王 清,李紅月,劉紅美,戴長(zhǎng)榮,鄧惠芳
(湖北三峽職業(yè)技術(shù)學(xué)院醫(yī)學(xué)院,湖北 宜昌 443000)
·實(shí)驗(yàn)研究·
婦科千金片對(duì)大鼠大腸桿菌所致慢性盆腔炎的治療作用研究
王 清,李紅月,劉紅美,戴長(zhǎng)榮,鄧惠芳
(湖北三峽職業(yè)技術(shù)學(xué)院醫(yī)學(xué)院,湖北 宜昌 443000)
目的 觀察婦科千金片對(duì)大鼠大腸桿菌所致慢性盆腔炎的作用。方法 用大腸桿菌制造盆腔炎模型,模型成功后,取60只雌性SD大鼠隨機(jī)分成6組:空白對(duì)照組,模型對(duì)照組,假手術(shù)組,婦科千金片低、中、高劑量組。婦科千金片低、中、高劑量組分別為0.5 g/kg、1.0 g/kg、2.0 g/kg,觀察各組對(duì)大鼠盆腔炎指標(biāo)的影響。結(jié)果 婦科千金片對(duì)大鼠大腸桿菌所致慢性盆腔炎的炎癥反應(yīng)和病理變化有一定抑制作用,并能降低炎癥介質(zhì)IL-6的影響。結(jié)論 表明婦科千金片對(duì)慢性盆腔炎有一定的治療作用。
婦科千金片;大腸桿菌
慢性盆腔炎是指女性生殖器官、周圍的結(jié)締組織、盆腔腹膜發(fā)生的慢性炎癥。婦科千金片作為婦科炎癥類唯一入選中成藥,已廣泛運(yùn)用于慢性盆腔炎的治療,其副作用小,療效確切。
1.1 動(dòng)物
健康成年雌性SD大鼠60只,體重(200±20)g,購(gòu)于三峽大學(xué)醫(yī)學(xué)院,合格證號(hào)SCXK(鄂)2011-0012。
1.2 藥物
婦科千金片,由株洲千金藥業(yè)股份有限公司提供,批號(hào)20110901
1.3 試劑
大腸桿菌懸液,將宜昌市防疫站提供的標(biāo)準(zhǔn)大腸桿菌菌株放置在肉湯培養(yǎng)基培養(yǎng)24小時(shí),之后,將其放置在生理鹽水中,稀釋成6×106個(gè)/ mL的濃度。白介素-6(IL-6)檢測(cè)試劑盒,上海喬羽生物科技有限公司。
2.1 造模取60只體重為200-220g的健康成年雌性SD大鼠隨機(jī)分為6組
空白對(duì)照組、模型對(duì)照組、假手術(shù)組、婦科千金片低、中、高劑量組,每組10只,低、中、高劑量組分別給予婦科千金片0.5 g/kg、1.0 g/kg、2.0 g/kg。按文獻(xiàn)方法[1]模型對(duì)照組、假手術(shù)組、婦科千金片低、中、高劑量組動(dòng)物用戊巴比妥鈉35 mg/kg進(jìn)行腹腔麻醉,對(duì)腹部消毒,在腹部正中切口約2 cm,使子宮暴露在外面,用注射器機(jī)械將子宮內(nèi)膜破壞,然后,用4號(hào)針頭從子宮一側(cè)將0.2 mL大腸桿菌菌液緩慢注入卵巢中。之后,用鑷子將針孔位置夾緊,以免菌液流出,另一側(cè)子宮不注入菌液,只分層關(guān)腹,之后對(duì)手術(shù)區(qū)消毒。假手術(shù)組只將腹腔打開(kāi),使子宮暴露在外面,不注射菌液。造模后從第10天開(kāi)始,每天灌胃給藥1次,連續(xù)28天,每天給空白對(duì)照組、模型對(duì)照組和假手術(shù)組等量蒸餾水。
2.2 子宮輸卵管的外觀及腫脹程度的計(jì)算:
最后一次給藥后,采取禁食不禁水的方式,持續(xù)12小時(shí),次日清晨,用戊巴比妥鈉35m g/kg腹腔麻醉,剖腹,觀察并比較各組大鼠子宮輸卵管的外觀和腫脹、粘連情況。摘取雙側(cè)子宮,除去脂肪組織后用電子天平稱重,計(jì)算子宮腫脹程度和腫脹率[3]。
子宮腫脹度=造模側(cè)子宮質(zhì)量-對(duì)照側(cè)子宮質(zhì)量
子宮腫脹率=(腫脹度)/對(duì)照側(cè)子宮重量×100%
2.3 子宮組織因子炎癥介質(zhì)IL-6的測(cè)定[2]
從造模側(cè)子宮剪取一段,將其放置在10 mL的生理鹽水中,以10000r/min勻漿10分鐘,使組織勻漿充分,然后將勻漿液以3000r/min離心15分鐘,取上清液,按試劑盒要求采用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法(ELISA)測(cè)定勻漿IL-6的含量。
2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
3.1 子宮組織炎癥腫脹程度
空白對(duì)照組和假手術(shù)組大鼠子宮柔軟,沒(méi)有出現(xiàn)充血、水腫癥狀。模型組大鼠造模側(cè)子宮與對(duì)側(cè)相比,發(fā)現(xiàn)造模側(cè)子宮明顯增粗,可見(jiàn)充血,造模側(cè)子宮明顯大于對(duì)側(cè)。婦科千金片高劑量組與模型組相比,造模側(cè)子宮增粗、腫脹、充血程度明顯減輕,腫脹度與腫脹率與模型組比較有顯著的差異性。見(jiàn)表1。
表1 婦科千金片對(duì)大腸桿菌所致大鼠慢性盆腔炎模型子宮腫脹度的影響(±s)
表1 婦科千金片對(duì)大腸桿菌所致大鼠慢性盆腔炎模型子宮腫脹度的影響(±s)
注:與假手術(shù)組比較△P<0.01,與模型組比較△△P≤0.05
級(jí)別 劑量 n 子宮腫脹度 腫脹率%空白對(duì)照組 10 0.02±0.02 4.00±4.01假手術(shù)組 10 0.02±0.03 4.00±6.64模型組 10 1.00±0.05△200±10.71△婦科千金片高劑量組 2.0 g/kg 10 0.60±0.07△△120±14.38△△婦科千金片中劑量組 1.0 g/kg 10 0.80±0.08△△160±16.57△△婦科千金片低劑量組 0.5 g/kg 10 0.85±0.06△△170±12.23△△
3.2 子宮組織IL-6含量測(cè)定
檢測(cè)顯示,造模動(dòng)物子宮組織內(nèi)IL-6水平較對(duì)照組明顯增加。婦科千金片各組的IL-6水平均明顯降低。見(jiàn)表2。
慢性盆腔炎目前在臨床上是一個(gè)難解決的疾病,西醫(yī)治療以抗生素為主,容易產(chǎn)生耐藥性和二重感染,不能長(zhǎng)期使用。中醫(yī)治療在改善慢性盆腔炎癥狀的同時(shí),可以提高人體的抵抗能力。
表2 各組大鼠血清IL-6參數(shù)比較(±s)
表2 各組大鼠血清IL-6參數(shù)比較(±s)
注:與假手術(shù)組比較△P<0.01,與模型組比較△△P≤0.05
級(jí)別 IL-6(pg/ mL)正常組 65.59±4.22假手術(shù)組 66.24±4.85模型組 78.63±5.66△婦科千金片高劑量組 69.59±5.55△△婦科千金片中劑量組 74.32±4.96△△婦科千金片低劑量組 78.01±3.22△△
IL-6屬于具有炎癥介導(dǎo)活性的細(xì)胞因子,在慢性盆腔炎的病變過(guò)程中,是炎癥反應(yīng)的主要誘導(dǎo)者和傳遞者,能促淋巴細(xì)胞的分化,催化和放大炎癥反應(yīng)和毒性作用,造成組織細(xì)胞的損害。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,婦科千金片通過(guò)使血清中的IL-6的含量降低,調(diào)節(jié)機(jī)體的免疫功能,起到抗菌、抗炎的作用。
綜上所述,婦科千金片能有效抑制慢性盆腔炎的致炎因子IL-6,減少I(mǎi)L-6的釋放,且婦科千金片里的中藥成分千金拔、金櫻根、穿心蓮、當(dāng)歸等活血化瘀和補(bǔ)血成份能改善局部血液循環(huán)、利于炎癥細(xì)胞的吸收和子宮內(nèi)膜的修復(fù),可以緩解子宮內(nèi)膜的炎癥,能夠有效治療大鼠的慢性盆腔炎[3]。
[1] 劉國(guó)生,王桐生,龍子江,等.盆腔炎沖劑對(duì)大鼠慢性盆腔炎模型的影響[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志,2004,10(3):24-26.
[2] 邱賽紅,尹胭脂,余 娜,等.紫英顆粒對(duì)慢性盆腔炎大鼠模型治療作用的研究[J].湖南中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào),2013,(5):49-51.
[3] 王 琛,王泰齡,李 平,等.婦科千金片軟膠囊對(duì)盆腔炎大鼠子宮內(nèi)膜組織病理學(xué)改變的觀察[J].中日友好醫(yī)院學(xué)報(bào),2005, 19(3):160.
本文編輯:王雨辰
R285
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ISSN.2095-8242.2017.02.997.02