蘇克劍，張 樂，陸國紅（上海交通大學醫(yī)學院附屬仁濟醫(yī)院南院藥劑科，上海 201112）

抗實驗性肝損傷中藥復方的用藥規(guī)律研究

蘇克劍＊，張 樂，陸國紅#（上海交通大學醫(yī)學院附屬仁濟醫(yī)院南院藥劑科，上海 201112）

目的：探究抗實驗性肝損傷中藥復方的用藥規(guī)律。方法：以“實驗性肝損傷”“中藥復方”“保護作用”等為主題，檢索中國期刊全文數據庫、萬方數據庫、中文科技期刊數據庫中與抗實驗性肝損傷中藥復方用藥規(guī)律有關的相關文獻，對納入研究基本信息、中藥分類、單味中藥使用率與共現頻率進行描述性分析；采用K-means聚類模型和SPSSModeler中的Apriori算法對使用率排名前10位的藥物進行聚類分析（聚類方與重要性）和關聯(lián)分析。結果：檢索到相關文獻498篇，最終納入有效文獻70篇，涉及51種中藥復方，包括111味中藥。用藥種類以清熱藥、補虛藥、活血化瘀藥為主；其中藥物種類最多的是清熱類，有34味；使用頻次最高的是補虛藥，有63次（使用率為25.82%）；使用率最高的單味中藥是柴胡（占總數的25.49%）；共現頻率最高的藥對是柴胡-丹參。聚類分析結果共得到5個聚類方，即柴胡-丹參-當歸-甘草、黃芪-當歸-白花蛇舌草、茵陳-郁金-虎杖、柴胡-丹參-茵陳、五味子-甘草；重要性預測結果顯示，在聚類方中五味子最重要、虎杖最不重要。關聯(lián)分析共得到13條藥組關聯(lián)規(guī)則，但支持度與置信度均較低。結論：抗實驗性肝損傷中藥復方的組成以清熱藥、補虛藥為主，但是用藥配伍多樣，相互關聯(lián)度較低。

中藥復方；抗實驗性肝損傷；用藥規(guī)律；聚類分析；關聯(lián)分析

肝損傷是指由各種原因（非外傷因素）導致的肝實質細胞受損、肝功能降低，繼而引發(fā)肝功能及結構發(fā)生變化，嚴重時可發(fā)展為肝衰竭；其常見病因包括病毒性感染、使用藥物或化學毒物、酗酒、自身免疫反應等[1]。在藥物研究過程中，常通過實驗性肝損傷模型來評價藥物的肝保護效果。中藥復方抗實驗性肝損傷主要通過辨證論治，注重整體觀念，多藥合理配伍，作用在肝損傷發(fā)生的各個階段，其治療效果日益受到重視[2]。本研究通過檢索數據庫，整理搜集中藥復方對各類實驗性肝損傷保護作用的文獻，旨在探究其用藥規(guī)律，為臨床合理用藥提供參考。

1 資料與方法

1.1 檢索策略

計算機檢索中國期刊全文數據庫、萬方數據庫、中文科技期刊數據庫。主題詞為“實驗性肝損傷”“中藥復方”“保護作用”；檢索時限設為“不限”；檢索條件為“模糊”。

1.2 納入與排除標準

1.2.1 納入標準 （1）中藥復方制劑對實驗性肝損傷保護作用的文獻；（2）文獻中列出了中藥復方的主要組成。1.2.2 排除標準 （1）綜述、講座等；（2）化學藥或生物制品對實驗性肝損傷保護作用的文獻；（3）單味中藥或其提取物的相關文獻；（4）重復發(fā)表的文獻。

1.3 資料處理與統(tǒng)計學方法

嚴格按照納入與排除標準處理文獻，通過Excel 2013軟件整理抗實驗性肝損傷中藥復方的文獻，利用SPSSModeler 18.0軟件進行數據處理和統(tǒng)計。采用描述性分析、聚類分析、關聯(lián)分析等方法進行分析。

2 結果與分析

2.1 描述性分析結果

2.1.1 納入研究基本信息 初檢出相關文獻498篇，依據納入與排除標準得到有效文獻70篇，合并文獻中相同復方制劑，最終納入研究的中藥復方為51種，共包括111味藥材。納入的中藥復方劑型多樣，其中膠囊劑20種、湯劑7種、沖劑5種、口服液5種、片劑4種、合劑3種、顆粒劑3種、丸劑3種、散劑1種。

實驗性肝損傷模型主要包括四氯化碳（CCl4）致小鼠肝損傷模型、D-氨基半乳糖（D-GalN）致小鼠急性肝損傷模型、硫代乙酰胺（TAA）致小鼠肝損傷模型等[3]。使用的對照藥物有聯(lián)苯雙酯、水飛薊素、護肝片、云芝肝泰等保肝藥物。

2.1.2 中藥分類 依據2014年版《中藥大辭典》的分類標準[4]，將納入的111味中藥進行分類，分類情況見表1。

表1 111味中藥分類情況Tab 1 Classification of111Chineseherbalmedicines

由表1可知，藥物種類最多的是清熱類，有34味中藥；使用頻次最高的是補虛藥，使用頻次為63次，使用率為25.82%。

2.1.3 單味中藥的使用頻率 納入的111味中藥中，柴胡的使用頻次最高，共計13次，使用率為25.49%。使用率在10%以上的中藥有10味，詳見表2。

表2 使用率在10%%以上的中藥Tab 2 Chinese herbalmedicines w ith use frequency more than 10%%

2.1.4 共現頻率 梳理出含有高頻使用藥物的所有處方，利用SPSSModeler 18.0進行統(tǒng)計分析，考察各藥物之間的共現頻率關系，結果見圖1（線條越粗表示鏈接越強，說明藥物同時出現的概率越大）。

圖1 各藥物之間的共現頻率關系Fig 1 Co-occurrence frequency relation am ong the Chineseherbalmedicines

由圖1可知，在各處方中柴胡-丹參的共現頻率最高，相對較高的藥對還包括柴胡-茵陳、茵陳-丹參、丹參-黃芪、黃芪-虎杖。

2.2 聚類分析結果

2.2.1 聚類方分析 在所有入選的中藥復方中，對使用率排名前10位的藥物，構建K-Means聚類模型，經過分析得到5個聚類方，分別為：（1）柴胡-丹參-當歸-甘草；（2）黃芪-當歸-白花蛇舌草；（3）茵陳-郁金-虎杖；（4）柴胡-丹參-茵陳；（5）五味子-甘草。

2.2.2 重要性分析 預測各個藥物在聚類方組成中的重要性。結果，五味子最重要，虎杖最不重要，詳見圖2。

2.3 關聯(lián)規(guī)則分析結果

對使用率排名前10位的藥物，采用SPSSModeler軟件中的Apriori算法，構建關聯(lián)規(guī)則模型，參數設定為：支持度≥5%，置信度≥50%，挖掘處方中的藥物關系（前項→后項），即處方中前項與后項關聯(lián)關系的強弱。其中，支持度指藥物A與藥物B同時在一個處方出現的概率；置信度指在藥物A出現的處方中同時出現藥物B的概率。結果，得出藥組的關聯(lián)規(guī)則13條，詳見表3。

圖2 藥物的重要性預測Fig 2 Im portance prediction of the Chinese herbal medicines

表3 高頻使用藥物的藥組關聯(lián)規(guī)則Tab 3 Drug pair related rules of the high-frequency used Chineseherbalmedicine

3 討論

在抗實驗性肝損傷的中藥復方中，藥物使用類別主要以清熱藥、補虛藥、活血化瘀藥為主。中醫(yī)認為，肝損傷多伴隨著濕、熱、瘀等病理因素，造成體內濕熱積聚、血行不暢。清熱藥具有清熱解毒的功效，可清除體內濕熱、排除毒邪[5]；補益藥具有健魄益氣、養(yǎng)血滋陰等作用；活血化瘀藥可改善體內氣機不暢、濕熱內蘊導致的血瘀狀態(tài)[6]。

本研究結果顯示，在各中藥復方中柴胡的使用率最高，與其他藥物的共現概率也較高。柴胡既能透表退熱、疏肝解郁，又可升舉陽氣。柴胡皂苷具有保護肝細胞溶酶體膜和線粒體的作用，能促進毛細管內膽汁的排除，對肝損傷有顯著的抗損傷作用，使肝內蓄積的肝糖原及核酸大部分恢復正常或接近正常，使血清轉氨酶活力下降，并可抑制纖維增生，促進纖維的吸收而達到保肝、養(yǎng)肝之目的[7]。

此外，抗實驗性肝損傷的中藥復方經常會使用到黃芪、茵陳、丹參。黃芪多糖具有多種免疫調節(jié)作用，黃芪中的黃酮類物質具有清除自由基和保肝的作用[8]。此外，黃芪還具有促進肝細胞白蛋白合成、抑制間質膠原合成、增強網狀內皮系統(tǒng)功能、改善巨噬細胞吞噬功能、誘導干擾素生成的作用，能提高淋巴細胞轉化率，達到抗肝損傷的目的[9]。

藥理研究表明，茵陳具有保肝、利膽、降血脂、降血壓、擴張冠脈、抗腫瘤等作用。茵陳的活性成分主要為揮發(fā)油、蒿屬香豆素、色原酮類、黃酮類、綠原酸等，有促進膽汁分泌和排泄的作用。茵陳中的色原酮是強利膽成分，其能抑制β-葡萄糖醛酸苷酶活性，從而使葡萄糖醛酸不被分解，加強肝臟解毒作用[10]。丹參被廣泛應用于心腦血管疾病的治療，近年來也已成為臨床上治療肝病的常用藥。丹參酮能提高血中超氧化物歧化酶的活性，具有較強的抗脂質過氧化和自由基清除作用，從而改善肝細胞線粒體的功能，穩(wěn)定生物膜，減輕肝細胞損傷[11]。丹參素能夠抑制和減輕急慢性肝損傷時肝細胞的變性、壞死，保護肝細胞膜和細胞器。另外，丹參素還能促進肝內膠原蛋白的降解，具有改善肝臟血液循環(huán)、抗肝纖維化、防止肝硬化發(fā)生的作用[12]。

聚類分析是一種在沒有先驗知識的情況下，進行的數據分析和數據挖掘，是一種較為新穎的研究方法[13]。在本次聚類分析中，藥物重要性預測排首位的是五味子。五味子能夠可逆性抑制肝細胞內轉氨酶活性，五味子素對肝細胞有一定保肝作用，并能加速肝組織再生。有研究報道，五味子有助于肝細胞蛋白質的合成，從而使線粒體恢復和增加，相應的酶活性增高，肝細胞得以恢復和再生，從而發(fā)揮降酶保肝作用[14]。

從藥物的共現情況分析來看，共現概率最高的藥對是柴胡-丹參，關聯(lián)規(guī)則得出的支持度數據同樣證實了此結果。但是，由于本研究的樣本量不大，而且各中藥復方的組成豐富多變，在得到的13條關聯(lián)規(guī)則中，最大的支持度為21.57%（置信度54.55%）＜30%，最高的置信度為75.00%（支持度7.84%）＜80%，支持度和置信度都相對偏低。

雖然依據篩選標準最終入選的中藥復方僅為51種，研究樣本量較小，給出的數據參考價值有限，但是研究將數據挖掘的技術應用到了中藥復方配伍中，可以獲得更加全面、深層次及潛在的循證藥學依據[15]，有利于相互借鑒、優(yōu)化處方組成，從而提高藥物療效。

[1] 孫鐵鋒，王平，張春莉.中藥治療肝損傷的研究進展[J].藥學研究，2014，33（12）：715-717.

[2] 翁芳娟.簡述具有保肝作用的常用中藥復方制劑[J].海峽藥學，2013，25（4）：267-269.

[3] 姬琦，馬秋霞.中藥對四氯化碳致急性肝損傷保護作用的研究進展[J].海軍醫(yī)學雜志，2012，33（5）：353-357.

[4] 南京中醫(yī)藥大學.中藥大辭典：縮印版[M].2版.上海：上?？茖W技術出版社，2014：588-591.

[5] 林慧，梅全喜，孔祥廉，等.蛇黃肝炎湯對小鼠急性肝損傷的保護作用研究[J].中國藥房，2011，22（43）：4038-4040. [6] 王京麗，周超凡.中草藥及其制劑對肝損傷的研究概述[J].中國中藥雜志，2011，36（23）：3371-3373.

[7] 田利鮮.柴胡的藥理作用和臨床運用[J].湖北中醫(yī)雜志，2008，30（1）：59-60.

[8] 陳建真，呂圭源，葉磊，等.黃芪黃酮的化學成分與藥理作用研究進展[J].醫(yī)藥導報，2009，28（10）：1314-1316.

[9] 任志萍.黃芪現代藥理學研究進展[J].中國民族民間醫(yī)藥，2010，18（3）：33-35.

[10] 董巖，王新芳，崔長軍，等.茵陳蒿的化學成分和藥理作用研究進展[J].時珍國醫(yī)國藥，2008，19（4）：874-876.

[11] 陳連劍，李停，李成.丹參酮ⅡA抗大鼠肝星狀細胞氧應激脂質過氧化作用的研究[J].中藥材，2003，26（7）：504-509.

[12] 鄭元義，戴立里，王文兵，等.丹參素治療肝纖維化及其作用機制研究[J].中華肝臟病雜志，2003，11（5）：288-290.

[13] 汪濤，鮑遠程.聚類分析在中藥復方研究中的應用[J].成都中醫(yī)藥大學學報，2013，36（2）：121-122.

[14] 金順姬.五味子的保肝作用研究[J].長春中醫(yī)藥大學學報，2007，23（6）：28.

[15] 劉嘉輝，呂東勇，何潔茹，等.基于數據挖掘對國醫(yī)大師治療肝硬化用藥規(guī)律研究[J].中華中醫(yī)藥雜志，2015，30（12）：4328-4331.

（編輯：劉明偉）

Study on the M edication Rules of TCM Com p lex Form ulas for Anti-experimental Liver In jury

SU Kejian，ZHANG Le，LU Guohong（Dept.of Pharmacy，South Branch of Renji Hospital，School of Medicine，Shanghai Jiaotong University，Shanghai201112，China）

OBJECTIVE：To explore themedication rules of TCM complex formulas for anti-experimental liver injury.METHODS：Using“experimental liver injury”“TCM complex preparations”“protection effect”as themes，related literatures aboutmedication rules of TCM complex formulas for anti-experimental liver injury in CJFT，Wanfang database and VIP database were retrieved，and general information，distribution，use frequency and co-occurrence frequency of single herbalmedicine were descriptively analyzed.K-means clustering model and Apriori in SPSSModeler were adopted for cluster analysis（clustering side and importance）and correlation analysis inmedicinesw ith top 10 use frequency.RESULTS：498 related literatureswere retrieved，and 70 valid literatures were involved totally，including 51 TCM complex formulas and 111 Chinese herbalmedicines.It wasmainly drug for clearing heat，restoring vital energy and blood circulation.Drugs for clearing heat weremost w idely used（34 varieties），drugs for restoring vital energy showed the highest use frequency，w ith 63 times（25.82%）；Prunella vulgaris had the highest frequency in single herbalmedicines（accounting for 25.49%）；and P.vulgaris-Salvia miltiorrhiza had the highest co-occurrence frequency in drug pairs.5 clustering sides were obtained in clustering analysis，which were P.vulgaris-S.miltiorrhiza-Angelica sinensis-Glycyrrhiza uralensis，Astragalusmembranaceus-A.sinensis-Hedyotis diffusa，Artemisia scoparia-Curcuma wenyujin-Plygonum cuspidatum，P.vulgaris-S.miltiorrhiza-A.scoparia，Schisandra chinensis-G.uralensis.Importance prediction showed，S.chinensis was the most important and P.cuspidatum was the least important.13 drug pair ruleswere obtained from correlation analysis，and both support and confidence degrees were low.CONCLUSIONS：The TCM complex formulas for anti-experimental liver injury aremainly based on drugs for clearing heat and restoring vital energy，while the compatibility is varied，and correlation degree is relatively low.

TCM complex formulas；Anti-experimental liver injury；Medication rules；Cluster analysis；Correlation analysis

R917

A

1001-0408（2017）16-2292-04

2016-08-26

2017-03-31）

＊主管藥師。研究方向：醫(yī)院藥學。電話：021-34506113。E-mail：sukejian@renji.com

#通信作者：主任藥師。研究方向：醫(yī)院藥學。電話：021-34506151。E-mail：luguohong@renji.com

DOI10.6039/j.issn.1001-0408.2017.16.37