喬 杰丁肇?zé)樛鯐曰苴w志東徐金倫

（1 河南警察學(xué)院刑事科學(xué)技術(shù)系 河南 鄭州 450046；2 鐵道警察學(xué)院治安系 河南 鄭州 450053；3 貴州警察學(xué)院刑事科學(xué)技術(shù)系 貴州 貴陽(yáng) 550005；4 貴州警察學(xué)院實(shí)驗(yàn)中心 貴州 貴陽(yáng) 550005；5 上海市公安局刑事偵查總隊(duì) 上海市 200083）

油脂種屬鑒別法檢驗(yàn)摻假植物油

喬 杰1丁肇?zé)?王曉卉3趙志東4徐金倫5

（1 河南警察學(xué)院刑事科學(xué)技術(shù)系 河南 鄭州 450046；2 鐵道警察學(xué)院治安系 河南 鄭州 450053；3 貴州警察學(xué)院刑事科學(xué)技術(shù)系 貴州 貴陽(yáng) 550005；4 貴州警察學(xué)院實(shí)驗(yàn)中心 貴州 貴陽(yáng) 550005；5 上海市公安局刑事偵查總隊(duì) 上海市 200083）

采用高效液相色譜-蒸發(fā)光散射法（HPLC-ELSD），通過(guò)甘油三酯的組成分析大豆油、花生油、米糠油、橄欖油、芝麻油的種屬差異，從而進(jìn)行模擬摻假植物油的鑒別。將5種常見(jiàn)植物油混合后模擬摻假油脂，采用丙酮提取后直接進(jìn)樣分析，采用蒸發(fā)光散射檢測(cè)器檢測(cè)，保持柱溫35℃，使植物油中的各種甘油三酯分離，對(duì)比處理各種譜圖數(shù)據(jù)。結(jié)果表明，5種植物油的譜圖數(shù)據(jù)特征性強(qiáng)，能夠使其相互區(qū)分開(kāi)來(lái)；可以確定涉假植物油中是否摻入其他植物油。采用植物油脂種屬鑒別方法能夠?qū)饺氪蠖褂?、米糠油、花生油的涉假橄欖油和芝麻油進(jìn)行檢驗(yàn)和判斷。

甘油三酯 植物油 高效液相-蒸發(fā)光散射法

1 引言

植物油是人們?nèi)粘ｏ嬍持械谋匦杵?，由于植物油（如橄欖油、芝麻油等）價(jià)格不菲，一些不法商販為謀取更高的經(jīng)濟(jì)利益，通過(guò)制假、摻假等手段以次充好，涉假油脂的出現(xiàn)不僅擾亂市場(chǎng)秩序、而且危害食品安全。在打擊這些違法犯罪行為的過(guò)程中，常常由于檢測(cè)手段滯后而形成證據(jù)不足、無(wú)法進(jìn)入司法審理程序，最終只能罰款了事。為解決在打擊危害食品安全犯罪中涉假動(dòng)植物油脂的檢驗(yàn)問(wèn)題，本文在對(duì)植物油脂種屬特征研究的基礎(chǔ)上，采用高效液相-蒸發(fā)光散射法對(duì)大豆油、花生油、米糠油、橄欖油、芝麻油5種植物油的甘油三酯組成及其特征譜圖進(jìn)行分析和比較，不僅可以對(duì)植物油脂種屬進(jìn)行鑒別，而且可以判斷涉假植物油中是否摻入廉價(jià)油脂，為打擊此類違法犯罪行為提供科學(xué)鑒定依據(jù)[1]。

2 材料和方法

2.1 食用油樣品

市售食用植物油樣品5份（見(jiàn)表1）。

表1 植物油樣品一覽表

2.2 甘油三酯標(biāo)準(zhǔn)品

月桂酸甘油酯（LaLaLa）、1，2-亞油酸-3-棕櫚酸甘油酯（LLP）、1，2亞油酸-3-油酸甘油酯（LLO）、1，2-豆蔻酸-3-棕櫚酸甘油酯（MMP）、油酸甘油三酯（OOO）、1，2-油酸-3-棕櫚酸甘油酯（OOP）、1，3-油酸-2-棕櫚酸甘油酯（OPO）、1，2-油酸-3-硬脂酸甘油酯（OOSt）、1，3-油酸-2-硬脂酸甘油酯（OStO）、1-棕櫚酸-2油酸-3-亞油酸甘油酯（POL）、1，2-棕櫚酸-3-油酸甘油酯（PPO）、1，3-棕櫚酸-2-油酸甘油酯（POP）、1-棕櫚酸-2-亞油酸-3-硬脂酸甘油酯（PLSt）、1-硬脂酸-2-油酸-3-硬脂酸甘油酯（POSt）、1，2-棕櫚酸-3-硬脂酸甘油酯（PPSt）、1-硬脂酸-2-棕櫚酸-3-油酸甘油酯（StPO）、1，2-硬脂酸-3-油酸甘油酯（StStO）、1，3-硬脂酸-2-棕櫚酸甘油酯（StPSt）、硬脂酸甘油酯（StStSt）[2]401。

2.3 樣品溶液和甘油三酯標(biāo)準(zhǔn)品溶液的配制

分別稱取19種標(biāo)準(zhǔn)品各2.0mg置于10.0mL容量瓶中，用丙酮溶解、定容，配制成甘油三酯標(biāo)準(zhǔn)溶液，檢測(cè)時(shí)分別取等量混合制成混合標(biāo)準(zhǔn)樣品溶液，待測(cè)。

分別取5種食用油樣品1μL溶解于1mL丙酮中，配成樣品溶液，待測(cè)。

模擬混合樣品采用1:1的比例把大豆油、花生油、米糠油分別與芝麻油、橄欖油進(jìn)行混合，之后再取混合后樣品1μL溶解于1mL丙酮中，配成樣品溶液，待測(cè)。

2.4 儀器及條件

美國(guó)Agilent 1100series高效液相色譜儀；色譜柱：C18柱（150mm×3.9mm，4μm）；柱溫：30℃；流動(dòng)相：二氯甲烷-乙腈-冰乙酸（30:70:0.2V/V/V）；流速：1.0mL/min；蒸發(fā)光散射監(jiān)測(cè)器（Model 1400ELSD）；漂移管溫度：70℃；霧化管溫度：30℃；光學(xué)池溫度：80℃；排氣管溫度：60℃；GAS：45～55P；柱溫箱溫度：35℃[2]401-402。

3 結(jié)果與討論

3.1 常見(jiàn)植物油特征譜圖的分析

實(shí)驗(yàn)對(duì)大豆油、花生油、米糠油、橄欖油、芝麻油5種植物油樣品的甘油三酯特征譜圖進(jìn)行了分析[3-6]（如圖1～5所示），5種植物油的HPLC-ELSD譜圖經(jīng)過(guò)與標(biāo)準(zhǔn)品比對(duì)，能夠確定出植物油中所含的甘油三酯種類，可以利用這5種植物中的甘油三酯的組成特征進(jìn)行相互區(qū)分，各樣品中甘油三酯相對(duì)含量如表2所示。

圖1 大豆油HPLC-ELSD分析譜圖

圖2 花生油HPLC-ELSD分析譜圖

圖3 米糠油HPLC-ELSD分析譜圖

圖4 橄欖油HPLC-ELSD分析譜圖

圖5 芝麻油HPLC-ELSD分析譜圖

表2 各樣品中甘油三酯相對(duì)含量

3.2 橄欖油、芝麻油中摻入大豆油的樣品分析

大豆油和橄欖油的混合樣品融合了兩種植物油的特征性，相對(duì)橄欖油，大豆油所含甘油三酯特征峰的數(shù)目較多，其中1號(hào)月桂酸甘油酯（LaLaLa）峰及2，3，4號(hào)三種未知甘油脂峰是橄欖油中不含的，而在混樣中會(huì)出現(xiàn)這4種甘油酯特征峰；在橄欖油中相對(duì)含量較高的1，2-肉豆蔻酸-3-棕櫚酸甘油酯（MMP）、1-棕櫚酸-2-油酸-3-亞油酸甘油酯（POL）、油酸甘油三酯（OOO）、1，3-油酸-2-棕櫚酸甘油酯（OPO）/1，2-油酸-3-棕櫚酸甘油酯（OOP），摻入花生油后，相對(duì)含量降低；因此，摻入大豆油的橄欖油樣品相對(duì)純橄欖油的特征峰變化很大，更趨向于大豆油的色譜特征（如圖6所示）。同樣，大豆油和芝麻油的混合樣品融合了兩種植物油的甘油三脂組成特征，混樣中出現(xiàn)了芝麻油中并不含有的月桂酸甘油酯（LaLaLa）及一種未知的甘油酯兩種甘油酯特征峰，芝麻油中相對(duì)含量較高的1，2-肉豆蔻酸-3-棕櫚酸甘油酯（MMP）、1-棕櫚酸-2-油酸-3-亞油酸甘油酯（POL）兩種甘油酯在混樣中相對(duì)含量降低，混合之后的樣品相對(duì)芝麻油的純品特征峰變化很大，趨向于大豆油的色譜特征（如圖7所示）。

圖6 大豆油和橄欖油混合前后的HPLC-ELSD分析譜圖

圖7 大豆油和芝麻油混合前后的HPLC-ELSD分析譜圖

3.3 橄欖油、芝麻油中摻入花生油的樣品分析

花生油和橄欖油的混合樣品融合了兩種植物油的特征性，相對(duì)于橄欖油的甘油三酯成分，花生油所含甘油三酯特征峰的數(shù)目較多，最明顯的是花生油中含有一個(gè)甘油三酯成分（未知峰），此成分是橄欖油中不存在的甘油三酯。另外，在花生油中1，2-亞油酸-3-油酸甘油酯（LLO）、1，2-亞油酸-3-棕櫚酸甘油酯（LLP）成分的相對(duì)含量高于橄欖油，因此，摻入花生油的橄欖油相對(duì)于橄欖油純品的甘油三酯特征峰變化很大，總體特征更趨近花生油（如圖8所示）。同樣，花生油和芝麻油的混合樣品融合了兩種植物油的特征性，兩種植物油所含特征峰種類相近，但各個(gè)甘油三酯的相對(duì)含量存在差異，摻入花生油的芝麻油趨近花生油的甘油三酯組成特征（如圖9所示）。

圖8 花生油和橄欖油混合前后的HPLC-ELSD分析譜圖

圖9 花生油與芝麻油混合前后的HPLC-ELSD分析譜圖

3.4 橄欖油、芝麻油中摻入米糠油的樣品分析

米糠油所含甘油三酯特征峰的數(shù)目較多，在芝麻油中摻入米糠油后，出現(xiàn)了之前不含有的1號(hào)色譜峰所對(duì)應(yīng)甘油三酯成分（未知），此外還有2號(hào)1，2-亞油酸-3-油酸甘油酯（LLO）峰、3號(hào)1，2-亞油酸-3-棕櫚酸甘油酯（LLP）峰相對(duì)含量高于橄欖油純品，因此，摻入米糠油的橄欖油樣品相對(duì)純橄欖油色譜特征峰變化很大，趨近于米糠油的甘油三酯特征（如圖10所示）。同樣，米糠油和芝麻油的混合樣品融合了兩種植物油的特征性，兩種植物油所含特征峰種類差不多，但各個(gè)峰的相對(duì)含量并不相同，混合之后的樣品相對(duì)芝麻油的純品特征峰變化較大，趨向于米糠油的特征（如圖11所示）。

4 結(jié)論

通過(guò)對(duì)植物油摻假前后甘油三酯組成和色譜特征的比對(duì)分析，向橄欖油、芝麻油中摻入相對(duì)廉價(jià)的大豆油、花生油、米糠油后，原本植物油的特征譜圖變化明顯，普遍趨向于含甘油三酯種類較多的大豆油、花生油、米糠油的色譜特征，能夠比較容易地判斷出是否為摻假植物油。因此，采用植物油脂種屬鑒別方法能夠?qū)χ参镉椭袚饺肓畠r(jià)植物油脂的制假方法進(jìn)行分析和判斷。

圖10 米糠油和橄欖油混合前后的HPLC-ELSD分析譜圖

圖11 米糠油和芝麻油混合前后的HPLC-ELSD分析譜圖

[1]丁軍凱,閆福寧,喻曉光,等.同時(shí)裂解甲基化氣相色譜法快速鑒別人體脂肪及動(dòng)植物油脂[J].中國(guó)法醫(yī)學(xué)雜志,1998(4):227-230.

[2]喬杰,趙鵬程,許英健,等.高效液相色譜-蒸發(fā)光散射法分析油脂物證種屬特征[J].刑事技術(shù),2015(5):400-403.

[3]王繼芬,姚琳桃,張桂霞.痕量動(dòng)物油和植物油的區(qū)分檢驗(yàn)研究[J].化學(xué)研究與應(yīng)用,2008(11):1514-1519.

[4]劉濤,尹春華,譚天偉.高效液相色譜-蒸發(fā)光散射檢測(cè)器測(cè)定脂肪酸和甘油酯的含量[J].中國(guó)油脂,2005(9):50-53.

[5]史曉凡,周欣欣,王磊,等.高效液相色譜-蒸發(fā)光散射法分析人和動(dòng)物油脂種屬[J].中國(guó)法醫(yī)學(xué)雜志,2013(2):116-118.

[6]王國(guó)強(qiáng),張婷,孫桂進(jìn),等.分散固相萃取凈化-GPC-GC/ MS快速分析魚(yú)塘水中21種農(nóng)藥[J].中國(guó)刑警學(xué)院學(xué)報(bào),2016(3):74-76.

（責(zé)任編輯：孟凡騫）

DF918.93

A

2095-7939（2017）04-0088-04

10.14060/j.issn.2095-7939.2017.04.017

2017-03-14

公安部應(yīng)用創(chuàng)新計(jì)劃項(xiàng)目（編號(hào)：2012YYCXXJXY128）。

喬杰（1991-），女，河南周口人，河南警察學(xué)院刑事科學(xué)技術(shù)系助教，主要從事微量物證分析研究。