劉 楊，袁廷香，婁 波

（遵義師范學(xué)院 化學(xué)化工學(xué)院，貴州 遵義 563000）

數(shù)理研究

單寧酸測定方法研究進(jìn)展

劉 楊，袁廷香，婁 波

（遵義師范學(xué)院 化學(xué)化工學(xué)院，貴州 遵義 563000）

單寧酸被廣泛應(yīng)用于食品、醫(yī)藥、制革、化妝品等領(lǐng)域，與之相關(guān)的檢測技術(shù)越來越受到人們的關(guān)注.對目前單寧酸的主要測定方法進(jìn)行了概述，以期為單寧酸檢測方法的選擇提供參考.

單寧酸；測定；研究進(jìn)展

單寧酸(tannic acid)，又名丹寧酸、單寧、鞣酸、鞣質(zhì),是一類具有生物活性的高分子多元酚類化合物.單寧酸因其獨特的化學(xué)性質(zhì)和生理特性，被廣泛應(yīng)用于食品、醫(yī)藥、化妝品、制革、冶金、印染等領(lǐng)域[1-3]，前景十分廣闊.因此對單寧酸進(jìn)行檢測顯得尤為重要.文中就目前單寧酸的主要測定方法作出綜述，以期為單寧酸檢測方法的選擇提供參考.

1 單寧酸的測定方法

目前測定單寧酸的方法主要有分光光度法、滴定法、蛋白質(zhì)預(yù)沉淀法、電化學(xué)分析法、化學(xué)發(fā)光法、高效液相色譜法、熒光分析法和原子吸收光度法等.

1.1 分光光度法

分光光度法作為測定單寧酸的經(jīng)典方法之一，因其快速、簡便，應(yīng)用最為廣泛.李曉文[4]等基于單寧酸可將鐵（Ⅲ）定量還原為鐵（Ⅱ），再以1，10-鄰二氮菲作為測定鐵（Ⅱ）的顯色劑，在醋酸鹽緩沖溶液pH4.4，明膠溶液增敏、增溶，EDTA作掩蔽劑的條件下，在505nm波長處測量吸光度，建立了測定啤酒中單寧酸的新方法，并可用于含有少量抗壞血酸試樣的分析.張縱圓[5]等首次用Folin-Denis(FD)顯色分光光度法測定無花果葉中的單寧酸.在弱堿性條件下，新疆無花果葉中單寧酸與鎢酸鈉-磷鉬酸形成穩(wěn)定的藍(lán)色配合物，在755nm處測定顯色液的吸光度從而確定單寧酸的含量，建立了一種快速、經(jīng)濟(jì)簡便的光度分析法，為進(jìn)一步開發(fā)利用該植物資源提供了依據(jù).

1.2 滴定法

滴定法也是單寧酸含量測定的經(jīng)典方法之一.單寧酸分子中有多個鄰位酚羥基，可與若干金屬離子（如鋅、鉛、鐵、錫等）絡(luò)合，在不同pH條件下生成沉淀.曲祥金[6]等利用單寧酸在一定條件下能與Zn2+發(fā)生定量反應(yīng)，生成沉淀，濾除沉淀物后，用標(biāo)準(zhǔn)EDTA滴定濾液中剩余的Zn2+，建立了操作較簡單、易被分析工作者所掌握的測定啤酒花中單寧酸含量的EDTA滴定法.

1.3 蛋白質(zhì)預(yù)沉淀法

單寧酸具有多酚結(jié)構(gòu)，可與蛋白質(zhì)結(jié)合生成沉淀.佟健[7]等采用牛血清白蛋白定量沉淀單寧后,將沉淀物溶解于十二烷基磺酸鈉 -三乙醇胺（SDS-TEA）水溶液中,在與氯化鈉試劑作用下生成紅色絡(luò)合物,該絡(luò)合物吸光度值與單寧酸的含量在0～50μg/mL范圍內(nèi)成線性關(guān)系.通過實驗得到單寧酸回收率為98.16～100.66%,與經(jīng)典方法(目視比色法)相比,該法具有簡便、快速、精確等特點,便于推廣.Cheng[8]等也采用牛血清白蛋白預(yù)沉淀單寧后，利用流動注射與光散色聯(lián)用技術(shù)建立了一種簡單、可靠地測定單寧酸的新方法，該法既可用于pH5溶液中也可于pH7溶液中進(jìn)行分析.

1.4 電化學(xué)分析法

電化學(xué)分析法因其靈敏度高、準(zhǔn)確性好，裝置簡單，易于操作等優(yōu)點而被廣泛用于無機(jī)、有機(jī)、藥物分析等.Vu[9]等利用經(jīng)預(yù)處理的鉛筆芯電極，使用陽極溶出微分脈沖伏安法測定了單寧酸，其線性范圍為5.0～500×10–9mol/L,檢出限為1.5×10–9mol/L，且成功應(yīng)用于飲料中單寧酸含量的測定.Lü[10]利用多壁碳納米管修飾玻碳電極，采用三電極體系，在開路條件下攪拌富集5min，靜置15s，使用線性掃描伏安法在-0.20～0.60V進(jìn)行掃描，發(fā)現(xiàn)在0.30V出現(xiàn)氧化峰，建立了測定單寧酸的新方法.該法線性范圍為4～2000×10–5mol/L,檢出限為1×10–7mol/L，并用于測定茶葉和五倍子中單寧酸含量.

表1 部分電化學(xué)分析法測定單寧酸

部分電化學(xué)分析法測定單寧酸見表1.

1.5 化學(xué)發(fā)光法

化學(xué)發(fā)光法亦因其靈敏度高、儀器簡單、線性范圍寬等優(yōu)點被廣泛應(yīng)用.Li[15]等發(fā)現(xiàn)單寧酸對luminol-H2O2-CuO NPs體系的化學(xué)發(fā)光具有抑制作用，據(jù)此建立了流動注射化學(xué)發(fā)光法測定單寧酸的新方法.該法線性范圍在10～100×10–9mol/L，檢出限為2.6×10–9mol/L，并成功測定中藥五倍子中單寧酸含量.Xie[16]等發(fā)現(xiàn)在有表面活性劑吐溫40存在時，KIO4與H2O2反應(yīng)產(chǎn)生化學(xué)發(fā)光，而單寧酸的注入會使化學(xué)發(fā)光增強(qiáng)，在此基礎(chǔ)上建立了測定單寧酸的流動注射化學(xué)發(fā)光新方法.其單寧酸濃度在7.0×10-9～1.0×10-5mol/L成良好的線性關(guān)系，檢出限為2.3×10-5mol/L，并用于工業(yè)廢水中單寧酸含量的檢測，結(jié)果令人滿意.

部分化學(xué)發(fā)光體系測定單寧酸見表2.

表2 部分化學(xué)發(fā)光體系測定單寧酸

1.6 高效液相色譜法

郭佳莉[20]等利用高效液相色譜法測定單寧酸的含量，采用Hypersil ODS(125×4.0mm，5μm)色譜柱，流動相為80%CH3OH及20%H2O，275nm檢測波長、流速0.5mL/min等實驗條件,其線性范圍為120～240ng/mL，在測定樣品余甘子提取液中單寧酸含量時得到其加標(biāo)回收率在99.7～107.5%之間，3min就能完成單次檢測，可用于多種物質(zhì)中單寧酸含量的測定.柯煒昌[21]等采用自動固相萃取實現(xiàn)去除干擾組分,反相高效液相色譜法對造紙法再造煙葉濃縮液中的單寧酸進(jìn)行了測定，該法操作簡單、快速準(zhǔn)確.在單寧酸的濃度為2～117μg/mL的范圍內(nèi)具有良好的線性關(guān)系，其檢出限0.2μg/mL.

1.7 熒光分析法

馮素玲[22]等提出了熒光動力學(xué)測定單寧酸的方法，該法基于單寧酸對Cu（II）催化過氧化氫氧化羅丹明B的活化作用，其線性范圍為0.04～0.72 mg/L，檢出限為0.025mg/L.在對各種試劑用量影響探究下，優(yōu)選出最佳的實驗條件，對含量為0.4mg/L的鞣酸標(biāo)準(zhǔn)液平行測定了11次，其RSD為1.8%.對處理后的茶葉樣品進(jìn)行測定，回收率為95.2～104%，RSD為1.7～3.0%.該法準(zhǔn)確、實用、靈敏度高.

1.8 原子吸收光度法

杜曉燕[23]等基于一定條件下，單寧酸可與二價銅離子發(fā)生沉淀反應(yīng)，再用原子吸收光度法測定剩余銅的原理，間接測定了茶葉中單寧酸，此法簡便快速、不受顏色及共存物質(zhì)的干擾.

2 結(jié)束語

因單寧酸具有很強(qiáng)的藥理和生物活性，近年來人們對其研究不斷深入，用途亦不斷拓展.尋找新思路、新方法，加大對單寧酸測定方法的研究，將對單寧酸的開發(fā)利用具有重要意義.

〔1〕馬志紅，陸忠兵，石碧.單寧酸的化學(xué)性質(zhì)及應(yīng)用[J].天然產(chǎn)物研究與開發(fā)，2003，15(1):87-91.

〔2〕石閃閃，何國慶.單寧酸及其應(yīng)用研究進(jìn)展[J].食品工業(yè)科技，2012，33(14):410-412，416.

〔3〕聶方園，馬曉豐.單寧酸的生物活性研究進(jìn)展[J].化學(xué)與生物工程，2015，32(1):16-18，22.

〔4〕李曉文，盛燦梅，嚴(yán)聃.啤酒中單寧的分光光度分析 [J].化學(xué)研究與應(yīng)用，2006，18(9):1127-1129.

〔5〕張縱圓,李茂華，張濤.分光光度法測定新疆無花果葉中的單寧[J].分析試驗室，2009，28(5):188-190.

〔6〕曲祥金，楊偉.啤酒花中單寧含量的EDTA滴定法測定[J].山東農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報，1990，21(3):75-78.

〔7〕佟健，侯冬巖，田速成，等.蛋白質(zhì)沉淀-光度法測定橡子淀粉中單寧的含量[J].遼寧大學(xué)學(xué)報（自然科學(xué)版），1996，23(3):60-63.

〔8〕Cheng T J,Hsiao H Y,Chung C Y,et al. Determination of tannic acid after precipitation with bovineserum albumin by visible light scattering in a flow injection system[J].Microchimica Acta,2010,169(1):117-122.

〔9〕Vu D L,Ertek B,Dilgin Y,et al.Voltammetric determination of tannic acid in beverages using pencil graphite electrode[J].Czech Journal of Food Sciences,2015,33(1):72-76.

〔10〕Lü S.Electrochemical determination of tannins using multiwall carbon nanotubes modified glassy carbon electrode[J].Russian Journal of Electrochemistry,2004,40(7):750–754.

〔11〕夏新泉，張海麗.碳糊電極陽極溶出法測定單寧酸的研究[J].分析科學(xué)學(xué)報，2006，22(3):296-298.

〔12〕Xu L,He N,Du J,et.A detailed investigation for determination of tannic acid by anodic stripping voltammetry using porouselectrochemical sensor[J].Analytical Chimica Acta, 2009,634(1):49–53.

〔13〕Raj M A,Revin S B,John S A.Synthesis, characterization and modification of functionalized pyrimidine stabilized gold nanoparticles on ITO electrode for the determination of tannic acid[J].Bioelectrochemistry,2013,89 (11):1-10.

〔14〕熊健,李偉,白瑪卓嘎,等.單寧酸在碳摻雜蒙脫土修飾電極上的電化學(xué)行為及測定[J].廣州化工,2013,41(17):114-116,130.

〔15〕LiG,Hong L,Tong M,et.Determination of tannic acid based on luminol chemiluminescence catalyzed by cupric oxide nanoparticles [J].Analytical Methods,2015,7(5):1924–1928.

〔16〕Xie C,Li H.Determination of tannic acid in industrial wastewater based on chemiluminescence system of KIO4–H2O2–Tween40 [J].Luminescence,2010,25(5):350–354.

〔17〕Cui H,Li Q,Meng R,et.Flow injection analysis of tannic acid with inhibited chemiluminescent detection[J].Analytica Chimica Acta, 1998,362(2):151–155.

〔18〕李世鳳,崔華,孫玉剛,等.流動注射化學(xué)發(fā)光增強(qiáng)法測定單寧酸[J].分析化學(xué),2001,29(3):333-335.

〔19〕Li S,Chen H,Wei X,et.Determination of Tannic Acid by Flow Injection Analysis with Inhibited Chemiluminescence Detection[J].Microchim Act,2006,155(3):427–430.

〔20〕郭佳莉,李國清,蔡英卿,等.高效液相色譜法測定余甘子中單寧酸的含量 [J].光譜實驗室，2007,24(5):911-913.

〔21〕柯煒昌,陳義坤,劉華臣,等.單寧酸的自動固相萃取-反相高效液相色譜分析 [J].分析儀器，2014(1):38-42.

〔22〕馮素玲,李俊,樊靜.熒光動力學(xué)分析法測定痕量鞣酸[J].分析化學(xué),2003,31(2):198-200.

〔23〕杜曉燕,管春梅,史忠誠,等.原子吸收光度法間接測定茶葉中單寧[J].分析試驗室,1998,17(2): 84-86.

TQ94

A

1673-260X（2017）07-0001-03

2017-03-22