陳泓竹,張世洋,黃雅彬,李生茂,陳金鳳,敖 慧,*

(1.成都中醫(yī)藥大學(xué),四川成都 611137;2.川北醫(yī)學(xué)院,四川南充 637000)

平貝母和川貝母總生物堿含量及其鎮(zhèn)咳、抗炎作用比較研究

陳泓竹1,張世洋1,黃雅彬1,李生茂2,陳金鳳1,敖 慧1,*

(1.成都中醫(yī)藥大學(xué),四川成都 611137;2.川北醫(yī)學(xué)院,四川南充 637000)

目的:比較平貝母與川貝母新品種——太白貝母、舊品種——松貝、青貝、爐貝總生物堿含量及鎮(zhèn)咳、抗炎藥理作用,探討平貝母作為川貝母新來(lái)源的可行性。方法:采用回流法提取各品種總生物堿,紫外分光光度法測(cè)定其含量;比較不同品種貝母總生物堿對(duì)氨水刺激法致小鼠咳嗽模型和二甲苯致耳廓腫脹模型的藥理作用;對(duì)各品種總生物堿咳嗽抑制率和炎癥抑制率進(jìn)行聚類分析。結(jié)果:各貝母提取物總生物堿含量從高到低依次為太白貝母(野生)、平貝母、青貝、松貝、爐貝、太白貝母(栽培)。平貝母、松貝、青貝、爐貝、太白貝母(栽培)總生物堿可明顯減少氨水刺激法致小鼠咳嗽模型咳嗽次數(shù),其中老品種較平貝母、新品種減少咳嗽次數(shù)優(yōu);松貝、青貝總生物堿可明顯延長(zhǎng)咳嗽潛伏期。平貝母、松貝總生物堿可明顯減輕二甲苯致小鼠耳廓腫脹模型腫脹度;平貝母較松貝減輕抗炎效果更佳。聚類分析結(jié)果顯示松貝、青貝、爐貝與太白貝母(栽培)、太白貝母(野生)聚集,與平貝母分離,表明平貝母與川貝母各品種總生物堿鎮(zhèn)咳抗炎藥效有一定差異。結(jié)論:平貝母總生物堿組成和抗炎、鎮(zhèn)咳作用與川貝母有一定差異;但平貝母亦可作為川貝母候選新來(lái)源品種進(jìn)一步研究。

平貝母,川貝母,生物堿,鎮(zhèn)咳,抗炎

藥食兩用川貝母屬名貴中藥材。傳統(tǒng)川貝母品種來(lái)源于川貝母FritillariacirrhosaD. Don、暗紫貝母FritillariaunibracteataHsiao et K. C. Hsia、甘肅貝母FritillariaprzewalskiiMaxim.、梭砂貝母FritillariadelavayiFranch.[1];但此4種植物喜生長(zhǎng)于高海拔地區(qū),資源受到破壞嚴(yán)重,供求矛盾突出,尋找相同功效的其他貝母類藥材作藥材川貝母使用已是迫在眉睫。太白貝母、平貝母與川貝母功效相近,種屬相似,能規(guī)模栽培,因此被長(zhǎng)期用作代用品,一定程度上緩解了川貝母供求矛盾,為野生資源提供了保護(hù)[2]。

目前,太白貝母已被《中國(guó)藥典》2010年版、2015年版列為川貝母的來(lái)源[3-4]。亦有學(xué)者支持將平貝母列入川貝母項(xiàng)下[5]。平貝母和川貝母新舊品種在物質(zhì)基礎(chǔ)和藥理作用方面是否相似,值得進(jìn)一步研究。

研究表明,生物堿是川貝母鎮(zhèn)咳抗炎的主要物質(zhì)基礎(chǔ)[6-7]。本研究擬首次平行比較平貝母和川貝母新品種——太白貝母、舊品種——松貝、青貝、爐貝的總生物堿含量及其鎮(zhèn)咳、抗炎藥理作用,并采用聚類分析綜合分析各提取物藥效差異性,以探討平貝母作為川貝母新來(lái)源的可行性,為臨床合理用藥提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

95%乙醇、三氯甲烷、羧甲基纖維素鈉、甲醇、二甲苯、濃氨水 分析純,成都市科龍化工試劑廠生產(chǎn);西貝母堿 純度98%以上,由成都瑞芬思生物科技有限公司生產(chǎn)。太白貝母(野生)、太白貝母(栽培)、松貝、青貝、爐貝、平貝母 購(gòu)自成都國(guó)際商貿(mào)城;醋酸地塞米松片 遂成藥業(yè)股份有限公司;氫溴酸右美沙芬片 北京天衡藥物研究院南陽(yáng)天衡制藥廠;SPF級(jí)昆明種小鼠 雌雄各半,體重18～22 g,成都達(dá)碩實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司,動(dòng)物質(zhì)量合格證號(hào):scxk(川)2013-24。

FA2004B型電子天平 上海越平科學(xué)儀器有限公司;AUW220D型電子分析天平 日本島津公司;XMTD-4000型電熱恒溫水浴鍋 北京市永光明醫(yī)療儀器有限公司;SHZ-D(Ⅲ)型循環(huán)水式真空泵 鞏義市予華有限公司;KH2200DE型數(shù)控超聲波清洗器 昆山禾創(chuàng)超聲儀器有限公司;SB25-12D型超聲波清洗儀 寧波新藝超聲設(shè)備有限公司;PCD-E3000智能型電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱 上?，槴\實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司;EPED-E2-30TJ型實(shí)驗(yàn)室級(jí)超純水器 南京易普易達(dá)科技發(fā)展有限公司;SPECORD? 200 PLUS型紫外分光光度計(jì) 德國(guó)耶拿分析儀器股份公司;YLS-8A型多功能誘咳引喘儀 濟(jì)南益延科技發(fā)展有限公司。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 不同品種貝母總生物堿含量測(cè)定

1.2.1.1 供試品溶液制備 根據(jù)《中國(guó)藥典》2015年版[1]和參考文獻(xiàn)[6],分別精密稱定各貝母樣品粗粉1.0000 g,置于100 mL圓底燒瓶中,加入1.5倍量濃氨試液,密封浸潤(rùn)1 h后,再加20倍量三氯甲烷-甲醇(4∶1)混合溶液,80 ℃水浴回流提取2次,每次2 h,過(guò)濾,濾渣用10 mL三氯甲烷-甲醇(4∶1)洗滌,合并濾液,60 ℃減壓濃縮至適當(dāng)體積,轉(zhuǎn)移并用三氯甲烷-甲醇(4∶1)混合溶液定容至50 mL容量瓶。分別取各供試品溶液5 mL置蒸發(fā)皿,60 ℃水浴揮去溶劑,精密加入三氯甲烷10 mL使其溶解,轉(zhuǎn)移至分液漏斗中,再精密加水5 mL、0.05%溴甲酚綠緩沖液2 mL,密塞,劇烈振搖3 min,靜置分層,取三氯甲烷層備用。

1.2.1.2 西貝母堿標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 取西貝母堿對(duì)照品適量,精密稱定,加三氯甲烷配制成每1 mL含0.2 mg的西貝母堿對(duì)照品儲(chǔ)備溶液。精密量取西貝母堿對(duì)照品儲(chǔ)備溶液0.1、0.2、0.4、0.6、0.8 mL,置10 mL容量瓶中,三氯甲烷定容,再轉(zhuǎn)移至分液漏斗中,加蒸餾水5 mL、0.05%溴甲酚綠緩沖液(取溴甲酚綠0.05 g,用0.2 mol/L氫氧化鈉溶液6 mL使其溶解,加磷酸二氫鉀1 g,加蒸餾水溶解并稀釋至100 mL)2 mL,密塞,劇烈振搖3 min,靜置分層,取三氯甲烷液層,按照(《中國(guó)藥典》2015年版通則0401)紫外-可見分光光度法,在415 nm的波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度,以吸光度為縱坐標(biāo),濃度為橫坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

1.2.1.3 方法學(xué)考察 精密度實(shí)驗(yàn):精密稱定太白貝母(栽培)1.0000 g,按“1.2.1.1”制備供試品溶液,415 nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度值,重復(fù)測(cè)定6次,計(jì)算吸光度值的RSD。

重復(fù)性實(shí)驗(yàn):取太白貝母(栽培)6份,每份精密稱定1.0000 g,按“1.2.1.1”制備供試品溶液,415 nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度值,計(jì)算其含量的RSD。

穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn):取太白貝母(栽培)按“1.2.1.1”制備供試品溶液,分別在0、1、2、4、6、8 h時(shí)間點(diǎn),415 nm波長(zhǎng)測(cè)定吸光度值,重復(fù)測(cè)定6次,計(jì)算吸光度值的RSD。

加樣回收率實(shí)驗(yàn):取太白貝母(栽培)5份,每份精密稱定1.0000 g,每份加入0.288 mg西貝母堿,按“1.2.1.1”制備供試品溶液,415 nm下測(cè)定吸光度值,計(jì)算回收率。

1.2.1.4 樣品測(cè)定 取供試品于波長(zhǎng)415 nm處測(cè)定吸光度,計(jì)算生物堿濃度。根據(jù)以下公式計(jì)算生物堿含量。生物堿含量(%)=生物堿濃度×體積×稀釋倍數(shù)/樣本質(zhì)量×100=生物堿濃度×10 mL/1 g×10×100。

1.2.2 不同品種貝母提取物鎮(zhèn)咳抗炎作用

1.2.2.1 受試藥物制備 分別精密稱定各貝母樣品粗粉20.0000 g,照“1.2.1.1供試品溶液制備”項(xiàng)下提取,合并2次濾液及洗滌液,60 ℃減壓濃縮得浸膏,加0.2%的CMC-Na(羧甲基纖維素鈉)溶液溶解并定容至100 mL容量瓶,即得濃度為20 g生藥/100 mL的溶液。將貝母臨床用量的12倍確定為小鼠給藥劑量,即2 g生藥/kg。

表1 不同品種貝母生物堿含量Table 1 The alkaloid contents of varieties of Beimu

1.2.2.2 不同貝母提取物對(duì)濃氨水致小鼠咳嗽模型的作用 按參考文獻(xiàn)[10]方法進(jìn)行。昆明種小鼠90只,雌雄各半,隨機(jī)將其分為8組(模型組、右美沙芬組、太白貝母(野生)組、太白貝母(栽培)組、松貝組、青貝組、爐貝組、平貝母組),標(biāo)記,適應(yīng)性喂養(yǎng)2 d。其后模型組給予10 mL/kg劑量的0.2% CMC-Na溶液,右美沙芬組給予9 mg/kg的氫溴酸右美沙芬溶液,其余6組貝母提取物組給予2 g生藥/kg的相應(yīng)貝母生物堿粗提物,均為等體積給藥,給藥體積為10 mL/kg。各組均灌胃3 d,每天1次,在第3 d給藥1 h后,將小鼠放入多功能誘咳引喘儀中,給予20%氨水噴霧10 s,觀察和記錄小鼠咳嗽潛伏期(開始噴霧氨水至發(fā)生咳嗽的時(shí)間)和2 min內(nèi)咳嗽次數(shù)(以腹部收縮,口部張開為指標(biāo)記一次咳嗽),計(jì)算咳嗽抑制率,咳嗽抑制率(%)=(模型組平均咳嗽次數(shù)-用藥組平均咳嗽次數(shù))/模型組平均咳嗽次數(shù)×100。

表2 不同貝母提取物對(duì)濃氨水致小鼠咳嗽模型的作用Table 2 Effects of the total alkaloids of varieties of Beimu on the ammonia-stimulated mouse cough model(±s)

注：與模型組比較,*p<0.05,**p<0.01。與太白貝母(野生)組比較,#p<0.05,##p<0.01。與太白貝母(栽培)組比較,△p<0.05,△△p<0.01。與平貝母組比較,▲p<0.05,▲▲p<0.01。表3同。1.2.2.3 不同貝母提取物對(duì)二甲苯致小鼠耳廓腫脹模型的作用 按參考文獻(xiàn)[10]方法進(jìn)行。昆明種小鼠72只,雄性,隨機(jī)將其分為8組并標(biāo)記(模型組、地塞米松組、太白貝母(野生)組、太白貝母(栽培)組、松貝組、青貝組、爐貝組和平貝母組),適應(yīng)性喂養(yǎng)2 d,其后模型組給予10 mL/kg劑量的0.2% CMC-Na溶液,陽(yáng)性對(duì)照組給予1.2 mg/kg的醋酸地塞米松溶液,其余6組貝母提取物組給予2 g生藥/kg的相應(yīng)貝母提取物,均為等體積給藥,給藥體積為10 mL/kg。各組均灌胃3 d,在第3次給藥1 h后,在每組小鼠右耳背腹兩側(cè)均勻涂布二甲苯各25 μL致炎,在1 h后頸椎脫臼處死,沿耳廓基線均勻剪下兩耳,用直徑為8 mm的打孔器打下左右兩耳圓形組織塊,分別稱重。按照公式腫脹率(%)=(右耳重量-左耳重量)/左耳重量×100,并計(jì)算各用藥組炎癥抑制率,炎癥抑制率(%)=(模型組平均腫脹度-用藥組平均腫脹度)/模型組平均腫脹度×100。

1.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

2 結(jié)果與分析

2.1 不同品種貝母總生物堿含量測(cè)定結(jié)果

2.1.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備 按照1.2.2方法制作標(biāo)準(zhǔn)曲線,得到了R2值為0.9995的標(biāo)準(zhǔn)曲線,見圖1。

圖1 西貝母堿標(biāo)準(zhǔn)曲線Fig.1 The standard curve of imperialine

2.1.2 方法學(xué)考察結(jié)果 精密度實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,吸光度值RSD為2.14%,表明儀器的精密度良好。重復(fù)性實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,生物堿平均含量0.0576%,RSD為3.78%,表明本方法的重復(fù)性良好;穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,吸光度值RSD為3.25%,表明樣品在8 h內(nèi)穩(wěn)定;加樣回收率實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,西貝母堿的平均回收率為101.75%,RSD為4.29%。

2.1.3 不同品種貝母提取物生物堿含量測(cè)定結(jié)果 不同品種貝母樣品中生物堿含量的測(cè)定結(jié)果,見表1，含量順序?yàn)樘棕惸?野生)>平貝母>青貝>松貝>爐貝>太白貝母(栽培)。

2.2 不同品種貝母總生物堿鎮(zhèn)咳、抗炎作用研究

2.2.1 不同品種貝母總生物堿對(duì)濃氨水致小鼠咳嗽模型的作用 如表2所示,與模型組比較,右美沙芬組、松貝組和青貝組咳嗽潛伏期明顯延長(zhǎng)(p<0.05),其余組有延長(zhǎng)的趨勢(shì),但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p>0.05);除太白貝母(野生)外的所有貝母組2 min咳嗽次數(shù)減少,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05或p<0.01),太白貝母(野生)組有2 min咳嗽次數(shù)減少趨勢(shì),但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p>0.05)。與太白貝母(野生)組比較,各組咳嗽潛伏期均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p>0.05);右美沙芬組、青貝組、爐貝組2 min咳嗽次數(shù)明顯減少,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.01);松貝組2 min咳嗽次數(shù)有減少趨勢(shì),無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p>0.05)。與栽培太白貝母組比較,各組咳嗽潛伏期均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p>0.05);右美沙芬組、松貝組、青貝組、爐貝組2 min咳嗽次數(shù)明顯減少(p<0.01)。與平貝母組比較,各組咳嗽潛伏期均無(wú)明顯差異(p>0.05);右美沙芬組、松貝組、青貝組、爐貝組2 min咳嗽次數(shù)明顯減少,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05)。太白貝母(野生)組、太白貝母(栽培)組、平貝母組三組兩兩比較,無(wú)明顯差異(p>0.05)。

2.2.2 不同貝母總生物堿對(duì)二甲苯致小鼠耳廓腫脹模型的作用 如表3,與模型組比較,地塞米松組、平貝母組和松貝組耳廓炎癥腫脹率明顯減輕,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05或<0.01),太白貝母(栽培)組、青貝組、爐貝組耳廓炎癥腫脹率有降低趨勢(shì),但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p>0.05);與野生太白貝母組比較,地塞米松組、松貝組、青貝組、爐貝組耳廓炎癥腫脹率明顯減輕,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05或p<0.01);與太白貝母(栽培)組比較,平貝母組、地塞米松組耳廓炎癥腫脹率明顯減輕(p<0.05),太白貝母(野生)組耳廓炎癥腫脹率明顯增高(p<0.01)。與平貝母組比較,模型組、太白貝母(野生)組、太白貝母(栽培)組、松貝組、青貝組、爐貝組耳廓炎癥腫脹率明顯增高(p<0.01)。

表3 不同貝母總生物堿對(duì)二甲苯致小鼠耳廓腫脹模型的作用Table 3 Effects of the total alkaloids of varieties of Beimu on the xylene-induced mouse ear edema model(±s)

2.2.3 藥效學(xué)聚類分析結(jié)果 將各品種貝母鎮(zhèn)咳、抗炎結(jié)果導(dǎo)入SPSS 13.0軟件,采用中間數(shù)(Median clustering)平方歐式距離(Squared Euclidean distance)進(jìn)行聚類,結(jié)果顯示,不同品種貝母樣品聚為兩類,其中,松貝、青貝、爐貝和太白貝母(栽培)先聚為一小類后,再與太白貝母(野生)聚為一類,而平貝母單獨(dú)聚為一類。

圖2 不同貝母生物堿鎮(zhèn)咳抑制率和抗炎抑制率聚類分析 Fig.2 Cluster-analysis on the cough and swelling inhibition ratesof the total alkaloids of varieties of Beimu

3 討論

本研究按參考文獻(xiàn)[6]和《中國(guó)藥典》[1]方法,采用堿性溶劑(氨水)浸潤(rùn),混合溶劑提取的方法對(duì)不同品種貝母總生物堿進(jìn)行提取,并采用紫外分光光度法進(jìn)行了含量測(cè)定,結(jié)果顯示:不同品種的貝母提取物生物堿含量各貝母提取物總生物堿含量依次為太白貝母(野生)、平貝母、青貝、松貝、爐貝、太白貝母(栽培)。均符合《中華人民共和國(guó)藥典》2015年版川貝母的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)。含生物堿最高的為太白貝母(野生),最低的為太白貝母(栽培)。

既往研究表明,傳統(tǒng)川貝母、太白貝母、平貝母具有抗炎、鎮(zhèn)咳等作用[9-12]。李萍等比較了傳統(tǒng)川貝母與平貝母生物堿鎮(zhèn)咳作用。沈力等研究了太白貝母與暗紫貝母鎮(zhèn)咳活性,但未對(duì)比生物堿鎮(zhèn)咳活性[13]。尚無(wú)報(bào)道對(duì)傳統(tǒng)川貝母、太白貝母、平貝母生物堿多種藥理作用進(jìn)行綜合比較研究。本研究鎮(zhèn)咳作用藥理實(shí)驗(yàn)表明,平貝母、青貝、松貝、爐貝、太白貝母(栽培)總生物堿可明顯減少氨水刺激法建立小鼠咳嗽模型咳嗽次數(shù),松貝、青貝總生物堿可延長(zhǎng)咳嗽潛伏期。與太白貝母(栽培)、平貝母比較,松貝、青貝、爐貝總生物堿減少氨水刺激法建立小鼠咳嗽模型咳嗽次數(shù)效果更佳。由此可見,相比傳統(tǒng)川貝母,太白貝母、平貝母止咳效果更差?？寡鬃饔盟幚硌芯勘砻?平貝母、松貝總生物堿可明顯減輕二甲苯致耳廓腫脹模型腫脹度;平貝母較松貝減輕二甲苯致耳廓腫脹模型腫脹度效果更佳。由此可見,相比松貝、青貝、爐貝,平貝母總生物堿抗炎效果更佳,太白貝母提取物抗炎效果不明顯?？寡鬃饔媒Y(jié)合生物堿含量分析,除太白貝母(野生)外,平貝母含量最高,抗炎效果亦最好。鎮(zhèn)咳作用結(jié)合生物堿含量分析,太白貝母(野生)、平貝母生物堿含量最高,但鎮(zhèn)咳效果較舊品種差。太白貝母(栽培)生物堿含量較舊品種低,其鎮(zhèn)咳效果較舊品種差。有研究表明,太白貝母較平貝母與暗紫貝母、甘肅貝母生物堿種類更為接近[14]。進(jìn)一步研究證實(shí)平貝母中含有平貝母堿甲、平貝母堿乙、平貝母堿苷、去氫貝母堿等,而在川貝母中未見報(bào)道[14-15]。而太白貝母生物堿成分與暗紫貝母總生物堿提取液主要色譜峰基本相似,有一定化學(xué)等效性[16]。結(jié)合本研究藥效實(shí)驗(yàn)結(jié)果和物質(zhì)基礎(chǔ)測(cè)定,我們可以推斷太白貝母栽培品生物堿組成應(yīng)比平貝母更接近川貝母舊品種。但本研究?jī)H對(duì)貝母總生物堿含量進(jìn)行了測(cè)定,而其中具體生物堿的種類和含量不得而知。體外研究表明,平貝母主要成分去氫貝母堿可抑制HMC-1細(xì)胞介導(dǎo)的急性炎癥反應(yīng)[17]。而太白貝母和暗紫貝母、甘肅貝母中未發(fā)現(xiàn)去氫貝母堿[14]。川貝母和平貝母之間的抗炎藥效差異是否由去氫貝母堿產(chǎn)生,值得進(jìn)一步研究。同理,根據(jù)物質(zhì)基礎(chǔ)含量和藥效研究結(jié)果,太白貝母野生品可能與太白貝母栽培品、川貝母舊品種物質(zhì)基礎(chǔ)差異較大。其原因應(yīng)進(jìn)一步研究。

貝母品種之間的鎮(zhèn)咳作用差異和抗炎作用差異不一致。若要綜合鎮(zhèn)咳作用和抗炎作用,比較太白貝母、平貝母、松貝、青貝、爐貝提取物的藥理作用,并進(jìn)行分類,需借助一定數(shù)據(jù)分析手段。聚類分析是一種探索性的分類方法,可將數(shù)據(jù)按照自身規(guī)律進(jìn)行分類,使數(shù)據(jù)分析結(jié)果更為客觀[18]。如晁顯玉等[19]以微量元素含量為指標(biāo),應(yīng)用主成分分析法,結(jié)合SPSS軟件對(duì)10種清熱類中藥中的微量元素進(jìn)行聚類分析。蔡宇等[20]對(duì)具有耐藥逆轉(zhuǎn)作用的數(shù)種中藥成分進(jìn)行聚類分析。本研究以鎮(zhèn)咳、抗炎抑制率為指標(biāo),對(duì)6種貝母生物堿粗提物藥效進(jìn)行聚類分析,結(jié)果顯示,太白貝母與松貝、青貝、爐貝聚為一類,而與平貝母分離。單就生物堿鎮(zhèn)咳、抗炎藥效而言,太白貝母與舊品種更為相似。市售太白貝母多為栽培品。本研究表明,太白貝母(野生)抗炎作用不明顯,有一定鎮(zhèn)咳趨勢(shì);而太白貝母(栽培)鎮(zhèn)咳作用明確,作用弱于舊品種,且有一定抗炎趨勢(shì)。由此可見,《中國(guó)藥典》將太白貝母特別是其栽培品作為川貝母的新基源有一定理論基礎(chǔ)。而平貝母之所以與川貝母新舊品種藥效差異較大,可能與其生物堿組成與川貝母不同有關(guān)。但考慮到平貝母生物堿抗炎效果較川貝母優(yōu),鎮(zhèn)咳效果雖弱于舊品種,與太白貝母相當(dāng)。建議將平貝母作為川貝母新來(lái)源候選品種進(jìn)一步研究。可從物質(zhì)基礎(chǔ)(生物堿、皂苷的組成、含量等)、藥效(鎮(zhèn)咳、抗炎、祛痰、平喘等)等方面進(jìn)行。

4 結(jié)論

綜上,平貝母總生物堿含量較川貝母舊品種、太白貝母(栽培)含量高,與太白貝母(野生)含量接近;鎮(zhèn)咳作用弱于川貝母舊品種,與新品種相當(dāng);抗炎作用優(yōu)于新舊品種。其鎮(zhèn)咳、抗炎綜合效應(yīng)與新舊川貝母有一定區(qū)別。原因可能是平貝母生物堿組成與川貝母新舊品種差異較大。但考慮到其抗炎效果明顯,亦可作為候選新品種進(jìn)一步研究。

[1]國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典[S].北京:中國(guó)醫(yī)藥科技出版社,2015:36.

[2]張國(guó)燕,陳志,尚軍.川貝母種源探討[J].亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥,2016,12(21):34-37.

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Comparative study on the content determination and the anti-tussive and anti-inflammatory effects of the total alkaloids of Pingbeimu and Chuanbeimu

CHEN Hong-zhu1,ZHANG Shi-yang1,HUANG Ya-bin1,LI Sheng-mao2,CHEN Jin-feng1,AO Hui1,*

(1.Chengdu University of TCM,Chengdu 611137,China; 2.North Sichuan Medical College,Nanchong 637000,China)

Objectives:To compare the anti-tussive and anti-inflammatory effects of the total alkaloids of the new and old varieties of Pingbeimu and Chuanbeimu,and to explore the feasibility of Pingbeimu as a new candidate source of Chuanbeimu. Methods:The total alkaloids of varieties of Beimu were extracted by reflux,the alkaloid contents were determined by the UV spectrophotometry,the pharmacodynamic effects of the total alkaloids of varieties of Beimu on the ammonia-stimulated mouse cough model and the xylene-induced mouse ear edema model were compared. The cough and swelling inhibition rates of the total alkaloids were cluster-analyzed.Results:The line of the alkaloids contents went from wild Taibaibeimu,Pingbeimu and Qingbei to Songbei and then down to Lubei and finally to cultivated Taibaibeimu. The total alkaloids of the three old varieties and cultivated Taibaibeimu could significantly reduce the coughing number of the ammonia-stimulated mouse cough model and the old varieties possessed better effect than Pingbeimu and the new variety. The total alkaloids of Songbei and Qingbei could obviously prolong the coughing incubation period. The total alkaloids of Songbei and Pingbeimu could significantly reduce the xylene-induced mouse ear inflammation swelling degree and Pingbeimu had better anti-inflammatory effect. Cluster analysis showed that the cough and swelling inhibition rates of the old varieties were clustered into those of Taibaibeimu but separated from those of Pingbeimu,which showed that the total alkaloids of Pingbeimu were different from Chuanbeimu. Conclusion:The composition and the anti-tussive and anti-inflammatory effects of Pingbeimu were diffenent from that of Chuanbeimu,Pingbeimu,as a new candidate source of Chuanbeimu deserved further study.

Pingbeimu;Chuanbeimu;alkaloids;anti-tussive;anti-inflammatory

2017-01-13

陳泓竹(1994-)，女，學(xué)士，主要從事中藥藥效物質(zhì)基礎(chǔ)研究，E-mail：894468563@qq.com。

*通訊作者:敖慧(1980-)，女，博士，副教授，主要從事中藥藥食兩用產(chǎn)品加工與應(yīng)用研究，E-mail：aohui2005@126.com。

四川省科技支撐項(xiàng)目——中藥種質(zhì)資源庫(kù)關(guān)鍵技術(shù)及示范(2014SZ0156)；中藥資源四川省青年科技創(chuàng)新研究團(tuán)隊(duì)(2015500028)。

TS201.1

A

1002-0306(2017)15-0063-05

10.13386/j.issn1002-0306.2017.15.014