胡宏峰，盧仁泉，胡 娟，江銘磊，郭 林

復(fù)旦大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院檢驗(yàn)科，復(fù)旦大學(xué)上海醫(yī)學(xué)院腫瘤學(xué)系，上海 200032

卵巢癌患者血清唾液酸含量檢測(cè)的價(jià)值

胡宏峰，盧仁泉，胡 娟，江銘磊，郭 林

復(fù)旦大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院檢驗(yàn)科，復(fù)旦大學(xué)上海醫(yī)學(xué)院腫瘤學(xué)系，上海 200032

背景與目的：目前臨床上用于輔助診斷卵巢癌的血清標(biāo)志物相對(duì)缺乏。該研究旨在探討血清唾液酸(sialic acid，SA)含量檢測(cè)在卵巢癌患者的輔助診斷、療效監(jiān)測(cè)等中的臨床應(yīng)用價(jià)值。方法：采用酶法檢測(cè)332例婦科惡性腫瘤患者、230例婦科良性疾病患者及194名健康對(duì)照者的血清SA含量；同時(shí)采用化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)上述標(biāo)本的血清CA125及HE4含量。結(jié)果：婦科惡性腫瘤患者的血清SA含量為584.0(499.8，702.5) mg/L，明顯高于婦科良性疾病組［497.0(454.0，559.0) mg/L］及健康對(duì)照組［475.0(443.8，505.0)mg/L，P＜0.05］；其中卵巢癌組血清SA含量最高［675.0(582.0，816.0) mg/L］；血清SA聯(lián)合CA125檢測(cè)對(duì)卵巢惡性腫瘤的靈敏度高達(dá)95.17%，陰性預(yù)測(cè)值為94.37%；卵巢癌患者隨訪測(cè)定過(guò)程中，血清SA含量隨著病情的好轉(zhuǎn)，其濃度逐步降低。結(jié)論：血清SA含量檢測(cè)可應(yīng)用于卵巢癌的早期篩查、鑒別診斷及療效監(jiān)測(cè)。

婦科腫瘤；卵巢癌；血清唾液酸；酶法

唾液酸(sialic acid，SA)本質(zhì)是神經(jīng)氨酸的乙酰化衍生物，存在于人體的各種組織細(xì)胞，是細(xì)胞膜的重要組成成分［1］。作為糖類(lèi)脂質(zhì)、糖蛋白及糖肽的構(gòu)成單位，與生物體的許多生物功能相關(guān)，參與許多重要的生理過(guò)程。隨著惡性腫瘤細(xì)胞的增殖、轉(zhuǎn)移、浸潤(rùn)及細(xì)胞黏附性降低，SA的含量有所升高［2］。

近年來(lái)，婦科腫瘤發(fā)病率居高不下，無(wú)論是良性還是惡性腫瘤的預(yù)先篩查及腫瘤的療效監(jiān)測(cè)，臨床均無(wú)快速便捷的標(biāo)志物。有研究表明，血清SA含量的變化與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展及轉(zhuǎn)移有著密切的關(guān)系［3］，測(cè)定血清SA含量對(duì)于惡性腫瘤的早期篩查及療效監(jiān)測(cè)有一定的臨床價(jià)值。本研究對(duì)332例婦科惡性腫瘤患者、230例婦科良性疾病患者及194名健康對(duì)照者的血清SA含量進(jìn)行測(cè)定，探索其在臨床婦科腫瘤應(yīng)用中的價(jià)值。

1 資料和方法

1.1 臨床資料

本研究共納入婦科惡性腫瘤患者332例?；颊吣挲g24～83歲，其中卵巢癌145例(漿液性腺癌138例，透明細(xì)胞癌7例)，宮頸鱗癌127例，子宮內(nèi)膜樣腺癌60例。均為復(fù)旦大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院2014年1月—2014年8月病理明確診斷的惡性腫瘤患者。婦科良性腫瘤患者230例，年齡17～83歲，其中卵巢良性腫瘤81例(成熟性畸胎瘤19例，卵巢囊腫29例，囊腺瘤33例)，宮頸上皮內(nèi)瘤變52例，子宮良性腫瘤97例(子宮平滑肌瘤51例，子宮內(nèi)膜不典型增生12例，子宮內(nèi)膜樣囊腫26例，子宮肌腺癥8例)。均為復(fù)旦大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院2014年1月—2014年8月病理明確診斷的良性疾病患者。健康對(duì)照者194名，年齡25～79歲，選取復(fù)旦大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院2014年1月—2014年8月健康體檢女性人群，無(wú)心、肝、肺及腎等重要疾病，肝腎功能正常且無(wú)家族腫瘤患病史。本研究通過(guò)復(fù)旦大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院倫理審查委員會(huì)審查，所有患者均由本人或家屬簽署知情同意書(shū)。

1.2 標(biāo)本來(lái)源

選取新入院未經(jīng)手術(shù)及放化療患者，靜脈采血3～4 mL，2 620×g離心10 min，取上層血清立即檢測(cè)或-80 ℃凍存，1周內(nèi)檢測(cè)。

1.3 SA測(cè)定原理及方法

血清SA的測(cè)定采用浙江東甌診斷產(chǎn)品有限公司試劑，嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)操作。在羅氏診斷產(chǎn)品(上海)有限公司P800全自動(dòng)生化分析儀上利用酶法測(cè)定，在保證嚴(yán)格的質(zhì)量控制下完成樣品的檢測(cè)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

所有結(jié)果以中位數(shù)(四分位間距，P25，P75)表示，均采用SPSS 13.0來(lái)分析。統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用非參數(shù)檢驗(yàn)，兩組數(shù)據(jù)之間比較采用Mann-Whitney U檢驗(yàn)，3組數(shù)據(jù)之間比較則采用Kruskal-Wallis檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 婦科惡性腫瘤組與婦科良性疾病組及健康對(duì)照組血清SA濃度之間的關(guān)系

婦科惡性腫瘤患者血清S A濃度為584.0(499.8，702.5) mg/L，婦科良性組及健康對(duì)照組血清SA濃度分別為497.0(454.0，559.0) mg/L及475.0(443.8，505.0) mg/L，3組數(shù)據(jù)間差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05，圖1)。

圖 1 婦科癌癥組與對(duì)照組的血清SA濃度之間的關(guān)系Fig. 1 The association of serum SA in gynecologic cancer group and control group

2.2 不同婦科癌癥組間血清SA濃度之間的關(guān)系

卵巢癌組、宮頸癌組和子宮內(nèi)膜癌組血清S A濃度分別為6 7 5.0(5 8 2.0，816.0) mg/L、504.0(447.0，602.0) mg/L和545.0(499.8，597.0) mg/L，與健康對(duì)照組的475.0(443.8，505.0) mg/L相比，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，其中卵巢癌組差異最為顯著(P＜0.001，圖2)。故本研究后續(xù)實(shí)驗(yàn)，主要選取卵巢癌為研究對(duì)象，進(jìn)一步比較分析血清SA水平在卵巢癌診療中的應(yīng)用價(jià)值。

2.3 卵巢癌中各指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)

在145例卵巢癌患者中，9例患者CA125水平未見(jiàn)升高，但SA水平卻異常升高；17例患者HE4陰性，而SA為陽(yáng)性。實(shí)驗(yàn)表明，血清SA檢測(cè)可以作為卵巢癌鑒別診斷的一個(gè)實(shí)用標(biāo)志物。

圖 2 卵巢癌組、宮頸癌組、子宮內(nèi)膜癌組分別與對(duì)照組的血清SA濃度之間的關(guān)系Fig. 2 The association of serum SA in ovarian cancer, cervical cancer, endometrial cancer and normal

以卵巢癌及對(duì)照組為分析人群，繪制受試者工作特征(receiver operating characteristic，ROC)曲線，根據(jù)統(tǒng)計(jì)結(jié)果計(jì)算Youden指數(shù)，并選擇其最大的切點(diǎn)為臨界點(diǎn)，確定SA濃度小于612 mg/L為最佳臨界值，此時(shí)靈敏度為67.59%，特異度為89.45%。

利用ROC曲線計(jì)算出SA檢測(cè)結(jié)果的診斷性能分別用靈敏度、特異度、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值和陰性預(yù)測(cè)值表示，同時(shí)計(jì)算出CA125、HE4及聯(lián)合診斷的結(jié)果(表1)，血清SA診斷卵巢癌靈敏度為67.59%，不如傳統(tǒng)的腫瘤標(biāo)志物CA125(88.28%)及HE4(80.69%)，但其聯(lián)合CA125的靈敏度為95.17%，高于單獨(dú)使用CA125。因此SA聯(lián)合CA125對(duì)于診斷卵巢癌有臨床價(jià)值。

表 1 卵巢癌組SA診斷特性及聯(lián)合診斷Tab. 1 Combined diagnosis of serum SA in ovarian cancer

2.4 卵巢癌患者的血清SA水平與病理特征之間關(guān)系分析

將卵巢癌患者組按年齡、腫瘤分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移進(jìn)行分組，比較亞組間血清SA濃度間是否存在差異(表2)。腫瘤分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移對(duì)卵巢癌患者血清SA濃度的影響見(jiàn)圖3、4。

表 2 卵巢癌患者血清SA濃度與病理特征之間關(guān)系Tab. 2 The association of serum SA and clinicopathological characteristics

圖 3 卵巢癌組血清SA濃度與腫瘤分期間的關(guān)系Fig. 3 The association of serum SA and tumor staging

圖 4 卵巢癌組血清SA濃度與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移間的關(guān)系Fig. 4 The association of serum SA and lymph node metastasis

2.5 SA濃度對(duì)卵巢癌的療效監(jiān)測(cè)

經(jīng)手術(shù)治療，本研究的30例卵巢癌患者中，29例患者(96.7%)術(shù)后血清SA濃度低于術(shù)前，其中編號(hào)為10的患者術(shù)后血清SA濃度升高，查其病史發(fā)現(xiàn)術(shù)后病情惡化，其余29例患者術(shù)后病情好轉(zhuǎn)(圖5)。本研究進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)，若以術(shù)后血清SA的濃度較術(shù)前測(cè)定結(jié)果降低20%及以上為手術(shù)治療有效；本研究中24例患者術(shù)后血清SA濃度下降達(dá)20%以上，故其測(cè)定SA的判斷準(zhǔn)確率可達(dá)82.8%(24/29)。

圖 5 卵巢癌患者手術(shù)前后SA濃度比較Fig. 5 The comparison of serum SA in pre-and post-operative patients

3 討 論

卵巢癌是全球女性最常見(jiàn)的惡性腫瘤，由于患者通常是在癌癥晚期才被診斷出患有該病，因此卵巢癌的死亡率一直居高不下［4］。如果能早期診斷出該病，則患者的生存率會(huì)大大提高。近年來(lái)，臨床工作者對(duì)于SA的研究日益增多，惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展會(huì)直接影響血清SA的含量［5］。正常代謝時(shí)，血清SA含量是穩(wěn)定的，一旦細(xì)胞發(fā)生癌變并惡性增殖時(shí)，細(xì)胞膜上糖脂合成增加及細(xì)胞膜上糖脂轉(zhuǎn)化異常，造成脫落或分泌入血，從而導(dǎo)致腫瘤患者血清SA濃度升高［6］。SA是一種廣譜的腫瘤標(biāo)志物，通過(guò)早期測(cè)定血清SA含量，能一定程度上提高卵巢癌的診斷效率［7］。

本研究通過(guò)檢測(cè)婦科惡性腫瘤患者(332例)、婦科良性疾病患者(230例)及健康對(duì)照者(194名)的血清SA含量，發(fā)現(xiàn)婦科癌癥患者的SA水平明顯高于健康對(duì)照者(P＜0.05)；其中卵巢癌患者的血清SA水平差異尤其顯著(P＜0.001)。目前臨床最實(shí)用的卵巢癌標(biāo)志物是CA125及HE4，而本研究的145例卵巢癌患者中9例患者CA125陰性，但SA卻異常升高；17例患者HE4陰性，而SA為陽(yáng)性。由此可見(jiàn)，血清SA檢測(cè)可以作為卵巢癌鑒別診斷的一種實(shí)用標(biāo)志物。

按照患者的年齡將145例卵巢癌患者分為大于等于50歲(98例)及小于50歲(47例)，統(tǒng)計(jì)分析得出，卵巢癌患者的血清SA濃度與年齡無(wú)明顯相關(guān)；將患者根據(jù)淋巴結(jié)是否發(fā)生轉(zhuǎn)移分為轉(zhuǎn)移組(83例)和非轉(zhuǎn)移組(62例)，可得出兩組血清SA濃度分別為783.0(682.0，921.0)mg/L和598.0(549.0，651.0)mg/L，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；若將患者按照腫瘤分期分為Ⅰ/Ⅱ期(44例)和Ⅲ/Ⅳ期(101例)兩組，則兩組SA濃度分別為641.0(583.0，742.0)mg/L和719.0(584.0，892.0)mg/L，同樣差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，即卵巢癌患者的血清SA濃度與患者的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及腫瘤分期相關(guān)。

血清S A濃度診斷卵巢癌的靈敏度為67.59%，雖不及傳統(tǒng)的腫瘤標(biāo)志物CA125和HE4高，但是其聯(lián)合CA125的診斷靈敏度卻高達(dá)95.17%。此外血清SA檢測(cè)可以使用酶法在生化分析儀上檢測(cè)，檢測(cè)方便快速、重復(fù)性好，且成本低廉，在臨床上對(duì)于卵巢癌的初篩有應(yīng)用價(jià)值。本研究還檢測(cè)了30例卵巢癌患者術(shù)前及術(shù)后1周血清SA濃度，隨著患者病情的好轉(zhuǎn)，血清SA濃度出現(xiàn)不同程度的下降，因此血清SA檢測(cè)有助于卵巢癌患者的療效監(jiān)測(cè)；同時(shí)血清SA檢測(cè)還有助于判斷患者手術(shù)治療是否有效。由于上述30例卵巢癌患者仍在隨訪之中，部分患者病情趨于穩(wěn)定，其血清SA濃度也維持在術(shù)后相應(yīng)水平，剩余患者的病情發(fā)展我們還將繼續(xù)跟蹤隨訪。

綜上所述，血清SA雖然診斷靈敏度不如傳統(tǒng)的腫瘤標(biāo)志物，但其快速的檢測(cè)方法及低廉的檢測(cè)成本可適用于大批健康人群的卵巢癌初篩實(shí)驗(yàn)；同時(shí)也可作為卵巢癌患者的療效監(jiān)測(cè)指標(biāo)，預(yù)測(cè)腫瘤的進(jìn)展及評(píng)估預(yù)后。

［1］ 王慜杰, 嚴(yán)翠娥, 李學(xué)祥, 等. 血清唾液酸在肝癌患者診療中的臨床應(yīng)用［J］. 中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志, 2013, 36(7): 643-647.

［2］ 王春燕, 劉 健, 賈 玫, 等. 血清唾液酸檢測(cè)在婦科惡性腫瘤診斷中的評(píng)價(jià)［J］. 中國(guó)實(shí)驗(yàn)診斷學(xué), 2009, 13(10): 1375-1377.

［3］ 田亞平, 齊 軍, 高春芳, 等. 血清唾液酸臨床應(yīng)用價(jià)值和臨床研究中應(yīng)重視的問(wèn)題［J］. 中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志, 2013, 36(10): 880-882.

［4］ 盧仁泉, 郭 林, 沈燁紅. HE4在卵巢癌診治中的臨床應(yīng)用評(píng)價(jià)［J］. 中國(guó)癌癥雜志, 2010, 20(9): 680-685.

［5］ FEIJOO-CARNERO C, RODRíGUEZ-BERROCAL F J, PáEZ DE LA CADENA M, et al. Clinical significance of preoperative serum sialic acid levels in colorectal cancer: utility in the detection of patients at high risk of tumor recurrence［J］. Int J Biol Markers, 2014, 19(1): 38-45.

［6］ SILLANAUKEE P, PONNIO M, JAASKELAINEN I P. Occurrence of sialic acids in healthy humans and different disorders［J］. Eur J Clin Invest, 1999, 29(5): 413-425.

［7］ PADLER-KARAVANI V, SONG X, YU H, et al. Crosscomparison of protein recognition of sialic acid diversity on two novel sialoglycan microarrays［J］. J Biol Chem, 2012, 287(27): 22593-22608.

The value of serum sialic acid levels detection in ovarian cancer

HU Hongfeng, LU Renquan, HU Juan, JIANG Minglei, GUO Lin
(Department of Clinical Laboratory, Fudan University Shanghai Cancer Center; Department of Oncology, Shanghai Medical College, Fudan University, Shanghai 200032, China)

GUO Lin E-mail: guolin500@hotmail.com

Background and purpose: There is a lack of serum markers for the diagnosis of ovarian cancer currently. This study aimed to investigate the clinical significance of serum sialic acid (SA) levels in patients with ovarian cancer in auxiliary diagnosis and efficacy monitoring. Methods: Enzyme reaction method was used to analyze serum SA levels and chemiluminescence was employed to detect CA125 and HE4 in participants including 194 healthy controls, 332 patients with gynecological cancer and 230 patients with benign disease. Results: The serum SA levels in patients with gynecological cancer ［584.0 (499.8, 702.5) mg/L］ were higher than those in patients with benign disease ［497.0 (454.0, 559.0) mg/L］ and healthy controls ［475.0 (443.8, 505.0) mg/L, P＜0.05］. The serum SA levels in patients with ovarian malignant tumors ［675.0 (582.0, 816.0) mg/L］ were the highest. The sensitivity of the combined detection of serum SA with CA125 for ovarian malignant tumors was up to 95.17%, and the negative predictive value was 94.37%. With the improvement of the condition, the serum concentration of SA in patients with ovarian cancer gradually decreased. Conclusion: The detection of serum SA can be applied to early screening, di ff erential diagnosis and efficacy monitoring.

Gynecological cancer; Ovarian cancer; Serum sialic acid; Enzyme reaction

10.19401/j.cnki.1007-3639.2017.07.011

R737.31

A

1007-3639(2017)07-0588-05

2017-01-30

2017-03-14）

郭 林 E-mail: guolin500@hotmail.com