徐萬幫 周穎儀 李華

近紅外光譜一致性檢驗(yàn)?zāi)Ｐ涂焖勹b別沉香化氣丸※

徐萬幫 周穎儀 李華

（廣東省藥品檢驗(yàn)所，廣東廣州510180）

目的建立沉香化氣丸的近紅外光譜一致性檢驗(yàn)方法。方法采集沉香化氣丸的近紅外光譜，利用OPUS軟件進(jìn)行處理，建立沉香化氣丸的近紅外光譜一致性檢驗(yàn)?zāi)Ｐ?，用不同廠家及功效相近樣品的近紅外光譜進(jìn)行驗(yàn)證。結(jié)果建立的近紅外一致性檢驗(yàn)?zāi)Ｐ涂梢钥焖?、?zhǔn)確地判斷出不同廠家的真?zhèn)?。結(jié)論該方法是一種快速、簡便、準(zhǔn)確的分析技術(shù)，可用于藥品快速檢測。

近紅外光譜；沉香化氣丸；一致性檢驗(yàn)；中醫(yī)鑒定

近紅外光譜法是一種利用化學(xué)物質(zhì)在近紅外譜區(qū)內(nèi)的光學(xué)特性快速測定物質(zhì)化學(xué)組分含量的光譜技術(shù)[1，6]。近紅外技術(shù)的特點(diǎn)是吸收系數(shù)較低、無損、快速、無污染，可以直接對樣品進(jìn)行測定，基本不需對樣品處理或僅需簡單的處理[2-4]。因此，近紅外分析技術(shù)是各級食品藥品監(jiān)督管理部門現(xiàn)場快速篩查假、劣藥品的重要手段之一，在監(jiān)管部門打擊偽、劣藥品方面發(fā)揮越來越重要的作用[5]。

本研究以2016年國家基本藥物評價性抽驗(yàn)沉香化氣丸中樣本數(shù)量較多的湖北諾得勝制藥股份有限公司和成都地奧集團(tuán)天府藥業(yè)股份有限公司以及陜西漢王藥業(yè)有限公司所生產(chǎn)的沉香化氣丸為基礎(chǔ)，建立沉香化氣丸的近紅外模型。由于中成藥組分復(fù)雜，難以找到特征吸收，故考慮利用近紅外漫反射技術(shù)，采用一致性評價方式，即一廠一品一規(guī)，建立一種快捷的圖譜比較方法，通過比較待測樣品的光譜與已知樣品的一組參考光譜是否具有一致性，以此來判斷待測樣品與已知樣品是否來自同一廠家。因此該法可以顯著區(qū)分不同廠家同品種同規(guī)格的藥品，適用于藥品質(zhì)量控制和假藥的快速篩查。

1 材料與方法

1.1 儀器BRUKER公司的傅里葉變換近紅外光譜儀（Matrix-F）；銦鎵砷（InGaAs）檢測器及漫反射裝置。

1.2 試劑湖北諾得勝制藥股份有限公司（29批，簡稱諾得勝）和成都地奧集團(tuán)天府藥業(yè)股份有限公司（41批，簡稱成都地奧）以及陜西漢王藥業(yè)有限公司（6批，簡稱漢王），其他廠家批樣品作為驗(yàn)證樣品。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 近紅外光譜測定每批樣品隨機(jī)取約100粒，粉碎，過5號藥典標(biāo)準(zhǔn)篩，取適量粉末置于漫反射杯中，均勻平鋪使樣品厚度0.5～1.0 cm，采用積分球漫反射系統(tǒng)，以空氣為參比，扣除背景采集近紅外光譜。

1.3.2 光譜采集條件分辨率：8 cm-1；背景掃描次數(shù)：32次；樣品掃描次數(shù)：32次；掃描范圍：9000-5700 cm-1和5300-4000 cm-1。記錄測試時的溫度為22℃，相對濕度為55%。所采集的原始光譜作為建模光譜及測試光譜。

2 結(jié)果與討論

2.1 沉香化氣丸丸近紅外光譜圖按照實(shí)驗(yàn)方法，取部分湖北諾得勝制藥股份有限公司所生產(chǎn)的沉香化氣丸為樣品進(jìn)行測定，典型的近紅外圖譜如下，見圖1。

圖1 沉香化氣丸近紅外光譜圖（諾得勝）

2.2 近紅外建模

2.2.1 建模譜段的選擇沉香化氣丸的近紅外漫反射原始光譜圖(見圖1)，扣除邊緣效應(yīng)和沉香化氣丸信息主要表達(dá)波段，我們選9000-5700 cm-1和5300-4000 cm-1為分析波段，對湖北諾得勝制藥股份有限公司的沉香化氣丸建立一致性模型。

2.2.2 光譜預(yù)處理方法的選擇建模時，在選定的譜段區(qū)域通過比較各種預(yù)處理方法(一階導(dǎo)數(shù)，二階導(dǎo)數(shù)，矢量歸一化，多元散射校正及其組合)，分別考察不同預(yù)處理方法對不同廠家生產(chǎn)的沉香化氣丸的區(qū)分效果。試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，單一歸一化處理后區(qū)分效果最佳。確定最優(yōu)模型的預(yù)處理方法為矢量歸一化。

2.3.3 CI指數(shù)的選擇分別選取CI=2，CI=3，CI=5，CI=7建立沉香化氣丸的一致性檢驗(yàn)定性模型，通過選取不同廠家的樣品來進(jìn)行驗(yàn)證，試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，CI=4左右時模型對不同廠家生產(chǎn)的樣品區(qū)分效果最理想，故選取4.2為湖北諾得勝制藥股份有限公司的CI指數(shù)，見圖2。

圖2 沉香化氣丸CI值圖（諾得勝）

3 模型的驗(yàn)證

3.1 不同儀器對一致性模型的驗(yàn)證為進(jìn)一步驗(yàn)證模型的有效性，本實(shí)驗(yàn)將湖北諾得勝制藥股份有限公司的部分沉香化氣丸置于另外2臺近紅外光譜儀進(jìn)行近紅外掃描，獲取相關(guān)圖譜，導(dǎo)入一致性評價模型，結(jié)果見圖3。

圖3 不同儀器掃描的沉香化氣丸驗(yàn)證圖

從圖3可以看出，不同的近紅外儀掃描的近紅外光譜圖具有一定的相似性，兩者沒有明顯的區(qū)別，無法將其區(qū)分。說明不同儀器對沉香化氣丸一致性評價模型影響不大。

3.2 自身樣品的驗(yàn)證為了考察模型的有效性，將部分湖北諾得勝制藥股份有限公司所生產(chǎn)的沉香化氣丸重新掃描，用所得光譜對模型進(jìn)行自身驗(yàn)證（圖4）。

圖4 同一近紅外光譜儀一致性模型驗(yàn)證圖

從圖4可以看出，兩者亦無法區(qū)分，說明所建立的一致性模型對該公司自身所生產(chǎn)的沉香化氣丸具有一致性。

3.3 與其他廠家樣品的驗(yàn)證為了考察所建立的湖北諾得勝制藥有限公司的沉香化氣丸近紅外一致性模型與其他廠家的沉香化氣丸近紅外光譜的不同，本試驗(yàn)在同樣條件下對江蘇七○七天然制藥有限公司、太極集團(tuán)重慶桐君閣藥廠、成都地奧集團(tuán)天府藥業(yè)股份有限公司、陜西漢王藥業(yè)有限公司等4個公司的沉香化氣丸進(jìn)行近紅外光譜圖掃描并導(dǎo)入一致性評價模型（諾得勝），用于驗(yàn)證湖北諾得勝制藥有限公司的一致性模型的準(zhǔn)確性（圖5）。

圖5 不同廠家沉香化氣丸近紅外光譜一致性模型區(qū)分圖

從圖5可以看出，所建立的湖北諾得勝制藥有限公司生產(chǎn)的沉香化氣丸近紅外一致性模型能有效區(qū)分不同廠家所產(chǎn)生的沉香化氣丸樣品，即湖北諾得勝制藥股份有限公司所生產(chǎn)的沉香化氣丸近紅外一致性評價模型具有很好的區(qū)分度。

4 其他廠家近紅外沉香化氣丸近紅外一致性模型的建立與評價

4.1 陜西漢王藥業(yè)有限公司參照本實(shí)驗(yàn)2.2所描述的方法對陜西漢王藥業(yè)有限公司所成產(chǎn)的沉香化氣丸進(jìn)行近紅外光譜掃描并建立一致性評價模型，結(jié)果表明所建立的該公司生產(chǎn)的沉香化氣丸近紅外一致性評價模型在CI值為3.6。符合近紅外一致性模型建立的基本要求（圖6）。

圖6 沉香化氣丸近紅外一致性模型（陜西漢王藥業(yè)有限公司）

由于該公司所生產(chǎn)的樣品量較少，無法對其進(jìn)行自身驗(yàn)證，僅對其他廠家生產(chǎn)的樣品進(jìn)行驗(yàn)證。參照3.3的操作，為了更好區(qū)分，本試驗(yàn)將不同生產(chǎn)廠家的沉香化氣丸分開比較（見圖7～9）。

圖7 不同廠家沉香化氣丸一致性模型驗(yàn)證圖（漢王VS江蘇707）

圖8 不同廠家沉香化氣丸一致性模型驗(yàn)證圖（漢王VS成都地奧）

圖9 不同廠家沉香化氣丸一致性模型驗(yàn)證圖（漢王VS諾得勝）

從圖7～9可以看出所建立的陜西漢王藥業(yè)有限公司所生產(chǎn)的沉香化氣丸近紅外一致性評價模型在CI值為3.6時能有效區(qū)分其他公司所生產(chǎn)的沉香化氣丸。

此外，本課題組還建立了成都地奧、江蘇707等公司生產(chǎn)的沉香化氣丸近紅外一致性評價模型，但是由于樣品量不足，所建立的模型還需進(jìn)一步驗(yàn)證，將在以后陸續(xù)報道。

5 結(jié)論

本實(shí)驗(yàn)通過建立近紅外一致性評價模型，選擇表征不同廠家沉香化氣丸的特征譜段，建立了湖北諾得勝制藥股份有限公司、陜西漢王藥業(yè)有限公司等公司的近紅外一致性檢驗(yàn)?zāi)Ｐ?，通過對比不同儀器掃描的圖譜，以及用其他不同廠家生產(chǎn)的樣品驗(yàn)證模型。結(jié)果表明，所建模型可以很好地和其他廠家的樣品區(qū)分。

近紅外光譜法用于藥品檢測多為口服的片劑和膠囊劑，由于中藥丸劑其特殊性，其近紅外采樣方式及檢測準(zhǔn)確性報道不多。本實(shí)驗(yàn)嘗試所建模型的的預(yù)測準(zhǔn)確性及穩(wěn)健性較佳。由實(shí)驗(yàn)可知，近紅外光譜漫反射應(yīng)用于中藥丸劑快速檢測分析是可行的，更具實(shí)用性。

[1]胡昌勤.近紅外光譜法快速分析藥品.[M].北京：化學(xué)工業(yè)出版社出版，2014，29（10）：1105-1108.

[2]耿穎，程奇蕾，何蘭時.近紅外光譜法鑒別普伐他汀鈉片及其原料藥晶型的一致性研究[J].現(xiàn)代藥物與臨床，2014，29（10）：1105-1108.

[3]曲佳，王秋珍，王杰.近紅外光譜法快速鑒別不同廠家的天王補(bǔ)心丸(小蜜丸)[J].藥物評價研究，2014，37（4）：346-348.

[4]王小亮，馮潤東，蘇坷.馬泉荔近紅外光譜法快速鑒別與區(qū)分不同廠家的硝酸咪康唑栓劑[J].海峽藥學(xué)，2015，27（11）：34-36.

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Quick Identification of Chenxiang Huaqi Pill by NIR Conformity Test Model

XU Wanbang,ZHOU Yingyi,LI Hua
(Guangdong Institute for Drug Control,Guangdong Province,Guangzhou 510180,China)

Objective To establish the nearinfrared spectroscopic conformityfor rapid identification of chenxianghuaqi pills.Methods Near-infrared spectra(NIR)of Chenxiang Huaqi pills were collected and operated by OPUS analysis software.It was etablished the near-infrared spectroscopic conformity test ofchenxianghuaqi pills.Samples from different factories verified the conformity test.Results The proposed nearinfrared spectroscopic conformity test correct1y identified real and counterfeit pills of chenxianghuaqi.Conclusion This method is rapid,simple and accurate analysis technology.

nearlnfrared spectroscopy;Chenxiang Huaqi pill;conformity;TCM identification

10.3969/j.issn.1672-2779.2017.15.062

1672-2779（2017）-15-0142-03

：李海燕本文校對：梁生旺

2017-04-26）

國家藥品評價性抽驗(yàn)專項(xiàng)資助；廣東省中醫(yī)藥局中藥強(qiáng)省專項(xiàng)資助【No.20150438，20172027】