型如下：

Y=B[1-e-c(t-lag)]。

式中，Y表示t時(shí)間累計(jì)產(chǎn)氣量（mL）；B表示理論最大產(chǎn)氣量（mL）；c表示產(chǎn)氣速率（mL·h-1）；lag表示延滯時(shí)間（h）；t表示發(fā)酵時(shí)間（h）。

1.3.1.2 發(fā)酵指標(biāo)測(cè)定

采用AOAC（1997）[9]方法測(cè)定底物及發(fā)酵殘?jiān)晌镔|(zhì)（DM）與CP含量，參照VanSoest[10]方法測(cè)定NDF和酸性洗滌纖維（ADF）含量，差減法計(jì)算發(fā)酵底物DM體外消失率（IVDDM）[11]。上清液經(jīng)10 000×g 4℃離心15 min后，靛酚比色法測(cè)定上清液中NH3-N濃度[12]，布同良[13]方法測(cè)定MCP濃度，氣相色譜法測(cè)定VFA濃度[14]。VFA濃度測(cè)定色譜條件為：載氣N2，分流比40：1，進(jìn)樣量0.4 μL，溫度220℃；色譜柱參數(shù)為HP-INNOWax毛細(xì)管色譜柱恒流模式，流量2.0 mL·min-1，平均線速度38 cm·s-1；柱溫箱升溫程序?yàn)?20℃（3 min）-10℃/min-180℃（1 min）；檢測(cè)器參數(shù)為氫氣（H2）流量40 mL·min-1，空氣流量450 mL·min-1，柱流量+尾吹氣流量45 mL·min-1，火焰離子檢測(cè)器（FID）溫度250℃。每個(gè)樣品指標(biāo)測(cè)定3個(gè)重復(fù)。

1.3.2 組合效應(yīng)計(jì)算

單項(xiàng)組合效應(yīng)指數(shù)（single-factor associative effects index，SFAEI）和綜合組合效應(yīng)指數(shù)（multiple-factors associative effects index，MFAEI）參照袁翠林[15]方法。其中：

SFAEI=（組合后實(shí)測(cè)值-加權(quán)估測(cè)值）/加權(quán)估測(cè)值

加權(quán)估測(cè)值=單一飼料實(shí)測(cè)值×所占比例+另一飼料實(shí)測(cè)值×所占比例

MFAEI等于各單項(xiàng)組合效應(yīng)值之和。

1.4 數(shù)據(jù)處理及分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用Excel 2010初步整理，再用SAS 9.2軟件中混合模型多重比較。

2 結(jié)果與分析

2.1 DCGF與玉米青貯不同比例組合對(duì)體外產(chǎn)氣特性、干物質(zhì)消失率及發(fā)酵特性影響

由表2可知，DCGF與青貯玉米不同比例組合后，發(fā)酵產(chǎn)氣量和產(chǎn)氣參數(shù)存在差異。2種飼料組合后產(chǎn)氣量均高于單一原料發(fā)酵產(chǎn)氣量，DCGF與青貯玉米以35：65比例組合時(shí)產(chǎn)氣速度最快，產(chǎn)氣延滯時(shí)間最短，延滯時(shí)間與產(chǎn)氣量趨勢(shì)相反。DCGF比例占35%時(shí)48 h產(chǎn)氣量顯著高于其他組合（P＜0.05），且DCGF與玉米青貯組合后各組均顯著高于玉米青貯單一原料組產(chǎn)氣量。2種飼料組合后IVDDM顯著提高，其中DCGF比例為35%、45%和100%時(shí)IVDDM顯著高于0%、15%和25%組合。總體上，組合飼料各產(chǎn)氣參數(shù)及IVDDM均優(yōu)于單一飼料。48 h體外培養(yǎng)產(chǎn)氣量動(dòng)態(tài)變化見(jiàn)圖1。發(fā)酵12 h前，各組合產(chǎn)氣速度均較慢，12 h后產(chǎn)氣量迅速升高。DCGF比例為35%時(shí)，組合產(chǎn)氣量處于最高水平，而玉米青貯100%時(shí)產(chǎn)氣量最低。

DCGF和青貯玉米不同比例組合后體外發(fā)酵48 h瘤胃發(fā)酵指標(biāo)存在顯著差異（P＜0.05）。各組發(fā)酵液中NH3-N濃度隨著DCGF比例增加而增加，青貯玉米比例100%時(shí)NH3-N濃度最低。MCP濃度隨DCGF比例增加而提高，當(dāng)DCGF占35%時(shí)達(dá)到最大值，與DCGF占25%和45%組合差異不顯著（P＞0.05）。

各組合中DCGF比例越高，TVFA濃度越高，且發(fā)酵底物均為DCGF時(shí)VFA各組分均高于其他組合，玉米青貯比例為100%時(shí)VFA濃度最低。DCGF比例增加顯著降低乙酸/丙酸（P＜0.05）。

2.2 DCGF與青貯玉米不同比例組合效應(yīng)值

由表3可知，DCGF與青貯玉米各組合效應(yīng)與以產(chǎn)氣量、NH3-N、MCP和TVFA濃度計(jì)算SFAEI趨勢(shì)不同。SFAEI評(píng)定時(shí)，DCGF/青貯玉米比例為35：65時(shí)產(chǎn)氣量和IVDDM組合效應(yīng)值最高，而組合比例為15：85時(shí)IVDDM組合效應(yīng)值為負(fù)數(shù)。組合比例為45：55時(shí)MCP和TVFA效應(yīng)值最高，所有組合均產(chǎn)生MCP正效應(yīng)值和TVFA正效應(yīng)值。以MFAEI對(duì)產(chǎn)氣量、NH3-N、MCP和VFA綜合評(píng)定時(shí)，各組合均產(chǎn)生正組合效應(yīng)，MFAEI值排序?yàn)镈CGF/青貯玉米35：45＞45：55＞25：75＞15：85。

表2 DCGF與青貯玉米不同比例組合對(duì)體外瘤胃發(fā)酵產(chǎn)氣特性、干物質(zhì)消失率、NH3-N、MCP和VFA影響Table 2 Effects of different combination proportion of DCGF and corn silage on gas parameters,dry matter degradability,NH3-N,MCP and VFA of fermented rumen fluid

圖1 DCGF與玉米青貯不同比例組合48 h體外產(chǎn)氣量動(dòng)態(tài)變化Fig.1 Dynamic change of gas production of different combination proportion of DCGF and corn silage in 48 h

表3 DCGF與青貯玉米不同比例組合效應(yīng)綜合評(píng)定指數(shù)結(jié)果Table 3 Multiple-factors associative effects index of different combination proportion of DCGF and corn silage

2.3 DCGF/青貯玉米與苜蓿干草不同比例組合對(duì)體外產(chǎn)氣特性、干物質(zhì)消失率及發(fā)酵特性影響

由表4可知，將DCGF和玉米青貯以35：65組合后再與苜蓿干草以不同比例組合，發(fā)酵產(chǎn)氣量和產(chǎn)氣參數(shù)存在差異。與單一苜蓿干草相比，3種飼料組合后發(fā)酵48 h產(chǎn)氣量增加，隨DCGF/青貯玉米（35：65）比例增加，產(chǎn)氣量增加（P＜0.05），產(chǎn)氣速度加快，產(chǎn)氣延滯期縮短。DCGF/青貯玉米（35： 65）與苜蓿干草以80：20組合產(chǎn)氣量顯著大于單一苜蓿干草、20：80及40：60組合（P＜0.05）。DCGF/玉米青貯（35：65）與苜蓿干草以0：100、20：80、40：60組合產(chǎn)氣速度顯著低于80：20和100：0組合（P＜0.05）。

由圖2可知，3種飼料組合在發(fā)酵12 h后產(chǎn)氣量均高于單一苜蓿干草產(chǎn)氣量，低于DCGF/玉米青貯（35：65）產(chǎn)氣量。

表4 DCGF/青貯玉米（35：65）與苜蓿干草不同比例組合對(duì)體外瘤胃發(fā)酵產(chǎn)氣特性、干物質(zhì)消失率、NH3-N、MCP和VFA影響Table 4 Effects of different combination proportion of DCGF/corn silage(35：65)and alfalfa hay on gas parameters,dry matter degradability,NH3-N,MCP and VFA of fermented rumen fluid

圖2 DCGF/青貯玉米（35：65）與苜蓿干草不同比例組合48 h體外產(chǎn)氣量的動(dòng)態(tài)變化Fig.2 Dynamic change of gas production of different combination proportion of DCGF/ corn silage(35：65)and alfalfa hay in 48 h

由表4可知，3種飼料以不同比例組合對(duì)48 h發(fā)酵參數(shù)影響顯著。3種飼料組合后48 h體外干物質(zhì)消失率隨著DCGF/青貯玉米（35：65）比例增加而增加，單一苜蓿干草和DCGF/青貯玉米與苜蓿干草以20：80組合體外干物質(zhì)消失率顯著低于60：40、80：20、100：0組合（P＜0.05），60：40、80：20和100：0組合IVDDM差異不顯著（P＞0.05）；各組間MCP產(chǎn)量差異均不顯著（P＜0.05）；NH3-N濃度隨DCGF/青貯玉米比例增加而增加，除單一苜蓿干草及60：40組合外，各組間差異不顯著（P＞0.05）。總揮發(fā)性脂肪酸濃度為單一苜蓿組最低，與DCGF/青貯玉米（35：65）與苜蓿干草以20：80、40：60、60：40組合間差異不顯著（P＞0.05），與80：20和100：0組合差異顯著（P＜0.05）。各組間乙酸濃度差異不顯著（P＞0.05），丙酸濃度隨DCGF/青貯玉米比例增加而增加，DCGF/青貯玉米（35：65）與苜蓿干草以80：20組合丙酸濃度與100：0差異不顯著（P＞0.05），但顯著高于其他組合（P＜0.05）；隨著DCGF/青貯玉米（35：65）比例增加，乙酸/丙酸逐漸減小。

2.4 DCGF/青貯玉米與苜蓿干草不同比例組合效應(yīng)值

由表5可知，以SFAEI評(píng)定組合效應(yīng)時(shí)，DCGF/青貯玉米（35：65）與苜蓿干草以20：80比例組合時(shí)產(chǎn)氣量效應(yīng)值最高；干物質(zhì)消失率組合效應(yīng)中，DCGF/青貯玉米（35：65）與苜蓿干草以80：20組合時(shí)效應(yīng)值最高，20：80組合時(shí)效應(yīng)值最低；NH3-N組合效應(yīng)中，各組均表現(xiàn)正組合效應(yīng)，但DCGF/青貯玉米（35：65）與苜蓿干草以60：40組合時(shí)效應(yīng)值最大。在DCGF/青貯玉米（35：65）與苜蓿干草以80：20組合時(shí)產(chǎn)生MCP正組合效應(yīng)，其他比例均產(chǎn)生MCP效應(yīng)負(fù)值。隨著DCGF/青貯玉米（35：65）比例增加，TVFA效應(yīng)值隨之增加。以MFAEI對(duì)產(chǎn)氣量、IVDDM、NH3-N、MCP及TVFA綜合評(píng)定，除DCGF/青貯玉米（35：65）與苜蓿干草以20：80組合時(shí)產(chǎn)生負(fù)組合效應(yīng)，其他均產(chǎn)生正組合效應(yīng)；其中DCGF/青貯玉米（35：65）與苜蓿干草以60：40組合時(shí)效應(yīng)值最大。

表5 DCGF/青貯玉米（35：65）與苜蓿干草不同比例組合效應(yīng)綜合評(píng)定指數(shù)結(jié)果Table 5 esults of multiple-factors associative effects index of different combination proportion of DCGF/corn silage(35：65)and alfalfa hay

3 討論

體外發(fā)酵產(chǎn)氣量是衡量飼料可消化性的重要指標(biāo)，反映飼料可發(fā)酵程度及飼料蛋白質(zhì)營(yíng)養(yǎng)價(jià)值，產(chǎn)氣量與飼料消化率呈正相關(guān)[16]。飼料發(fā)酵時(shí)主要產(chǎn)氣來(lái)源是碳水化合物和粗蛋白質(zhì)，飼料可發(fā)酵性和瘤胃微生物活性越高，發(fā)酵產(chǎn)氣量越大[17]。本試驗(yàn)DCGF與玉米青貯和DCGF/玉米青貯與苜蓿干草組合后產(chǎn)氣量及產(chǎn)氣速度增加，隨DCGF或DCGF/玉米青貯比例增加而增加，產(chǎn)氣延滯期降低，原因是DCGF粗蛋白含量和可發(fā)酵碳水化合物含量較高，為微生物發(fā)酵提供充足碳源和氮源。DCGF含有大量NDF，但ADF含量較低，纖維可降解程度較高[18]。此外，非纖維性碳水化合物含量較高，淀粉、果膠等化合物在瘤胃微生物作用下快速降解，提高產(chǎn)氣量，縮短產(chǎn)氣延滯時(shí)間。Zhao等研究發(fā)現(xiàn)體外發(fā)酵產(chǎn)氣量與飼料可發(fā)酵有機(jī)物含量相關(guān)性較高[19]。與DCGF相比，苜蓿干草含可發(fā)酵有機(jī)物相對(duì)較少，隨苜蓿干草比例增加，產(chǎn)氣量呈下降趨勢(shì)。有關(guān)DCGF產(chǎn)氣特性及與其他粗飼料間組合效應(yīng)尚未見(jiàn)報(bào)道，缺乏試驗(yàn)對(duì)比。3種飼料組合后發(fā)酵產(chǎn)氣量顯著高于單一飼料產(chǎn)氣量，說(shuō)明組合后有效提高飼料消化率。本試驗(yàn)體外干物質(zhì)消化率隨DCGF或DCGF/青貯玉米（35：65）比例增加而逐漸提高，表現(xiàn)出正組合效應(yīng)，證明組合后飼料消化率提高。布同良等研究報(bào)道，粗飼料間組合效應(yīng)，可通過(guò)營(yíng)養(yǎng)素間互補(bǔ)，有效平衡單一粗飼料能氮不平衡缺陷，為瘤胃微生物生長(zhǎng)創(chuàng)造有利條件，提高纖維素降解率和組合粗飼料整體發(fā)酵水平[13,20]。

NH3-N是瘤胃微生物分解飼料含氮營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)主要產(chǎn)物，也是微生物合成MCP主要原料之一。瘤胃液中NH3-N濃度反映飼料蛋白質(zhì)在瘤胃中的降解程度及瘤胃微生物氨利用狀況。瘤胃中NH3-N濃度影響MCP合成，適宜NH3-N濃度有利于MCP合成，NH3-N不足可降低MCP合成效率，NH3-N濃度過(guò)高說(shuō)明氨在瘤胃內(nèi)釋放速度大于利用速度，利用效率降低[21]。正常瘤胃內(nèi)NH3-N濃度在1～76 mg·dL-1范圍內(nèi)波動(dòng)[22]。本試驗(yàn)NH3-N濃度在18.92～19.77 mg·dL-1范圍內(nèi)。NH3-N濃度隨青貯玉米比例增加而提高，可能是兩種飼料組合后微生物活性提高，蛋白質(zhì)降解率提高。在DCGF與青貯玉米最佳組合基礎(chǔ)上添加苜蓿干草發(fā)酵后，NH3-N濃度提高，表現(xiàn)正組合效應(yīng)，可能是含氮底物及微生物活性增加雙重因素造成。

VFA是反芻動(dòng)物能量利用主要形式，主要包括乙酸、丙酸、丁酸，及少量異丁酸、異戊酸、戊酸等[23]。瘤胃微生物將飼料中纖維素、半纖維素、淀粉、可溶性碳水化合物等首先轉(zhuǎn)化為丙酮酸，丙酮酸在三羧酸循環(huán)過(guò)程中經(jīng)不同代謝途徑轉(zhuǎn)化為乙酸、丙酸和丁酸等物質(zhì)。乙酸是合成反芻動(dòng)物體脂和乳脂重要原料，丙酸是反芻動(dòng)物體內(nèi)葡萄糖重要前體物質(zhì)。反芻動(dòng)物瘤胃壁吸收丙酸后在肝臟內(nèi)異生為葡萄糖，丙酸是奶牛合成乳糖重要前體物質(zhì)。丁酸是合成體脂和乳脂前體物，參與體內(nèi)能量代謝[24]。DCGF與青貯玉米組合后發(fā)酵TVFA產(chǎn)量高于玉米青貯單一發(fā)酵時(shí)產(chǎn)量，可能是組合后DCGF提供大量可發(fā)酵纖維，底物碳水化合物可發(fā)酵性提高；由其他發(fā)酵指標(biāo)看見(jiàn)，DCGF和玉米青貯組合后微生物活性提高，產(chǎn)生更多VFA。當(dāng)三種飼料原料組合后，隨著DCGF/青貯玉米（35：65）比例增加，可發(fā)酵纖維含量增加為微生物發(fā)酵提供充足底物，TVFA產(chǎn)量提高。本試驗(yàn)3種飼料組合后乙酸、丙酸和丁酸產(chǎn)量有不同程度變化，與不同飼料原料組合后發(fā)酵影響瘤胃微生物纖維素降解酶活性有關(guān)。另一方面，瘤胃內(nèi)主要纖維分解菌如溶纖維丁酸弧菌、產(chǎn)琥珀酸絲狀桿菌、白色瘤胃球菌等數(shù)量受粗飼料類(lèi)型影響，改變飼料纖維素降解和VFA組成[25]。Silva等報(bào)道反芻動(dòng)物僅飼喂秸稈類(lèi)粗飼料因易消化養(yǎng)分缺乏限制微生物生長(zhǎng)和增值[26]；秸稈與易消化纖維性飼料飼喂時(shí)，纖維分解菌優(yōu)先附著在消化率高的優(yōu)質(zhì)粗飼料上，微生物快速增殖，提高秸稈消化率、TVFA產(chǎn)量。

MCP是反芻動(dòng)物重要蛋白來(lái)源，與瘤胃非降解飼料蛋白一同在小腸內(nèi)被酶解吸收供反芻動(dòng)物利用。MCP濃度反映發(fā)酵體系中微生物數(shù)量及能氮平衡性[27]。能量和蛋白質(zhì)供應(yīng)是影響MCP合成主要因素，當(dāng)微生物所處發(fā)酵環(huán)境氮供給平衡時(shí)，MCP合成效率方可最大限度提高[28]。吳仙等研究表明瘤胃中MCP產(chǎn)量與飼料粗蛋白含量呈正相關(guān)關(guān)系[29]。本試驗(yàn)隨DCGF或DCGF/玉米青貯（35：65）比例增加，發(fā)酵底物中可發(fā)酵碳水化合物比例增加，有利于瘤胃微生物的生長(zhǎng)繁殖，MCP在各組合比例中均呈正組合效應(yīng)。

飼料間組合效應(yīng)是不同飼料來(lái)源營(yíng)養(yǎng)成分、非營(yíng)養(yǎng)成分以及抗?fàn)I養(yǎng)因子之間互作效應(yīng)。組合效應(yīng)產(chǎn)生機(jī)制復(fù)雜，一種或多種指標(biāo)難以準(zhǔn)確評(píng)價(jià)飼料間組合效應(yīng)，需要結(jié)合各指標(biāo)評(píng)價(jià)效果綜合評(píng)估。多項(xiàng)指標(biāo)綜合指數(shù)（MFAEI）通過(guò)體外人工瘤胃產(chǎn)氣法將各項(xiàng)發(fā)酵指標(biāo)綜合后得出組合效應(yīng)評(píng)估指數(shù)，王旭、林曦采用MFAEI綜合評(píng)定幾種粗飼料或副產(chǎn)物間組合效應(yīng)[27,30]。本試驗(yàn)DCGF與玉米青貯組合后均表現(xiàn)不同程度正組合效應(yīng)，說(shuō)明組合后營(yíng)養(yǎng)成分互補(bǔ)提高整體發(fā)酵水平及飼料利用效率。MFAEI直接受其他單一指標(biāo)的影響，每批次發(fā)酵結(jié)果瘤胃液質(zhì)量變化較大；有關(guān)DCGF與其他粗飼料間組合效應(yīng)研究有限，缺乏試驗(yàn)結(jié)果對(duì)比，有關(guān)DCGF與其他粗飼料間組合比例仍待深入探討。

4 結(jié)論

本試驗(yàn)結(jié)果表明，DCGF與玉米青貯、DCGF/玉米青貯與苜蓿干草以不同比例組合后，發(fā)酵指標(biāo)均受到一定影響。DCGF與玉米青貯適宜以36：65比例組合，DCGF/玉米青貯與苜蓿干草適宜以60：40比例組合，MFAEI值均達(dá)到最大。以上為體外模擬瘤胃發(fā)酵結(jié)果，尚需動(dòng)物試驗(yàn)進(jìn)一步驗(yàn)證。

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Study on associative effects of dry corn gluten feed,corn silage and alfalfa hay/

HAO Xiaoyan,GAO Hong,WANG Xinying,ZHANG Guangning,SUN Kaijing,LIU Yan, ZHANG Yonggen
(1.School of Animal Sciences and Technology,Northeast Agricultural University,Harbin 150030,China;2.School ofAnimal Sicence and Veterinary Medicine,ShanxiAgricultural University,Taigu Shanxi 030801,China)

This experiment was conducted to investigate the associative effects of dry corn gluten feed(DCGF),corn silage(CS)and alfalfa hay(AH).DCGF and CS were mixed in rations of 0：100,15：85,25：75,35：65,45：55 and 100：0 with three replicates,respectively.The associative effects were assessed by thein vitrorumen fermentation technology to monitor fermentation indictors,single-factor associative effect index(SFAEI)and multiple-factor associative effect index(MFAEI).Then,the optimal combination of DCGF and CS was assessed and mixed with AH in rations of 0：100,20：80,40：60,60：40,80：20 and 100：0.The results showed that there were significant differences in gas production among different combinations of DCGF and CS(P＜0.05).With the increase of DCGF ratio,the yields of microbial crude protein(MCP)and the total volatile fatty acid(TVFA)were increasing.According to theMFAEI results,DCGF/CS in ration of 35：65 had the optimal associative effects.DCGF/CS(35：65)/AH in ration of 80：20 had the maximum gas production rate,DCGF/CS(35：65)/AH in ration of 60：40 had the maximum associative effect for NH3-N,and the maximum associative effect for TVFA in ration of 80：20.MFAEI results showed that DCGF/CS(35：65)/AH had the optimal associative effect in ration of 60：40.It was concluded from MFAEI that the combinations of DCGF/CS in ration of 35：65 and DCGF/ CS(35：65)/AH in ration of 60：40 were appropriate,respectively.

dry corn gluten feed;associative effect;gas production;microbial crude protein

S816.4

A

1005-9369（2017）08-0025-08

時(shí)間2017-9-12 11:36:21[URL]http://kns.cnki.net/kcms/detail/23.1391.S.20170912.1136.008.html

郝小燕,高紅,王馨影,等.玉米纖維飼料、青貯玉米和苜蓿干草間組合效應(yīng)研究[J].東北農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),2017,48(8):25-32.

Hao Xiaoyan,Gao Hong,Wang Xinying,et al.Study on associative effects of dry corn gluten feed,corn silage and alfalfa hay[J].Journal of Northeast Agricultural University,2017,48(8):25-32.(in Chinese with English abstract)

2016-08-27

國(guó)家奶牛產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系項(xiàng)目（CARS-37）

郝小燕（1990-），女，博士，研究方向?yàn)榉雌c動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)。E-mail:haoxiaoyan1990@sina.com

*通訊作者：張永根，教授，博士生導(dǎo)師，研究方向?yàn)榉雌c動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)。E-mail:zhangyonggen@sina.com