侯 俐，宋曉婕，印賢琴，張 清，田 萍，劉麗平，程 春

（武漢市婦女兒童醫(yī)療保健中心婦產(chǎn)科，武漢 430000）

URSA患者血清IL-2、IL-10及MCP-1與細胞免疫功能相關(guān)性研究

侯 俐，宋曉婕，印賢琴，張 清，田 萍，劉麗平，程 春

（武漢市婦女兒童醫(yī)療保健中心婦產(chǎn)科，武漢 430000）

目的：探究原因不明復(fù)發(fā)性流產(chǎn)（URSA）患者外周血中IL-2、IL-10及MCP-1與細胞免疫功能相關(guān)性。方法：選取2014年6月～2016年4月我院收治的71例原因不明復(fù)發(fā)性流產(chǎn)患者作為觀察組，選取76例行人工流產(chǎn)的婦女作為對照組。結(jié)果：觀察組患者E2水平明顯高于對照組，差異具有統(tǒng)計學意義；觀察組患者IL-2水平高于對照組，觀察組患者血清IL-10、MCP-1水平低于對照組，差異均具有統(tǒng)計學意義；觀察組患者CD4+、CD8+及CD4+/CD8+水平明顯高于對照組，差異均具有統(tǒng)計學意義；觀察組患者血清IL-2與CD4+/CD8+呈現(xiàn)正相關(guān)，IL-10、MCP-1與CD4+/CD8+呈現(xiàn)負相關(guān)。結(jié)論：URSA可能與體內(nèi)Th1/Th2細胞因子失衡有關(guān)，IL-2，IL-10、MCP-1異常表達可能會引起免疫功能異常從而引發(fā)復(fù)發(fā)性流產(chǎn)。

原因不明復(fù)發(fā)性流產(chǎn)；白細胞介素-2；白細胞介素-10；單核細胞趨化蛋白

原因不明復(fù)發(fā)性流產(chǎn)（Unexplained recurrent spontaneous abortion，URSA）是一種由于不明原因引起的妊娠28周內(nèi)多于2次以上的自然流產(chǎn)，其病因較為復(fù)雜多樣［1］，占復(fù)發(fā)性流產(chǎn)婦女的一般以上，對廣大育齡期婦女的生殖健康危害較大，臨床上難防難治。近年來有研究指出，引起婦女發(fā)生URSA的病因可能與母體免疫功能異常有關(guān)［2，3］，其中母體內(nèi)免疫細胞異常分泌的大量細胞因子可能對胚胎的發(fā)育和生產(chǎn)產(chǎn)生不良的影響，這可能與Th1與Th2型細胞因子分泌失衡有關(guān)［4］。此外單核細胞趨化蛋白（MCP-1）具有趨化性，可激活體內(nèi)中性粒細胞、淋巴細胞、單核細胞的活性，產(chǎn)生大量細胞因子，可能會對URSA的發(fā)生產(chǎn)生影響。本文主要通過探究URSA患者外周血中IL-2、IL-10及MCP-1與細胞免疫功能相關(guān)性，為URSA治療和發(fā)病機制的研究提供參考。

1 資料與方法

1.1 研究對象 選取2014年6月～2016年4月我院收治的71例原因不明復(fù)發(fā)性流產(chǎn)患者作為觀察組，平均年齡（28.9±2.1）歲，平均停經(jīng)時間（59.1±4.3）d。選取76例行人工流產(chǎn)的婦女作為對照組，其平均年齡（29.4±2.8）歲，平均停經(jīng)時間（58.6±5.2）d。兩組患者在年齡、體質(zhì)指數(shù)（BMI）、停經(jīng)時間、吸煙及飲酒史資料比較上，差異均無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），組間具有可比性，詳細情況見表1。

觀察組患者診斷按照《實用婦產(chǎn)科學（第二版）》中URSA診斷標準［5］進行，觀察組患者自然流產(chǎn)2次及以上，彩超提示有胎芽，無胎心搏動。排除性染色體異常、生殖器官病變及異常、高血糖、甲狀腺激素異常、生殖系統(tǒng)細菌性感染、凝血功能障礙、自身免疫性疾病及長期服用化療及免疫抑制劑的患者。

1.2 檢測方法 抽取兩組患者靜脈血5mL，離心后（1500r/min）取其上層血清置于-20攝氏度環(huán)境下進行保存。采用性激素六項試劑盒分別測量兩組患者促卵泡成熟激素（FSH）、催乳素（PRL）、促黃體生成素（LH）、雌二醇（E2）、睪酮（T）水平。采用酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）法對兩組患者血清中白細胞介素-2（IL-2）、白細胞介素-10（IL-10）及單核細胞趨化蛋白（MCP-1）水平進行測定。采用流體細胞儀測定兩組患者外周血中CD4+、CD8+細胞亞群的百分率。

1.3 觀察指標 兩組患者性激素FSH、PRL、LH、E2、T水平比較；血清IL-2、IL-10及MCP-1水平比較；CD4+、CD8+及CD4+/CD8+水平比較；觀察組患者血清IL-2、IL-10、MCP-1與CD4+/CD8+相關(guān)性分析。

1.4 統(tǒng)計學方法 采用SPSS21.0軟件對收集的數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析。計量資料以均數(shù)±標準差表示，進行t檢驗。計數(shù)資料使用卡方（χ2）檢驗。相關(guān)性分析采用Pearson相關(guān)性檢驗。P＜0.05定義為差異具有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者性激素水平比較 觀察組患者E2水平明顯高于對照組，差異具有統(tǒng)計學意義（t=3.592，P＜0.001），兩組患者在FSH、PRL、LH、T激素水平比較上，差異均無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。詳細情況見表2。

表2 兩組患者性激素水平比較

2.2 兩組患者血清IL-2、IL-10及MCP-1水平比較

觀察組患者IL-2水平高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義（t=20.90，P＜0.001），觀察組患者血清IL-10（t=21.68，P＜0.001）、MCP-1（t=6.037，P＜0.001）水平低于對照組，差異均具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。詳見表3。

表3 兩組患者血清IL-2、IL-10及MCP-1水平比較

2.3 兩組患者免疫功能相關(guān)指標比較 觀察組患者CD4+（t=9.841，P＜0.001）、CD8+（t=2.305，P=0.023）及CD4+/CD8+（t=4.669，P＜0.001）水平明顯高于對照組，差異均具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。

表4 兩組患者CD4+、CD8+及CD4+/CD8+水平比較

2.4 觀察組患者血清IL-2、IL-10、MCP-1與CD4+/ CD8+相關(guān)性分析 經(jīng)Pearson檢驗發(fā)現(xiàn)，IL-2、IL-10、MCP-1與CD4+、CD8+均無線性相關(guān)關(guān)系，而觀察組患者血清IL-2與CD4+/CD8+呈現(xiàn)正相關(guān)（r=0.479，P＜0.001），IL-10、MCP-1與CD4+/CD8+呈現(xiàn)負相關(guān)（r=-0.512，-0.421；P＜0.001）。詳見圖1。

圖1 觀察組患者血清IL-2、IL-10、MCP-1與CD4+/CD8+相關(guān)性分析

3 討論

導(dǎo)致復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的病因較多，目前臨床上認為與母體染色體異常、體內(nèi)激素分泌異常、生殖系統(tǒng)感染、生殖器官病變與先天性異常等因素有關(guān)?？擅鞔_病因的復(fù)發(fā)性流產(chǎn)患者只占50%左右，另外50%的URSA的病因現(xiàn)如今尚未研究清楚［6］。但有學者認為可能與母胎界面免疫耐受、甲狀腺抗體水平上調(diào)、胎盤血供不足等原因有關(guān)［7，8］。盡早明確URSA發(fā)病機制對其早期防治具有重要的臨床價值與意義。

本研究發(fā)現(xiàn)，觀察組患者E2水平明顯高于對照組，差異具有統(tǒng)計學意義，說明體內(nèi)E2水平異常升高可能會URSA的發(fā)生。E2是由卵巢成熟濾泡分泌的一種性激素，對婦女生殖器官的發(fā)育起到重要的作用，其異常上升高可能與卵巢早衰癥狀的出現(xiàn)有關(guān)［9］。IL-2主要由CD4 Th1型細胞產(chǎn)生，能夠促進白血球的活性，此外還能誘導(dǎo)NK細胞的增殖，可與TNF-a因子協(xié)同作用產(chǎn)生細胞毒作用［10］。IL-10是一種負性調(diào)節(jié)因子，主要由Th2細胞產(chǎn)生，可以拮抗相關(guān)炎癥介質(zhì)，起到下調(diào)炎癥反應(yīng)的作用［5］。MCP-1對單核和淋巴細胞具有較強的趨化作用，此外妊娠反應(yīng)中滋養(yǎng)葉細胞中也可分泌少量MCP-1，隨著孕周的增加，孕婦MCP-1的水平上升明顯，與胚胎的發(fā)育密切相關(guān)［11］。我們研究發(fā)現(xiàn)，觀察組患者IL-2水平高于對照組，觀察組患者血清IL-10、MCP-1水平低于對照組，差異均具有統(tǒng)計學意義，說明URSA可能與血清中IL-2上調(diào)，IL-10、MCP-1下調(diào)有關(guān)，可間接反映體內(nèi)Th1/Th2型細胞因子分泌失衡，有研究表明，Th2型細胞及相關(guān)細胞因子異常表達可能會造成產(chǎn)婦發(fā)生自然流產(chǎn)［12］。與本研究結(jié)果一致。此外，觀察組患者CD4+、CD8+及CD4+/CD8+水平明顯高于對照組，提示USRA的發(fā)生與體內(nèi)免疫功能異常有關(guān)，有研究指出，孕婦CD4+水平升高可能會引起排斥反應(yīng)增強，CD8+上調(diào)可抑制體內(nèi)細胞免疫，抑制超敏反應(yīng)的發(fā)生［13］。觀察組患者血清IL-2與CD4+/CD8+呈現(xiàn)正相關(guān)，IL-10、MCP-1與CD4+/CD8+呈現(xiàn)負相關(guān)，說明URSA的發(fā)生與體內(nèi)免疫功能失衡有關(guān)，CD4+/CD8+比值上調(diào)可能與體內(nèi)Th1/Th2細胞因子失衡有關(guān)，可為臨床治療提供依據(jù)。

綜上所述，URSA可能與體內(nèi)Th1/Th2細胞因子失衡有關(guān)，IL-2，IL-10、MCP-1異常表達可能會引起免疫功能異常從而引發(fā)復(fù)發(fā)性流產(chǎn)。

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The study on correlation of serum IL-2, IL-10, MCP-1 with cellular immune function in URSA patients

Hou Li, Song Xiao-jie, Yin Xian-qin, Zhang Qing, Tian Ping, Liu Li-ping, Chen Chun
(Women and Children Health Care Center In Wuhan City, Wuhan, 430000 China)

Objective To investigate correlation of serum IL-2, IL-10, MCP-1 with cellular immune function in URSA patients. Methods 71 cases of unexplained recurrent spontaneous abortion were selected as the observation group from April 2016 to June 2014, 76 women with artificial abortion were selected as the control group. Results The level of E2 in the observation group was significantly higher than control group, the difference was statistically significant; IL-2 of the observation group was higher than the control group, serum IL-10, MCP-1level is lower than the control group, the differences were statistically significant; CD4+, CD8+and CD4+/CD8+ levels in observation group were significantly higher than the control group, the difference was statistically significant; IL-2of observation group showed positive correlation with CD4+/CD8+, IL-10, MCP-1 showed a negative correlation with CD4+/CD8+. Conclusions URSA may be related to the imbalance of Th1/Th2 cytokine in vivo, IL-2, IL-10, MCP-1 abnormal expression may cause abnormal immune function and thus lead to recurrent abortion.

unexplained recurrent spontaneous abortion; IL-2; IL-10; MCP-1

R714.21

A

1673-016X（2017）02-0122-03

2017-01-21

侯俐，E-mail:chen1juan2@163. com