李劉欽

冷凍卵子并不是什么新技術(shù)，至少它的技術(shù)原理并不新鮮。這跟我們用冰箱急凍肉類長時間保存?zhèn)溆?，又或者和電影里演的——主角被冰封在雪山上，千年后冰雪融化再醒過來，是差不多的。只不過急凍肉類并不用考慮解凍后肉類是否依然鮮活，而電影也不用考慮具體的技術(shù)細節(jié)，顧好票房就夠了。

所以回歸到現(xiàn)實中，冷凍卵子依然是個技術(shù)活。從流程上來看，冷凍卵子主要分三步走，取卵-凍卵-復(fù)蘇，其中的每一步，都有許多需要注意的技術(shù)細節(jié)，稍有不慎便可能導(dǎo)致前功盡棄。

取卵：小心后遺癥

女性的生理特點決定了收集卵子是件不容易的事。

女性出生時，卵巢內(nèi)有10萬顆原始卵泡，到了青春期，每個月兩側(cè)卵巢都會有10顆左右的卵泡準備發(fā)育，但女性體內(nèi)的激素只能夠供應(yīng)1-2顆卵泡發(fā)育成熟為卵子，所以，只有某個優(yōu)勢卵泡能繼續(xù)發(fā)育為卵子，其他的卵泡就萎縮了。在正常的激素水平下，正常女性的卵巢每個月只會排出一顆卵子。鑒于卵子的質(zhì)量參差不齊，以及現(xiàn)有的冷凍卵子操作的低成功率，只收集一顆卵子顯然是不夠的。而且從卵巢中取卵大小也是個有創(chuàng)手術(shù)，每個月都去醫(yī)院在卵巢上扎上一針顯然是不現(xiàn)實的。所以就有必要通過使用促排卵藥物讓卵巢在一定期限內(nèi)產(chǎn)生更多的卵子，然后由醫(yī)院統(tǒng)一收集。

這樣問題就來了，促排卵藥物畢竟屬于激素類藥物，副作用還是有的，卵巢在藥物的刺激下不斷排卵，容易造成女性月經(jīng)不調(diào)、卵巢早衰，甚至出現(xiàn)卵巢過度刺激綜合征（Ovarian Hyper-Stimulation Syndrome， OHSS），少數(shù)人則會罹患卵巢腫瘤。其中OHSS嚴重癥狀的發(fā)生率約在0.4%-2%之間。OHSS的主要癥狀是胸腹積水、卵巢囊性增大，同時還可能有脫水、血液的高凝狀態(tài)（容易形成血栓）、腎衰竭、中風(fēng)等嚴重后果。

另外，促排卵藥物的頻繁使用也有可能導(dǎo)致卵巢扭轉(zhuǎn)，這有不到1%的發(fā)生率。一旦卵巢扭轉(zhuǎn)嚴重，會很快切斷卵巢的血液供應(yīng)，出現(xiàn)卵巢缺血、壞死的嚴重后果，不得不開腹手術(shù)切除壞死的卵巢。

有鑒于此，即使是平時，醫(yī)生也不提倡女性隨意使用促排卵藥物，就算產(chǎn)婦能承擔(dān)巨大的風(fēng)險，也并不能保證胎兒不會因此出現(xiàn)營養(yǎng)不良、體重偏低、生存能力差等問題。而在冷凍卵子時，女性一般需要取10顆左右的卵子，是平常自然排卵的10倍，一般女性都需要多次用藥打針才能達到想要的效果，卵巢甚至整個身體承受的激素刺激之大可想而知。

到了取卵手術(shù)階段，醫(yī)生會在B超的引導(dǎo)下，經(jīng)過陰道穿到卵巢內(nèi)，把包涵著成熟卵子的卵泡用針管取出來，整個手術(shù)時長通常不會超過30分鐘。在現(xiàn)有的技術(shù)下，整個取卵過程無痛進行不是什么難事。但在手術(shù)過程中，子宮、膀胱、腸管、血管及其他卵巢周圍的盆腔結(jié)構(gòu)，還是可能被損傷，如果創(chuàng)傷嚴重，可能還需開腹修補損傷。另外，手術(shù)還可能造成卵巢急性損傷、出血、感染、甚至不孕。只不過這類嚴重并發(fā)癥的發(fā)生率很低，在1‰-2‰。

凍卵：卵子很受傷

取卵手術(shù)后，醫(yī)生需要迅速將針管里的卵泡傳遞到實驗室的顯微鏡下，進行卵子細胞的提取。卵子很嬌氣，怕光怕冷怕熱，所以整個過程都要在恒溫的暗室里進行。

將卵子細胞從卵泡中分離出來后，便要開始對其進行低溫速凍了。這也是整個冷凍卵子項目的關(guān)鍵一步。

要使冰凍過的卵子細胞解凍后仍具有生命力，必須克服冰凍生物學(xué)的三大考驗：冰晶形成、滲透性損傷和過冷現(xiàn)象。物質(zhì)在降溫的冰凍過程中，其中所含的水分會隨著溫度的變化而呈現(xiàn)三態(tài)變化，當溫度降至冰點以下時，水分會形成冰晶，冰晶和冰晶融合便會形成冰塊。冰晶、冰塊的存在會破壞卵子的顯微結(jié)構(gòu)，對卵子造成不可逆的損傷，最后導(dǎo)致細胞死亡。同時，因為水分變成冰晶和冰塊，使得原本溶解在水中的電解質(zhì)不斷濃縮，卵子細胞本身所帶的水分會受到所處環(huán)境中電解質(zhì)的濃度影響而將之排出或攝入，進而導(dǎo)致過度脫水或細胞過度膨脹，最終會導(dǎo)致細胞膜的滲透性損傷及細胞休克。而過冷現(xiàn)象是指水分子在超低溫環(huán)境下結(jié)晶反應(yīng)時釋放的大量能量直接傷害細胞。

為了避免上述傷害，改善卵子冷凍過后的存活率，就必須控制冰凍的速度、有效地脫水、及時調(diào)整細胞外電解質(zhì)濃度、滲透壓、酸堿度等。整個過程的操作即便十分完美也無法保證卵子細胞完全不受傷害，所以早期的卵子冷凍想要成功，就跟買彩票中頭獎差不多。

直到2006年，胚胎學(xué)者研究出細胞冷凍保存新方法——玻璃化快速冷凍法（Vitrification）后，卵子冷凍后存活率才慢慢開始高了起來。其具體原理是以高濃度的冷凍保護劑將卵子內(nèi)水分脫水至細胞外，然后直接將卵子置入-196攝氏度的液態(tài)氮中，使細胞內(nèi)物質(zhì)瞬間變成高粘稠的玻璃化物質(zhì)，因此避免了卵子細胞內(nèi)冰晶甚至冰塊的產(chǎn)生，大大減低細胞的損傷，也提高了效率。

但是卵子作為人體內(nèi)最大的細胞，水分含量尤其高，而且其細胞膜對溫度變化的耐受能力和滲透性都比較差，這些都會讓冷凍保護劑滲入較困難。脫水不充分的話，在降溫過程中就易形成冰晶，損傷細胞膜和細胞器導(dǎo)致存活率降低?？衫鋬霰Ｗo劑同時又具有細胞毒性，高溫（4-37攝氏度）長時間接觸同樣可能導(dǎo)致細胞死亡。

美國馬里蘭州的謝迪格羅夫生殖醫(yī)學(xué)中心（Shady Grove Fertility）這些年來從冷凍過的卵子中成功孕育了200個嬰兒（全球范圍內(nèi)從冷凍過的卵子中成功孕育的嬰兒數(shù)則為2000左右），是美國乃至全球冷凍卵子技術(shù)的佼佼者，其資深胚胎學(xué)家邁克爾·塔克（Michael Tucker）認為玻璃化快速冷凍法沒有想象的那么簡單，需要非常細致的操作，需要靈活協(xié)調(diào)和觀察判斷，“我們有26位胚胎學(xué)家，但我只敢把玻璃化操作交給其中的6位來做。如果是解凍操作的話，我只放心其中4位?！?/p>

解凍：復(fù)活靠運氣

通過邁克爾·塔克的話，希望你也看出來了，冷凍卵子難，解凍卵子更難。從流程上來看，解凍卵子就是冷凍卵子的反向操作，將之前脫出去的水重新送回到卵細胞里。

解凍的過程中，必須保證水分能夠緩慢有序地進入解凍后的卵細胞（進入過快同樣會導(dǎo)致細胞膜損傷），首先將需要解凍的卵子置于高滲透壓、高濃度的解凍試劑中，讓外部環(huán)境的潔凈水分、培養(yǎng)液慢慢進入卵細胞中。接著上濃度稍低的試劑，又滲透進一些水分和培養(yǎng)液;多次操作后，最后由滲透壓和濃度均為最低的試劑“上場”，給卵細胞“注水”的過程也就完成了。

隨后，醫(yī)生還會將這些復(fù)蘇的卵子放置在37℃、二氧化碳濃度6%、濕度95%以上的培養(yǎng)液中待上4個小時。在模擬出來的人體環(huán)境待上足夠長時間后，感覺回到熟悉環(huán)境的卵子細胞才終于“滿血復(fù)活”。

但是，要解凍的卵子畢竟是之前經(jīng)歷過一系列冷凍操作以及長時間儲存的卵子，有沒有受損，以及受損的程度，都會讓解凍產(chǎn)生更多的變數(shù)，這需要足夠的經(jīng)驗和細致入微的觀察才能讓情況盡在掌握之中。

之后，“滿血復(fù)活”的卵子能否成功與精子完成結(jié)合，分娩出試管嬰兒，就要看胚胎質(zhì)量、生殖系統(tǒng)狀況等因素了。

一個卵子，從女性卵巢中取出，經(jīng)歷漫長的冷凍，最后復(fù)蘇進而成功與精子結(jié)合培育成胚胎，走完這段復(fù)雜的路成功率為多少呢？很遺憾，由于可供統(tǒng)計的樣本數(shù)太少，目前業(yè)界還沒能給出一個可靠的數(shù)字，但是許多權(quán)威學(xué)者認為，成功率絕對沒有許多醫(yī)院宣傳的60%至70%那么高。

不同機構(gòu)的提供的數(shù)字也不盡相同，英國人類受孕與胚胎學(xué)管理局（ HFEA）發(fā)布的數(shù)據(jù)顯示，如果卵子數(shù)量比較多，有很多次嘗試的機會，成功率最高約為15%（而美國相關(guān)機構(gòu)提供的數(shù)據(jù)是20%左右）。而40歲以上的女性再選擇冷凍卵子，待以后懷孕使用的話，即使冷凍了很多個，每個卵子的成功率只有3%-4%。

所以，僅從技術(shù)角度來看，花重金去冷凍卵子，買到的是保險還是彩票，還真是個未解之謎。