李慶勇

[摘要]目的：確定婦寧袋泡劑的制備工藝。方法：以出粉率為指標(biāo)優(yōu)選粉碎工藝，以總黃酮含量和出膏率為指標(biāo)，采用正交實驗法對其水提取工藝進(jìn)行優(yōu)選，并對其成型工藝進(jìn)行研究。結(jié)果：其中益母草、紫草部分藥材打粉，其余藥材采用水提取工藝，最佳工藝為提取3次，第1次加水8倍水，第2、3次分別加水6倍水，每次提取40min。濃縮液的相對密度為1.09～1.11（60℃）的浸膏，并吸收到藥材粗末中，經(jīng)干燥，分裝入濾袋中即得。結(jié)論：優(yōu)選的提取工藝穩(wěn)定可行，選擇的制備工藝有效，可適應(yīng)醫(yī)療機(jī)構(gòu)制劑生產(chǎn)的需求。

[關(guān)鍵詞]婦寧袋泡劑；制備工藝；成型工藝

婦寧袋泡茶主要由益母草、蒲黃、紫草等組成，是廣東省第二中醫(yī)院臨床實踐應(yīng)用多年的經(jīng)驗處方，具有活血化瘀止血的功效，主治人工流產(chǎn)、藥物流產(chǎn)術(shù)后陰道出血。對縮短人工流產(chǎn)術(shù)后陰道出血時間和減少陰道出血量，預(yù)防感染，治療藥物流產(chǎn)不全，放置節(jié)育器后陰道出血具有較好的療效。為進(jìn)一步提高本方劑的療效，保證制劑質(zhì)量，方便患者攜帶和改進(jìn)傳統(tǒng)中藥煎煮過程繁瑣、不利于現(xiàn)代都市人使用的特點，擬將其開發(fā)為袋裝茶劑，既保持原湯劑的特色和優(yōu)勢，又可為形成特色?？浦委熖峁┮罁?jù)。

1.儀器與試藥

SF-170-3型粉碎機(jī)，DZF-6050型真空干燥箱（上海一恒科技有限公司），RE-98A旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器（上海亞榮生化儀器廠），BP211D型電子分析天平（德國Sartorius公司），UV-2500紫外分光光度（島津）。蘆丁對照品（080-9303）購于中國藥品生物制品檢定所；益母草、蒲黃、紫草均由本院藥房提供。

2.方法與結(jié)果

通過對文獻(xiàn)資料的研究，總結(jié)出本處方同功能主治及現(xiàn)代藥理作用相關(guān)的主要有效成分主要存在于水提取液中，結(jié)合生產(chǎn)可行性和生產(chǎn)設(shè)備條件，確定本品采用部分藥材水煎煮提取、濃縮得浸膏，再將余下的藥材打粉、吸收浸膏，通過混勻干燥等過程，制備成半生藥型袋裝茶劑。

2.1益母草、紫草的粉碎工藝考察 按處方比例，稱取益母草、紫草藥材飲片3Kg，加入適量70%乙醇使藥材表面充分濕潤，密閉24h，烘干。取消毒處理后的藥材三份，每份500g，粉碎成粗粉，稱重，計算得粉率，結(jié)果三批藥材干燥后的出粉率分別為95.64%、93.64%、94.61%，均達(dá)90%以上，符合要求，說明益母草、紫草的粉碎工藝穩(wěn)定可行。

2.2水提取條件的優(yōu)選 以干膏收率和總黃酮含量為評價指標(biāo)，對水煎煮提取工藝過程中，影響提取效果的加水量、浸泡時間、提取時間和提取次數(shù)進(jìn)行考察。

2.2.1樣品的制備 按處方比例稱取藥材100g，按實驗設(shè)計的方法進(jìn)行提取，過濾，濾液減壓濃縮，定容至適量，測定藥液中固形物的含量和總黃酮的含量。

2.2.2得膏率的測定 取各試驗號濃縮液10mL于干燥至恒重的蒸發(fā)皿中，水浴蒸干，105℃干燥至恒重，取出，放冷，精密稱重，即得。計算公式：得膏率（%）=W×V/10×Wt×100%（W為10mL濃縮液中干浸膏重量，V為定容體積，Wt為藥材重量）

2.2.3總黃酮含量測定

2.2.3.1對照品溶液的制備 精密稱取蘆丁對照品5.0mg，置25mL容量瓶，加甲醇至刻度，搖勻，即為每mL含蘆丁0.20mg的對照品溶液。

2.2.3.2供試品溶液的制備 精密吸取各樣品溶液10mL，用水飽和的正丁醇振搖提取3次，每次30mL，棄去正丁醇層，水層轉(zhuǎn)移至蒸發(fā)皿，水浴蒸干至適量，用蒸餾水稀釋定容至10mL容量瓶。

2.2.3.3標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 分別精密移取蘆丁對照品溶液0.0、0.5、1.0、2.0、4.0、5.0、6.0mL分別置25mL量瓶中，加5%亞硝酸鈉溶液1.0mL，搖勻，放至6min，再加10%硝酸鋁溶液1.0mL，放置6rain，加4%的NaOH 10mL，用蒸餾水稀釋至刻度，放置15min，以0.0mL樣品為空白對照，于503nm處測定吸光度，以蘆丁濃度（C）為橫坐標(biāo)，吸光度（A）為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，回歸方程為：Y=12.604X-0.0006，r=0.9998。結(jié)果表明蘆丁含量在0.004～0.048mg/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

2.2.3.4總黃酮含量的測定 分別精密吸取已配制好的供試品溶液各lmL，照“標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制”項下操作，于503nm波長下測定吸光度。

2.2.4吸水率的考察 按處方比例，稱取藥材三份，每份100g，加20倍量的水浸泡，每隔1h觀察一次浸透心情況，直至藥材全部浸透，濾過，量取濾液體積，計算藥材吸水率，求得藥材平均吸水率為290.3%。

2.2.5浸泡時間的考察 按處方比例，稱取藥材三份，每份100g，分別在浸泡0、2、4h后回流提取2次，每次加8倍，提取1h，濾過，合并濾液，濃縮定容至100mL，分別測定干膏得率和總黃酮含量，結(jié)果總黃酮含量分別為4.64、4.69、4.58mg/mL；得膏率分別為6.87%、7.02%、7.06%，說明浸泡時間對總固物和總黃酮的提取率沒有明顯的影響。

2.2.6正交設(shè)計優(yōu)選提取工藝 采用正交設(shè)計法，以濃縮液總黃酮含量和干膏得率為評價指標(biāo)，對加水量，提取次數(shù)，提取時間進(jìn)行考察，因素水平見表1。采用綜合評價法對試驗結(jié)果進(jìn)行評價，考慮到黃酮類化合物是有效成分之一，因此，評價時選擇總黃酮含量權(quán)重系數(shù)定為0.6。而作為有效成分煎出間接控制的一個指標(biāo)，藥效物質(zhì)提取的多少可以從干膏得率的大小來判斷，權(quán)重系數(shù)定為0.4。實驗方案及結(jié)果見表2、表3。

綜合評分值=（60/最大總黃酮含量）×總黃酮含量+（40/最大固形物含量）×固形物含量）。

由直觀分析可知，影響提取效果的因素順序為：提取次數(shù)（C）>加水量（A）>提取時間（B），由此得出的最佳工藝組合為A383C3。經(jīng)過方差分析，提取次數(shù)有顯著性影響，而加水量和提取時間均無顯著性影響。綜合考慮各因素，選擇提取三次，第1次加水8倍水，第2、3次分別加水6倍水，每次提取40min。即A2.1.1B1C3。

2.2.7驗證實驗 為確定工藝的優(yōu)劣和穩(wěn)定性，據(jù)所篩選的最佳條件進(jìn)行三批驗證試驗，結(jié)果總黃酮含量分別為6.81、6.66、6.54mg/mL，平均含量6.67mg/mL；得膏率分別為9.82%、9.65%、10.09%，平均得膏率為9.85%，說明驗證試驗結(jié)果與正交試驗優(yōu)選結(jié)果接近，選出的工藝條件基本合理穩(wěn)定可行。

2.3濃縮方法的確定 提取液濃縮的常用方法有減壓濃縮和常壓濃縮，考慮到GPP對制劑工藝的要求以及醫(yī)院現(xiàn)有的設(shè)備條件，本提取液的濃縮方法選用真空濃縮，適用設(shè)備有真空濃縮罐、單效或雙效真空濃縮器，優(yōu)點：濃縮效率高、溫度低，操作過程與外界隔絕，符合GPP對設(shè)備的要求。

2.4制劑成型工藝研究 半生藥型袋泡茶是將部分藥材粉碎成粗粉，部分藥材煎汁，濃縮成浸膏后吸收到藥材粗末中，經(jīng)干燥，分裝入濾袋中即得。因此藥液的濃縮密度、藥粉的粒度、用量是至關(guān)重要的。

2.4.1藥液濃縮密度的考察 取提取液三份，每份相當(dāng)于1167g藥材，分別濃縮成相對密度1.05、1.10、1.15（60℃），稱重，分別加入233g益母草、紫草混合粗粉，攪拌是藥材充分吸收濃縮液，放置2h，觀察藥材粗粉對濃縮液的吸收情況（見表4）。

結(jié)果表明，當(dāng)藥液濃縮至相對密度1.10時，藥材粗粉可以完全吸收濃縮液，因此，確定濃縮液的相對密度為1.09～1.11（60℃）。

2.4.2臨界相對濕度的測定 配制不同飽和鹽溶液，分別置于玻璃干燥器中，恒溫20℃放置48h，使其內(nèi)部濕度平衡構(gòu)成不同相對濕度場（RH）的環(huán)境，在己干燥恒重的稱量瓶中放入約5g按處方5比例配制的顆粒，平鋪于瓶底，厚約2mm，稱重，并干燥至恒重，精密稱定，打開稱量瓶蓋，放入上述不同的RH干燥器中，吸濕至恒重，精密稱重，計算吸濕率，測定其CRH。并以吸濕百分率數(shù)據(jù)為縱坐標(biāo)，相對濕度數(shù)據(jù)為橫坐標(biāo)作圖，結(jié)果婦寧袋泡茶的臨界相對濕度為70%，故在生產(chǎn)本制劑時，應(yīng)考慮適宜的包裝材料和貯存條件（見表5）。

2.4.3包裝、劑量規(guī)格的確定 藥材干浸膏在無損耗下約為344g左右，藥材粉碎后粗粉為700g，可制成1000g左右，按臨床用藥要求，分成每袋裝2g，可用6cm x7cm濾紙袋分裝，每袋含生藥量8.4g。

3.小結(jié)與討論

婦寧袋泡茶為我院婦科的常用經(jīng)驗處方，為了便于臨床用藥，并結(jié)合處方中各味藥材的理化性質(zhì)，采用以部分藥材打粉和部分藥材煎膏混合制粒加工成袋泡茶劑的工藝，既保持了傳統(tǒng)湯劑原有特點，又有溶出量大，避免揮發(fā)性成分損失和分解破壞，方便服用，攜帶方便的優(yōu)點，同時更能體現(xiàn)中醫(yī)醫(yī)療的特色療法。本研究對其制備工藝進(jìn)行了初步研究，將其制備成半生藥型袋泡茶劑，從而為婦寧袋泡茶的醫(yī)療機(jī)構(gòu)制劑的開發(fā)提供了依據(jù)。