任飛宇

(內(nèi)蒙古自治區(qū)烏蘭察布市中心醫(yī)院，內(nèi)蒙古 集寧 012000)

HPLC法測(cè)定達(dá)斡爾習(xí)用藥材柳蒿芽不同部位中金絲桃苷的含量

任飛宇

(內(nèi)蒙古自治區(qū)烏蘭察布市中心醫(yī)院，內(nèi)蒙古 集寧 012000)

目的：建立民族藥材柳蒿芽中金絲桃苷的HPLC測(cè)定方法。方法： HPLC法，流動(dòng)相：甲醇-水-磷酸-三乙胺溶液(25：30：0.1：0.15)，流速：1.0mL·min-1，檢測(cè)波長(zhǎng)：350nm，柱溫：30℃。結(jié)果：金絲桃苷在0.007～0.464μg范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系，r=0.9999；平均回收率為98.56%，RSD為0.82%(n=6)。柳蒿芽不同部位金絲桃苷含量，葉0.29%、莖0.24%，根0.06%，金絲桃苷平均含量為0.197%。結(jié)論：HPLC法測(cè)定柳蒿芽中金絲桃苷含量，方法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、快速，可做為柳蒿芽質(zhì)量評(píng)價(jià)方法之一。

HPLC法；柳蒿芽；金絲桃苷

柳蒿芽學(xué)名蔞蒿Artemisin Selengensis Turcz，是菊科屬多年草本植物，又名柳葉蒿、香葉蒿，蒙古名庫木勒，既可食用，也可全草入藥，是達(dá)斡爾人藥食兩用的野生植物，具有養(yǎng)肝健胃、清熱解毒作用[1]。藥理學(xué)研究表明，柳蒿芽有降壓、降血脂、抗氧化、耐缺氧、免疫調(diào)節(jié)、消炎作用[2]?；瘜W(xué)成分主要有蘆丁、胡蘿卜素、谷甾醇、芹菜素、木犀草素、揮發(fā)油類[2]。本文建立藥材金絲桃苷HPLC的質(zhì)量評(píng)價(jià)方法，報(bào)道如下。

1 儀器與試劑

1.1 儀器：1100型高效液相色譜儀 (美國(guó)安捷倫公司)，SPD-2A紫外檢測(cè)器(島津)，TJ-912型色譜分析平臺(tái)(太極計(jì)算機(jī)公司)，IN-180型柱溫箱(上海英泰科技研究所)，SH6150D超生波清洗器(上海昆山)，電子天平(梅特勒)。

1.2 試藥：金絲桃苷對(duì)照品(111521-200303)由中國(guó)藥品生物制品檢定所提供；甲醇為色譜純；其他均為分析純?cè)噭?；水為純化水；柳蒿芽?014年6月采自內(nèi)蒙古和林格爾南天門林場(chǎng)。

2 實(shí)驗(yàn)方法與結(jié)果

2.1 色譜條件：Kromasi -C18柱(200mm×4.6mm,5μm)；流動(dòng)相：甲醇-水-磷酸-三乙胺溶液(25：30：0.1：0.15)；流速：1mL·min-1；溫度：30℃；檢測(cè)波長(zhǎng)：350nm nm；進(jìn)樣量10μL。在此條件下待測(cè)組分可達(dá)到基線分離。樣品中金絲桃苷與其它組分有較好的分離，見圖1。

2.2 對(duì)照品溶液的制備：精密稱取金絲桃苷對(duì)照品適量，加甲醇制成0.58mg·mL-1的溶液，即得。

2.3 供試品溶液的制備：取本品干燥、粉碎，過篩，精密稱定400mg，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇10mL，稱質(zhì)量，超聲處理30min ，放冷，稱重，用甲醇補(bǔ)足減失的質(zhì)量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液備用，即得。

2.4 線性關(guān)系考察：精密吸取對(duì)照品溶液0.1、0.2、0.4、1、2、4、8mL,分別加到10mL量瓶中，加甲醇稀釋到刻度，搖勻，注入高效液相色譜儀，測(cè)定峰面積；以峰面積為縱坐標(biāo)(Y)，進(jìn)樣量為橫坐標(biāo)(X)做線性回歸, 回歸方程為Y = 2284159 X +58465，r=0.9999。結(jié)果表明，金絲桃苷在0.0058～0.464μg范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。

2.5 穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)：取同1份供試品溶液，分別在0，2，4，8h進(jìn)樣測(cè)定，以金絲桃苷峰面積值計(jì)算RSD為0.36%。結(jié)果表明，供試品溶液在8h內(nèi)穩(wěn)定。

2.6 精密度實(shí)驗(yàn)：吸取同一批供試品溶液，在上述色譜條件下重復(fù)進(jìn)樣6次，測(cè)得金絲桃苷峰面積RSD為0.42%，符合測(cè)定要求。

2.7 重復(fù)性實(shí)驗(yàn)：取同批藥材(葉)按2.3項(xiàng)下平行制備6份樣品溶液，并按2.1項(xiàng)下測(cè)定，金絲桃苷的平均含量為0.29%， RSD=1.21%，符合測(cè)定要求。

2.8 加樣回收率實(shí)驗(yàn)：取同批藥材(葉)已知含量的樣品6份，每份取約300mg，精密稱定，精密加入金絲桃苷對(duì)照品溶液0.2 mL(0.58 mg/mL)，按2.3項(xiàng)下制備樣品溶液，同法操作，測(cè)定含量，計(jì)算回收率。結(jié)果，金絲桃苷平均回收率為98.56%，RSD為0.82%，符合測(cè)定要求。

3 樣品測(cè)定

按2.3 項(xiàng)下方法制備供試品溶液，按擬定的色譜條件測(cè)定柳蒿芽不同部位金絲桃苷含量，葉0.29%、莖0.24%，根0.06%，柳蒿芽金絲桃苷平均含量0.197%。

4 小結(jié)

柳蒿芽為達(dá)斡爾人習(xí)用的野菜，營(yíng)養(yǎng)豐富、美味可口、風(fēng)味獨(dú)特，特別對(duì)于脾胃肝腎受損或亞健康狀態(tài)者極為適合。目前市場(chǎng)有售，多為由人工栽培品。藥理學(xué)研究已經(jīng)證實(shí)，柳蒿芽無毒副作用，具有調(diào)節(jié)血脂、血糖、抗氧化作用，是一個(gè)具有開發(fā)潛力，藥食同源的藥材。本文初步建立柳蒿芽有效成分含量測(cè)定方法，為柳蒿芽的進(jìn)一步的研究開發(fā)提供參考數(shù)據(jù)。

[1]托亞，金曉紅.達(dá)翰爾人喜食-柳蒿芽[J].中國(guó)民間療法,2007,8(15)：10.

[2]董強(qiáng).東北林業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文[D].2010

2016年10月11日收稿

R292.2

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1006-6810(2017)01-0045-02