劉振剛，高建亮，孫林林，郭 鑫，王 萌，龐智寅，付愛(ài)軍，李建民，田景瑞

(1.華北理工大學(xué)附屬醫(yī)院神經(jīng)外科，河北 唐山 063000；2.遵化市人民醫(yī)院神經(jīng)外科，河北 遵化 064200；3.華北理工大學(xué)附屬醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科，河北 唐山 063000；4.華北理工大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院，河北省慢性疾病重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，唐山市慢性病臨床基礎(chǔ)研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，河北 唐山 063000)

頸內(nèi)動(dòng)脈刺破法制作大鼠蛛網(wǎng)膜下腔出血模型

劉振剛1，高建亮2，孫林林1，郭 鑫3，王 萌3，龐智寅1，付愛(ài)軍1，李建民1，田景瑞4

(1.華北理工大學(xué)附屬醫(yī)院神經(jīng)外科，河北 唐山 063000；2.遵化市人民醫(yī)院神經(jīng)外科，河北 遵化 064200；3.華北理工大學(xué)附屬醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科，河北 唐山 063000；4.華北理工大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院，河北省慢性疾病重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，唐山市慢性病臨床基礎(chǔ)研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，河北 唐山 063000)

目的 通過(guò)圖文結(jié)合的形式，詳細(xì)介紹大鼠蛛網(wǎng)膜下腔出血模型的制作方法及過(guò)程；改進(jìn)并創(chuàng)新模型，使其能更好的模擬臨床動(dòng)脈瘤破裂所致蛛網(wǎng)膜下腔出血。方法 選取SD雄性大鼠，采用頸內(nèi)動(dòng)脈顱外段穿入頸內(nèi)段法，建立SD雄性大鼠蛛網(wǎng)膜下腔出血模型，用呼吸、瞳孔、大小便及留置纖芯解剖大鼠頭頸等方法對(duì)模型進(jìn)行驗(yàn)證。通過(guò)觀察死亡率和臨床表現(xiàn)，探討模型的可控性、可重復(fù)性。結(jié)果 實(shí)現(xiàn)了刺破血管造成蛛網(wǎng)膜下腔出血，且纖芯到達(dá)的位置能準(zhǔn)確的刺破所需要的血管。結(jié)論 此法制作模型穩(wěn)定，方法通俗易懂，操作精巧靈活，可重復(fù)性強(qiáng)，理解后短時(shí)間內(nèi)就可造模成功，且成功造模所形成的蛛網(wǎng)膜下腔出血，能更好地模擬臨床動(dòng)脈瘤突然破裂出血，非常適用于蛛網(wǎng)膜下腔出血早期腦損害及其血管痙攣的研究。

蛛網(wǎng)膜下腔出血；血管穿刺法；模型，大鼠；纖芯

蛛網(wǎng)膜下腔出血(subaraclmoid hemorrhage,SAH)為神經(jīng)外科常見(jiàn)疾病，因其有較高的致殘及致死率[1]，并且常常會(huì)使患者遺留有明顯的神經(jīng)功能及認(rèn)知障礙，為臨床醫(yī)生所高度關(guān)注。但因當(dāng)今技術(shù)條件所限，對(duì)其病理、生理機(jī)制變化的研究仍未有較完整而清晰的詮釋，其中可能的原因之一是制作的動(dòng)物模型不能理想的模擬動(dòng)脈瘤突然破裂所形成的蛛網(wǎng)膜下腔出血[2]。筆者反復(fù)嘗試，通過(guò)對(duì)材料與技術(shù)不斷改良與創(chuàng)新，較為科學(xué)合理的制作出能夠穩(wěn)定重復(fù)呈現(xiàn)大鼠SAH模型，此法技術(shù)思路完善，理解通俗易懂、易學(xué)，希望能夠給研究蛛網(wǎng)膜下腔出血的同行提供便利。

1 材料和方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

清潔級(jí)SD雄性大鼠120只，體重(320～330) g，2～3月齡。購(gòu)于中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院衛(wèi)生學(xué)環(huán)境醫(yī)學(xué)研究所動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心【SCXK(軍)2014-0001】，無(wú)菌手術(shù)在華北理工大學(xué)屏障環(huán)境動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心進(jìn)行【SYXK(冀)2015-0038】；動(dòng)物飼養(yǎng)單元溫度控制在(23～25)℃，相對(duì)濕度55%～60%[7]；并按實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用的“3R”原則給予人道的關(guān)懷：盡可能地減少了所用動(dòng)物的數(shù)量；采用腹腔給藥全身麻醉減少動(dòng)物的精神緊張與痛苦；盡可能采用模擬統(tǒng)計(jì)分析的方法，少用活體動(dòng)物。

1.2 動(dòng)物分組

將SD大鼠平均分成4組，每組30只，分別在造模后的6 h、24 h、72 h對(duì)存活模型大鼠腹主動(dòng)脈取血后，心臟灌注甲醛固定液后取腦；同時(shí)對(duì)死亡大鼠及時(shí)進(jìn)行解剖，探查尋找死亡原因，其中在術(shù)中部分為造模后，瞳孔散大，呼吸、心跳驟停死亡，部分為纖芯刺破頸內(nèi)動(dòng)脈在顱外段的分杈處，出血壓迫頸部重要組織而死；另有些發(fā)現(xiàn)為解剖異常，頸內(nèi)動(dòng)脈在頸總分杈處同時(shí)也分杈，當(dāng)結(jié)扎其中一支時(shí)，大鼠突然死亡；復(fù)蘇3 h內(nèi)死亡的大鼠，可能為顱內(nèi)出血過(guò)多，顱壓過(guò)高而死；其它時(shí)間段大鼠清醒后死亡的，考慮為顱內(nèi)出血后，嚴(yán)重影響了大鼠的飲食及飲水等基本生活，當(dāng)然可能存在其它未知原因如手法不熟練致手術(shù)時(shí)間過(guò)長(zhǎng)等。

1.3 主要材料及工具

普通光纖、指甲油、無(wú)菌紗布?jí)K、棉棒、自配10%水合氯醛、2%葡萄糖酸氯已定醇皮膚消毒液、5-0與3-0縫合線、1/2弧度皮內(nèi)與皮膚縫合針。

高精度游標(biāo)卡尺、剃毛器(備皮刀)、光纖剝纖鉗、徠卡顯微系統(tǒng)(上海)貿(mào)易有限公司產(chǎn)Leica M320手術(shù)顯微鏡、張家港市奧斯卡醫(yī)療器械有限公司產(chǎn)顯微外科手術(shù)器械包等(見(jiàn)圖1 A～D)。

注：(A)無(wú)菌操作；(B)纖芯制作；(C)纖芯標(biāo)記;(D)物品準(zhǔn)備。圖1 術(shù)前準(zhǔn)備Note.(A)Aseptic operation;(B)Core make up;(C)Core marking;(D)Item preparation.Fig.1 Preoperative preparation of surgical instruments

1.4 模型的制作

1.4.1 大鼠固定：10%的水合氯醛(0.3～0.4 mL/100 g)腹腔麻醉成功后，大鼠呈仰臥位，四肢及頭顱(門牙)以橡皮筋或細(xì)繩固定于大鼠固定臺(tái)(圖2 A,B)。

1.4.2 手術(shù)區(qū)備皮、消毒與皮層剪開(kāi)：打開(kāi)大鼠手術(shù)體溫控制儀及Leica手術(shù)顯微鏡，設(shè)定溫度為38℃[3]，將溫度探頭插入大鼠肛門內(nèi)，用生理鹽水浸濕大鼠頸部皮毛，防止剃毛時(shí)毛發(fā)亂飛，確定手術(shù)區(qū)域大小范圍約為3×2 cm，剃毛器剃去手術(shù)區(qū)域皮毛，用棉棒蘸取2%葡萄糖酸氯已定醇皮膚消毒液依次消毒手術(shù)皮膚區(qū)域三次，離頸部正中線偏右側(cè)做斜切口長(zhǎng)度約2 cm，以利于右側(cè)血管的分離，切口遠(yuǎn)心端至大鼠下頦(皮膚標(biāo)志為米粒大小淡紅色皮丘)，眼科剪剪開(kāi)皮膚及皮下組織(圖2 C,D)。

注：(A)體位固定；(B)術(shù)前準(zhǔn)備；(C)術(shù)區(qū)備皮；(D)皮膚剪開(kāi)。圖2 手術(shù)體位與分離皮下組織Note.(A)Suping position fixed;(B)Preoperative preparation;(C)Preoperative skin preparation;(D)Skin incision.Fig.2 Surgical position and separation of subcutaneous tissue

1.4.3 鈍性分離皮下組織、血管：眼科鑷鈍性分離頸闊肌可見(jiàn)大舌下腺、淋巴結(jié)及頜下腺，依二腹肌前后腹連接處(顯白色腱膜)為起點(diǎn)，沿二腹肌后腹向頸部鈍性分離深筋膜，可見(jiàn)胸鎖乳突肌、胸骨舌骨肌、鎖骨舌骨肌及胸骨甲狀腺肌，順以上肌肉(胸鎖乳突肌、二腹肌后腹與胸骨舌骨肌等)間形成的類似向頭胸兩端拉長(zhǎng)的大于號(hào)(>)樣的自然溝壑鈍性分離以上肌肉及其筋膜，可見(jiàn)頸總動(dòng)脈鞘，鞘外布滿滋養(yǎng)血管及回流小靜脈，鞘內(nèi)的頸總動(dòng)脈及迷走神經(jīng)清晰可變，迷走神經(jīng)緊貼頸總動(dòng)脈背側(cè)，用小彎鉗夾住同側(cè)胸鎖乳突肌，充分暴露手術(shù)視野，慎重用彎鉗夾持胸骨舌骨肌、胸骨甲狀腺肌及鎖骨舌骨肌等，防止長(zhǎng)時(shí)間壓迫氣管，小心仔細(xì)鈍性分離頸總動(dòng)脈鞘，用眼科鑷細(xì)致的把迷走神經(jīng)從頸總動(dòng)脈上分離出，頸總動(dòng)脈直徑大約1 mm，鈍性分離出頸總動(dòng)脈和迷走神經(jīng)，長(zhǎng)度大約1 cm，在二腹肌后腹的下1/3處可見(jiàn)頸總動(dòng)脈分杈：頸內(nèi)動(dòng)脈與頸外動(dòng)脈，鈍性分離頸外動(dòng)脈遠(yuǎn)心端及頸叢神經(jīng)，顯露頸外動(dòng)脈分支甲狀腺上動(dòng)脈，在頸外動(dòng)脈與甲狀腺上動(dòng)脈連接根部穿雙線(5-0號(hào)線)(圖3 A，B)。

1.4.4 頸外動(dòng)脈結(jié)扎與臨時(shí)夾閉頸總動(dòng)脈及頸內(nèi)動(dòng)脈：用其中一根結(jié)扎頸外動(dòng)脈，注意剝離下壓頸叢神經(jīng)，防止一起被結(jié)扎，為頸外動(dòng)脈第二結(jié)，保留一定長(zhǎng)度線，做為牽引線，同時(shí)也結(jié)扎了同側(cè)甲狀腺上動(dòng)脈，剪斷甲狀腺上動(dòng)脈，第二根線沿頸外動(dòng)脈向遠(yuǎn)心端游離上行，離第二結(jié)大約3 mm左右再次結(jié)扎頸外動(dòng)脈，為頸外動(dòng)脈第三結(jié)，在離第二結(jié)2 mm左右處(離第三結(jié)1 mm)用神經(jīng)外科顯微剪剪斷頸外動(dòng)脈，可防止第二結(jié)在多次牽引時(shí)出現(xiàn)滑結(jié)、脫結(jié)，也是為了避免頸外回流出血，減少大鼠手術(shù)中失血，第三結(jié)不用保留牽引線，左手通過(guò)第二結(jié)牽引線提起頸外動(dòng)脈近心端殘端，利用神經(jīng)外科顯微鑷細(xì)心分離頸外動(dòng)脈第一分支枕動(dòng)脈，注意盡量下壓頸叢及迷走神經(jīng)，結(jié)扎枕動(dòng)脈(盡量遠(yuǎn)離頸外動(dòng)脈)，禁止結(jié)扎頸叢及迷走神經(jīng)，神經(jīng)外科纖維剪刀剪斷枕動(dòng)脈(斷端離線結(jié)距離盡量遠(yuǎn)些)，為了防脫結(jié)，此時(shí)枕動(dòng)脈遠(yuǎn)心端回流會(huì)出現(xiàn)少量出血，小紗布?jí)K壓迫，很快止血；充分分離頸外動(dòng)脈殘端、頸內(nèi)動(dòng)脈及頸總動(dòng)脈分杈處血管外膜周圍附著的纖維結(jié)締組織，耐心分離頸動(dòng)脈竇及頸動(dòng)脈小球，先用動(dòng)脈夾夾閉頸總動(dòng)脈近心端，再用另一個(gè)動(dòng)脈夾夾閉頸內(nèi)動(dòng)脈遠(yuǎn)心端(圖3 C，D)。

注：(A)血管分離；(B)頸外穿線；(C)頸外結(jié)扎；(D)臨時(shí)夾閉。圖3 血管游離與血流臨時(shí)阻斷Note.(A)Vascular separation;(B)External carotid artery threading;(C)Ligation of the external carotid artery;(D)Temporarily clipped carotid arteries.Fig.3 Vascular separation and temporary blood flow occlusion

1.4.5 插入纖芯：輕輕提起頸外動(dòng)脈，用神經(jīng)外科顯微剪在頸外動(dòng)脈近分杈處(不可過(guò)近)、枕動(dòng)脈殘端對(duì)側(cè)剪一小口，導(dǎo)入纖芯，牽拉頸外動(dòng)脈，使其與頸內(nèi)動(dòng)脈近似呈一直線(纖芯尾部與頸部正中線呈30°～45°角、與水平面也呈30°～45°角，纖芯頭部向內(nèi)側(cè))，由頸外開(kāi)口插入頸內(nèi)動(dòng)脈至動(dòng)脈夾處，助手在松開(kāi)頸內(nèi)動(dòng)脈動(dòng)脈夾，快速插入纖芯，此時(shí)會(huì)有較多頸內(nèi)動(dòng)脈回流血液流出，插入約20 mm左右(用藍(lán)色指甲油在纖芯一端20 mm處做了標(biāo)記)[4]，此時(shí)有暢通無(wú)阻力感，再次快速插入纖芯1～2 mm[5]，當(dāng)有突破感時(shí)表明前交通動(dòng)脈已經(jīng)插破，此時(shí)有扎豆腐渣的感覺(jué)，快速抽出纖芯，用小紗布?jí)K短暫壓迫止血，提起頸外動(dòng)脈，在頸外動(dòng)脈剪口的近心端結(jié)扎頸外動(dòng)脈，為頸外動(dòng)脈第一結(jié)，打開(kāi)頸總動(dòng)脈動(dòng)脈夾(圖4 A，B)。

1.4.6 評(píng)判模型成功與否的指征：觀察頸總動(dòng)脈、頸內(nèi)動(dòng)脈的血流、搏動(dòng)情況及大鼠的瞳孔及大小便，血管充盈、搏動(dòng)良好、雙側(cè)瞳孔不等大或雙側(cè)瞳孔針尖樣大小或出現(xiàn)大小便失禁，可考慮手術(shù)成功(圖4 C，D)。

1.5 解剖驗(yàn)證

1.5.1 解剖驗(yàn)證手術(shù)是否成功：穿刺進(jìn)入20 mm后再次進(jìn)入5 mm左右，在第三結(jié)處用5-0線固定纖芯或用動(dòng)脈夾夾住纖芯與主要?jiǎng)用}，行頸部及顱腦相關(guān)組織的解剖驗(yàn)證(圖5 A，B)。

1.5.2 路徑證明造模成功：切開(kāi)二腹肌前后腹的連接處，分離咬肌和下頜骨，可見(jiàn)面神經(jīng)及頸外靜脈(面神經(jīng)在頸外靜脈的下面)，可從顱底與顱蓋骨兩個(gè)方向進(jìn)行仔細(xì)剝離，顯露頸內(nèi)動(dòng)脈在顱外的分支-翼腭支，此支通過(guò)巖鼓裂進(jìn)入顱內(nèi)，主支通過(guò)頸動(dòng)脈孔進(jìn)入顱內(nèi)，分出大腦中動(dòng)脈與大腦前動(dòng)脈，清晰可見(jiàn)纖芯刺破了頸內(nèi)動(dòng)脈在顱內(nèi)段的分叉[6]，顱底動(dòng)脈環(huán)布滿陳舊性血塊(圖5 C，D)。

2 結(jié)果

模型經(jīng)過(guò)改進(jìn)并創(chuàng)新能夠較完美的實(shí)現(xiàn)SD大鼠蛛網(wǎng)膜下腔出血，纖芯所到達(dá)的位置也較理想；經(jīng)過(guò)圖表形式描述統(tǒng)計(jì)分析可得，利用此模型成功大鼠的死亡率=(死亡-未見(jiàn)出血)/(總只數(shù)-未見(jiàn)出血)=13/105=12.38%，總死亡率=死亡大鼠/大鼠總只數(shù)=28/120=23.33%；通過(guò)大鼠血管刺破法建立的動(dòng)物模型能夠模擬臨床動(dòng)脈瘤破裂所致蛛網(wǎng)膜下腔出血的發(fā)生過(guò)程，有極高的死亡率，有統(tǒng)計(jì)稱總死亡率在35%左右[7]，本次實(shí)驗(yàn)成功模型大鼠的死亡率在12.38%，總死亡率在23.33%，經(jīng)過(guò)兩者比較，改進(jìn)并創(chuàng)新的造模方式更穩(wěn)定，可控性與可重復(fù)性更好，更能完美的模擬臨床動(dòng)脈瘤破裂所致蛛網(wǎng)膜下腔出血的發(fā)生過(guò)程(表1)。

注：(A)血管解剖；(B)圖解演示；(C)瞳孔增大；(D)針尖瞳孔。圖4 血管穿刺技術(shù)路線與成功相關(guān)指征Note.(A)Vascular anatomy;(B)Photo-illustration of the operative field;(C)Pupil dilation;(D)Pinpoint pupil.Fig.4 The route of vascular puncture and related successful indicators

注：(A)纖芯固定；(B)解剖驗(yàn)證；(C)路徑驗(yàn)證；(D)造模成功。圖5 解剖驗(yàn)證造模的結(jié)果Note.(A)Core fixed;(B)Anatomical confirmation;(C)Path identification;(D)Successful modeling.Fig.5 Anatomical confirmation of the successful modeling

造模Modeling瞳孔Pupil無(wú)改變Nochange針尖樣大小Pinpointsize不等大Anisocoria散大Dilation尿崩Polyuria失明blindness肢體癱瘓Limbparalysis死亡Death出血Bleeding無(wú)出血Nobleeding0.5h47263413155103h106h163512h324h73572h5352

3 討論

自發(fā)性蛛網(wǎng)膜下腔出血多源于顱內(nèi)動(dòng)脈瘤，一旦破裂對(duì)人的危害是非常大的，尤其是動(dòng)脈瘤破裂后被診斷為3或4級(jí)[8]，危及患者生命且死亡率極高，正由于其極高的致殘、致死率且又為神經(jīng)外科常見(jiàn)疾病，所以一直成為臨床醫(yī)生所高度關(guān)注的焦點(diǎn)；動(dòng)脈瘤破裂發(fā)病急，病情演變迅速，給疾病的研究帶來(lái)了非常大的困難，這就迫切需要一種動(dòng)物模型，能夠較穩(wěn)定而準(zhǔn)確的模擬這種病變化，本實(shí)驗(yàn)經(jīng)過(guò)改進(jìn)并創(chuàng)新建立的SD大鼠蛛網(wǎng)膜下腔出血模型，能更好的模擬臨床，較為真實(shí)的演示疾病的發(fā)生過(guò)程，給科研工作者帶來(lái)了希望；本實(shí)驗(yàn)的創(chuàng)新點(diǎn)在于：①采用普通光纖纖芯，取材方便、容易，光滑度高，粗細(xì)及光滑度與大鼠線栓相似，但較線栓有較強(qiáng)的硬度與鋒利度，非常適應(yīng)蛛網(wǎng)膜下腔造模刺破血管。②通過(guò)對(duì)頸外動(dòng)脈及其分支的處理，尤其是頸外三個(gè)結(jié)的設(shè)計(jì)，使術(shù)中基本沒(méi)有出血，操作靈活、方便，術(shù)野清晰，組織層次分明。③枕動(dòng)脈的處理與頸外入口的特殊設(shè)計(jì)，使穿刺時(shí)，頸外與頸內(nèi)基本成一直線，為纖芯的順利地通過(guò)創(chuàng)造了良好的條件。④造模成功率高，出血相對(duì)易控制，能夠較好的在動(dòng)物模型上模擬動(dòng)脈瘤破裂出血所形成的蛛網(wǎng)膜下腔出血。⑤通過(guò)對(duì)穿刺角度的把握可避免對(duì)頸內(nèi)動(dòng)脈分支翼腭支的結(jié)扎及其由結(jié)扎翼腭支所致過(guò)分分離二腹肌等損害，避免大鼠復(fù)蘇后部分正常功能的喪失，減少死亡率。⑥此法制作模型穩(wěn)定，方法通俗易懂，操作精巧靈活，可重復(fù)性強(qiáng)，理解后短時(shí)間內(nèi)就會(huì)造模成功?？v觀現(xiàn)有文獻(xiàn)，尚缺乏以圖文并茂的形式詳細(xì)闡述這種模型制作過(guò)程的文獻(xiàn)，希望通過(guò)本室的努力，能給予本方面研究者提供便利。

下面是對(duì)此模型制作過(guò)程中的一點(diǎn)體會(huì)總結(jié)與相關(guān)注意事項(xiàng)：①穿刺時(shí)一定把握好角度，不然很容易進(jìn)入翼腭支，使造模失敗。②一定要處理好枕動(dòng)脈，不然無(wú)法修正角度使頸外與頸內(nèi)成一直線，枕動(dòng)脈緊靠頸總動(dòng)脈分杈，內(nèi)部壓力高，結(jié)扎后不要過(guò)分牽拉線結(jié)，易造成滑結(jié)、脫結(jié)。③處理頸動(dòng)脈竇與頸動(dòng)脈小球時(shí)，一定要仔細(xì)認(rèn)真。④每次結(jié)扎頸外動(dòng)脈時(shí)，一定要注意剝離頸叢神經(jīng)，勿被一起結(jié)扎。⑤穿刺時(shí)，一定要在放開(kāi)頸內(nèi)動(dòng)脈夾的瞬間順勢(shì)插入纖芯，顱內(nèi)血液回流時(shí)，頸內(nèi)動(dòng)脈入顱處即頸動(dòng)脈孔處血管充盈，時(shí)間越長(zhǎng)，血管逐漸萎陷，同時(shí)術(shù)野模糊，由于進(jìn)顱處為骨縫結(jié)構(gòu)，當(dāng)壓迫止血停止后，頸內(nèi)動(dòng)脈孔處的血管干癟，纖芯無(wú)法進(jìn)入顱內(nèi)，此時(shí)易刺破頸內(nèi)動(dòng)脈顱外段，使造模失敗。⑥當(dāng)?shù)谝淮问r(shí)，不要再反復(fù)嘗試，纖芯會(huì)由于大鼠的凝血作用，在纖芯上形成多個(gè)小栓子，會(huì)形成類似棘刺結(jié)構(gòu)，使纖芯在血管中運(yùn)動(dòng)受限，可拔出纖芯，用醫(yī)用酒精擦拭后再用生理鹽水沖洗，去除其表面的油脂與血塊，恢復(fù)其表面光滑度。⑦纖芯在20 mm處用指甲油標(biāo)記時(shí)，不可標(biāo)記過(guò)大，輕點(diǎn)一下即可。⑧不建議對(duì)頸內(nèi)動(dòng)脈分支翼腭支進(jìn)行結(jié)扎，因?yàn)榉蛛x翼腭支，會(huì)使頸部分離過(guò)度，傷及大鼠維持基本生活功能組織，同時(shí)結(jié)扎后，過(guò)多減少顱內(nèi)供血，加大復(fù)蘇困難，延長(zhǎng)蘇醒時(shí)間或醒后造成食、水等生活狀態(tài)差，大大增加死亡率[9]。⑨最好在大鼠體溫控制儀下造模，實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)大鼠體溫，提高大鼠的耐受時(shí)間。⑩術(shù)中避免器械對(duì)氣管的壓迫。大鼠復(fù)蘇過(guò)程中要保溫。從血管夾夾閉頸總動(dòng)脈刺破頸內(nèi)動(dòng)脈血管顱內(nèi)段到松開(kāi)，完成造模時(shí)間能夠控制在2～3 min內(nèi)[10]。穿刺成功后，對(duì)瞳孔的觀察越早越好，最好在拔出纖芯結(jié)扎頸外第一結(jié)后當(dāng)即觀察，發(fā)現(xiàn)很多時(shí)候在縫合肌肉及皮膚組織時(shí)，雙側(cè)瞳孔會(huì)在較短時(shí)間恢復(fù)等大。在剪頸外動(dòng)脈小口時(shí)，過(guò)小纖芯可能會(huì)刺入血管外膜周圍間隙的結(jié)締組織，過(guò)大當(dāng)牽拉頸外第二結(jié)時(shí)，可能會(huì)扯斷血管。纖芯穿刺時(shí)不可用力過(guò)猛，應(yīng)順勢(shì)，否則會(huì)刺破頸內(nèi)動(dòng)脈顱外段分杈。

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Preparation of a rat model of subarachnoid hemorrhage by a fiber core inserted in the internal carotid artery

LIU Zhen-gang1,GAO Jian-liang2,SUN Lin-lin1,GUO Xin3,WANG Meng3,PANG Zhi-yin1,
FU Ai-jun1,LI Jian-min1,TIAN Jing-rui4

(1.Department of Neurosurgery, Affiliated Hospital of North China University of Science and Technology, Tangshan 063000, China; 2. Department of Neurosurgery, Zunhua People's Hospital, Zunhua 064200; 3. Department of Neurology, Affiliated Hospital of North China University of Science and Technology, Tangshan 063000; 4. Hebei Key Laboratory of Chronic Diseases, Tangshan Key Laboratory of Preclinical and Basic Research on Chronic Diseases, School of Basic Medical Sciences, North China University of Science and Technonogy, Tangshan 063000 )

Objective To report a newly developed method and procedure to establish a rat model of subarachnoid hemorrhage in detail, and to provide a better model simulating the clinical subarachnoid hemorrhage caused by a ruptured aneurysm for related research. Methods One hundred and twenty healthy SPF 2-3-month old male Sprague-Dawley rats were divided into 4 groups, 30 rats in each group. The three experimental groups were sacrificed at 6, 24 and 72 hours after modeling. Rat models of subarachnoid hemorrhage were established by inserting a fiber core in the internal carotid artery and piercing this artery. Successful establishment of the subarachnoid hemorrhage model was confirmed by observation of breathing, pupil, defecation, urination and inspection at autopsy dissection. The controllability and reproducibility of this model were verified by observation of clinical manifestation and explored by mortality analysis. Results Subarachnoid hemorrhage was successfully induced by fiber core piercing the internal carotid artery at the needed location. Conclusions This method of model preparation is stable and understandable. The operation is nimble, with a good reproducibility. This model can be successfully performed after a short time learning, well simulate the sudden hemorrhage caused by a ruptured aneurysm, and suitable for research on early brain injury and vasospasm after subarachnoid hemorrhage.

Subarachnoid hemorrhage (SAH); Aneurysm; Internal carotid artery; Surgery;Animal model; Rat; Fiber core

河北省省級(jí)重大醫(yī)學(xué)項(xiàng)目(Zd2013093)。

劉振剛(1982-)男，主治醫(yī)師，碩士研究生，研究方向：蛛網(wǎng)膜下腔出血后早期腦損害及血管痙攣的基礎(chǔ)研究。E-mail: 1525669738@qq.com。

付愛(ài)軍(1968-)男，主任醫(yī)師，碩士生導(dǎo)師，教授，研究方向：顱內(nèi)動(dòng)脈瘤所致蛛網(wǎng)膜下腔出血的基礎(chǔ)與臨床。E-mail: tsfaj@sina.com。

研究報(bào)告

【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】 A 【文章編號(hào)】1671-7856(2017) 06-0037-09

10.3969.j.issn.1671-7856. 2017.06.008

2017-05-10