王 丹 劉曉華 孫 贊

（1 遼寧省遼陽市中心醫(yī)院檢驗科，遼寧 遼陽 111000；2 遼寧省人民醫(yī)院檢驗科，遼寧 沈陽 110016）

輪狀病毒抗原檢測患兒腹瀉的診斷價值與臨床檢驗學(xué)研究

王 丹1劉曉華1孫 贊2

（1 遼寧省遼陽市中心醫(yī)院檢驗科，遼寧 遼陽 111000；2 遼寧省人民醫(yī)院檢驗科，遼寧 沈陽 110016）

目的研究分析糞便中輪狀病毒抗原對腹瀉患兒診斷價值與臨床意義。方法采用免疫層析金標(biāo)記技術(shù)快速檢測本院2080份嬰幼兒糞便樣品中輪狀病毒抗原。結(jié)果檢出輪狀病毒抗原陽性患兒1260例，陽性率為60.6%。將6個月～2歲嬰幼兒組與＜6個月嬰兒組、2～6歲幼兒三組作χ2檢驗，P＜0.05及P＜0.01，差異有統(tǒng)計學(xué)意義，表明6個月～2歲嬰幼兒為輪狀病毒感染的高發(fā)期。同一年齡組男女患兒間陽性率差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。結(jié)論糞便中輪狀病毒抗原檢測是診斷輪狀病毒腸炎較敏感的方法，對臨床診斷該病提供了有價值的依據(jù)。

輪狀病毒；嬰幼兒腹瀉；糞便；病毒抗原檢測；檢測分析

輪狀病毒（RV）是小兒急性胃腸炎，尤其是秋、冬季腹瀉的主要病因[1-2]，常導(dǎo)致水電解質(zhì)酸堿平衡紊亂，嚴(yán)重危害患兒身心健康甚至危及生命。為了解腹瀉患兒中輪狀病毒感染的情況，并探討輪狀病毒抗原檢測的臨床應(yīng)用價值。2012年1月至2015年10月采用輪狀病毒免疫層析金標(biāo)記技術(shù)方法，對本院2080例臨床診斷為秋冬季腹瀉患兒的糞便標(biāo)本進(jìn)行輪狀病毒抗原檢測，結(jié)合臨床資料分析，報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料：選擇2012年1月至2015年10月本院門診就診及住院的急性腹瀉患兒2080例，男1272例，女808例；門診1244例，住院836例。年齡在1～6個月以下384例，6個月～2歲1400例，2～6歲256例。所有患兒血液分析各細(xì)胞總數(shù)基本正常，淋巴細(xì)胞比例增高；部分患兒有嘔吐、脫水、發(fā)熱等臨床癥狀。病程＜3 d 420例，3～7 d 1228例，7 d以上432例。

1.2 試劑和方法

1.2.1 試劑：試劑盒由深圳市惠安生物科技有限公司生產(chǎn)，輪狀病毒檢測試條卡以雙抗體夾心法為基礎(chǔ)，采用免疫層析金標(biāo)記技術(shù)，快速檢測嬰幼兒糞便中Rota Virus抗原。檢測時一個抗體吸附在硝酸纖維素膜（NC）上，另一個抗體結(jié)合于膠體金顆粒表面，當(dāng)糞便標(biāo)本中含有Rota Virus抗原時，先與NC膜上面抗體結(jié)合，然后與金標(biāo)記抗體反應(yīng)，于是形成抗體-抗原-金標(biāo)記抗體的夾心式復(fù)合物，并呈現(xiàn)出紫紅色沉淀線。

1.2.2 方法：取適量糞便樣品放入裝有稀釋液的采便器內(nèi)。轉(zhuǎn)動采便棒，直到樣本溶入樣品稀釋液中。取出測試卡，平放干燥平面上。當(dāng)振蕩、混勻后，旋轉(zhuǎn)折斷試管上的蓋帽，垂直滴加3～4滴（120～150 μL）到測試卡中的樣品位。10～20 min內(nèi)報告結(jié)果，結(jié)果報告不可超過20 min。

1.2.3 結(jié)果判斷：測試卡出現(xiàn)兩條紅色線為陽性結(jié)果，測試卡只出現(xiàn)質(zhì)控線為陰性結(jié)果，測試卡不出現(xiàn)紅色線為無效，應(yīng)重新檢測。

1.3 統(tǒng)計學(xué)處理：采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件，多個計數(shù)資料的χ2檢驗，P＜0.05差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 不同年齡組腹瀉兒糞便輪狀病毒檢測結(jié)果：對2080例秋冬季腹瀉患兒的糞便標(biāo)本進(jìn)行RV抗原檢測，陽性1260例，陽性率60.6%，其中男696例，占陽性例數(shù)的55.2%，女564例，占44.8%；年齡6個月以下的156例占陽性例數(shù)的12.4%，6個月～2歲1024例占81.3%，2～6歲80例占6.3%。各年齡組輪狀病毒抗原檢出率見表1。將6個月～2歲嬰幼兒組、＜6個月嬰兒組、2～6歲幼兒組作比較，經(jīng)χ2檢驗，P＜0.05及P＜0.01，差異有統(tǒng)計學(xué)意義，可認(rèn)為6個月～2歲嬰兒為輪狀病毒感染的高發(fā)期。同時對3個年齡組中男、女患兒檢出率進(jìn)行統(tǒng)計分析，P＞0.05，說明輪狀病毒的感染在性別間差異無統(tǒng)計學(xué)意義。

表1 不同年齡組患兒輪狀病毒抗原的檢測結(jié)果

2.2 不同性狀糞便輪狀病毒的陽性率：6個月～2歲腹瀉兒HRV組陽性率以糞便蛋花湯樣49.9%最高。見表2。

表2 1260例陽性患兒不同糞便性狀陽性率

3 討 論

人類RV歸類于呼腸孤病毒科[3]，是嬰幼兒腹瀉的主要病原菌，不論發(fā)達(dá)國家還是發(fā)展中國家，RV的感染率和發(fā)病率都很高[4]。在我國由輪狀病毒引起的嬰幼兒急性腹瀉常常在秋冬季造成大范圍的流行，每年10～12月份是發(fā)病高峰，主要侵犯2歲以下的嬰幼兒，嚴(yán)重影響了兒童的健康發(fā)育。腹瀉嬰幼兒因病原體感染而引起腹瀉者占60.6%，與國內(nèi)報道相近，表明輪狀病毒仍然是導(dǎo)致嬰幼兒秋冬季腹瀉的主要病原體。

從表1可看出，各年齡組腹瀉患兒糞便中輪狀病毒抗原檢出率以6個月～2歲組最高，占71.1%，說明輪狀病毒引起的嬰幼兒腹瀉多發(fā)生在6個月～2歲的嬰幼兒，6個月以下的嬰兒和2歲以上的幼兒發(fā)病較少。＜6個月的嬰兒因從母體獲得抗體而得到部分保護(hù)，故＜6個月的嬰兒陽性率較低，而6個月～2歲正是很多嬰兒喂養(yǎng)方式轉(zhuǎn)變的時期，開始減少母乳喂養(yǎng)或完全停止，一旦來自母體的抗體水平下降后，自身免疫力下降，當(dāng)與病毒接觸時易被感染，于是形成輪狀病毒感染的高發(fā)期[5]。

在1260例陽性的大便常規(guī)檢查中，除108例有少許的脂肪滴外，還有56例有少量的WBC和RBC，20例隱血陽性，其余患者常規(guī)檢查均無異常，RV感染未引起大便中WBC、RBC及脂肪滴增多，其機(jī)制是輪狀病毒侵犯小腸絨毛頂端的柱狀上皮細(xì)胞時，小腸的柱狀上皮細(xì)胞發(fā)生一系列病理生理變化，使腸道吸收功能障礙，水分大量積聚于腸腔，引起水樣腹瀉，而不引起腸壁局部炎癥的發(fā)生。另外在1260例陽性患兒中，黃色稀水樣便4400例（34.9%），蛋花湯樣便628例（49.9%），綠色稀便92例（7.3%），黃色糊狀便72例（5.7%），褐色軟便28例（2.2%），可以看出輪狀病毒性腸炎的大便多為蛋花水樣或黃色稀水樣便，上述大便性狀特征為臨床診斷提供了參考價值。

綜上所述，糞便標(biāo)本的性狀與腹瀉患兒RV的陽性率有明顯的關(guān)系，小兒出現(xiàn)腹瀉時除查大便常規(guī)外，特別是對蛋花樣或稀水樣便，鏡檢無或偶有少量白細(xì)胞或少量脂肪球者[6]，還需檢測輪狀病毒，以確定病原菌。因此，輪狀病毒抗原的快速檢測對嬰兒腹瀉病原的早期診斷和鑒別診斷有重要的臨床應(yīng)用價值。

[1] 慕容洋洋,邊彤,江山.輪狀病毒抗原檢測患兒腹瀉臨床診斷價值與檢驗學(xué)研究[J].中華醫(yī)學(xué)檢驗雜志,2015,38(6):366-368.

[2] 周新.檢驗醫(yī)學(xué)指南[M].武漢:湖北科學(xué)技術(shù)出版社,2008:210-220.

[3] 葉應(yīng)嫵,王毓三,申子瑜.全國臨床檢驗操作規(guī)程[M].南京:東南大學(xué)出版社,2008:636-639.

[4] 陳軍華.輪狀病毒感染發(fā)病機(jī)制研究進(jìn)展[J].國外醫(yī)學(xué):兒科分冊,2015,16(31):237-239.

[5] 徐濤,金小軍.1760例小兒腸炎A群輪狀病毒檢測結(jié)果分析[J].檢驗醫(yī)學(xué)與臨床,2015,12(9):551-552.

[6] 李宏魁,鄒掌玉,吳雄.輪狀病毒感染致嬰幼兒腹瀉的檢測分析[J].臨床和實驗醫(yī)學(xué)雜志,2015,14(10):1582-1583.

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1671-8194（2017）11-0151-02