陳 飛， 曾傳琴， 歐 彬

(四川大學(xué)華西廣安醫(yī)院病理科， 四川 廣安 638001)

血清高爾基體膜蛋白73在原發(fā)性肝細(xì)胞癌早期診斷中的應(yīng)用

陳 飛， 曾傳琴， 歐 彬

(四川大學(xué)華西廣安醫(yī)院病理科， 四川 廣安 638001)

目的：探討血清高爾基體膜蛋白73(GP73)診斷原發(fā)性肝細(xì)胞癌(HCC)的臨床價(jià)值。方法：選取2014年7月至2015年7月期間我院接收的門(mén)診、住院和健康體檢人群300例，將其分為5組，分別為HCC組、乙肝后硬化組、其他惡性腫瘤組、乙型病毒性肝炎組、健康對(duì)照組，檢測(cè)5組的血清GP73、甲胎蛋白(AFP)水平，繪制其診斷HCC的ROC曲線。結(jié)果：HCC患者中，不同年齡、腫瘤大小、性別及不同AFP濃度患者的血清GP73水平比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；HCC組血清AFP、GP73水平較其他各組人群差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，慢性乙型肝炎組、乙肝后肝硬化組及其他惡性腫瘤組患者AFP、GP73均較健康對(duì)照組差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；GP73診斷HCC的特異性、敏感性均高于AFP，P<0.05。結(jié)論：血清GP73對(duì)HCC的診斷敏感性、特異性優(yōu)于AFP，可作為HCC早期診斷的血清標(biāo)記物。

原發(fā)性肝細(xì)胞癌； GP73； 慢性乙型肝炎； 乙肝后肝硬化； 惡性腫瘤； 早期診斷

原發(fā)性肝癌(PHC)是發(fā)病率位列我國(guó)第三的惡性腫瘤，其中以肝細(xì)胞肝癌(HCC)最為多見(jiàn)，發(fā)病率占PHC的90%[1]。HCC的預(yù)后與其發(fā)現(xiàn)階段密切相關(guān)，越早發(fā)現(xiàn)，治療效果就越好，但多數(shù)肝細(xì)胞肝癌患者一經(jīng)診斷基本已處于晚期，往往治愈率極低。因此盡早診斷HCC對(duì)臨床醫(yī)師制定治療方案，提高治愈率具有重要意義。甲胎蛋白(AFP)是既往早期HCC監(jiān)測(cè)的主要指標(biāo)，其特異度為70%～92%，敏感性為39%～65%之間，但患有肝硬化活動(dòng)期、肝炎、睪丸癌、生殖腺胎瘤、卵巢癌等疾病時(shí)，其水平也會(huì)出現(xiàn)升高，而影響其對(duì)HCC的診斷。近年來(lái)，隨著蛋白質(zhì)組學(xué)、基因技術(shù)、腫瘤免疫等研究的快速發(fā)展，一系列新的肝癌腫瘤學(xué)標(biāo)準(zhǔn)物，如甲胎蛋白異質(zhì)體-3(AFP-3)、肝癌缺失基因-1(DLD-1)、高爾基體蛋白-73(GP73)相繼被人們發(fā)現(xiàn)，其中GP73被認(rèn)為是最值得期待的肝癌血清標(biāo)志物[2]。本研究中觀察GP73在不同人群血清中的表達(dá)水平及差異，判斷其在HCC早期診斷中的應(yīng)用價(jià)值，現(xiàn)報(bào)道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料:選取2014年7月至2015年7月期間我院接收的門(mén)診、住院和健康體檢人群，共300例，將其分為5組，分別為HCC組，58例，女12例，男46例，年齡40～75歲，平均(51.8±3.3)歲；乙肝后硬化組60例，女15例，男45例，年齡20～68歲，平均(45.6±3.5)歲；乙型病毒性肝炎組65例，女20例，男45例，年齡20～68歲，平均(40.8±6.3)歲；其他惡性腫瘤組(均經(jīng)病理血確診)50例，其中胰腺癌8例，胃癌19例，食管癌10例，膽囊癌1例，結(jié)腸癌4例，十二指腸癌3例，直腸癌5例，其中女14例，男36例，年齡20～86歲，平均(63.8±5.3)歲，健康對(duì)照組67例，其中女25例，男42例，年齡20～68歲，平均(36.5±4.3)歲。

1.2 方法:采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)檢測(cè)GP73，采用武漢華美生物工程有限公司提供的試劑盒；采用電化學(xué)發(fā)光法測(cè)定AFP，采用Cobas6000全自動(dòng)生化免疫分析儀(瑞士羅氏公司)，試劑盒為配套試劑。根據(jù)實(shí)體或影像學(xué)檢查對(duì)腫瘤病灶打下進(jìn)行測(cè)量，將HCC分為瘤體<5cm和≥5cm兩組。

2 結(jié) 果

表1 HCC組中不同情況患者的GP73值差異

2.1 HCC組中腫瘤大小、性別、年齡及AFP濃度不同的GP73值差異:HCC患者中，不同年齡、腫瘤大小、性別及不同AFP濃度患者的血清GP73水平比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，見(jiàn)表1。

2.2 各組AFP和GP73表達(dá)水平:HCC組血清AFP、GP73水平較其他各組人群均要高(P<0.05)，慢性乙型肝炎組、乙肝后肝硬化組及其他惡性腫瘤組患者AFP、GP73均較健康對(duì)照組要高(P<0.05)，見(jiàn)表2。

表2 各組AFP和GP73表達(dá)水平差異

注：與健康對(duì)照組比較，*P<0.05；與HCC組比較，#P<0.05

2.3 血清AFP和GP73的ROC曲線分析應(yīng)用:GP73曲線下面積為0.862，其用于診斷HCC的臨界值為150μg/L，診斷HCC的特異度和靈敏度達(dá)到最佳，AFP的曲線面積為0.758，其用于診斷HCC的臨界值為200μg/L時(shí)，診斷HCC的特異度、靈敏度最佳。

2.4 血清GP73和AFP檢測(cè)對(duì)HCC診斷效能差異:GP73診斷HCC的特異性、敏感性、準(zhǔn)確度均高于AFP，P<0.05，見(jiàn)表3。

表3 血清GP73和AFP檢測(cè)對(duì)HCC診斷效能差異

3 討 論

HCC是一種惡性程度高、進(jìn)展快、病死率高的惡性腫瘤，肝內(nèi)小的惡性病變采用影像學(xué)檢查仍較難發(fā)現(xiàn)，而腫瘤越小，則治愈率越高，因此對(duì)HCC早發(fā)現(xiàn)、早診斷尤為重要。AFP作為傳統(tǒng)肝癌標(biāo)志物，大量床病例及長(zhǎng)期觀察顯示，AFP特異性為70%～92%，敏感性為39%-65%之間[3]。理想的腫瘤標(biāo)記物應(yīng)具有高度的特異性，能將肝臟病變，如肝臟再生結(jié)節(jié)、肝硬化、肝炎等與原發(fā)性肝癌進(jìn)行鑒別。同時(shí)它還能在HCC早期提示診斷，需要有高度的敏感性，且具有可重復(fù)、易檢測(cè)及取樣簡(jiǎn)單、安全的特征。而AFP診斷HCC的敏感性不夠。本研究中AFP診斷HCC的敏感性、特異性分別為60.3%、71.1%，診斷價(jià)值不高。因此，尋找新的更加敏感的血清標(biāo)志物顯得尤為重要。GP73是一種高爾基體跨膜蛋白，由美國(guó)學(xué)者Ⅺadney等最早發(fā)現(xiàn)，并指出GP73在健康人體肝組織中，主要由膽管上皮細(xì)胞表達(dá)，而很少在肝細(xì)胞內(nèi)表達(dá)甚至不表達(dá)[4]。在受到非病毒原因(自身免疫性肝炎或酒精性肝病)或病毒性感染均可引起GP73的高表達(dá)，此項(xiàng)研究為GP73應(yīng)用于肝臟疾病的診斷提供理論依據(jù)。李慶芝[5]通過(guò)研究發(fā)現(xiàn)，HCC患者血清中GP73呈高表達(dá)，是正常肝臟GP73表達(dá)量的數(shù)十倍，其早期發(fā)現(xiàn)HCC的敏感度高于AFP。在HCC患者中GP73在血清中含量升高的機(jī)制目前仍不清楚，研究指出其轉(zhuǎn)錄調(diào)控機(jī)可能與以下幾方面有關(guān)[6,7]：①血液中雌激素及骨化三醇水平；②體內(nèi)乙肝病毒的復(fù)制；③血液中TNF-α和TCF-α含量；④肝硬化患者(與病原學(xué)無(wú)關(guān))；⑤急慢性肝細(xì)胞損傷；⑥機(jī)體內(nèi)弗林含量的變化等。

研究發(fā)現(xiàn)[8,9]，在急慢性肝炎患者，大部分肝臟細(xì)胞GP73呈高表達(dá)，而肝硬化患者其血清內(nèi)GP73水平又進(jìn)一步升高，發(fā)展到HCC時(shí)，GP73的表達(dá)達(dá)到高峰。本研究中，筆者得出HCC患者血清中GP73表達(dá)與患者的年齡、腫瘤大小、性別及AFP濃度等無(wú)明顯相關(guān)性。而HCC組血清GP73水平較慢性乙型肝炎組、乙肝后肝硬化組均要高(P<0.05)，提示GP73可能與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展有關(guān)，隨著病情的進(jìn)展，其血清內(nèi)水平不斷增高。另外，研究發(fā)現(xiàn)，GP73的病理表達(dá)不止是在肝臟。最近研究指出，在各種類(lèi)型的腺癌組織中可見(jiàn)高爾基磷酸蛋白呈高表達(dá)，包括腎上腺癌、前列腺癌、結(jié)腸癌腺癌等，這可能會(huì)影響GP73對(duì)HCC的特異性。而本研究中，HCC患者血清GP73含量高于其他腫瘤患者，可見(jiàn)GP73可作為HCC早期診斷的血清標(biāo)記物。GP73對(duì)HCC診斷的敏感性、特異性上，研究結(jié)果顯示，GP73診斷HCC的特異度達(dá)92.8%，敏感性80.2%，這項(xiàng)研究顯示出檢測(cè)HCC患者GP73的高特異性和高敏感性。本研究中，應(yīng)用ROC曲線對(duì)GP診斷HCC的準(zhǔn)確性進(jìn)行客觀地評(píng)價(jià)，結(jié)果顯示，GP73診斷HCC的特異度、靈敏度均高于AFP(P<0.05)，說(shuō)明GP73對(duì)HCC的早期診斷有重要的臨床價(jià)值。

[1] 孫啟明,陳海波,顧玉明,等.比較兩種方法檢測(cè)血清高爾基體膜蛋白-73診斷肝細(xì)胞肝癌的價(jià)值[J].徐州醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2014,34(6):364～367.

[2] 江均昌,周林福.高爾基體駐膜糖蛋白73的研究進(jìn)展及其與肝癌等疾病的聯(lián)系[J].浙江大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版),2012,41(2):215～221.

[3] 陳海波,顧玉明,王洵,等.高爾基體膜蛋白73在原發(fā)性肝癌患者血清中的表達(dá)及其早期診斷價(jià)值[J].介入放射學(xué)雜志,2014,23(6):528～531.

[4] 鄭盛,唐映梅,楊晉輝,等.血清GP73和AFP單項(xiàng)與聯(lián)合診斷原發(fā)性肝癌的價(jià)值[J].肝臟,2013,18(3):164～166.

[5] 李慶芝.血清高爾基體膜蛋白73在原發(fā)性肝細(xì)胞癌早期診斷中的應(yīng)用[J].中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合外科雜志,2016,22(5):435～437,438.

[6] 巢映暉,傅華群.肝癌新的血清標(biāo)記物高爾基體蛋白73[J].中華肝膽外科雜志,2011,17(12):1027～1029.

[7] 蔡媛媛,徐霞.Ⅱ型高爾基體膜蛋白GP73的研究進(jìn)展[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)診斷學(xué),2012,16(7):1328～1331.

[8] 童海江,王亞玲.血清高爾基體蛋白73檢測(cè)在肝病患者中的意義[J].放射免疫學(xué)雜志,2012,25(2):219～220.

[9] 聶東雷,陳亞晗.血清高爾基體蛋白73與肝臟疾病研究進(jìn)展[J].中華實(shí)用診斷與治療雜志,2016,30(8):735～737.

The Application of Serum Golgi Membrane Protein 73 in Early Diagnosis of Primary Hepatocellular Carcinoma

CHENFei,ZENGChuanqin,OUbin

(TheWestChinaGuang'anHospital,SichuanUniversity,SichuanGuang'an638001,China)

Objective: To investigate the clinical value of serum Golgi membrane protein 73 (GP73) in the diagnosis of primary hepatocellular carcinoma (HCC).Methods：300 people including healthy people, outpatient and inpatient in our hospital from July 2014 to July 2015 were divided respectively into five groups as HCC group, posthepatitic b cirrhosis group, other malignant tumor group, chronic hepatitis B group and healthy control group. The level of Serum GP73 and alpha fetoprotein (AFP) were determined and the ROC curve of its diagnostic HCC was drawn. Result: There was no significant difference in the level of serum GP73 of the patients with different age, tumor size, gender and concentration of serum AFP in the HCC group (P>0.05). The level of serum AFP and GP73 of the patients in the HCC group were significantly higher than that in the other groups(P<0.05), while the level of serum AFP and GP73 of the patients in the chronic hepatitis B, posthepatitic b cirrhosis group and other malignant tumor group were significantly higher than that of the healthy control group(P<0.05). The specificity and sensitivity of GP73 in the diagnosis of HCC were significantly higher than those of AFP, P<0.05. Conclusion: The sensitivity and specificity of serum GP73 in the diagnosis of HCC are better than those of AFP. GP73 can be a serum marker in the early diagnosis of HCC.

Primary hepatocellular carcinoma; GP73; Chronic hepatitis B; Posthepatitic b cirrhosis; Malignant tumor; early diagnosis

四川省科技廳科研課題，(編號(hào)：2013JY02541)

1006-6233(2017)02-0263-04

A 【doi】10.3969/j.issn.1006-6233.2017.02.026