焦福林，韓一超，李文剛，梁興龍，任喜斌，劉文俊，吳志娟，賀東昌

非洲豬瘟的檢測與防控

焦福林，韓一超，李文剛，梁興龍，任喜斌，劉文俊，吳志娟，賀東昌

（山西省農(nóng)業(yè)科學院畜牧獸醫(yī)研究所，山西太原030032）

非洲豬瘟是由非洲豬瘟病毒引起的豬急性、烈性傳染病。臨床癥狀以高熱、皮膚發(fā)紺、呼吸障礙和神經(jīng)癥狀為主要特征，病理變化以全身廣泛出血為主，發(fā)病率和死亡率幾乎達100%。豬是唯一的自然宿主，軟蜱為傳播的主要媒介。1921年肯尼亞首次報道；1957，1971，2007年分別傳到了葡萄牙、南美洲和高加索地區(qū)；2017年3月，在俄羅斯遠東地區(qū)伊爾庫茨克州發(fā)生了非洲豬瘟，伊爾庫茨克州距離我國較近，且邊境地區(qū)存在軟蜱和野豬，非洲豬瘟傳入我國的風險很大，對我國的防控提出了嚴峻的挑戰(zhàn)。

非洲豬瘟；臨床癥狀；病理變化；防控

非洲豬瘟（African swine fever，ASF），又稱非洲豬瘟疫，或疣豬病[1]，是由非洲豬瘟病毒（African swine fever virus，ASFV）引起的豬急性、烈性傳染病。臨床以高熱、皮膚發(fā)紺、呼吸障礙和神經(jīng)癥狀為主要特征，發(fā)病率和死亡率幾乎達100%。ASF是世界動物衛(wèi)生組織（OIE）要求各成員國及時報告的疾病之一，也是我國動物病原微生物名錄中的一類病。1921年東非肯尼亞首次公開報道了非洲豬瘟，1957年傳到了葡萄牙，1971年傳入南美洲，2007年傳入高加索地區(qū)。目前全球共有29個國家存在非洲豬瘟，大部分都是非洲國家，也包括高加索地區(qū)和俄羅斯聯(lián)邦以及一些歐洲國家[2]。2017年3月，俄羅斯遠東地區(qū)伊爾庫茨克州發(fā)生非洲豬瘟疫情。伊爾庫茨克州距離我國較近，同時邊境地區(qū)有軟蜱和野豬的存在，使非洲豬瘟傳入我國的風險加大，對我國防控ASF提出了嚴峻的挑戰(zhàn)，因此，應加強我國非洲豬瘟實驗室的檢測方法建設和對邊境地區(qū)軟蜱和野豬以及進口家豬的檢測。

1 病原體特征

非洲豬瘟病毒屬非洲豬瘟病毒科（Asfarviridae）中的唯一成員[3]。ASFV是一種非常復雜的病毒，直徑為170～200 nm、帶衣殼和含類脂的囊膜雙股DNA病毒[4-5]，基因組全長170～190 kb，含有151個開放閱讀框（ORFs），5個多基因家族編碼200多種蛋白質(zhì)[3]。ASFV只有一個血清型，根據(jù)B646L基因（編碼P72蛋白）進行分型，可以分成22種不同的基因型[6-7]，其中，最大的基因群為基因Ⅰ型，或稱ESAC-WA基因型，由從歐洲、南美洲、加勒比海和西非等地區(qū)的24個國家分離到的毒株組成[6]，不同基因型的ASFV毒株分布有一定的區(qū)域性特點[1]，不同分離毒株間全基因組序列有明顯差異[8]。ASFV在自然環(huán)境中抵抗力很強，在豬舍中能存活30 d以上，混于25%血清中的病毒37℃半存活期為24 h，18個月仍能從血液和血清中分離出病毒；室溫條件下，在糞便中能存活11 d，60℃30 min可滅活，冰凍的肉中能存活幾周或幾月；pH值1.9～13.4可存活2 h以上；對甲醛、氫氧化鈉、乙酰乙烯亞胺等常用消毒劑以及乙醚和氯仿等脂溶劑敏感。

2 流行特點

豬是ASFV唯一的自然宿主[9]，ASF僅發(fā)生于豬和野豬，并且傳播快、發(fā)病率和死亡率高，所有品種和年齡豬均可感染。歐洲野豬、非洲野豬和美洲野豬都是非洲豬瘟的宿主和易感動物[10]，其中，非洲的疣豬在ASF的流行、維持與傳播中起著最重要的作用[11]。非洲軟蜱、患病豬、康復豬為主要傳染源。豬虱以及蜱類是主要的傳播媒介[9]，作為ASF媒介的蜱僅局限于軟蜱科中的鈍緣蜱屬[12]，軟蜱通過吸血而感染ASFV，而受感染的軟蜱能長時間的貯藏病毒，并通過叮咬將其傳播給其他易感豬群，同時可將病毒垂直傳染給子代。病毒存在于病豬和死豬的體液、組織、分泌物和排泄物中，能夠污染飼料、圈舍、圍欄、器具和衣物。豬群可通過帶毒的吸血昆蟲如軟蜱叮咬，采食被污染的飼料、泔水，接觸被污染圈舍、圍欄、器具和衣物感染；也可通過短距離內(nèi)被污染的空氣感染[13]；精液也有可能成為ASFV傳播的一個途徑[14]。某一地區(qū)一旦暴發(fā)ASF，很難消滅，多數(shù)會成為地方性疾病。

3 臨床癥狀

自然感染潛伏期4～19 d，實驗室感染潛伏期由于接種病毒的劑量和接種的途徑不同一般為2～5 d。臨床癥狀與病毒的毒力、感染的劑量和途徑有關(guān)，可分為超急性型、急性型、亞急性型和隱性型。感染ASFV后，開始體溫驟然上升，精神及食欲正常，隨后精神不振、食欲廢絕、心跳及呼吸急促、畏寒、無法站立，耳、腹、尾巴等處皮膚可出現(xiàn)藍紫色出血塊，一般病程為5～7 d，致死率 95%～100%。盡管ASFV感染后產(chǎn)生的中和抗體不能對病毒感染提供足夠的保護，但是可以減少病毒血癥，延緩臨床癥狀的出現(xiàn)[15]。

4 病理變化

急性型、亞急性型的病理剖解變化較明顯，主要的病變器官為脾臟、淋巴結(jié)、腎臟和心臟。脾臟腫大、出血，呈紅黑色，質(zhì)脆，有梗死灶；淋巴結(jié)腫大、出血、變脆，有時血腫呈黑紅色，切面呈大理石樣；腎皮質(zhì)和腎盂切面有點狀出血；心臟斑點狀出血，心包積液帶有血液。急性型消化道水腫出血，腹腔內(nèi)有血性漿液，膽囊、肝充血，胸腔內(nèi)有胸水，胸膜上有出血點，肺水腫，膀胱黏膜針尖狀出血。

5 實驗室檢測

ASF是豬的急性、烈性傳染病，目前，我國尚未發(fā)現(xiàn)，建立快速有效的實驗室檢測方法，并對邊境地區(qū)軟蜱和野豬以及進口家豬進行及時準確地檢測，對于我國防控ASF非常重要。

非洲豬瘟病原的檢測常用直接免疫熒光法（DIF），血細胞吸附實驗（HA），聚合酶鏈式反應（PCR）等方法。DIF是ASF最常用、安全的檢測方法，對急性ASF是一種快速、經(jīng)濟和敏感性高的一種方法，而對于亞急性和慢性ASF的敏感性較低，只有40%；HA具有很高的特異性和靈敏性，常用于疾病的急性暴發(fā)診斷，尤其是在應用其他方法檢測為陰性時常用的檢測方法；聚合酶鏈式反應（PCR）具有及時、快速、準確的特點，對于任何毒力的毒株以及HA方法不能診斷的毒株都能檢測，在疾病的檢測、診斷和根除計劃中起著很重要的作用。吳憶春[16]研制了敏感性可達0.1 fg的快速檢測ASFVPCR試劑盒，并且IgG與豬偽狂犬病病毒、豬瘟病毒（疫苗株）、豬圓環(huán)病毒2型、豬繁殖與呼吸綜合征病毒、豬乙型腦炎病毒、豬細小病毒、健康豬和蜱的基因組無交叉反應。鄔旭龍[17]在分子生物學的基礎(chǔ)上，利用環(huán)介導等溫擴增快速、簡便的特性，建立了一種快速檢測非洲豬瘟病毒LAMP方法。

抗體檢測常用補體結(jié)合反應、瓊脂擴散試驗、間接免疫熒光技術(shù)、酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）等方法。ASFV感染豬7 d左右即可檢出IgM和IgG，并且IgG在感染豬體內(nèi)能存在數(shù)年。蔣正軍等[18]在國內(nèi)首次用Bac價2作載體表達的非洲豬瘟衣殼蛋白抗原即2作為間接EHAS反應的包被抗原，建立了非洲豬瘟的ELISA檢測方法，并對我國的ASF血清學進行了調(diào)查，沒有陽性結(jié)果，這與我國實際情況相符。董志珍等[19]建立了檢測血清中非洲豬瘟抗體的競爭法ELISA，結(jié)果表明，ELISA競爭法特異性高，無交叉反應，靈敏度高于間接免疫熒光法，可用于豬血清的非洲豬瘟抗體檢測。

6 預防控制

我國尚未報道有ASF的發(fā)生，2017年3月，俄羅斯遠東地區(qū)伊爾庫茨克州發(fā)生非洲豬瘟疫情，由于非洲豬瘟病毒的傳播速度快、傳播媒介多，中俄邊境地區(qū)野豬的流動和軟蜱的存在，對我國構(gòu)成了嚴重的威脅，應提高警惕。對ASFV的感染機制至今不完全了解，保護性免疫反應復雜，目前傳統(tǒng)的滅活疫苗、弱毒疫苗、亞單位疫苗和DNA疫苗不能提供完全有效地免疫保護，無理想的疫苗用于主動或被動免疫[20-21]，也無理想的藥物可以進行治療，因此，做好周密的預防和控制計劃是預防控制ASF發(fā)生的關(guān)鍵。（1）引種時加強檢疫、檢測，從無疫區(qū)引種；（2）密切關(guān)注疫情動態(tài)，對與我國相鄰的發(fā)病國家邊境周邊地區(qū)的蜱類和野豬進行檢疫、檢測；（3）對來自發(fā)病國家的過境車輛、飛機和船舶上需要在港口處理的食物和泔水等要進行無害化處理；（4）嚴禁進口疫區(qū)豬肉及副產(chǎn)品；（5）發(fā)現(xiàn)疑似病例，及時向主管部門報告，做到“早、快、嚴、小”，劃定疫點、疫區(qū)、受威脅區(qū)，調(diào)查疫源，對豬群迅速采取封鎖、隔離、撲殺、銷毀、消毒、無害化處理等強制性措施，迅速撲滅疫病，嚴防擴散。

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Detection and Control of African Swine Fever

JIAOFulin，HANYichao，LIWengang，LIANGXinglong，RENXibin，LIUWenjun，WUZhijuan，HEDongchang
（Instituteof Animal Husbandry and Veterinary，Shanxi Academy of Agricultural Sciences，Taiyuan 030032，China）

African swine fever caused by African swine fever virus in pigs which is an acute and virulent disease.High fever,skin cyanosis,respiratory disorders and neurological symptoms were the main clinical symptoms.The main pathological changes were extensive hemorrhage,morbidity and mortality were almost 100%.The pig is the only natural host,and soft ticks are the main vector of transmission.Kenya was first reported in 1921,and spread to Portugal,South America and the Caucasus in 1957,1971 and 2007,respectively.In March 2017,African swine fever occurred in the Far East of Russia Irkutsk.Irkutsk distance in our country is short,soft ticks and wild boar is in border areas,the risk of African swine fever spread to China is great.It is a severe challenge to prevention and control African swinefever in our country.

African swine fever;clinical symptoms;pathological changes;prevention and control

S858.28

A

1002-2481（2017）12-2006-03

10.3969/j.issn.1002-2481.2017.12.26

2017-09-11

山西省科技攻關(guān)項目（20150311018-2）；山西省農(nóng)業(yè)科技成果轉(zhuǎn)化和示范推廣項目（2017CGZH04）；生豬安全高效生產(chǎn)山西省科技創(chuàng)新團隊（201313120）

焦福林（1964-），男，山西晉中人，副研究員，主要從事養(yǎng)豬與豬病防治研究工作。