孟秀彥

（泰山職業(yè)技術(shù)學(xué)院 山東 泰安 271000）

行業(yè)論壇

淺談做好雞新城疫抗體水平測(cè)定技能大賽的培訓(xùn)工作

孟秀彥

（泰山職業(yè)技術(shù)學(xué)院 山東 泰安 271000）

雞新城疫抗體水平測(cè)定項(xiàng)目是全國(guó)職業(yè)院校技能大賽農(nóng)業(yè)類賽項(xiàng)舉辦以來(lái)高職組的一個(gè)固定項(xiàng)目，筆者曾多次指導(dǎo)學(xué)生參加該項(xiàng)目省級(jí)比賽，積累了一些經(jīng)驗(yàn)，現(xiàn)總結(jié)出來(lái)分享給大家，希望能拋磚引玉，與更多地同行共同探討、互相學(xué)習(xí)，把這項(xiàng)工作做得更好。

1 認(rèn)真學(xué)習(xí)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)(GB/T16550-2008)“雞新城疫診斷技術(shù)”的相關(guān)部分

該競(jìng)賽項(xiàng)目是以國(guó)家職業(yè)標(biāo)準(zhǔn)《動(dòng)物疫病防治員》(高級(jí))規(guī)定的技能要求為基礎(chǔ)，以中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)(GB/T16550-2008)“雞新城疫診斷技術(shù)”為依據(jù)，操作規(guī)范與要求參考國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB/T16550-2008的第5(血凝試驗(yàn))和第6(血凝抑制試驗(yàn))兩個(gè)部分。讓學(xué)生有深刻的理論知識(shí)基礎(chǔ)，知其然知其所以然，操作時(shí)才能有的放矢，賽場(chǎng)上才能隨機(jī)應(yīng)變，正確合理地解決突發(fā)問(wèn)題。將來(lái)到生產(chǎn)上也才能更好地解決實(shí)際問(wèn)題，這也是舉行比賽的宗旨。好多教師忽略了這一點(diǎn)，認(rèn)為只要學(xué)生能規(guī)范熟練機(jī)械的操作就能取得好成績(jī)。

2 熟練掌握各種儀器的規(guī)范使用

在比賽中用到的儀器主要有禽用采血器、普通托盤天平、離心機(jī)、微量移液器、微型振蕩器、恒溫箱等。要讓學(xué)生掌握每一種儀器的使用原理、操作規(guī)范及注意事項(xiàng)等，可以讓學(xué)生進(jìn)行單項(xiàng)訓(xùn)練、比賽，現(xiàn)場(chǎng)點(diǎn)評(píng)，學(xué)、比、趕、幫、超相結(jié)合，互相促進(jìn)、提高。

3 認(rèn)真研讀評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)細(xì)則，針對(duì)考核要點(diǎn)及評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)制定合理的操作規(guī)程及標(biāo)準(zhǔn)

選手比賽操作流程及標(biāo)準(zhǔn)總結(jié)如下：

3.1 操作前準(zhǔn)備工作 穿工作服，清洗手，戴手套等。

3.2 試驗(yàn)器材準(zhǔn)備 （1）正確選擇儀器、材料，合理擺放、標(biāo)示。兩個(gè)離心管：血、鹽水；2個(gè)小燒杯，5個(gè)大燒杯：配平1，配平2，生理鹽水，1%紅細(xì)胞懸液，四單位病毒，廢液、廢棄物。（2）檢查天平、微量移液器、離心機(jī)、振蕩器、恒溫箱的工作狀況，如發(fā)現(xiàn)問(wèn)題及時(shí)舉手示意，請(qǐng)求評(píng)委予以解決。（3）清點(diǎn)所需物品，清點(diǎn)被檢血清數(shù)量。

3.3 配制1%紅細(xì)胞懸液 （1）采血及1%紅細(xì)胞懸液的制備：采血器內(nèi)吸取抗凝劑，翅靜脈采血適量，抗凝劑與血液比例為1∶4)，采血前酒精消毒，采血后干棉球止血，注射器采血后注意立即輕輕搖動(dòng)，拔掉針頭，貼壁輕輕打入標(biāo)記“血”的離心管中，與標(biāo)記“鹽水”的離心管配平，注意要加上相應(yīng)的離心套管和離心管蓋子。配平時(shí)一般用移液器向不含紅細(xì)胞一側(cè)離心管內(nèi)添加或吸取生理水。2000rpm/min離心5～10min。用1000μl移液器，吸出適量上清液，槍頭插入離心管內(nèi)固形物上部，輕輕旋轉(zhuǎn)至白細(xì)胞旋起，慢慢松開(kāi)大拇指，吸出白細(xì)胞、鹽水等。再加入生理鹽水，混勻洗滌、離心，重復(fù)操作3次。向標(biāo)記1%紅細(xì)胞的燒杯中事先加入30ml生理鹽水(看檢測(cè)樣品多少而定，這里以配制30ml 1%紅細(xì)胞懸液為例)，再吸出300ul生理鹽水。用1000ul移液器調(diào)至300ul刻度，槍頭輕輕插入離心管底部，注意不要用力按壓，慢慢松手至液面不再上升為止，略停片刻(此時(shí)心中可默數(shù)1.2.3)，輕輕提起移液器。將盛鹽水燒杯稍傾斜，槍頭插入液面以下并遠(yuǎn)離燒杯底部，紅細(xì)胞慢慢排出，邊排出邊旋轉(zhuǎn)，最后槍頭用生理鹽水盡量洗干凈。

3.4 血凝及血凝抑制試驗(yàn) （1）試驗(yàn)過(guò)程(略)。（2）注意事項(xiàng)：①反應(yīng)板要標(biāo)記工位號(hào)、HA板或HI板，以防感作時(shí)與其他選手的反應(yīng)板混淆。反應(yīng)板可在6～7孔之間劃線，以防止加樣時(shí)加錯(cuò)孔；②每次換槍頭時(shí)槍頭要預(yù)濕潤(rùn)；③移液器要懸空加樣，移液器排空時(shí)要用力打出至第二檔位。④加樣或倍比稀釋時(shí)要防止出現(xiàn)氣泡。⑤血清、抗原，4單位病毒、1%雞紅細(xì)胞懸液加樣前要預(yù)先混勻，4單位病毒、1%雞紅細(xì)胞懸液在加樣過(guò)程中要經(jīng)常輕搖混勻，可每加3～5個(gè)樣就輕輕搖動(dòng)幾下。⑥倍比稀釋后再加樣一律由后向前加。⑦對(duì)照孔操作一定要特別小心，以防對(duì)照孔出現(xiàn)假陰性或假陽(yáng)性。⑧反應(yīng)板送恒溫箱感作時(shí)隊(duì)員要雙手拿板，最好兩個(gè)隊(duì)員同時(shí)去，以防失手反應(yīng)板內(nèi)液體灑出等。觀察結(jié)果時(shí)要先舉手示意評(píng)委老師，在評(píng)委老師的監(jiān)督下觀看結(jié)果并記錄。板豎起時(shí)樣品由上至下的順序最好是1，2，3……，防止記錄結(jié)果時(shí)順序弄反了。⑨試驗(yàn)步驟、感作時(shí)間、結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)要嚴(yán)格按照國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行。⑩操作中要及時(shí)在打草紙上記錄時(shí)間、過(guò)程等，尤其是時(shí)間的起始。○11判定結(jié)果時(shí)被檢血清如第10孔仍有拖線，血清效價(jià)應(yīng)記為大于等于10。

3.5 清理物品、儀器復(fù)位 移液器的刻度要調(diào)至最大，微型振蕩器、離心機(jī)要拔掉電源，天平復(fù)位。

4 其它注意事項(xiàng)

（1）選拔參賽隊(duì)員時(shí)除了要考量選手的思想品質(zhì)、專業(yè)知識(shí)基礎(chǔ)、動(dòng)手能力外，還要注意心理素質(zhì)及應(yīng)變能力。有的選手場(chǎng)下做得很好，但一上場(chǎng)就特別緊張，嚴(yán)重影響操作。賽前訓(xùn)練非常辛苦，非能吃苦、肯鉆研的學(xué)生不能勝任。（2）應(yīng)加強(qiáng)校企合作，讓學(xué)生多與生產(chǎn)實(shí)踐結(jié)合，為學(xué)生提供大量的檢測(cè)樣品。俗話說(shuō)熟能生巧，做得多了，遇到問(wèn)題多了，解決的問(wèn)題多了，學(xué)生的操作水平會(huì)大大提高，才能做到在賽場(chǎng)上游刃有余。（3）訓(xùn)練時(shí)要多進(jìn)行模擬比賽，包括現(xiàn)場(chǎng)緊張氣氛的模擬?？梢哉?qǐng)其他同學(xué)、老師到現(xiàn)場(chǎng)觀摩、點(diǎn)評(píng)。還可以全程錄像，人為制造緊張氣氛，以鍛煉選手的抗干擾能力?？梢哉?qǐng)選手為其他班級(jí)上試驗(yàn)課，既可以提高其業(yè)務(wù)水平，對(duì)其心理素質(zhì)也是一個(gè)很好的鍛煉。（4）平時(shí)訓(xùn)練時(shí)應(yīng)嚴(yán)格按照比賽要求訓(xùn)練，每一個(gè)細(xì)節(jié)都要做到最好。（5）訓(xùn)練儀器、耗材要盡可能按比賽要求準(zhǔn)備。有條件的學(xué)校要帶學(xué)生多參觀、熟悉一些不同型號(hào)、規(guī)格儀器的使用方法。標(biāo)準(zhǔn)抗原我們?cè)秒u新城疫疫苗代替，導(dǎo)致產(chǎn)生的現(xiàn)象不明顯，與標(biāo)準(zhǔn)抗原凝集價(jià)差別較大，嚴(yán)重影響結(jié)果的準(zhǔn)確性。（6）賽前要讓學(xué)生休息好，保持充沛的精力和良好的精神狀態(tài)。（7）學(xué)生離開(kāi)賽場(chǎng)后要及時(shí)與指導(dǎo)教師溝通，以便在大賽組委會(huì)公布成績(jī)、專家點(diǎn)評(píng)時(shí)心中有數(shù)，也有助于指導(dǎo)教師為今后的比賽積累經(jīng)驗(yàn)。

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