徐洋濤++++++張瑜+++++++許躍軍+++++潘巖

[摘要] 目的 探討復方玄駒膠囊對弱精癥男性不育患者精液質量、精子功能形態(tài)及精漿一氧化氮（NO）水平的影響。 方法 回顧性分析2015年1月～2016年6月保定市第二中心醫(yī)院收治的80例弱精癥男性不育患者的臨床資料，按照治療方法分為復方玄駒組和常規(guī)治療組，每組各40例，另選擇30名精子質量正常的已婚已育男性作為健康對照組進行對比分析。常規(guī)治療組應用抗生素、能量劑及激素類藥物治療，復方玄駒組在常規(guī)治療組基礎上給予復方玄駒膠囊治療。比較治療前后患者精液質量變化，同時比較三組精子頂體完整性及精漿一氧化氮水平。 結果 治療3個月后，兩組患者精子密度均較治療前明顯下降（P < 0.05），但組間差異無統(tǒng)計學意義（P > 0.05），兩組患者精子活率及精子活力a級、a+b級百分比均較治療前明顯升高，且復方玄駒組各指標明顯高于常規(guī)治療組，差異均有統(tǒng)計學意義（P < 0.05或P < 0.01）。治療后，復方玄駒組患者精子頂體完整率較治療前明顯升高（P < 0.01），而常規(guī)治療組變化不明顯（P > 0.05）；復方玄駒組患者精子頂體完整率與健康對照組差異無統(tǒng)計學意義（P > 0.05），且均明顯高于常規(guī)治療組，差異均有統(tǒng)計學意義（P < 0.05或P < 0.01）。治療后，兩組患者精漿NO水平均較治療前明顯降低（P < 0.05或P < 0.01），復方玄駒組患者精漿NO水平與健康對照組差異無統(tǒng)計學意義（P >0.05），且均明顯低于常規(guī)治療組，差異均有統(tǒng)計學意義（P < 0.05或P < 0.01）。 結論 復方玄駒膠囊能明顯提高弱精癥男性不育患者精液質量及精子頂體完整率，降低精漿NO水平，對提高弱精癥患者療效具有重要價值，值得臨床推廣。

[關鍵詞] 復方玄駒；弱精癥；頂體；一氧化氮

[中圖分類號] R277.5 [文獻標識碼] A [文章編號] 1673-7210（2017）02（b）-0121-04

[Abstract] Objective To investigate the effect of sperm quality， sperm function form and seminal plasma nitric oxide level of weak sperm disease patients treating with Compound Xuanju Capsules. Methods From January 2015 to June 2016， in the Second Central Hospital of Baoding， the clinical data of 80 weak sperm male infertility patients were retrospective analyzed， they were divided into compound Xuanju group and convention treatment group by treatment method， with 40 cases in each group， and 30 normal sperm quality married with children men were selected as healthy control group. The convention treatment group patients were treated with antibiotic， energy agent and hormone drugs， the compound Xuanju group patients were given Compound Xuanju Capsules on the basis of convention treatment group. The sperm quality changes of patients before and after treatment were compared， and the sperm acrosome integrality and seminal plasma nitric oxide level detection of three groups were compared. Results After 3 months treatment， the sperm density of patients in two groups were significantly decreased than before the treatment （P < 0.05）， but there was no statistical significance between the two groups （P > 0.05）； the live sperm rate and sperm vitality grade a， a+b level percents of patients in two groups were significantly increased than before the treatment， and the indexes of compound Xuanju group were obviously higher than that of convention treatment group， the differences were statistical significance （P < 0.05 or P < 0.01）. After the treatment， the sperm acrosome integrality rate of compound Xuanju group significantly increased than before the treatment （P < 0.01）， and the changes of the conventional treatment were not obvious （P > 0.05）； the sperm acrosome integrality rate had no statistical significance between the compound Xuanju group and healthy control group （P > 0.05）， and these were significantly higher than that in the convention treatment group， the differences were statistical significant （P < 0.05 or P < 0.01）. After the treatment， the seminal plasma NO levels of patients in two groups were significantly lower than those before the treatment （P < 0.05 or P < 0.01）， the seminal plasma NO levels had no statistical significance between compound Xuanju group and healthy control group （P > 0.05）， and these were significantly lower than that in the convention treatment group， the differences were statistical significant （P < 0.05 or P < 0.01）. Conclusion Compound Xuanju Capsules can obviously improve the sperm quality and the sperm acrosome integrality rate of the weak sperm male infertility patients，reduce the seminal plasma NO levels， and it has important value to improve the curative effect for weak sperm disease patients， it is worth of clinical promotion.

[Key words] Compound Xuanju Capsules； Weak sperm disease； Acrosome； Nitric oxide

近年來，男性不育癥呈逐年上升趨勢[1]。在男性不育癥中，弱精癥占有很大比例，在不育癥發(fā)病原因中占75.5%[2]。目前，對弱精癥得治療主要以抗生素、激素和能量類藥物等治療為主，但效果不夠理想。保定市第二中心醫(yī)院在常規(guī)治療基礎上采用復方玄駒膠囊治療弱精癥取得了較好的治療效果，現(xiàn)報道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料

回顧性分析2015年1月～2016年6月在保定市第二中心醫(yī)院治療的80例弱精癥患者的臨床資料，按照治療方法分為復方玄駒組和常規(guī)治療組，每組各40例。復方玄駒組：年齡22～36歲，平均（29.3±5.6）歲，婚齡2～9年，平均（4.4±2.1）年，不育時間2～5年，平均（3.7±1.4）年。常規(guī)治療組：年齡22～34歲，平均（28.7±5.9）歲，婚齡2～8年，平均（4.2±1.9）年，不育時間2～5年，平均（3.5±1.6）年。兩組患者在年齡、婚齡、不育時間等一般資料比較，差異無統(tǒng)計學意義（P > 0.05），具有可比性。選取同期30名精子質量正常的已婚已育男性作為健康對照組，年齡24～35歲，平均（30.2±4.3）歲。

納入標準：①婚后夫妻性生活均正常，同居時間>2年，且未采取避孕措施；②精液分析結果符合弱精癥診斷：精子密度>20×106/mL，精子活率<60%，精子活力級別a≤25%，或a+b≤50%；③女方生殖功能檢查均正常；④治療前1個月內無改善精子數(shù)目或活力的藥物應用史，且近半年未服用過細胞毒性藥物、激素、抗癲癇、抗腫瘤等可能影響精子活力藥物者；⑤治療過程中均遵醫(yī)囑用藥者。

排除標準：①少精或無精癥以及勃起功能障礙、逆行射精或不射精的患者；②既往患有過尿道狹窄、腮腺炎病毒感染、生殖系統(tǒng)外傷等病史者；③患有隱睪、生殖系畸形及其他影響生育能力的先天性疾病者；④患有Cushing綜合征、甲亢、垂體瘤、腺垂體功能減退癥等患者；⑤患有嚴重糖尿病、重度營養(yǎng)不良等代謝性疾病以及嚴重心血管、肝、腎及造血系統(tǒng)原發(fā)性疾病的患者。

1.2 方法

常規(guī)治療組患者常規(guī)給予四環(huán)素類抗生素，ATP、輔酶Q10等能量劑，克羅米芬等激素類藥物治療。復方玄駒組患者在常規(guī)用藥基礎上給予復方玄駒膠囊（施強藥業(yè)有限公司生產，批號：20141215）3粒/次，3次/d。治療前及治療3個月后檢測兩組患者精液質量及精漿一氧化氮（NO）水平，并通過檢測精子頂體完整率對精子功能形態(tài)進行評價。由于精液質量有明確參考標準，故僅將精子頂體完整率及精漿NO水平與健康對照組進行對比分析。

1.2.1 精液質量檢測 每次精液采集于禁欲3～5 d后采用手淫法進行，精液質量采用計算機輔助精液分析（CASA）技術，項目包括精子密度、精子活率以及精子活力等參數(shù)。

1.2.2 精子頂體完整率檢測 常規(guī)進行瑞氏染液及吉姆薩染液的制備，并置于室溫1周后使用。取液化精液推片，95%乙醇固定10 min，自然干燥，用瑞-吉氏混合液（10∶1）加等量pH=6.9的磷酸鹽緩沖液，染色10 min，自來水沖洗，在把染片置于95%乙醇2～5 s，脫掉膜上的浮色，待自然干燥后，置于鏡下觀察，分別于3個視野中計算頂體完整率并取平均值，頂體完整率=（頂體完整的精子數(shù)/精子總數(shù)）×100%。

1.2.3 精漿NO檢測 精漿NO水平利用硝酸還原酶特異性及顯色深度進行常規(guī)檢測，3000 r/min離心8 min，離心半徑為8 cm，提取上清盡量多精漿放入1.5 mL Ep管于-20℃冰箱保存，標本收集15例或1個月內收集的標本（≤15例）解凍后根據(jù)試劑盒說明集中對精漿中NO含量進行測定。

1.3 統(tǒng)計學方法

采用統(tǒng)計軟件SPSS 18.0對數(shù)據(jù)進行分析，正態(tài)分布的計量資料以均數(shù)±標準差（x±s）表示，方差齊性時采用t檢驗，方差不齊時采用t'檢驗。以P < 0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 復方玄駒組及常規(guī)治療組治療前后精液質量比較

復方玄駒組及常規(guī)治療組患者治療前精子密度、精子活率及精子活力a級、a+b級百分比差異均無統(tǒng)計學意義（P > 0.05）。治療3個月后，兩組患者精子密度均較治療前明顯下降（P < 0.05），但組間差異無統(tǒng)計學意義（P > 0.05）；兩組患者精子活率及精子活力a級、a+b級百分比均較治療前明顯升高，且復方玄駒組各指標明顯高于常規(guī)治療組，差異均有統(tǒng)計學意義（P < 0.05或P < 0.01）。見表1。

2.2 復方玄駒組及常規(guī)治療組治療前后精子頂體完整率比較

治療前，復方玄駒組與常規(guī)治療組比較，差異無統(tǒng)計學意義（P > 0.05）；但均明顯低于健康對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P < 0.01）。治療3個月后，復方玄駒組患者精子頂體完整率較治療前明顯升高（P < 0.01），而常規(guī)治療組變化不明顯（P > 0.05），復方玄駒組患者精子頂體完整率與健康對照組差異無統(tǒng)計學意義（P > 0.05），且均明顯高于常規(guī)治療組，差異均有統(tǒng)計學意義（P < 0.05或P < 0.01）。見表2。

2.3 復方玄駒組及常規(guī)治療組治療前后精漿NO水平比較

復方玄駒組及常規(guī)治療組患者治療前精漿NO水平差異無統(tǒng)計學意義（P > 0.05），且均明顯高于健康對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P < 0.01）。治療3個月后，兩組患者精漿NO水平均較治療前明顯降低（P < 0.05或P < 0.01），復方玄駒組患者精漿NO水平與健康對照組比較，差異無統(tǒng)計學意義（P > 0.05），且均明顯低于常規(guī)治療組，差異均有統(tǒng)計學意義（P < 0.05或P < 0.01）。見表2。

3 討論

已有研究指出，精子活力是影響弱精癥男性生育能力最重要的指標[3]，只有正常做前向運動的精子才能順利抵達輸卵管壺腹部，并與卵子結合形成受精卵。另外，有研究發(fā)現(xiàn)精子密度過高也可能會導致男性不育，高密度精子不育者精子運動軌跡與正常生育男性有明顯差異，其原因可能與單位體積精子產生過多會出現(xiàn)精子先天營養(yǎng)不足，而導致精子質量及運動能力降低有關[4]。隨著對弱精癥研究的不斷深入，有研究發(fā)現(xiàn)精子功能與精子的正常形態(tài)密切相關，精子頭部缺陷，如大頭精子、不定行頭畸形精子等運動速度減慢，不能到達輸卵管，而無法與卵子結合，位于精子頭部頂體的異常導致精子喪失受精能力，而造成不育[5]，提示精子頂體完整率在男性不育中具有重要研究價值。另有研究發(fā)現(xiàn)，精子活力的相關病理變化可能與體內或精漿中的氧化應激狀態(tài)以及NO水平的平衡密切相關[6-8]，低濃度NO有利于精子活動度的提高，而高濃度則可能會造成生精功能損害、精子活動度受抑制、頂體反應率降低等[9-10]。因此，除精子活力外，精子功能形態(tài)及NO水平同樣可作為弱精癥評價及療效評價的重要參數(shù)。目前對弱精癥的治療除了一般的抗生素、激素和能量類藥物治療外，還有輔助生殖技術可供選擇，雖然治療效果不斷提高，但仍不夠理想。

中醫(yī)學中多將弱精癥歸入“精寒”、“精冷”、“不育”范疇[11]。多數(shù)認為腎虛是其根本，由于先天腎精不足，精失所養(yǎng)，又腎虛元氣不足，無力推動血脈的循行，局部瘀血阻滯，臟腑經絡氣血不通，致使精子運動乏力[12]。腎主生殖的實驗研究表明，腎虛存在下丘腦-垂體-性腺軸的功能紊亂，導致對性腺得刺激減弱而抑制對性激素釋放，影響睪丸和附睪功能，或通過損壞微環(huán)境而導致不育[13]。治療原則應以補腎生精，活血化瘀，溫陽益氣為主[14-15]。復方玄駒膠囊以玄駒為君藥，淫羊藿為臣藥，蛇床子、枸杞子為佐藥。方中玄駒即擬黑多刺蟻，補益肝腎、活血通絡[16]，淫羊藿溫補腎陽，枸杞子補肝益腎，蛇床子溫腎壯陽，諸藥配伍共奏溫腎、壯陽、益精、活血之功效[17]?，F(xiàn)代藥理學研究認為，擬黑多刺蟻富含ATP及多種有利氨基酸及微量元素，有利于提高生精功能及精液質量。淫羊藿具有雄激素樣作用，能提高生精功能，促進精液分泌[18]。枸杞子富含枸杞多糖和維生素，具有補肝腎、益精氣之功效[19]。蛇床子可顯著提高睪丸、附睪等功能，從而提高精子質量。已有大量研究證實，復方玄駒膠囊能明顯提高男性弱精癥不育患者（a+b）級精子比例以及精子活動率[20-21]。另外，吳國琳等[22]的研究結果顯示，應用復方玄駒膠囊的低劑量組和高劑量組大鼠血清NO水平較模型組明顯降低，且均更接近于正常組水平，提示復方玄駒膠囊不僅能提高少弱精癥患者精液質量，并能促進NO水平趨于正常。目前多認為應取接近于睪丸端的精索靜脈取血對NO水平進行檢測，但由于操作難度大，創(chuàng)傷大，很難廣泛應用于臨床[23-24]。

本研究在觀察復方玄駒膠囊治療前后精液質量變化的同時，對體現(xiàn)精子功能形態(tài)的頂體完整性以及精漿NO水平變化進行了綜合性分析，結果顯示，治療3個月后，復方玄駒組精子活率及精子活力a級、a+b級百分比均較治療前明顯升高，且改善明顯優(yōu)于常規(guī)治療組，與劉永杰等[20]、姜輝等[21]的研究結果基本一致；而復方玄駒組患者精子頂體完整率較治療前明顯升高，且明顯高于常規(guī)治療組，而與健康對照組差異無統(tǒng)計學意義（P > 0.05），提示復方玄駒膠囊能明顯改善精子功能形態(tài)，從而進一步提高精子質量；另外，復方玄駒組患者精漿NO水平較治療前明顯降低，且明顯低于常規(guī)治療組，而與健康對照組并無顯著性差異（P > 0.05），提示弱精癥患者存在精漿NO水平的明顯升高，而復方玄駒膠囊能明顯降低精漿NO水平，使其趨于平衡，這也可能是其進一步提高弱精癥患者精子活力、精子功能的基礎。

綜上所述，復方玄駒膠囊能明顯提高弱精癥男性不育患者精液質量及精子頂體完整率，降低精漿NO水平，對提高弱精癥患者療效具有重要價值，但其具體作用機制仍有待進一步研究證實。

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