許裕紅

DOI：10.19392/j.cnki.16717341.201722210

摘要：作為原血常規(guī)主要儀器設(shè)備，血細(xì)胞分析儀可以提供眾多實(shí)驗(yàn)指標(biāo)，對(duì)診斷疾病具有重要意義，必須要保證其檢定結(jié)果的可靠性。

關(guān)鍵詞：血細(xì)胞分析儀；檢定方法；影響因素

血細(xì)胞分析儀在各級(jí)醫(yī)院中均得到了廣泛應(yīng)用，是臨床疾病診斷與鑒別診斷重要支持，這樣就決定了血細(xì)胞分析儀檢定的重要性。就日常檢定工作來看，很多情況下會(huì)因?yàn)橥獠恳蛩氐母蓴_，而出現(xiàn)細(xì)胞計(jì)數(shù)不準(zhǔn)確的情況，想要解決此類問題，前提是要明確問題發(fā)生原因，然后有針對(duì)性的采取措施進(jìn)行優(yōu)化，提高檢定過程的規(guī)范性，排除標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)、人為操作以及儀器試劑等因素帶來的影響。

一、血細(xì)胞分析儀檢定影響因素

（一）儀器檢測(cè)技術(shù)

血細(xì)胞分析儀主要分為機(jī)械系統(tǒng)、細(xì)胞檢測(cè)系統(tǒng)、電學(xué)系統(tǒng)以及計(jì)算機(jī)控制系統(tǒng)等幾部分組成，且以檢測(cè)系統(tǒng)對(duì)最終檢定結(jié)果準(zhǔn)確性影響最大。目前我國(guó)所用血細(xì)胞分析儀，檢測(cè)技術(shù)多為電阻抗檢測(cè)與光散射檢測(cè)，應(yīng)將其作為主要影響因素進(jìn)行分析。

1.電阻抗檢測(cè)

應(yīng)用電阻抗檢測(cè)方法，即在待測(cè)稀釋液內(nèi)設(shè)置一微孔，并在微孔兩端添加電壓電極，按照一定比例進(jìn)行稀釋處理后，利用負(fù)壓吸引使其通過儀器微孔小管。與稀釋液相比血細(xì)胞電導(dǎo)性較低，這樣液體細(xì)胞顆粒在通過微孔時(shí)，電極間電阻將會(huì)出現(xiàn)瞬間變化，形成電脈沖信號(hào)，只需要完成電脈沖計(jì)數(shù)便可確定血細(xì)胞顆粒數(shù)量。其中，顆粒體積大小可以由脈沖幅度表示，通過對(duì)不同細(xì)胞對(duì)應(yīng)脈沖幅度便可判斷細(xì)胞種類，最后通過放大、調(diào)節(jié)閾值、甄別、整形、計(jì)數(shù)后便可得到檢驗(yàn)結(jié)果[1]。在整個(gè)過程中，雖然操作簡(jiǎn)單快速，并且成本較低，但是因?yàn)樵O(shè)計(jì)因素的限制，并不能有效對(duì)細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)進(jìn)行有效甄別，如果液體內(nèi)幼稚白細(xì)胞數(shù)量較多，會(huì)很大程度上降低白細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果準(zhǔn)確性。同樣核紅細(xì)胞增多時(shí)，對(duì)于白細(xì)胞分群與計(jì)數(shù)準(zhǔn)確性降低。

2.光散射檢測(cè)

電阻抗檢測(cè)技術(shù)在實(shí)際應(yīng)用中存在較大缺陷，在血細(xì)胞分析儀不斷更新背景下，光散射檢測(cè)實(shí)現(xiàn)了對(duì)電阻抗檢測(cè)技術(shù)的有效補(bǔ)充，可進(jìn)一步提高檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確性。檢測(cè)過程中按照一定比例對(duì)待檢測(cè)血液進(jìn)行稀釋處理，使其形成一個(gè)極細(xì)的液流穿過激光束，通過激光束照射，每個(gè)細(xì)胞均會(huì)產(chǎn)生光散射，由光電倍增管接收[2]。應(yīng)用此種方法可以實(shí)現(xiàn)對(duì)白細(xì)胞進(jìn)行詳細(xì)分類，包括三分類、五分類以及九分類。并且在進(jìn)行紅細(xì)胞計(jì)數(shù)時(shí)，可以結(jié)合電阻抗方法對(duì)紅細(xì)胞體積進(jìn)行三維空間分析，保證計(jì)數(shù)結(jié)果的準(zhǔn)確性。同時(shí)，結(jié)合比色法對(duì)血紅蛋白計(jì)數(shù)，可以通過光散射法分析單個(gè)紅細(xì)胞血紅蛋白，可有效降低高白細(xì)胞等因素對(duì)血紅蛋白學(xué)比色的影響。

（二）儀器試劑影響

所用儀器試劑不同，也會(huì)對(duì)最終檢定結(jié)果產(chǎn)生影響，其中常見的儀器試劑包括稀釋液、溶血素以及清洗劑等。

1.稀釋液

血細(xì)胞分析儀計(jì)量鑒定，主要是利用稀釋液對(duì)血液細(xì)胞進(jìn)行稀釋處理，避免出現(xiàn)聚集或粘連問題，同時(shí)還可以維持血液pH與ρ等理化指標(biāo)的穩(wěn)定。不同血細(xì)胞分析儀，對(duì)稀釋液的理化指標(biāo)要求差異明顯，將電阻抗法應(yīng)用到不同儀器上，設(shè)定的脈沖信號(hào)閾值存在差異。如果在實(shí)際檢定中，稀釋液理化指標(biāo)不合格，必定會(huì)對(duì)檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確性產(chǎn)生影響，包括白細(xì)胞分類不細(xì)、血小板本底高等。因此需要合理選擇檢定用稀釋液，尤其是對(duì)于長(zhǎng)時(shí)間放置的試劑，要避免因?yàn)橹亓Τ两翟斐扇芤翰环€(wěn)定性帶來的計(jì)數(shù)誤差較大問題的發(fā)生。

2.溶血素

通過應(yīng)用溶血素來對(duì)血細(xì)胞進(jìn)行溶解，便于白細(xì)胞的可靠計(jì)數(shù)，同時(shí)作用于白細(xì)胞膜，還可以使得白細(xì)胞膜穿孔，胞漿流失后進(jìn)行內(nèi)核檢測(cè)。對(duì)于溶血素的質(zhì)量，多通過吸光度、吸收峰波長(zhǎng)、pH值以及空白值等指標(biāo)來衡量試劑質(zhì)量。如果吸收峰波長(zhǎng)、吸光度等不符合要求，將會(huì)對(duì)比色法測(cè)量血紅蛋白結(jié)果準(zhǔn)確性產(chǎn)生影響。如果所用溶血素溶血不完全，無法對(duì)紅細(xì)胞造成有效破壞，會(huì)直接將紅細(xì)胞當(dāng)做白細(xì)胞計(jì)數(shù)，使得最終白細(xì)胞計(jì)數(shù)增多。

3.清洗劑

主要利用清洗劑進(jìn)行管道、計(jì)數(shù)池以及檢測(cè)小孔周圍沉積、污染蛋白的清除，可根據(jù)儀器要求在每次檢測(cè)完成或者關(guān)機(jī)時(shí)使用。市場(chǎng)上清洗劑質(zhì)量偏差較大，應(yīng)選擇活性酶含量多的清洗劑，可對(duì)管道、計(jì)數(shù)池所沉積蛋白進(jìn)行可靠去除，但是此種試劑保質(zhì)期較短，且成本高實(shí)用性較低。清洗劑效果往往需要經(jīng)過一段時(shí)間后才能夠體現(xiàn)，如果所用清洗劑質(zhì)量較差，將會(huì)造成管道、計(jì)數(shù)池發(fā)硬、變性、變色以及堵塞等，還會(huì)改變液體壓力，測(cè)量結(jié)果漂移，影響最終檢定結(jié)果準(zhǔn)確性。在實(shí)際應(yīng)用中，務(wù)必要選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的清洗劑，爭(zhēng)取將系統(tǒng)誤差控制在最小。

二、血細(xì)胞分析儀示值誤差檢定分析

在對(duì)血細(xì)胞分析儀示值誤差進(jìn)行檢定時(shí)，可以從儀器常用測(cè)量范圍內(nèi)選擇3～5種不同濃度血細(xì)胞標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，且首次檢測(cè)必須要選擇5種，對(duì)其進(jìn)行均勻混合后，連續(xù)測(cè)量5次，最后根據(jù)測(cè)定結(jié)果計(jì)算得到儀器示值相對(duì)誤差，△T。選擇絕對(duì)值最大△T作為儀器紅細(xì)胞技術(shù)濃度、白細(xì)胞計(jì)數(shù)濃度、血紅蛋白濃度以及血小板示值誤差檢定結(jié)果。其中，血細(xì)胞分析儀示值誤差計(jì)算公式為：

三、結(jié)語

血細(xì)胞分析儀為醫(yī)院血常規(guī)檢測(cè)的重要儀器，為保證其檢定結(jié)果的準(zhǔn)確性，需要基于其技術(shù)特點(diǎn)，總結(jié)各影響因素，然后通過可靠措施進(jìn)行調(diào)整優(yōu)化，爭(zhēng)取為后續(xù)病情診斷以及治療提供可靠依據(jù)。

參考文獻(xiàn)：

[1]陳余君，馮瑤.血細(xì)胞分析儀計(jì)量檢定中細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果的影響因素[J].計(jì)量與測(cè)試技術(shù)，2011，38（11）：911.

[2]趙鵬.血細(xì)胞分析儀主要技術(shù)指標(biāo)超差的原因及“定期檢定”的重要性[J].甘肅科技縱橫，2007，（06）：200.