郭小華，劉 明，李文輝，楊鳳娟，譙仕彥

（1.中南民族大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，湖北武漢430074；2.北京中農(nóng)弘科生物技術(shù)有限公司，北京 102206；3.廊坊市農(nóng)業(yè)局，河北廊坊 065000；4.中國農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科技學(xué)院，北京100193）

酵母培養(yǎng)物對斷奶仔豬生長性能、糞便菌群和血液指標(biāo)的影響

郭小華1*，劉 明2，李文輝3，楊鳳娟2，譙仕彥4

（1.中南民族大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，湖北武漢430074；2.北京中農(nóng)弘科生物技術(shù)有限公司，北京 102206；3.廊坊市農(nóng)業(yè)局，河北廊坊 065000；4.中國農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科技學(xué)院，北京100193）

本試驗旨在研究日糧中添加酵母培養(yǎng)物對斷奶仔豬生長性能、腹瀉率、糞便微生物菌群數(shù)量和血液指標(biāo)的影響。選取144頭體重為（7.46±0.52）kg、健康的杜×長×大三元雜交斷奶仔豬，隨機(jī)分配到對照組（飼喂基礎(chǔ)日糧）和3個不同添加水平的酵母培養(yǎng)物組（添加量分別為0.25%、0.50%和0.75%），每個處理6個重復(fù)（圈），每個重復(fù)6頭仔豬。試驗期為28 d。結(jié)果表明：隨著日糧中酵母培養(yǎng)物添加量的增加，顯著改善了試驗結(jié)束時仔豬的末重（線性，P＜0.05），提高了在試驗15～28 d仔豬的平均日增重和采食量（線性，P＜0.05）以及在試驗全期的日增重和采食量（線性和二次，P＜0.05）；不同添加水平的酵母培養(yǎng)物組均有效改善了仔豬不同階段的腹瀉發(fā)生率，增加了糞便中乳酸桿菌的數(shù)量（線性和二次，P＜0.05），減少大腸桿菌數(shù)（線性，P＜0.05）；同時，降低了血液中尿素氮的水平（線性，P＜0.05）。綜上所述，日糧中添加酵母培養(yǎng)物能夠顯著提高斷奶仔豬的生長性能，降低腹瀉發(fā)生率，并改善腸道微生態(tài)區(qū)系和血液生化指標(biāo)，其中0.50%的添加效果最好。

酵母培養(yǎng)物；仔豬；生長性能；微生物；血液指標(biāo)；腹瀉發(fā)生率

斷奶仔豬的生長性能（包括體增重或保育結(jié)束時體重）與仔豬的健康、后續(xù)的生長發(fā)育以及上市時間均密切相關(guān)。而斷奶仔豬通常由于環(huán)境、飼料、管理等因素的改變，受到較大應(yīng)激，在生產(chǎn)中易發(fā)生腹瀉、食欲不佳、生長緩慢甚至死亡等斷奶應(yīng)激綜合征[1-2]，極大地影響了養(yǎng)豬業(yè)的生產(chǎn)效率。如何解決這些問題，減少斷奶應(yīng)急綜合征帶來的負(fù)面影響是一個重大的研究課題。

酵母培養(yǎng)物是一種在特定工藝條件下由酵母菌在特定的培養(yǎng)基（如玉米、麥麩和燕麥等谷物）中經(jīng)過充分的厭氧發(fā)酵后形成的微生態(tài)制品，主要由細(xì)胞外代謝產(chǎn)品、經(jīng)過發(fā)酵后變異的培養(yǎng)基和少量的已無活性的酵母細(xì)胞所構(gòu)成[3]。由于其含有肽類、寡糖、增味物質(zhì)、芳香物質(zhì)和未知生長因子，因此在改善飼料適口性、提高動物采食量、改善動物腸道健康和生長上具有重要作用。目前許多研究發(fā)現(xiàn)，在仔豬日糧中添加酵母培養(yǎng)物能顯著提高仔豬的采食量、體重和飼料轉(zhuǎn)化效率，對仔豬腹瀉有明顯的預(yù)防效果[4-6]。Shen等[7]研究表明，斷奶仔豬飼喂含酵母培養(yǎng)物的日糧能顯著提高其腸絨毛高度、絨毛高度/隱窩深度和改善腸道免疫反應(yīng)，進(jìn)而改善斷奶仔豬的生長性能。因此，本試驗通過在斷奶仔豬日糧中添加不同水平的酵母培養(yǎng)物，探討其對斷奶仔豬生長性能、糞便微生物和血液指標(biāo)的影響，確定適宜的添加用量，為酵母培養(yǎng)物在生產(chǎn)實踐中的使用提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗材料 酵母培養(yǎng)物（由北京中農(nóng)弘科生物技術(shù)有限公司提供）含粗蛋白15.32%（按GB/T 6432-1994測定）、甘露聚糖0.76%（按企業(yè)提供的Q/HKBIO 0004-2016中的檢測方法測定），均為實測值。

1.2 試驗動物和日糧 本試驗采用單因素試驗設(shè)計，將144頭健康杜×長×大三元雜交斷奶仔豬（斷奶日齡21 d）按照體重和性別因素，隨機(jī)分配到4個日糧處理組，即對照組（飼喂基礎(chǔ)日糧）和3個不同水平的酵母培養(yǎng)物組（添加量分別為0.25%、0.50%和0.75%）。每個處理6個重復(fù)（圈），每個重復(fù)6頭仔豬。試驗期28 d，基礎(chǔ)日糧過渡7 d，正式試驗起始體重為（7.46±0.52）kg。基礎(chǔ)日糧是參考NRC（1998）標(biāo)準(zhǔn)和第2004版《中國飼料成分及營養(yǎng)價值表》配制成的玉米-豆粕型日糧，各處理組日糧配方和營養(yǎng)成分見表1。

1.3 飼養(yǎng)管理 試驗于2016年3月1日—4月4日在河北定州市海豐養(yǎng)殖有限公司養(yǎng)殖場保育舍進(jìn)行。試驗期間，每天飼喂仔豬4次（08:00、12:00、16:00、20:00），自由采食和飲水。平均2 h巡圈觀察仔豬采食狀況，保證仔豬料槽內(nèi)余料量不低于料槽容積的1/4，飼槽為矩形四口長槽，飲水器為乳頭式。在試驗期間，豬只發(fā)生死亡或因疾病淘汰時，稱取個體體重并結(jié)算飼料消耗量。豬舍保持通風(fēng)、清潔，圈舍內(nèi)溫度控制在23～25℃，鋼制架構(gòu)，塑料漏縫地板。仔豬的免疫按豬常規(guī)獸醫(yī)傳染病的免疫程序進(jìn)行，仔豬飼養(yǎng)管理措施嚴(yán)格執(zhí)行衛(wèi)生防疫制度。

表1 日糧組成及營養(yǎng)成分（飼喂基礎(chǔ)）

1.4 測定指標(biāo)及方法

1.4.1 生長性能 于試驗第14天和試驗結(jié)束時對仔豬進(jìn)行稱重，并記錄各圈加料量，而每天結(jié)算各圈余料和損失料，以計算仔豬在試驗1～14、15～28 d及全期的生長性能，包括平均日增重、平均日采食量和耗料增重比。

1.4.2 腹瀉發(fā)生率 腹瀉發(fā)病率的觀察采用視覺評估法，每天08:00和16:00觀察糞便稠度，糞便稠度評分等級為0=固體、1=半固態(tài)、2=半液體和3=液體（表2）。發(fā)生腹瀉的定義為糞便粘稠度連續(xù)2 d評分在2級或3級。

腹瀉的發(fā)生率=每組仔豬總腹瀉天數(shù)/（仔豬總數(shù)×28 d）×100%

1.4.3 糞便微生物菌群數(shù)量 在28 d試驗結(jié)束時，每個重復(fù)隨機(jī)采集1頭仔豬直腸未污染的新鮮糞樣。采用液氮速凍后送至實驗室-40℃保存，并對樣品盡快處理分析。采用平板計數(shù)法檢測糞便微生物中乳酸菌和大腸桿菌的數(shù)量。在無菌操作臺內(nèi)取1.0 g糞樣與9 mL滅菌生理鹽水混勻配制成10-1稀釋液，再依次按照10倍梯度稀釋得到不同濃度的稀釋液，選取合適梯度的稀釋液分別接種于MRS平板（測定乳酸桿菌）和麥康凱平板（測定大腸桿菌）中，混合均勻。大腸桿菌在37℃有氧條件培養(yǎng)20 h后計數(shù)，乳酸菌則采用厭氧缸在37℃厭氧培養(yǎng)36 h后計數(shù)。每個接種選擇3個梯度，每個稀釋梯度重復(fù)3次，糞便微生物數(shù)量最終采用每克糞樣含菌落總數(shù)的對數(shù)值來表示。

1.4.4 血液生化指標(biāo) 飼養(yǎng)試驗結(jié)束后，每個處理隨機(jī)挑選6頭，即每圈挑選1頭接近平均體重的仔豬進(jìn)行前腔靜脈采血。使用全自動血液生化分析儀（UnicelDxC 800 Synchron）測定血清中白蛋白、球蛋白、尿素氮和堿性磷酸酶活性。

1.5 統(tǒng)計分析 以圈為試驗單元，采用SAS 9.2（SAS Institute，Cary，NC）中GLM模型進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，通過線性（Linear）和二次（Quadratic）效應(yīng)評估日糧中不同酵母培養(yǎng)物水平對生長性能、糞便微生物數(shù)量及血液指標(biāo)的影響。P＜0.05表示差異顯著，P＜0.1被認(rèn)為有趨勢。

表2 仔豬腹瀉程度評分表

表3 日糧中添加酵母培養(yǎng)物對斷奶仔豬生長性能的影響（n=6）

2 結(jié)果與分析

2.1 不同添加水平酵母培養(yǎng)物對仔豬生長性能的影響 由表3可知，與對照組相比，隨著日糧中酵母培養(yǎng)物添加量的增加，仔豬在試驗結(jié)束時的末重呈線性增加（線性，P＜0.05）。在試驗1～14 d，添加不同水平的酵母培養(yǎng)物對仔豬平均日增重、日采食量和耗料增重比均無顯著性影響（線性和二次，P＞0.05）。在試驗15～28 d，斷奶仔豬的日增重和采食量隨酵母培養(yǎng)物添加量的增加線性提高（線性，P＜0.05），但耗料增重比在各組間無顯著性差異（線性和二次，P＞0.05）。在整個試驗期間，隨著酵母培養(yǎng)物添加量的增加，斷奶仔豬的日增重和采食量線性和二次提高（線性和二次，P＜0.05），但對耗料增重比無顯著性影響（線性和二次，P＞0.05）。當(dāng)添加量為0.50%時，仔豬試驗?zāi)┲亍⑵骄赵鲋睾筒墒沉烤罡摺?/p>

2.2 不同添加水平酵母培養(yǎng)物對仔豬腹瀉發(fā)生率的影響 由表4可知，相比于對照組，0.25%、0.50%和0.75%酵母培養(yǎng)物組均能有效降低斷奶仔豬試驗期第1周，分別降低16.76%、24.32%和15.72%；第2周，分別降低26.63%、34.05%和25.01%和第4周，分別降低21.21%、29.21%和23.39%的腹瀉發(fā)生率，說明本酵母培養(yǎng)物在降低仔豬腹瀉率上有良好的效果。

2.3 不同添加水平酵母培養(yǎng)物對仔豬糞便微生物的影響 由表5可知，隨著酵母培養(yǎng)物添加量的提高，仔豬糞便中乳酸桿菌的數(shù)量顯著增加（線性和二次，P＜0.05），線性減少了大腸桿菌數(shù)（線性，P＜0.05）。仔豬糞便中乳酸桿菌數(shù)在0.5%添加量時最高，大腸桿菌數(shù)在0.75%添加量時最低。

2.3 不同添加水平酵母培養(yǎng)物對仔豬血液指標(biāo)的影響 由表6可知，隨著酵母培養(yǎng)物添加量的提高，仔豬血液中尿素氮的水平線性降低（線性，P＜0.05），但對仔豬血清中白蛋白、球蛋白和堿性磷酸酶活性均無顯著性影響（線性和二次，P＞0.05）。

表4 日糧中添加酵母培養(yǎng)物對斷奶仔豬腹瀉率的影響 %

3 討 論

3.1 酵母培養(yǎng)物對斷奶仔豬生長性能的影響 早在1973年，就有報道表明酵母培養(yǎng)物對斷奶和保育豬的生長具有積極的作用[8]。本試驗結(jié)果表明，與基礎(chǔ)日糧組相比，添加不同水平的酵母培養(yǎng)物能顯著提高斷奶仔豬試驗?zāi)┲亍⑵骄赵鲋睾筒墒沉?，促生長作用效果顯著，且以0.50%添加量的添加效果最佳，這與金加明等[9]報道結(jié)果較為一致。近年來，越來越多研究者開始關(guān)注酵母培養(yǎng)物。孫展英等[5]研究報道，飼喂含酵母培養(yǎng)物的日糧能顯著提高斷奶仔豬的平均日增重。關(guān)于酵母培養(yǎng)物促生長作用機(jī)制方面的研究也有不少，從已有研究可知，酵母培養(yǎng)物這種促生長作用的可能機(jī)制包括調(diào)節(jié)機(jī)體免疫系統(tǒng)[10]和改善機(jī)體腸道形態(tài)發(fā)育[11]。

表5 日糧中添加酵母培養(yǎng)物對斷奶仔豬糞便微生物菌群數(shù)量的影響 lg(CFU/g)

表6 日糧中添加酵母培養(yǎng)物對斷奶仔豬血液指標(biāo)的影響

3.2 酵母培養(yǎng)物對斷奶仔豬糞腹瀉發(fā)生率和糞便微生物的影響 仔豬腹瀉是制約養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展的一個瓶頸，給養(yǎng)豬生產(chǎn)者造成極大的經(jīng)濟(jì)損失。本試驗發(fā)現(xiàn)，添加不同水平的酵母培養(yǎng)物能顯著改善斷奶仔豬的腹瀉發(fā)生率，與汪德明等[12]研究結(jié)果一致。由此可見，酵母培養(yǎng)物可作為緩解養(yǎng)豬過程中仔豬腹瀉的有效途徑之一。本試驗還測定了仔豬糞便微生物的變化情況，結(jié)果顯示，添加0.25%、0.50%和0.75%的酵母培養(yǎng)物均能顯著增加糞便中乳酸菌數(shù)量，而減少大腸桿菌數(shù)量。孟繁伊等[13]也報道，酵母培養(yǎng)物可調(diào)節(jié)動物體內(nèi)微生態(tài)平衡，促進(jìn)乳酸菌等有益菌的生長，抑制病原菌的生長?？梢?，酵母培養(yǎng)物降低斷奶仔豬腹瀉發(fā)生率與其改善微生物菌群的積極作用密切相關(guān)。而根據(jù)其他研究報道，這種改善微生態(tài)結(jié)構(gòu)的作用與酵母培養(yǎng)物中的寡糖和其他活性成分可維護(hù)胃腸道微生態(tài)平衡，選擇性地促進(jìn)有益菌群增殖和抑制有害菌的繁殖有關(guān)[14]。

3.3 酵母培養(yǎng)物對斷奶仔豬血液指標(biāo)的影響 動物機(jī)體的代謝過程是一個動態(tài)平衡的變化過程，血液中許多生理生化參數(shù)受生長發(fā)育階段、日糧營養(yǎng)水平和自身分泌狀況等因素的影響，因此，血液指標(biāo)可以作為反映動物體內(nèi)物質(zhì)代謝和某些組織器官機(jī)能變化的重要特征，也可以反映體內(nèi)營養(yǎng)物質(zhì)沉積的情況[15]。血清球蛋白和白蛋白與機(jī)體的免疫機(jī)能和蛋白質(zhì)代謝密切相關(guān)，其含量的高低在一定程度上反映了動物的免疫水平及其生理狀況[16]。血清尿素氮能較準(zhǔn)確反映動物體內(nèi)蛋白質(zhì)代謝和氨基酸之間的平衡狀態(tài)，良好的氨基酸平衡能促進(jìn)血清尿素氮濃度的下降[17]。本試驗結(jié)果表明，添加不同水平酵母培養(yǎng)物雖然對血清中白蛋白、球蛋白和堿性磷酸酶沒有顯著性影響，但能顯著降低血清中尿素氮的含量。這表明，添加本酵母培養(yǎng)物可能對促進(jìn)日糧氨基酸平衡和提高機(jī)體對蛋白質(zhì)的消化吸收效率有顯著效果，這也是酵母培養(yǎng)物能改善仔豬生長性能的重要原因之一。

4 小 結(jié)

綜上所述，斷奶仔豬日糧中添加本酵母培養(yǎng)物能夠顯著提高仔豬的試驗?zāi)┲?、平均日增重和采食量，改善其生長性能；有效改善仔豬的腹瀉發(fā)生率，能夠增加仔豬糞便中乳酸菌的數(shù)量，降低大腸桿菌數(shù)量；并顯著降低了仔豬血清中尿素氮的含量。試驗結(jié)果表明，酵母培養(yǎng)物可能提高了仔豬對飼料蛋白的消化利用，其中以0.50%酵母培養(yǎng)物添加組效果最好。

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Effects of Yeast Culture on Growth Performance, Fecal Microbiota and Blood Profiles in Weaned Piglets

GUO Xiao-hua1*, LIU Ming2, LI Wen-hui3, YANG Feng-juan2, QIAO Shi-yan4
(College of Life Science, South-Central University for Nationalities, Hubei Wuhan 430074, China; 2. Beijing China-Agri Hong Ke Biotechnology Co., Ltd, Beijing 102206, China; 3. Agriculture Bureau of Langfang City, Hebei Langfang 065000, China; 4. College of Animal Science and Technology, China Agricultural University, Beijing 100193, China)

The present study was conducted to investigate the effect of yeast culture on growth performance, diarrhea incidence, fecal microbiota and blood profiles in weaned piglets. A total of 144 Duroc × Landrace × Large White weaned pigs with the average initial weight of (7.46 ± 0.52) kg were randomly allocated to 1 of 4 diets (a control diet and three diets containing 0.25%, 0.50% and 0.75% yeast culture, respectively) with 6 pens per treatment and 6 pigs per pen. The feeding trail lasted for 28 d. The results showed that increasing supplementation of yeast culture improved the final body weight of weaned piglets at d 28 (linear, P＜0.05); increased the average daily gain (ADG) and the average feed intake (ADFI) during 15～28 d (linear, P＜0.05), as well as the ADG and ADFI during the whole trail (linear and quadratic, P＜0.05). Meanwhile, supplementation of different levels of yeast culture effectively improved the diarrhea incidence of piglets; additionally, the fecal lactic acid bacteria count increased (linear and quadratic, P＜0.05) and the fecal Escherichia coli counts reduced (linear, P＜0.05) as the supplementation of yeast culture increased. Moreover, the supplementation of yeast culture to diet reduced the content of urea nitrogen in serum of piglets (linear, P＜0.05). In summary, the supplementation of yeast culture could significantly improve the growth performance of piglets. Furthermore, diets containing yeast culture reduced the diarrhea incidence and had positive effects on the fecal microbiota and blood profiles. The optimum dosage of yeast culture in weaned piglet diet was 0.50%.

Yeast culture; Piglet; Growth performance; Microbiota; Blood profiles; Diarrhea incidence.

S828.5

A

10.19556/j.0258-7033.2017-06-106

2017-01-23；

2017-04-08

中南民族大學(xué)橫向合作項目（HZY17001）；北京市科技型中小企業(yè)促進(jìn)專項項目（Z16010101463）

郭小華（1978-），博士，主要從事益生菌基礎(chǔ)與應(yīng)用等方面的研究開發(fā)工作，E-mail：guo_xh@hotmail.com

* 通訊作者