常向前++呂亮++張舒

摘要：模擬高溫?zé)崂说臏囟饶Ｊ?，研究了熱浪式連續(xù)高溫脅迫對小菜蛾（Plutella xylostella）幼蟲和蛹的影響。結(jié)果表明，高溫脅迫時(shí)的初始蟲態(tài)、脅迫溫度、脅迫模式及各因子之間的交互作用都可能對小菜蛾3齡幼蟲和蛹的羽化率及生殖力有顯著影響。小菜蛾3齡幼蟲比蛹耐熱，蛹更易受到高溫危害。雖然小菜蛾較耐高溫，但40 ℃，持續(xù)3 d每天8 h（3 d×8 h/d）的高溫脅迫下，相比30 ℃ 1 d 8 h（1 d×8 h/d），小菜蛾羽化率降低了55.48%。從生殖角度看，蛹經(jīng)高溫脅迫后生殖力顯著低于3齡幼蟲，3 d持續(xù)高溫脅迫與 1 d高溫相比，生殖力降低了48.84%，40 ℃脅迫相比30 ℃，生殖力降低了64.32%。持續(xù)長時(shí)間的高溫?zé)崂颂鞖饪赡軙?dǎo)致小菜蛾種群數(shù)量的大幅度減少。

關(guān)鍵詞：高溫?zé)崂?；高溫脅迫；羽化率；生殖力；小菜蛾（Plutella xylostella）

中圖分類號：Q968.1；S433.4 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A 文章編號：0439-8114（2016）22-5835-04

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2016.22.027

The Effects of Continuous High Temperature Stress on the Larvae

and Pupae of Plutella xylostella

CHANG Xiang-qian， L？譈 Liang， ZHANG Shu

（Institute of Plant Protection and Soil Science，Hubei Academy of Agricultural Sciences/Hubei Key Laboratory for Crop Diseases，

Insect Pests and Weeds Control， Wuhan 430064， China）

Abstract： The effects of continuous high temperature on the 3rd larvae and pupae of diamondback moth （DBM）（Plutella xylostella） emergence rate and fecundity were conducted by simulating heat waves. The results showed that the initial development stage of heat stress， stress temperature， heat stress patterns and the interaction between these factors all significantly may affect the emergence rate and fecundity of 3rd larvae and pupae. The larvae were more tolerant to the heat stress than the pupae. The pupae were more susceptible to high temperature stress. The emergence rate was decreased by 55.48% under the stress of successive 3 d 8 h/d of 40 ℃ compared to 1 d 8 h/d. The fecundity of pupae was significantly lower than larvae under high temperature stress； The fecundity of 3 d stress was decreased by 48.84% compared to 1 d stress and the fecundity of 40 ℃ stress was decreased by 64.32% compared to 30 ℃ respectively. The heat waves may lead the collapse of the DBM population in the fields.

Key words： heat waves； high temperature stress； emergence rate； fecundity； diamondback moth（Plutella xylostella）

近年來，隨著全球平均氣溫的升高，極端天氣現(xiàn)象，如高溫?zé)崂恕⒈┯?、驟熱驟冷等現(xiàn)象明顯增加[1]。根據(jù)聯(lián)合國政府間氣候變化專門委員會的報(bào)告，全球范圍內(nèi)夏季高溫?zé)崂颂鞖鈱⒊掷m(xù)頻繁出現(xiàn)[2]。高溫?zé)崂颂鞖庖馕吨B續(xù)多天出現(xiàn)超過35 ℃的高溫。昆蟲是變溫動(dòng)物，更容易受到這種天氣變化的影響[3]。

目前關(guān)于夏季高溫對昆蟲的影響已有報(bào)道，如夏季高溫抑制了溫室白粉虱（Trialeurodes vaporariorum）的發(fā)生[4]，對水花生的重要天敵蓮草直胸跳甲（Agasicles hygrophila）成蟲生殖力有迅速降低的作用[5]；夏季高溫可能是制約二化螟（Chilo suppressalis）田間種群增長的重要因子[6]；夏季高溫導(dǎo)致了新疆地區(qū)棉蚜（Aphis gossypii）種群產(chǎn)生明顯的崩潰[7，8]，但高溫?zé)崂耸降南募靖邷厝绾斡绊懤ハx的生物學(xué)特性尚無詳細(xì)報(bào)道。

小菜蛾（Plutella xylostella）是危害十字花科作物的重要害蟲[9]。在內(nèi)蒙、新疆多次大暴發(fā)，造成近70萬hm2油菜絕收[10，11]，在長江中下游流域如湖北、安徽、江蘇等及長江以南廣大地區(qū)如浙江、福建、廣東、廣西等地發(fā)生世代多，抗藥性突出。在夏季，長江中下游十字花科蔬菜田中小菜蛾種群數(shù)量普遍極低。已有的研究表明，在恒溫條件下，30 ℃時(shí)，小菜蛾可以正常存活，但當(dāng)溫度超過30 ℃時(shí)，小菜蛾各發(fā)育階段的存活率迅速下降；35 ℃時(shí)小菜蛾卵不能孵化，4齡幼蟲、蛹均死亡，不能完成世代[12，13]。但在夏季田間，小菜蛾并不會受到恒定高溫的脅迫，常會受到熱浪式的高溫脅迫。用氣象記錄儀Kestrel 4500 Pocket Weather Meters（Nielsen-Kellerman Co.，USA） 記錄武漢甘藍(lán)田中太陽直射條件下的24 h瞬時(shí)空氣溫度，發(fā)現(xiàn)在2012年7月20～24日，連續(xù)5 d出現(xiàn)持續(xù)6～8 h超過35 ℃的高溫天氣。田間發(fā)生的小菜蛾種群世代重疊嚴(yán)重[9]，各個(gè)發(fā)育階段同時(shí)大量存在，在高溫季節(jié)各個(gè)發(fā)育階段都會受到田間高溫脅迫。因此超過35 ℃的熱浪式高溫脅迫對小菜蛾不同發(fā)育階段有何作用，并如何影響其夏季種群數(shù)量值得深入探討。

本試驗(yàn)將模擬高溫?zé)崂颂鞖鈱π〔硕甑淖饔?，將?jīng)過不同模式高溫脅迫后的小菜蛾轉(zhuǎn)移至室溫，觀察其后繼存活、生殖情況，探討熱浪式連續(xù)高溫脅迫對小菜蛾不同發(fā)育階段存活率及生殖力的影響，從而更好地揭示田間小菜蛾種群對夏季高溫脅迫的響應(yīng)機(jī)制。

1 材料與方法

1.1 蟲源及飼養(yǎng)方法

以2008年秋采自湖北省農(nóng)業(yè)科學(xué)院花椰菜（Brassica oleracea L. var. botrytis L.）上的小菜蛾為初始蟲源，在25±1 ℃、RH 60%～70%、L∶D=16 h∶8 h的養(yǎng)蟲室中用3～4葉盆栽甘藍(lán)（Brassica oleracea L.var.capitata L.）飼養(yǎng)1代后，人工飼料（Southland products incorporatied，USA）在養(yǎng)蟲盒（直徑9 cm，高7 cm）內(nèi)。

1.2 連續(xù)高溫脅迫初始蟲態(tài)為3齡幼蟲的小菜蛾

將1～2日齡3齡幼蟲放入12孔塑料培養(yǎng)板（型號TPP 92012，體積12.5 cm×8.3 cm×2.2 cm，每孔直徑2.4 cm）的孔內(nèi)，每孔3頭幼蟲，并加入適當(dāng)?shù)娜斯わ暳?，重?fù)3個(gè)培養(yǎng)板，然后置于人工氣候箱（HP300GS-C，武漢瑞華儀器設(shè)備有限責(zé)任公司）中，將3臺人工氣候箱分別于10：00～18：00（8 h）設(shè)置為各脅迫溫度（30、35、40 ℃），其余時(shí)間（16 h）為25 ℃。分別在高溫脅迫1 d、連續(xù)高溫脅迫3 d后將小菜蛾移至25 ℃養(yǎng)蟲室中觀察幼蟲的存活、化蛹、羽化情況。將羽化成蟲成對單獨(dú)飼養(yǎng)于培養(yǎng)皿（直徑6 cm）內(nèi)，逐日觀察產(chǎn)卵量。計(jì)算幼蟲的羽化率及生殖力，作為統(tǒng)計(jì)分析指標(biāo)。幼蟲羽化率為經(jīng)高溫脅迫后羽化的成蟲數(shù)量與初始幼蟲數(shù)量的比值。

1.3 連續(xù)高溫脅迫初始蟲態(tài)為蛹的小菜蛾

將30頭蛹放入直徑10 cm培養(yǎng)皿內(nèi)，置于人工氣候箱中，重復(fù)3個(gè)培養(yǎng)皿。氣候箱的溫度設(shè)置方法同“1.2”。處理后將蛹移至25 ℃養(yǎng)蟲室觀察蛹羽化及生殖情況。羽化成蟲的生殖情況觀察方法同“1.2”。計(jì)算蛹的羽化率及生殖力，作為統(tǒng)計(jì)分析指標(biāo)。

1.4 統(tǒng)計(jì)方法

用SAS 6.12多因素試驗(yàn)統(tǒng)計(jì)進(jìn)行方差分析，Duncans新復(fù)極差法進(jìn)行多重比較。

2 結(jié)果與分析

2.1 連續(xù)高溫脅迫后小菜蛾的羽化率及生殖力

3齡幼蟲及蛹經(jīng)高溫脅迫后羽化及生殖情況見表1。由表1可知，除40 ℃ 3 d×8 h/d處理組合外，經(jīng)各處理組合脅迫后小菜蛾的羽化率均超過70%，生殖力也超過30粒/雌。而40 ℃ 3 d×8 h/d處理后羽化率不足35%，生殖力基本為0。

2.2 連續(xù)高溫脅迫對小菜蛾羽化率的影響

多因素方差分析（表2）表明，脅迫溫度及脅迫模式對小菜蛾的羽化率有顯著影響；但初始蟲態(tài)對小菜蛾的羽化率影響不顯著，因此只對脅迫溫度及脅迫模式進(jìn)行多重比較分析（圖1）。

當(dāng)溫度為30、35 ℃時(shí)，連續(xù)高溫脅迫對小菜蛾的羽化率沒有顯著影響，羽化率為81.11%～91.11%；當(dāng)溫度為40 ℃時(shí)，經(jīng)連續(xù)3 d×8 h/d的脅迫后羽化率顯著下降為36.11%，與30 ℃ 1 d×8 h/d相比，羽化率降低了55.48%（圖1A）。當(dāng)脅迫時(shí)間為1 d時(shí)，各溫度處理間沒有顯著差異，當(dāng)連續(xù)時(shí)間為3 d時(shí)，40 ℃處理的羽化率顯著下降（圖1B）。

2.3 連續(xù)高溫脅迫對小菜蛾生殖力的影響

多因素方差分析（表3）表明，小菜蛾初始蟲態(tài)、脅迫溫度及脅迫模式對生殖力均有顯著影響，但二級和三級交互作用沒有顯著差異。因此，分別對初始蟲態(tài)、脅迫溫度及脅迫模式進(jìn)行多重比較分析（圖2）。

初始蟲態(tài)為蛹時(shí)，受到高溫脅迫后，生殖力顯著低于初始蟲態(tài)為幼蟲的小菜蛾（圖2A）；而40 ℃相對于30、35 ℃顯著降低了小菜蛾的生殖力，40 ℃相比30 ℃降幅為64.32%（圖2B）；3 d的連續(xù)高溫可顯著降低小菜蛾的生殖力，3 d持續(xù)高溫脅迫與1 d高溫相比，生殖力降低了48.84%（圖2C）。

3 小結(jié)與討論

有許多研究報(bào)道了高溫對昆蟲的致死效應(yīng)[4-8]。Harcourt[14]系統(tǒng)研究了影響田間小菜蛾種群密度的生物因子及非生物因子，發(fā)現(xiàn)非生物因子溫度的權(quán)重很大。在日本茨城縣發(fā)現(xiàn)，夏季溫度越高，小菜蛾種群密度越低[15]。昆蟲不同齡期、性別及地理種群的耐熱性可能不同[16]。本試驗(yàn)初步研究了熱浪式高溫脅迫對小菜蛾不同發(fā)育階段的作用特點(diǎn)。結(jié)果表明，小菜蛾3齡幼蟲比蛹耐熱。雖然連續(xù)高溫脅迫下，初始蟲態(tài)為幼蟲與初始蟲態(tài)為蛹的羽化率差異不顯著，但蛹的生殖力卻顯著下降。蛹在小菜蛾各個(gè)發(fā)育階段中幾乎不能移動(dòng)，不能主動(dòng)躲避高溫脅迫，而幼蟲卻可以在小范圍內(nèi)主動(dòng)躲避高溫脅迫，蛹比幼蟲耐熱性差，導(dǎo)致當(dāng)高溫?zé)崂税l(fā)生時(shí)，很容易造成當(dāng)代種群數(shù)量的大量減少。

小菜蛾整體比較耐熱[17]，但持續(xù)的熱浪天氣對小菜蛾種群數(shù)量有顯著的負(fù)面作用。2齡幼蟲在35 ℃處理12 h后死亡率僅為10%[18]；在35 ℃處理8 h后，3齡幼蟲的死亡率僅為3.13%[19]；本研究發(fā)現(xiàn)，持續(xù)1 d×8 h/d的35 ℃脅迫未顯著降低小菜蛾羽化率及生殖力，以上研究均說明當(dāng)小菜蛾沒有處于連續(xù)高溫脅迫時(shí)，可忍受35 ℃高溫，即小菜蛾本身對高溫具有一定的抗性。但當(dāng)連續(xù)脅迫時(shí)間為3 d時(shí)，40 ℃脅迫相對于30 ℃，羽化率降低了55.48%，而生殖力幾乎降為0。根據(jù)氣象儀的田間監(jiān)測數(shù)據(jù)，夏季高溫?zé)崂颂鞖獬３掷m(xù)超過3 d，甚至達(dá)到5 d，如果熱浪持續(xù)時(shí)間超過3 d，小菜蛾的羽化率將會進(jìn)一步劇烈下降，說明持續(xù)長時(shí)間的熱浪確實(shí)對小菜蛾種群數(shù)量有致命威脅。

本試驗(yàn)只選取了小菜蛾的兩個(gè)發(fā)育階段進(jìn)行研究，因此仍需要對小菜蛾的其他蟲態(tài)進(jìn)行試驗(yàn)，同時(shí)根據(jù)田間溫度的變化，設(shè)置更合理的模擬溫度，使試驗(yàn)狀態(tài)更接近田間環(huán)境，以期獲得更接近實(shí)際條件的試驗(yàn)結(jié)果。

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