王希波,劉艷

(濰坊市人民醫(yī)院，山東濰坊261041)

異位子宮內(nèi)膜組織中黏附斑激酶表達(dá)及其與臨床分期的關(guān)系

王希波,劉艷

(濰坊市人民醫(yī)院，山東濰坊261041)

目的 觀察黏附斑激酶(FAK)在異位子宮內(nèi)膜組織中的表達(dá)及其意義。方法 收集30例(臨床分期Ⅱ期6例、Ⅲ期11例、Ⅳ期13例)子宮內(nèi)膜異位癥(EMS)患者異位和在位子宮內(nèi)膜組織、10例因輸卵管阻塞因素不孕行試管嬰兒患者的正常子宮內(nèi)膜組織，采用免疫組化Elivision兩步法檢測不同子宮內(nèi)膜組織中的FAK。結(jié)果 EMS患者在位子宮內(nèi)膜組織中FAK陽性表達(dá)率為73.33%、異位子宮內(nèi)膜組織中為93.33%、正常子宮內(nèi)膜組織中為35.00%，不同組織間兩兩比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均<0.05)；臨床分期Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期EMS患者異位子宮內(nèi)膜組織中，F(xiàn)AK陽性表達(dá)率分別為66.67%、100%、100%，Ⅲ、Ⅳ期EMS患者異位子宮內(nèi)膜組織中FAK陽性表達(dá)率均高于Ⅱ期(P均<0.05)。結(jié)論 FAK在EMS患者異位子宮內(nèi)膜組織中高表達(dá)，且臨床分期高者FAK表達(dá)水平越高。

子宮內(nèi)膜異位癥；黏附斑激酶；在位內(nèi)膜；異位內(nèi)膜

子宮內(nèi)膜異位癥(EMS)是指具有活性的子宮內(nèi)膜組織出現(xiàn)在子宮內(nèi)膜以外的部位所引起的一種疾病，近年發(fā)病率呈上升趨勢。EMS雖為良性病變，但具有與惡性腫瘤相似的生物學(xué)行為，嚴(yán)重影響著婦女的健康和生活質(zhì)量[1,2]。近年來，國內(nèi)很多學(xué)者臨床研究發(fā)現(xiàn)，EMS患者在位內(nèi)膜組織中一些生物因子表達(dá)異常,有別于正常子宮內(nèi)膜,具有更強(qiáng)的黏附和侵襲能力。黏附斑激酶(FAK)是一種細(xì)胞質(zhì)中的非受體酪氨酸蛋白激酶，與惡性腫瘤關(guān)系密切，在腫瘤的侵襲、轉(zhuǎn)移以及種植上都起著重要作用。目前，關(guān)于EMS發(fā)病與FAK的研究性報(bào)道比較少。本研究觀察了FAK在異位子宮內(nèi)膜組織中的表達(dá)，并分析其與EMS臨床分期的關(guān)系?，F(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取2016年1～7月濰坊市人民醫(yī)院腹腔鏡手術(shù)治療的EMS患者30例(觀察組)，年齡26～35(30.5±3.4)歲，體質(zhì)量為47～63(52.6±7.2)kg，月經(jīng)周期27～30 d，臨床分期Ⅱ期6例、Ⅲ期11例、Ⅳ期13例；均經(jīng)手術(shù)病理證實(shí)，術(shù)前3個(gè)月內(nèi)均未使用任何性激素類藥物，術(shù)中獲取異位內(nèi)膜(巧克力囊腫壁)、在位內(nèi)膜(宮腔內(nèi)內(nèi)膜)。選擇同期門診因輸卵管阻塞因素不孕擬行試管嬰兒術(shù)前行宮腔鏡檢查的患者10例(對照組)，年齡28～36(31.3±3.1)歲，體質(zhì)量48～66(54.9±6.7)kg，月經(jīng)周期27～30 d，術(shù)中獲取正常子宮內(nèi)膜。兩組均排除合并有嚴(yán)重心腦血管疾病、肝腎功能不全及內(nèi)分泌、免疫和代謝性疾病，合并子宮肌瘤或其他生殖系統(tǒng)腫瘤、原發(fā)性痛經(jīng)、盆腔炎性包塊者，精神病者。兩組年齡、體質(zhì)量及月經(jīng)周期具有可比性(P均>0.05)。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準(zhǔn)，患者均簽署知情同意書。

1.2 檢測方法 手術(shù)切除子宮內(nèi)膜組織標(biāo)本用4%甲醛固定，常規(guī)脫水之后，將石蠟進(jìn)行簡單的包埋和固定。采用免疫組化Elivision兩步法檢測FAK，嚴(yán)格按照說明書來對具體流程進(jìn)行操作。一抗(FAK)的工作濃度比例為1∶100，以PBS作為空白對照，用已知陽性的結(jié)直腸癌作為陽性對照。結(jié)果評斷標(biāo)準(zhǔn)：采用人工半定量積分的方法，根據(jù)細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞膜在光鏡下的顏色對陽性細(xì)胞和陰性細(xì)胞進(jìn)行區(qū)分和判斷，若顆粒的顏色為黃色或者棕黃色則判斷其為陽性細(xì)胞，若顆粒沒有顏色則判斷其為陰性細(xì)胞。陽性細(xì)胞所占百分比：<10%計(jì)0分，10%～<25%計(jì)1分，26%～<50%計(jì)2分，≥50%計(jì)3分。陽性細(xì)胞染色程度：不著色計(jì)0分，淡黃色計(jì)1分，棕黃色計(jì)2分，黃褐色3分。將兩項(xiàng)評分相加，總分在0～1分為陰性(-)，2～3分為弱陽性(+)，4分為陽性(+ +)，5分以上為強(qiáng)陽性(+ + +)。+～+ + +均判為陽性表達(dá)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件。計(jì)數(shù)資料比較采用χ2檢驗(yàn)或Fisher確切概率法。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組FAK表達(dá)比較 觀察組在位內(nèi)膜組織中FAK陽性表達(dá)率為73.33%(22/30)、異位內(nèi)膜組織為93.33%(28/30)，對照組為30.00%(3/10)。觀察組異位和在位子宮內(nèi)膜組織中FAK陽性表達(dá)率均高于對照組(P<0.01、0.05)，且異位子宮內(nèi)膜組織中FAK陽性表達(dá)率高于在位子宮內(nèi)膜組織(P<0.05)。

2.2 觀察組不同臨床分期異位子宮內(nèi)膜組織中FAK表達(dá)比較 觀察組臨床分期Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期患者異位子宮內(nèi)膜組織中，F(xiàn)AK陽性表達(dá)率分別為66.67%(4/6)、100%(11/11)、100%(13/13)，Ⅲ、Ⅳ期EMS患者異位子宮內(nèi)膜組織中FAK陽性表達(dá)率均高于Ⅱ期(P均<0.05)。

3 討論

FAK位于整合素、神經(jīng)肽及癌基因作用的聚合點(diǎn)，是細(xì)胞質(zhì)中的一種非受體酪氨酸蛋白激酶。FAK是細(xì)胞內(nèi)多條信號傳導(dǎo)通路的交匯點(diǎn)，主要功能是激活后通過Ras/MAPK、PI3K/Akt等信號通路介導(dǎo)細(xì)胞和胞外基質(zhì)的黏附，從而參與細(xì)胞多種生理功能及腫瘤細(xì)胞的增殖、凋亡、轉(zhuǎn)移與侵襲[3,4]。研究[5～7]發(fā)現(xiàn)，在乳腺癌、卵巢癌、肝癌、大腸癌等人類多種惡性腫瘤組織中FAK處于高表達(dá)或過度激活狀態(tài)，說明FAK的表達(dá)水平有可能作為腫瘤侵襲和轉(zhuǎn)移早期事件的標(biāo)志物[8]，F(xiàn)AK高表達(dá)或過度激活可抑制腫瘤細(xì)胞凋亡，改變其黏附性能，增強(qiáng)遷移能力，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的增殖，抑制其表達(dá)或功能則可抑制腫瘤的惡性表型[9,10]。

EMS為婦科常見病、多發(fā)病，是導(dǎo)致痛經(jīng)及不孕的首要原因，嚴(yán)重影響婦女的生活質(zhì)量，其發(fā)病機(jī)制尚不十分明了。隨著醫(yī)學(xué)上對EMS的廣泛深入研究，證實(shí)該病具有與惡性腫瘤非常相近的生物學(xué)特性，同時(shí)具有明顯的黏附、侵襲、轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)等類似惡性腫瘤的生物學(xué)行為。目前有研究表明EMS與FAK表達(dá)異常有關(guān)，F(xiàn)AK在異位內(nèi)膜組織中表達(dá)明顯升高，其表達(dá)水平與EMS臨床分期、盆腔疼痛及卵巢子宮內(nèi)膜異位囊腫的大小呈正相關(guān)[11,12]。本研究也證明EMS與FAK表達(dá)異常有關(guān)，且隨著EMS臨床分期的增高FAK的表達(dá)也相應(yīng)升高，說明FAK在EMS的發(fā)生、侵襲轉(zhuǎn)移中起重要作用。提示研究FAK 在EMS和正常子宮內(nèi)膜中的表達(dá)和基因調(diào)控情況，對EMS患者的無創(chuàng)性診斷及選擇新的治療靶點(diǎn)具有重要意義。

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