黃繼超　姜德清　王宗山　溫江濤　孫詠梅　柯群剛　郝占偉

[摘要]目的探討血漿多聚免疫球蛋白受體（PIgR/SC）、甲胎蛋白（AFP）對原發(fā)性肝癌（PHC）的診斷價值及聯(lián)合檢測的意義。方法選取50例原發(fā)性肝癌患者、30例肝良性占位患者、45例肝硬化患者和60例健康志愿者進行研究，抽取每位研究對象4mL空腹靜脈血，采用電化學(xué)發(fā)光全自動免疫分析系統(tǒng)檢測患者血清中的甲胎蛋白（AFP）濃度，采用自行包被的ELISA檢測板和OD值半定量法檢測血漿PIgR/SC。肝癌患者手術(shù)切除后1周重復(fù)檢測AFP和PIgR/SC水平。結(jié)果肝癌、肝良性占位、肝硬化和志愿者4組患者PIgR/SC和AFP水平差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），兩兩分析，肝癌患者PIgR/SC高于肝良性占位患者、肝硬化患者和志愿者（P<0.05）。PIgR/SC診斷原發(fā)性肝細胞肝癌的敏感度為76%高于AFP的66%，特異性為68.9%，低于AFP的81.5%，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。聯(lián)合檢測PIgR/SC、AFP可提高肝癌患者的診斷率。PIgR/SC與AFP串聯(lián)檢測診斷肝癌的特異度為95.6%，2項指標并聯(lián)檢測診斷肝癌的靈敏度為92.0%，明顯高于單用PIgR/SC或AFP（P<0.05）；結(jié)論聯(lián)合檢測PIgR/SC、AFP可顯著提高原發(fā)性肝癌患者的診斷率。

[關(guān)鍵詞]多聚免疫球蛋白受體；甲胎蛋白；原發(fā)性肝癌；診斷價值

[中圖分類號]R735.7

[文獻標識碼]A

[文章編號]2095-0616（2016）23-15-04

原發(fā)性肝癌（簡稱肝癌），是我國常見的惡性腫瘤之一，其發(fā)病率在世界各地都有增加的趨勢，我國的新發(fā)病例占了全球肝癌病例的一半以上。肝癌具有惡性程度高、早期診斷率低、預(yù)后差、病死率高的特點，因此，肝癌的早期診斷是治療和延長患者生存期的關(guān)鍵。檢測肝癌血清中腫瘤標志物是目前早期診斷的主要手段之一。目前常用的肝癌腫瘤標志物為甲胎蛋白（AFP）。但臨床上約有30%肝癌病人AFP無明顯升高。而在慢性肝炎和肝硬化等一些慢性肝病中，AFP也會出現(xiàn)高水平表達。由于其敏感性與特異性不令人滿意，美國肝病研究協(xié)會和歐洲肝病研究協(xié)會有提出不推薦將血清AFP作為常規(guī)篩查診斷指標。而AFP與其他腫瘤標志物聯(lián)合應(yīng)用很可能會顯著增加AFP診斷的靈敏度。因此，尋找AFP以外特異性和靈敏度更高的肝癌診斷標志物，對提高肝癌的早期診斷率有重要臨床價值。本研究中我們探討檢測血漿多聚免疫球蛋白受體（polymeric immunoglobulinreceptor/secretory component，PIgR/SC）與甲胎蛋白聯(lián)合檢測對肝癌的診斷價值。

1.資料與方法

1.1一般資料

選擇2012年1月～2015年12月在連云港市第二人民醫(yī)院就診的原發(fā)性肝癌患者44例以及贛榆縣人民醫(yī)院同期收治的6例肝癌患者、肝硬化患者45例、肝良性占位患者30例及健康志愿者60例，肝癌患者均符合中國抗癌協(xié)會肝癌專業(yè)委員會2001年制定的《原發(fā)性肝癌》臨床診斷標準，其中男33例，女17例，年齡（56.5±7.2）歲，均經(jīng)手術(shù)切除病理證實為原發(fā)性肝癌；肝硬化患者均符合2005年中華醫(yī)學(xué)會肝病學(xué)分會、感染病學(xué)分會聯(lián)合修訂的《慢性乙型肝炎防治指南》中肝硬化診斷標準，其中男31例，女14例，年齡（54.5±6.5）歲，均經(jīng)臨床表現(xiàn)、生化、CT、MRI等綜合檢查確診已排除肝癌；肝良性占位患者，男11例，女1 9例，年齡（52.6±8.1），其中肝血管瘤13例，肝囊腫17例，三組間一般情況差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。同時抽取我院同期體檢的健康志愿者60例作為正常對照組，其中男30例，女30例，平均年齡（50.5±9.1）歲。

1.2標本采集

所有受研究者均于清晨空腹采集外周靜脈血4mL，其中2mL置入抗凝管中，3000r/min（離心半徑為10cm）離心15min，分離血漿，用于檢測PIgR/sC；另外2mL置人真空采血管，室溫自然凝集1h后，3000r/min（離心半徑為10cm）離心15min，分離血清用于檢測AFP。

1.3檢測方法

（1）AFP采用電化學(xué)發(fā)光全自動免疫分析系統(tǒng)（Cobase e601）及配套試劑盒檢測患者血清中的AFP濃度。（2）PIgR/SC采用ELISA法測定，經(jīng)包被、封閉、加樣、加酶標體、顯色、終止反應(yīng)等步驟，在酶標儀雙波長450nm/570 nm，檢測各孔的OD值。

1.4結(jié)果判斷

根據(jù)受試者工作特征（ROC）曲線確定對肝癌的診斷界值，假陽性和假陰性的病例數(shù)之和最小處為最佳臨界點（cutoff值約為0.805），大于或等于cutoff值者為陽性，小于cutoff值者為陰性。聯(lián)合檢測時，串聯(lián)要求兩項結(jié)果均為陽性，并聯(lián)要求其中一項陽性即判斷為陽性。

1.5統(tǒng)計學(xué)處理

采用SPSSl6.0進行統(tǒng)計學(xué)分析處理，計量資料（x±s）表示，采用t檢驗，計數(shù)資料以百分比表示，采用X²檢驗，P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2.結(jié)果

2.1各組pIgR/SC和AFP水平比較

從表1與表2可以看出，肝癌組患者PIgR/SC和AFP水平明顯高于肝硬化、肝良性占位患者和志愿者3組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；提示PIgR/SC診斷肝癌具有特異性，不易受到肝臟良性病變及健康人群的干擾。從表3可以看出原發(fā)性肝癌患者血漿PIgR/SC的陽性率高于AFP的陽性率（P<0.05），這可能對肝癌的診斷尤其是AFP陰性肝癌的診斷是一個有益的補充。

2.2 PIgR/SC和AFP項及聯(lián)合檢測對肝癌的診斷價值

PIgR/SC與AFP串聯(lián)檢測診斷肝癌的特異度為95.6%，明顯高于單用PIgR/SC（x²=4.76，P<0.05）或AFP組（x²=10.24，P<0.05）；2項指標并聯(lián)檢測診斷肝癌的靈敏度為92.0%，明顯高于單用PIgR/SC（x²=32.96，P<0.05減AFP組（x²=10.19，P<0.05）。提示應(yīng)用PIgR/SC與AFP聯(lián)合檢測肝癌具有較高價值。見表4。

3.討論

肝癌因其高病死率排行全球腫瘤第三位，對人類的生命和健康造成嚴重危害，其五年生存率較低。大部分患者不能早期發(fā)現(xiàn)，一經(jīng)發(fā)現(xiàn)即有肝內(nèi)或遠處轉(zhuǎn)移，僅有15%左右的患者有機會接受手術(shù)治療。而早期肝癌患者經(jīng)治療后5年生存率可達50%～75%，因此探尋一種簡便有效的檢測方法來篩查或診斷肝癌對患者的治療和預(yù)后均有著非常重要的意義。隨著影像學(xué)的快速發(fā)展，肝癌的診斷技術(shù)有了長足進步，但從檢查的便捷和經(jīng)濟等方面考慮，實驗室檢測項目的地位仍然不可替代。AFP是目前常用的原發(fā)性肝癌診斷標志物，但其敏感度和特異度均存在不同程度的不足，臨床上有較高的假陰性率，導(dǎo)致肝癌的漏檢率達30%～40%。本研究中，AFP的診斷敏感度為66.0%，特異性為81.5%，假陰性率達34%（17/50），與報道相符合，提示單用AFP檢測不能充分支持臨床診斷。尋找其他的實驗室檢測項目來幫助肝癌的臨床診斷就非常必要。

PlgR是腺上皮細胞表達的一種糖蛋白，其能夠在原發(fā)性肝癌中過表達。目前關(guān)于PIgR的研究比較多，但多數(shù)是研究腫瘤組織中PIgR過表達與肝癌術(shù)后復(fù)發(fā)或肝轉(zhuǎn)移的關(guān)系，用以判斷預(yù)后。而關(guān)于PIgR對原發(fā)性肝癌診斷的作用研究尚未見諸文獻報道。SC是PIgR的裂解片段，有學(xué)者報道采用ELISA檢測方法結(jié)合OD值半定量法成功的在人外周血中檢測出PIgR/SC蛋白，我們參考其方法應(yīng)用于本研究，并在受試者外周血中成功檢測出了PIgR/SC蛋白，證實其檢測方法可行。

檢驗結(jié)果顯示，PIgR/SC敏感度（88.0%）明顯高于AFP（66.0%），而且在AFP陰性組也有較高陽性率，提示PIgR/SC對原發(fā)性肝癌具有較高診斷價值。但據(jù)文獻報道，PIgR在很多組織和器官炎癥和上皮來源腫瘤中均升高，故本研究PIgR/SC的特異度偏低（68.9%）。本研究中PIgR/SC與AFP串聯(lián)檢測診斷肝癌的特異度為95.6%，并聯(lián)檢測診斷肝癌的靈敏度為92.0%，明顯高于單用PIgR/SC或AFP組（P<0.05）。提示PIgR/SC+AFP聯(lián)合檢測可以提高肝癌的確診率。肝癌組患者PIgR/SC水平明顯高于肝硬化、肝良性占位患者和志愿者3組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；提示PIgR/SC診斷肝癌具有一定的特異性。原發(fā)性肝癌患者血漿PIgR/SC的陽性率高于AFP的陽性率，提示PIgR/SC診斷肝癌的敏感性較高，這可能對肝癌的診斷尤其是AFP陰性肝癌的診斷是一個有益的補充。PIgR/SC與AFP串聯(lián)檢測診斷肝癌的特異度為95.6%，而2項指標并聯(lián)檢測診斷肝癌的靈敏度為92.0%，均明顯高于單用PIgR/sC或AFP（P<0.05），提示應(yīng)用PIgR/SC與AFP聯(lián)合檢測診斷肝癌強于PIgR/SC或AFP單項應(yīng)用。

綜上所述，PIgR/SC對原發(fā)性肝癌診斷具有較高價值。其敏感性高于AFP，提示PIgR/SC對肝癌的診斷或篩查具有重要的臨床意義，但因PIgR/SC的特異度偏低，診斷肝癌易出現(xiàn)假陽性可能，而PIgR/SC+AFP聯(lián)合檢測可以提高肝癌的靈敏度和特異度，較好的彌補了單用PIgR/SC檢測的不足，具有較大的臨床應(yīng)用價值。但本研究首次將血漿PIgR/SC及血清AFP聯(lián)合檢測用于原發(fā)性肝癌的診斷，結(jié)果尚有待進一步研究驗證；對于原發(fā)性肝癌患者血漿PIgR/SC的升高機制還需進一步研究證實。本次受研究條件、病例所限，我們僅對肝癌、肝臟良性占位、肝硬化和健康體檢者進行了研究，未納入其它腫瘤或炎性占位的患者，有待于在以后的研究中進一步開展。