馬國平+楊晨+王廣基+朱萱萱+張迪+王健鯤
[摘要] 目的 比較9種臨床常用潤肺化痰中藥的排痰效果,評價祛痰有效性,為臨床應(yīng)用提供理論依據(jù)。 方法 本研究選用9種臨床常用潤肺化痰中藥:旋覆花、桔梗、浙貝母、金蕎麥、前胡、川貝母、瓜蔞皮、百合、石斛,分別采用小鼠呼吸道酚紅排痰量法、大鼠毛細管排痰量法觀察其排痰效果。 結(jié)果 9種不同中藥均可以增加小鼠呼吸道的酚紅排痰量及大鼠毛細管的排痰量,與空白組比較差異有高度統(tǒng)計學(xué)意義(P < 0.01)。其中,百合、桔梗、旋覆花、瓜蔞皮、前胡、浙貝母的效果較佳。 結(jié)論 9種不同中藥均有較好的祛痰效果,具有促進呼吸道分泌物增加的作用。
[關(guān)鍵詞] 潤肺化痰;中藥;祛痰
[中圖分類號] R285.5 [文獻標(biāo)識碼] A [文章編號] 1673-7210(2017)03(a)-0016-04
Comparison of eliminating phlegm effects of 9 traditional Chinese medicine of moistening the lung and eliminating phlegm
MA Guoping1 YANG Chen1 WANG Guangji2 ZHU Xuanxuan1 ZHANG Di1 WANG Jiankun2
1.Department of Pharmacology, Affiliated Hospital of Nanjing University of Chinese Medicine, Jiangsu Province, Nanjing 210029, China; 2.Key Laboratory of Drug Metabolism and Pharmacokinetics, China Pharmaceutical University, Jiangsu Province, Nanjing 210009, China
[Abstract] Objective To observe the pharmacological phlegm expelling effect of nine clinical commonly used Chinese medicine of moistening the lung and eliminating phlegm, to evaluate their effectiveness and to provide theoretical foundation for clinical application. Methods This experiment selected 9 kinds of commonly used clinical Chinese medicine of moistening the lung and eliminating phlegm: Flos Inulae, Radix Platycodonis, Bulbus Fritillariae Thunbergii, Rhizoma Fagopyri Dibotryis, Radix Peucedani, Bulbus Fritillariae Cirrhosae, Pericarpium Trichosanthis, Bulbus Lilii, Herba Dendrobii. The phlegm expelling effect was observed by phenol red on mice and eliminating phlegm on rat capillary. Results Nine different Chinese medicine could apparently increase excretion of phenol red and phlegm from the respiratory tract, there were significant differences compared with the blank group (P < 0.01). Among them, Bulbus Lilii, Radix Platycodonis, Flos Inulae, Pericarpium Trichosanthis, Radix Peucedani, Bulbus Fritillariae Thunbergii had better effects. Conclusion Nine Chinese medicine have good expectorant effects and good productive role in promoting the effect of respiratory secretions.
[Key words] Moistening the lung and eliminating phlegm; Traditional Chinese medicine; Expectorant
近年來,人們對大氣PM2.5的健康危害日益重視,對PM2.5致機體損傷的機制研究日趨深入,PM2.5雖然粒徑小,但由于其相對表面積較大,能夠吸附的重金屬和其他有毒物質(zhì)相對較多,并且也會加速這些物質(zhì)在肺中的溶解度,在一定程度上會造成肺部損傷或引起繼發(fā)性的血液學(xué)改變,引發(fā)心血管疾病,嚴(yán)重者甚至導(dǎo)致死亡。中藥對PM2.5致肺損傷有一定的干預(yù)作用。本文選用臨床常用的潤肺化痰中藥,分別為旋覆花、桔梗、浙貝母、金蕎麥、前胡、川貝母、瓜蔞皮、百合、石斛,以這9種中藥為研究對象,進行排痰作用的比較,以篩選祛痰效果較佳的中藥,為臨床用藥提供實驗依據(jù)。
1 材料與方法
1.1 儀器與試藥
氯化銨:南京化學(xué)試劑廠,批號100905;秋梨潤肺膏:湖北武當(dāng)金鼎制藥有限公司,批號141122;旋覆花:批號20140721,產(chǎn)地河南;桔梗:批號20140721,產(chǎn)地安徽;浙貝母:批號20140721,產(chǎn)地浙江;金蕎麥:批號20140721,產(chǎn)地江蘇;前胡:批號20140721,產(chǎn)地浙江;川貝母:批號20140721,產(chǎn)地四川;瓜蔞皮:批號20140721,產(chǎn)地山東,以上中藥材購自南京藥業(yè)股份有限公司中藥飲片廠。百合:批號20140827,產(chǎn)地江蘇;石斛:批號20140827,產(chǎn)地云南,購自安徽省萬生中藥飲片有限公司。以上藥材由江蘇省中醫(yī)院藥學(xué)部藥材庫房提供,并由朱育鳳主任藥師鑒定。756PC紫外線分光光度計:上海光譜儀器有限公司;AR1140型電子分析天平:梅特勒-托利多儀器(上海)有限公司;苯酚紅:上海試劑三廠,批號100914;氫氧化鈉:廣東西隴化工廠,批號20120610;玻璃點樣毛細管(內(nèi)徑0.5 mm,長100 mm):華西醫(yī)科大學(xué)儀器廠提供。
1.2 實驗動物
ICR小鼠:雌雄各半,18~22 g,由南通大學(xué)實驗動物中心提供,合格證號:SCXK(蘇)2014-0001。SD大鼠:雄性,180~220 g,南京軍區(qū)總醫(yī)院提供,合格證號:SCXK(軍)2012-0014。全價營養(yǎng)顆粒飼料:江蘇省協(xié)同醫(yī)藥生物技術(shù)有限公司提供,合格證號:20150107。飼養(yǎng)環(huán)境:室溫(20±2)℃,濕度55%~65%,光照適度,通風(fēng)潔凈良好。
1.3 藥物配制及給藥方法
1.3.1 小鼠給藥配制方法 氯化銨:精密稱取氯化銨5.0 g,加蒸餾水至100 mL,配成濃度為0.05 g/ mL溶液。按0.2 mL/10 g灌胃給藥。秋梨潤肺膏:規(guī)格140 mL(180 g)/瓶,13.3 g(10 mL)/kg(臨床人用劑量的20倍),取藥液原液50 mL,加50 mL雙蒸水稀釋,按0.2 mL/10 g灌胃給藥。旋覆花的配制:取0.5 kg旋覆花中藥飲片,加蒸餾水浸泡1 h后煎煮2次,第1次1 h,第2次40 min;將一煎和二煎合并濃縮至500 mL,配制成1 g/mL的藥液,按0.2 mL/10 g灌胃給藥。其他各組煎煮方法及給藥方法同上。
1.3.2 大鼠給藥配制方法 氯化銨:精密稱取氯化銨10.0 g,加蒸餾水至100 mL,配成濃度為0.1 g/mL溶液。按0.8 mL/100 g灌胃給藥。秋梨潤肺膏:規(guī)格140 mL(180 g)/瓶,10.66 g/kg(臨床人用劑量的16倍),取秋梨潤肺膏原液50 mL(1.29 g/mL),加蒸餾水至100 mL,配成0.645 g/mL的秋梨潤肺膏溶液,按1.64 mL/100 g灌胃給藥。旋覆花的配制:取0.5 kg旋覆花中藥飲片,加蒸餾水浸泡1 h后煎煮2次,第1次1 h,第2次40 min;將一煎和二煎合并濃縮至500 mL,配制成1 g/mL的藥液,按1.6 mL/100 g灌胃給藥。其他各組煎煮方法及給藥方法同上。
1.4 實驗方法
1.4.1 不同中藥對小鼠呼吸道酚紅排痰量的影響[2-3] 取120只健康ICR小鼠,雌雄各半。稱重后,按體重隨機分為12組,分別為空白組、氯化銨組、秋梨潤肺膏組、旋覆花組、桔梗組、浙貝母組、金蕎麥組、前胡組、川貝母組、瓜蔞皮組、百合組、石斛組,每組10只。按不同分組灌胃給予相應(yīng)的藥液,0.2 mL/10 g灌胃給藥,連續(xù)給藥10 d。末次給藥1 h后,腹腔注射酚紅0.1 mL(5 mg)/10 g體重,注射酚紅后半小時,處死動物,剝離氣管周圍組織,剪下自甲狀軟骨下至氣管分支處的一段氣管,放入盛有2 mL生理鹽水的試管中,再加1 mol/L氫氧化鈉,用756PC紫外線分光光度計,波長546 nm處測OD值,與對照組比較。根據(jù)所測出的OD值,根據(jù)酚紅標(biāo)準(zhǔn)曲線方程計算小鼠酚紅的排泌量。
1.4.2 不同中藥對大鼠毛細管排痰量的影響[4-6] 取SD大鼠120只,雄性,稱重后,按體重隨機分為12組,分組同“1.4.1”。適應(yīng)飼養(yǎng)3 d后,按不同分組灌胃給予相應(yīng)劑量的藥液,10 mL/kg灌胃給藥,連續(xù)給藥10 d。實驗前禁食不禁水8~12 h,于末次給藥后,10%水合氯醛0.3 mL/100 g腹腔注射麻醉,仰位固定。剪開頸中部皮膚,分離出氣管,在甲狀腺軟骨下緣正中兩軟骨環(huán)之間用尖銳的注射針頭扎一小孔,然后插入預(yù)先采用肝素化的玻璃毛細管一根,使毛細管剛好接觸氣管底部表面,借以吸取氣管后部之痰液。當(dāng)痰液充滿毛細血管時,立即另換一根。以毛細管吸取痰液長度作為評價藥物的化痰效果。記錄2 h各組痰液的分泌量,比較各給藥組平均每小時痰液分泌量,并作統(tǒng)計學(xué)分析。
1.5 統(tǒng)計學(xué)方法
采用SPSS 19.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計分析,計量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示,重復(fù)測量的計量資料采用方差分析,組間兩兩比較采用LSD-t檢驗。以P < 0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
2 結(jié)果
2.1 對小鼠呼吸道酚紅排痰量的影響
2.1.1 酚紅標(biāo)準(zhǔn)曲線及方程 用分析天平精確稱取0.05 g酚紅,加1 mL 5%碳酸氫鈉溶解,配成1 mL含50 μg,然后順次稀釋成每毫升含酚紅0.025、0.0125、0.006 25、0.003 125、0.001 562 5、0.000 781 25、0.000 390 625 μg,用分光光度計測OD值,其相對應(yīng)的OD值分別為1.665、0.860、0.423、0.221、0.115、0.054、0.039。以O(shè)D值為橫坐標(biāo),酚紅濃度為縱坐標(biāo),各交點連成直線,即為酚紅標(biāo)準(zhǔn)曲線,見圖1。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線得到酚紅標(biāo)準(zhǔn)曲線線性方程:y=0.0150x-0.0002,R2 = 0.9998。
2.1.2 不同潤肺化痰中藥對小鼠體重及氣管酚紅排泌量(OD值和酚紅濃度)的影響 灌服川貝母的小鼠體重與空白組比較明顯減輕(P < 0.01),其他各組小鼠體重與空白組比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P > 0.05)。根據(jù)紫外分光光度計所測出的OD值,按酚紅標(biāo)準(zhǔn)曲線方程計算小鼠酚紅的排泌量。與空白組比較,各中藥組小鼠氣管分泌物的酚紅濃度都明顯增大,差異有高度統(tǒng)計學(xué)意義(P < 0.01)。提示:選取的9種中藥中川貝母可能會使小鼠體重減輕,其他的中藥對小鼠體重影響不明顯。9種潤肺化痰中藥均可使小鼠的氣管分泌物酚紅含量增加,具有較好的排痰作用,其中以桔梗組、百合組效果最佳。見表1~2。
2.2 不同潤肺化痰中藥對大鼠體重及毛細管排痰量的影響
灌服旋覆花、桔梗、浙貝母、金蕎麥、前胡、川貝母、瓜蔞皮、百合、石斛這9種中藥的大鼠體重與空白組比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P > 0.05),9種中藥的毛細管吸取痰液長度均明顯增加,與空白組比較差異有高度統(tǒng)計學(xué)意義(P < 0.01)。表明選取的9種中藥均可以促進呼吸道分泌物外排,具有良好的排痰作用。其中,百合、旋覆花、瓜蔞皮、前胡、浙貝母的祛痰效果較佳。見表3。