馮波++歐陽娟++鹿炎++吳勝利++夏阿林

隨著人們生活節(jié)奏的加快，一次性餐盒開始被人們廣泛的使用。然而一次性餐盒在使用之前可能存在一定的安全隱患。經(jīng)過調(diào)查統(tǒng)計，100名同學(xué)中有83位同學(xué)在使用一次性餐盒之前沒有進(jìn)行清洗，因此我們對邵陽學(xué)院周邊餐館一次性餐盒使用前的微生物污染情況進(jìn)行調(diào)查，其中包括菌落總數(shù)的測定以及大腸埃希氏菌群的測定。測定一次性餐盒的菌落總數(shù)是用來檢測一次性餐盒在使用前的細(xì)菌污染程度的一個重要指標(biāo)。大腸埃希氏菌群主要來源于人畜糞便，故以此作為糞便污染指標(biāo)來評價一次性餐盒的衛(wèi)生質(zhì)量，具有廣泛的衛(wèi)生學(xué)意義，它反映了一次性餐盒是否被糞便污染，同時間接地指出食品是否有腸道致病菌污染的可能性。

材料和方法

材料

一次性餐盒樣品取自邵陽學(xué)院周邊的小型餐館、個體飲食攤點(diǎn)臨使用前的樣本30份，分兩個批次采集。每一份樣品10個餐盒，取好樣品后均放入未拆封的購物袋中，12h內(nèi)檢測。

培養(yǎng)基為牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基：牛肉膏3g、蛋白胨10g、氯化鈉5g、瓊脂20g、加入1000ml去離子水中，調(diào)節(jié)pH=7.0±7.2，分裝于錐形瓶中，121℃，高壓滅菌20min。

乳糖單料管：按GB/T 4789.28-2013中4.9規(guī)定。

方法

菌落總數(shù)的測定。樣液的制備：從每份樣品中抽取三個待檢樣品，在超凈工作臺用無菌水浸濕的無菌棉簽擦拭樣本，擦拭面積為2×2.5cm，每個樣本擦拭五個點(diǎn)，使每份試樣的擦拭面積為75cm?，擦拭后將棉簽置于75ml無菌水中充分搖勻，制備1：1的原樣。

采用十倍稀釋法，用無菌吸量管吸取1ml原樣，放入裝有9ml無菌水的試管中。每一次稀釋，吸量管都不能伸入試管中，并且每一次稀釋都需要更換一支移液管。根據(jù)污染程度，選擇合適稀釋梯度即原液、10-1、10-2三個稀釋梯度。

每一個稀釋梯度制備三個培養(yǎng)皿，即從三個稀釋梯度中用無菌移液管吸取0.5ml樣液，加入到制作好的無菌平皿中，用涂布器將樣液涂勻，動作要輕以減少機(jī)械損傷。將滅菌過后的一份樣本采用相同的方法制備三個平皿作為對照。培養(yǎng)：將涂布好的平皿倒置放入37℃；的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48h±2h。

計數(shù)：菌落計數(shù)以菌落形成單位（CFU）為計數(shù)單位。選取平皿上的菌落數(shù)為10-100CFU計數(shù)為適宜，用菌落平均數(shù)進(jìn)行計算。

大腸埃希氏菌群的測定。在超凈工作臺用無菌吸量管將樣液1ml加入到乳糖單料管中，經(jīng)37℃、24h培養(yǎng)后觀察杜氏小管中否有氣泡以及單料管是否有顏色變化，如有上述變化則按GB 4789.3-2010 6.2的規(guī)定進(jìn)行實驗，如沒有變化，則說明大腸埃希氏菌群未檢出。

結(jié)果與分析

樣品中菌落總數(shù)和大腸埃希氏菌群的測定

按照上述方法對邵陽學(xué)院周邊的小型餐館、個體飲食攤點(diǎn)的一次性餐盒使用前的微生物進(jìn)行測定，實驗采樣時分為兩批春季和秋季，菌落總數(shù)結(jié)果見表1、2。計數(shù)圖片見圖1。

由表1可知3、6、7、8、11、15號餐館遠(yuǎn)高于總體平均值40 CFU/cm?。由采樣時的記錄可知這些餐館菌落總是遠(yuǎn)高于總體平均值可能是由于一次性餐盒暴露在外面的時間過長、餐館衛(wèi)生狀況不達(dá)標(biāo)導(dǎo)致。因為我們采樣的這幾家餐館的一次性餐盒都是直接暴露在空氣中，沒有用塑料袋裝好，也沒有倒扣著。相比4、12、13號餐館在這些方面就做得好。餐盒沒有使用時都用塑料袋裝起來，餐館衛(wèi)生也保持較好。

表2中，各餐館的菌落總是都低于平均值，這一批餐館衛(wèi)生總體都較前一批好，其中12號餐館未檢出菌落總數(shù)，這并不是說明12號餐館沒有細(xì)菌污染，只能說明該餐館的衛(wèi)生保持很好，對一次性餐盒的管理也很到位，還有我們的實驗可能存在誤差。由檢測數(shù)據(jù)可知兩批樣本所檢測出來的菌落總數(shù)有明顯差異，春季菌落總數(shù)明顯高于秋季，于陳少博等人的實驗結(jié)果有相似之處。

通過實驗，無論是春季還是秋季，大腸埃希氏菌群均未檢出秋季采集前校門餐館的一次性餐盒，春季采集后校門及其校內(nèi)一些個體飲食攤點(diǎn)的一次性餐盒。由數(shù)據(jù)分析可知，秋季前校門一次性餐盒中的菌落總數(shù)明顯高于春季后校門一次性餐盒中的菌落總數(shù)。主要是因為前校門人流量車流量大，空氣中的菌落總數(shù)要略高于后校門，這也與被檢測的餐館、個體飲食攤點(diǎn)的衛(wèi)生保持程度密切相關(guān)；也與邵陽地區(qū)在去年秋季和今年春季的溫度有關(guān)，因為去年秋季溫度要高于今年春季溫度，而且溫度對細(xì)菌和大腸埃希氏菌群的生長也會有明顯的影響；也與我們采樣時一次性餐盒暴露在外面的時間有關(guān)；還有與我們的實驗時的操作方法有關(guān)。

討論

隨著一次性餐盒的廣泛使用，人們對一次性餐盒衛(wèi)生情況的關(guān)注度也越來越高，因為一次性餐盒的衛(wèi)生情況直接影響著人們的健康。

通過實驗，我們發(fā)現(xiàn)邵陽學(xué)院周邊一次性餐盒檢測的30份樣品中，秋季菌落總數(shù)明顯高于春季。雖然樣品中未檢出大腸埃希氏菌群，但是樣品中仍可能存在有大腸埃希氏菌群。因為此次檢測的樣品總量并不是很大，實驗操作上可能也會存在一定的誤差，所以對于不合格的小型餐館、個體飲食攤點(diǎn)的一次性餐盒，建議有關(guān)部門加強(qiáng)對一次性餐盒生產(chǎn)質(zhì)量的監(jiān)管，從源頭上降低一次性餐盒微生物的污染。

商家可以使用干凈的保鮮袋將一次性餐盒封存好，只在使用時開袋，或是使用消毒的瓷器餐具、不銹鋼餐具供顧客使用。

大家可以在使用一次性餐盒之前進(jìn)行清洗以減少微生物對人體的危害。像我們的實驗中，也檢測出菌落總數(shù)符合標(biāo)準(zhǔn)的餐館。說明在衛(wèi)生方面保持好，并且使用合適的一次性餐盒保存方法還是能起到降低菌落總數(shù)的作用。