河北省石家莊市中醫(yī)院

鄭彩華 郭愛林△ 李 晶△ 郭光業(yè) 常玉娟 馮秀賢 張 娜(石家莊 050051)

潰結(jié)爽灌腸組方不同組分對(duì)實(shí)驗(yàn)性潰瘍性結(jié)腸炎大鼠的治療中單因素效應(yīng)及量效關(guān)系分析*

河北省石家莊市中醫(yī)院

鄭彩華 郭愛林△李 晶△郭光業(yè) 常玉娟 馮秀賢 張 娜(石家莊 050051)

目的：通過正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)，對(duì)潰結(jié)爽組方中苦參、地榆、黃柏、白及4味中藥的單因素效應(yīng)進(jìn)行分析，觀察其對(duì)潰瘍性結(jié)腸炎(UC)大鼠的治療作用，并探討他們之間的量效關(guān)系及其最佳配伍，為臨床中藥灌腸組方提供依據(jù)。方法：清潔級(jí)雄性wistar大鼠70只，應(yīng)用正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)，組方各因素取三水平， 選用L9(34)正交表，進(jìn)行9組試驗(yàn)。以葡聚糖硫酸鈉(DSS)灌胃造模成功后灌腸治療10 d，評(píng)估各組大鼠基礎(chǔ)狀況并計(jì)算疾病活動(dòng)指數(shù)(DAI) ; 蘇木精-伊紅(HE) 染色后顯微鏡下觀察其病理變化并評(píng)分；ELISA法檢測(cè)大鼠結(jié)腸黏膜白細(xì)胞介素10(IL-10)，白細(xì)胞介素17(IL-17)表達(dá)水平。結(jié)果：組方中苦參、地榆、黃柏、白及4味中藥在三水平均可降低大鼠結(jié)腸黏膜促炎因子IL-17表達(dá)水平，提高抑炎因子IL-10表達(dá)；苦參、白及可明顯提高IL-10表達(dá)，降低IL-17含量，并且在1水平效應(yīng)最高，但隨用量增加效應(yīng)降低；地榆在2水平時(shí)，可明顯提高IL-10表達(dá)，在3水平時(shí)，可明顯降低IL-17含量；黃柏在2水平時(shí)，可明顯提高IL-10表達(dá)，在1水平時(shí)，可明顯降低IL-17含量；A、B、C、E、F、G、I組的IL-17含量均顯著低于模型組，IL-10表達(dá)顯著高于模型組，差異具有顯著性(P<0.05)，D、H組IL-17含量低于模型組，IL-10表達(dá)高于模型組，但差異無顯著性(P>0.05)。潰結(jié)爽灌腸組中(A、B、C、E、F、G、I組)大鼠疾病活動(dòng)指數(shù)(DAI)、結(jié)腸病理評(píng)分較模型組均有不同程度改善，結(jié)果與炎癥因子IL-17、IL-10表達(dá)水平變化一致。結(jié)論：潰結(jié)爽灌腸組方可以顯著改善UC大鼠癥狀、結(jié)腸組織學(xué)評(píng)分，其治療作用可能與降低大鼠結(jié)腸黏膜促炎因子IL-17表達(dá)、提高抑炎因子IL-10水平有關(guān)，從而維持腸道穩(wěn)態(tài)，促進(jìn)腸道黏膜修復(fù)。

潰瘍性結(jié)腸炎;腸澼;久痢;休息痢;潰結(jié)爽;中藥灌腸;IL-10;IL-17;中藥組方

潰瘍性結(jié)腸炎(UC) 以遷延不愈、反復(fù)發(fā)作、病因復(fù)雜為特征，其發(fā)病可能涉及多因素、多環(huán)節(jié)綜合作用，臨床表現(xiàn)以腹痛、腹瀉、黏液膿血便等直、結(jié)腸非特異性炎癥病變?yōu)橹?，不同患者間因病變部位、病變程度不同，表現(xiàn)不盡相同，重癥患者可同時(shí)伴有腸外多器官損害。[1]目前研究表明，細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)失衡在UC腸道黏膜免疫反應(yīng)的過程中具有重要作用。[2]我國(guó)的潰瘍性結(jié)腸炎患者多為輕度及中度，病變部位多在乙狀結(jié)腸和直腸(脾曲以遠(yuǎn))，因此臨床上灌腸等局部用藥對(duì)于該病的治療具有重要意義。[3-4]中藥灌腸治療作用直接、療效顯著，目前在國(guó)內(nèi)廣泛應(yīng)用。潰結(jié)爽方灌腸在臨床應(yīng)用中每獲顯效。本研究通過正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)，觀察潰結(jié)爽方灌腸對(duì)UC模型大鼠疾病活動(dòng)指數(shù)(DAI)、結(jié)腸病理評(píng)分、大鼠結(jié)腸黏膜白細(xì)胞介素10(IL-10)，白細(xì)胞介素17(IL-17)水平，探討其對(duì)UC大鼠炎癥水平的影響及療效機(jī)制，苦參、地榆、黃柏、白及4味中藥的之間的量效關(guān)系及其最佳配伍，為臨床中藥灌腸組方提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：清潔級(jí)雄性wistar大鼠70只，7 ～ 8 周齡，體質(zhì)量( 200±20) g，由河北醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。動(dòng)物合格證號(hào): SCXK(冀) 2013-1-003，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物合格證號(hào):1610114。大鼠正常飲食，自由飲水，在室溫22℃下飼養(yǎng)，相對(duì)濕度40%～60%，正常光照。

1.1.2 藥物制備：潰結(jié)爽方(藥物組成：苦參，地榆，黃柏，白及)購(gòu)于石家莊市中醫(yī)院中藥房，根據(jù)實(shí)驗(yàn)方案用蒸餾水配制成不同濃度的混懸液，置于 4 ℃冰箱備用；葡聚糖硫酸鈉(DSS)，Sigma公司中國(guó)代理。

1.1.3 試劑與儀器：倒置顯微鏡：Olympus公司；酶標(biāo)儀( BS-1101) ，南京德鐵實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司。大鼠IL-10Elisa試劑盒:上海恪敏生物科技有限公司(貨號(hào)：KB2735)；大鼠IL-17Elisa試劑盒：上海恪敏生物科技有限公司(貨號(hào)：KB2628)。

1.2 方法

1.2.1 分組與造模：基礎(chǔ)喂養(yǎng)適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后，隨機(jī)取6只為正常組(K組)，飲用蒸餾水。其余64只為模型復(fù)制組。用蒸餾水將DSS[4]溶解成濃度為5%的溶液，灌胃并自由飲用7 d，每日1次，每次4 mL，灌胃后常規(guī)飼養(yǎng)。造模第7 d結(jié)束后從模型組隨機(jī)抽取4只處死，用以判斷模型復(fù)制情況，制作結(jié)腸病理切片觀察UC實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ痛笫笫欠窠ⅰ⒃炷３晒Φ?0只大鼠隨機(jī)分為10組，分別是從第A組到第I組、模型對(duì)照組(J組)，每組6只。

1.2.2 給藥方法

1.2.2.1 大鼠給藥劑量：按臨床成人(人的體質(zhì)量按70 kg算)用量的6.3倍，1次/d，每次2 mL，連續(xù)10 d。模型組及正常組給予相同計(jì)量0.9%氯化鈉溶液灌腸。治療組具體灌腸用藥如下：A組3.69 g/kg，B組6.48 g/kg，C組9.27 g/kg，D組6.93 g/kg，E組7.02 g/kg，F(xiàn)組8.19 g/kg，G組7.47 g/kg，H組8.64 g/kg，I組8.73 g/kg。

1.2.2.2 灌腸方法：用兒童肛軟管輕輕從大鼠肛門插入深度為8 cm， 每只大鼠灌腸2 mL，將各組藥液緩慢注入腸道，灌腸后大鼠倒掛安置10 min以延長(zhǎng)灌腸液在腸道內(nèi)的停留時(shí)間，從而達(dá)到保留灌腸的目的，之后自由飲食。療程；連續(xù) 10 d，1 次/d。療程結(jié)束后禁食不禁水1 d，之后處死動(dòng)物取材備用。

1.2.2.3 具體用藥分組： 藥物，a=苦參， b=地榆，c=黃柏，d=白及。各因素取3水平，L1、L2、L3。a：苦參，L1=10 g，L2=20 g，L3=30 g；b：地榆，L1=15 g，L2=30 g，L3=45 g；c：黃柏，L1=6 g，L2=12 g，L3=18 g；d：白及，L1=10 g，L2=20 g，L3=30 g。不考慮各因子之間的的交互作用。

表頭設(shè)計(jì)：采用L9(34)正交表。

列號(hào)abcd因子1234

各試驗(yàn)組方：

A.苦參10 g，地榆15 g，黃柏6 g，白及10 g。

B.苦參10 g，地榆30 g，黃柏12 g，白及20 g。

C.苦參10 g，地榆45 g，黃柏18 g，白及30 g。

D.苦參20 g，地榆15 g，黃柏12 g，白及30 g。

E.苦參20 g，地榆30 g，黃柏18 g，白及10 g。

F.苦參20 g，地榆45 g，黃柏6 g，白及20 g。

G.苦參30 g，地榆15 g，黃柏18 g，白及20 g。

H.苦參30 g，地榆30 g，黃柏6 g，白及30 g。

I.苦參30 g，地榆45 g，黃柏12 g，白及10 g。

1.3 觀察指標(biāo)及方法

1.3.1 疾病活動(dòng)指數(shù)：分別在造模結(jié)束后(第8 d)以及治療結(jié)束后(第18 d)對(duì)各組大鼠進(jìn)行DAI評(píng)分。DAI評(píng)分=(大鼠大便性狀得分+大鼠體質(zhì)量下降得分+大鼠便血得分)/3，具體標(biāo)準(zhǔn)見表1。

表1

DAI評(píng)分表

1.3.2 酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法(ELISA)測(cè)定腸黏膜IL-10、IL-17水平： 采用ELISA 法檢測(cè)UC大鼠腸組織 IL-10、IL-17含量。灌腸給藥10 d后，各組大鼠禁食水24 h，以10%水合氯醛腹腔注射麻醉后，取肛門以上2 ～ 10 cm 結(jié)腸組織，生理鹽水沖洗后，濾紙吸干水分，分裝于凍存管中，冷凍于液氮罐中備檢。檢測(cè)時(shí)取出腸組織，各加5 倍的生理鹽水，超聲粉碎機(jī)勻漿，4 ℃，3 500 r / min 離心20 min，取上清，存放于1.5 mL EP管中。ELISA 法檢測(cè)UC 大鼠腸組織IL-10、IL-17含量的變化，檢測(cè)方法同說明書。采集實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，計(jì)算樣本含量。

1.3.3 HE 染色觀測(cè)病理組織學(xué)情況并評(píng)分：取肛門以上2 ～ 10 cm 結(jié)腸組織，生理鹽水沖洗干凈，多聚甲醛固定，梯度脫水，石蠟包埋，常規(guī) HE染色，光鏡觀察，并由經(jīng)驗(yàn)豐富的病理教師對(duì)其進(jìn)行量化雙盲評(píng)分。[4]光鏡下HE染色評(píng)分分?jǐn)?shù)是由上皮細(xì)胞與炎細(xì)胞浸潤(rùn)情況共同決定的，是2項(xiàng)分?jǐn)?shù)之和。具體評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)見表2。

表2

UC大鼠結(jié)腸病理組織學(xué)評(píng)分

2 結(jié)果

2.1 大鼠DAI評(píng)分 在實(shí)驗(yàn)進(jìn)程中正常組6只大鼠狀態(tài)良好，進(jìn)食進(jìn)水量正常，被毛緊密色白有光澤，糞便呈顆粒狀，無腹瀉，無血便，體質(zhì)量逐漸增加。造模開始后，除正常組外，其他各組大鼠均有不同程度精神萎靡、肉眼血便、體質(zhì)量下降，被毛稀松毛色泛黃無光，肛周污染嚴(yán)重。造模結(jié)束后，各模型組大鼠DAI評(píng)分顯著高于空白組，差異具有顯著性(P<0.05)。潰結(jié)爽灌腸治療開始后，A、B、C、I組大鼠出現(xiàn)不同程度好轉(zhuǎn)。治療第10 d，A、B、C、I組大鼠活動(dòng)增加，飲食量及體質(zhì)量增加，大便未見到黏液膿血，一般狀態(tài)明顯優(yōu)于模型組大鼠。E、F、G組大鼠精神亦有所好轉(zhuǎn)，但形態(tài)較為消瘦，進(jìn)食進(jìn)水量較少，糞便接近成形，但仍偶可見肉眼血便，有輕微肛周污染。D、H組雖有所改善，但大鼠精神仍較差，體型瘦削，被毛無光澤，活動(dòng)較少，大便稀溏，偶見黏液膿血，肛周不同程度污染。A、B、C、I、E、F、G組大鼠DAI評(píng)分較模型組明顯改善，差異具有顯著性(P<0.05)。D、H組雖有所改善，但差異無顯著性(P>0.05)。詳見表3。

表3

大鼠DAI評(píng)分

2.2 潰結(jié)爽方灌腸對(duì)UC 大鼠結(jié)腸組織中IL-17、IL-10水平的影響 大鼠造模成功后, 連續(xù)灌腸10 d，結(jié)腸組織中IL-10、IL-17水平結(jié)果如表4所示。UC 模型組結(jié)腸組織中IL-17水平均顯著高于正常組，IL-10顯著低于正常組，差異具有顯著性(P<0.05)。潰結(jié)爽灌腸方組結(jié)腸組織中A、B、C、E、F、G、I組的IL-17含量均顯著低于模型組，IL-10水平顯著高于模型組，差異具有顯著性(P<0.05)。D、H組IL-17含量低于模型組，IL-10水平高于模型組，但差異無顯著性。潰結(jié)爽各劑量組呈現(xiàn)一定的量效關(guān)系，組方中苦參、地榆、黃柏、白及4味中藥在三水平均可降低大鼠結(jié)腸黏膜IL-17水平，提高IL-10含量?？鄥ⅰ准翱擅黠@提高IL-10表達(dá)，降低IL-17含量，并且在1水平效應(yīng)最高，但隨用量增加效應(yīng)降低。地榆在2水平時(shí)，可明顯提高IL-10表達(dá)；在3水平時(shí)，可明顯降低IL-17含量。黃柏在2水平時(shí)，可明顯提高IL-10表達(dá)；在1水平時(shí)，可明顯降低IL-17含量。詳見表5。

表4 潰結(jié)爽灌腸對(duì)UC大鼠結(jié)腸黏膜IL-10、IL-17水平的影響

注: 與模型組比較，△P< 0.05；與正常組比較，*P< 0.05

2.3 病理組織學(xué)情況 正常組(K組)大鼠結(jié)腸黏膜結(jié)構(gòu)正常，腺體排列規(guī)整，杯狀細(xì)胞正常存在無減少；模型組(J組)大鼠結(jié)腸黏膜層可見大量浸潤(rùn)的炎性細(xì)胞，隱窩結(jié)構(gòu)消失，腺體破壞，杯狀細(xì)胞基本消失，部分黏膜上皮脫落，形態(tài)、結(jié)構(gòu)被破壞；各治療組在潰結(jié)爽灌腸治療后與J組相比均有不同程度的改善，以炎癥表現(xiàn)為主，A、B、C、I 組大鼠在結(jié)腸黏膜可見少量炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，腺體排列較為整齊；E、F、G組大鼠炎性細(xì)胞浸潤(rùn)到結(jié)腸黏膜下層甚至固有層，杯狀細(xì)胞減少；D、H組大鼠結(jié)腸腺體紊亂，可見分支現(xiàn)象，偶見肉芽組織增生。

潰結(jié)爽灌腸治療后，潰瘍性結(jié)腸炎模型組大鼠(J組)結(jié)腸病理組織學(xué)評(píng)分顯著高于正常組，差異具有顯著性(P<0.05)；潰結(jié)爽灌腸方A、B、C、E、F、G、I組的病理組織學(xué)評(píng)分均顯著低于模型組，差異具有顯著性(P<0.05)；D、H組結(jié)腸病理組織學(xué)評(píng)分低于模型組，但差異無顯著性(P>0.05)。詳見表6。

表6 UC大鼠結(jié)腸病理組織學(xué)評(píng)分

3 討論

UC屬于中醫(yī)學(xué)“休息痢”“久痢”“大瘕泄”“腸澼”等范疇。[5]《素問·太陽(yáng)陽(yáng)明篇》云：“飲食不節(jié)，起居不時(shí)者，陰受之，陽(yáng)受之則入六腑，陰受之則入五臟……入五臟則滿閉，下則飧瀉，久為腸澼。”該病發(fā)病機(jī)制尚未完全明確，細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)失衡在UC腸道黏膜免疫反應(yīng)的過程中具有重要作用。目前研究表明，腸道黏膜炎癥的發(fā)生發(fā)展，與肌體中促炎細(xì)胞因子和抗炎細(xì)胞因子之間的平衡狀態(tài)被打破有關(guān)。相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)，炎性反應(yīng)具有促進(jìn)UC 發(fā)生發(fā)展的作用，UC 患者 IL -17 、腫瘤壞死因子-α( TNF-α) 等促炎因子水平明顯升高，IL-10 等抗炎因子水平明顯降低，促炎因子/抑炎因子失衡是導(dǎo)致腸道炎性反應(yīng)重要原因之一。[6]

IL-17是由Th 17細(xì)胞分泌的一種強(qiáng)促炎因子，能夠激活并募集大量炎性細(xì)胞到肌體相應(yīng)部位引發(fā)炎癥反應(yīng)，參與了多種自身免疫性疾病的發(fā)生發(fā)展，[7]并且IL-17的表達(dá)水平與潰瘍性結(jié)腸炎的炎性反應(yīng)程度及疾病進(jìn)展密切相關(guān)，有研究發(fā)現(xiàn)，[8]病情越嚴(yán)重的UC患者腸組織中IL-17 的表達(dá)水平越高，呈正相關(guān)。與IL-17生物學(xué)作用相反，IL-10能夠抑制致炎細(xì)胞因子的釋放從而抑制炎癥反應(yīng)，是典型的抗炎與免疫抑制性細(xì)胞因子。IL-10的免疫調(diào)節(jié)活性基于其抑制細(xì)胞因子合成和抗原遞呈的能力。[9]研究顯示，活動(dòng)期的UC患者 IL-10 的結(jié)腸組織含量明顯降低，緩解期有所上調(diào)，并且與病變范圍和病情嚴(yán)重程度呈負(fù)相關(guān)，所以 IL -10 在 UC 中可能是保護(hù)性因素。即使在正常飼養(yǎng)條件下(無特異性致病菌感染)IL -10的缺失能夠自發(fā)誘導(dǎo)多種自身免疫疾病的發(fā)生，如類似于克羅恩病的結(jié)腸炎，[10]慢性非感染性腸道炎癥[11]等。由此印證了IL-10 等炎癥因子在維持正常腸道黏膜免疫調(diào)節(jié)和炎癥反應(yīng)平衡中發(fā)揮了重要作用。[12]

根據(jù)疾病嚴(yán)重程度，我國(guó)的UC患者多為輕度及中度，病變部位多在乙狀結(jié)腸和直腸(脾曲以遠(yuǎn))，所以臨床上灌腸等局部用藥對(duì)于該病的治療具有重要意義，[4]并在指南中得到肯定。中藥灌腸可使藥物與病變部位直接接觸，藥物直達(dá)病所，使之充分接觸病灶，有效成分直接通過腸道黏膜吸收，提高了病變部位的血藥濃度，使藥物迅速被吸收，改善組織營(yíng)養(yǎng)和血供，修復(fù)腸道潰瘍面，促進(jìn)潰瘍愈合，充分發(fā)揮藥物的局部治療作用；同時(shí)由于避免了肝臟的首過消除效應(yīng)，減少了藥物在肝臟及胃腸多種酶對(duì)藥物的破壞，生物利用度得到了充分發(fā)揮，且無明顯毒副作用，是臨床常用的重要治療方法之一。因此，尋找更加有效的中藥灌腸方具有重要的臨床意義。

筆者曾對(duì)146首中藥治療UC灌腸方藥物進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，根據(jù)每味藥物的應(yīng)用頻數(shù)，依次為：苦參、地榆、黃柏、白及、三七、大黃、五倍子、明礬、馬齒莧、黃連、槐花、兒茶等。此次統(tǒng)計(jì)與潰結(jié)爽組方相一致。潰結(jié)爽灌腸方(黃柏，苦參，地榆，白及)以清熱燥濕、涼血解毒、止血生肌為組方原則，在其長(zhǎng)期臨床應(yīng)用中，療效明顯。黃柏苦寒，入腎、膀胱、大腸經(jīng)，清熱燥濕，瀉火解毒，現(xiàn)代藥理研究其具有抗菌抑菌，改善創(chuàng)面微循環(huán)，促進(jìn)潰瘍愈合的作用?？鄥⒖嗪?入大腸、小腸、胃、肝、心經(jīng)，主治熱毒血痢,腸風(fēng)下血, 赤白帶下等，葉天士稱其“治痢極效, 百發(fā)百中之藥”，其同樣可以抗菌殺蟲，抗病毒，抗炎，調(diào)節(jié)免疫。地榆苦酸澀，微寒，歸大腸、肝經(jīng),功能清熱解毒、涼血止血，《藥性論》謂：“止血痢蝕膿?！币志寡椎耐瑫r(shí)還可止瀉止血。白及苦甘澀、微寒,入肺經(jīng)，功擅止血、消腫,生肌、斂瘡, 其可止血，促進(jìn)潰瘍愈合。

臨床有1 d灌腸2次，甚至1次灌2付藥，亦取得非常滿意的療效。啟發(fā)筆者可以針對(duì)患者病情，靈活調(diào)整藥量來提高藥效。中醫(yī)不傳之秘在用量，所以采用正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)處理這種多因素多水平實(shí)驗(yàn)，通過綜合比較和方差分析，對(duì)苦參、地榆、黃柏、白及4味中藥的單因素效應(yīng)進(jìn)行分析，在探尋其療效機(jī)制的同時(shí)，并確定他們之間的量效關(guān)系及其最佳配伍，為臨床中藥灌腸組方提供依據(jù)。

本研究結(jié)果顯示，模型組大鼠結(jié)腸黏膜組織中IL-17水平顯著高于正常組(P<0.05)，IL-10表達(dá)量明顯低于正常組(P<0.05)；潰結(jié)爽灌腸組A、B、C、E、F、G、I組大鼠結(jié)腸組織中IL-17水平較模型組明顯降低(P<0.05), IL-10表達(dá)量均明顯高于模型組(P<0.05),差異具有顯著性。研究初步證實(shí)潰結(jié)爽灌腸可降低UC結(jié)腸組織中促炎因子IL-17的水平，提高抑炎因子IL-10含量，減輕肌體免疫反應(yīng)，改善肌體炎癥反應(yīng)狀態(tài)。造模后，大鼠出現(xiàn)不同程度精神倦怠，體質(zhì)量下降，飲食量減少，大便稀溏，甚至排黏液膿血，肛周污染；各劑量組潰結(jié)爽灌腸過程中大鼠外觀體征均有不同程度好轉(zhuǎn)。A、B、C、I組大鼠改善明顯，精神好轉(zhuǎn)，體質(zhì)量、進(jìn)食進(jìn)水量增加，皮毛、排便情況等較前改善。病理組織學(xué)觀察結(jié)果顯示，模型組大鼠結(jié)腸黏膜炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，杯狀細(xì)胞減少或消失，腺體破壞，被浸潤(rùn)的炎癥細(xì)胞替代，個(gè)別黏膜層明顯變薄，個(gè)別肌層組織炎癥較重，失去正常結(jié)構(gòu)的程度，潰結(jié)爽不同劑量組大鼠的病變都較前減輕，其中以A、B、C、I組大鼠改善明顯。此外，IL-17 、IL-10與UC大鼠DAI評(píng)分、病理組織學(xué)評(píng)分有明顯的相關(guān)性，結(jié)果一致。說明潰結(jié)爽灌腸對(duì) UC 模型大鼠具有較顯著的治療作用。

本研究結(jié)果顯示，潰結(jié)爽灌腸后大鼠結(jié)腸黏膜促炎因子IL-17的含量明顯降低，而抑炎因子IL-10的水平上調(diào)，并且DAI評(píng)分及結(jié)腸組織病理學(xué)表現(xiàn)較模型組也有所改善，說明潰結(jié)爽能調(diào)節(jié)UC大鼠抗炎和抑炎因子的失衡，使其恢復(fù)平衡，抑制或緩解結(jié)腸黏膜炎癥反應(yīng)，從而使受損腸道黏膜得到修復(fù)和一定程度的愈合。另外，實(shí)驗(yàn)結(jié)果同時(shí)提示，結(jié)腸組織炎癥因子表達(dá)的失衡情況與結(jié)腸的損傷程度具有一致性，這從另一角度印證了潰結(jié)爽治療 UC 的機(jī)制可能與其對(duì)炎癥因子的調(diào)控作用有關(guān)。維持或調(diào)節(jié)促炎因子與抗炎因子之間的平衡，恢復(fù) UC 大鼠免疫功能，這可能是潰結(jié)爽治療 UC 免疫機(jī)制之一，也可能成為今后 UC 治療的新策略和新方法。但中藥復(fù)方作用機(jī)制復(fù)雜，其相關(guān)機(jī)理還有待進(jìn)一步的研究。

[1]BergAM，KellyCP，F(xiàn)arrayeFA. Clostridium difficile infection in the inflammatory bowel disease patient[J].Inflamm Bowel Dis，2013，19(1):194-204

[2]TewGW，HackneyJA，GibbonsD，et al. Association between response to etrolizumab and expression of integrin αE and granzyme A in colon biopsies of patients with ulcerative Colitis[J]. Gastroenterol，2016，150(2) : 477-487

[3]崔朝陽(yáng).健脾湯對(duì)潰瘍性結(jié)腸炎患者 CRP、ESR 及凝血功能的影響[J].陜西中醫(yī)，2015,36(10):1 354-1 355

[4]胡品津.炎癥性腸病診斷與治療的共識(shí)意見(2012 年·廣州) 解讀[S].胃腸病學(xué)，2012，17(12)：709-711

[5]李毅，劉艷，劉力，等. 潰瘍性結(jié)腸炎癥狀學(xué)聚類研究[J]. 現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志，2016，25(4) :1 027-1 029

[6]OlesenMT，Ballarín-GonzálezB，HowardKA. The application of RNAi-based treatments for inflammatory bowel disease[J]. Drug Deliv Transl Res，2014，4((1) : 4-18

[7]KohnoM,TsutsumiA，MatsuiH,et al. Interleukin 17 gene Expression in Patients with Rheumatoid arthritis[J].Modeumatol,2008,18(l):15-22

[8]FitzpatrickLR. Inhibition of IL-17 as a pharmacological approach for IBD[J]. Int Rev Immunol，2013，32: 544-555

[9]HyunMH,LeeCH,KangMH, et al.Interleukin-10 promoter gene polymorphisms and susceptibility to asthma: a meta-analysis[J].PLoS One, 2013,8: e53 758

[10]LindsayJO，CiesielskiCJ，ScheininT，et al. Local delivery of adenoviralvectors encoding murine interleukin 10 induces colonic interleukin 10production and is therapeutic for murine colitis[J]. Gut，2003，52(7) : 981-987

[11]朱葉珊，劉陽(yáng)，李禾花. 改良愈瘍湯對(duì)潰瘍性結(jié)腸炎大鼠外周血白介素- 8、白介素-10 的影響[J]. 四川中醫(yī)，2012，30(3) : 30-31

[12]何本求，賴象權(quán)，肖成. 侗藥五味止瀉湯對(duì)潰瘍性結(jié)腸炎大鼠血清 IL-6、IL-10 的影響[J]. 時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥，2012，23(11) : 2 801-2 803

[13]陳冠儒，張怡,鄭育卿，等.近十年中藥灌腸治療潰瘍性結(jié)腸炎文獻(xiàn)分析[J].亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥，2017,13(6)：61-63

(2017-06-04 收稿)

*河北省中醫(yī)藥管理局科學(xué)技術(shù)研究計(jì)劃項(xiàng)目：No.2016102

R285.5

A

1007-5615(2017)04-0037-05

方 藥 研 究