崔志海，張 輝

（廊坊市藥品檢驗(yàn)所，河北 廊坊 065000）

金菊五花茶顆粒是由金銀花、木棉花、葛花、野菊花、槐花、甘草等6種藥味經(jīng)提取制成的顆粒劑，具有清熱利濕、涼血解毒、清肝明目的功效，用于大腸濕熱所致的泄瀉、痢疾、便血、痔血以及肝熱目赤，風(fēng)熱咽痛，口舌潰爛等癥[1]。金菊五花茶顆?，F(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)為《衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)》中藥成方制劑第十冊(cè)，標(biāo)準(zhǔn)中僅規(guī)定了一項(xiàng)理化鑒別和蘆丁的薄層色譜法鑒別，缺少對(duì)葛花的專屬性鑒別。本研究針對(duì)葛花主要含射干苷等異黃酮成分[2][3]的特性，參考有關(guān)文獻(xiàn)資料，采用薄層色譜法對(duì)金菊五花茶顆粒中的射干苷進(jìn)行鑒別，并進(jìn)行了相關(guān)方法學(xué)驗(yàn)證，為提高金菊五花茶顆粒的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供了方法參考，有利于保證該藥品的質(zhì)量。

1 資料與方法

1.1 儀器

CAMAG TLC Visualizer薄層色譜存檔系統(tǒng)；WD-9403C紫外分析儀；科導(dǎo)SK7210超聲儀；賽多利斯CPA224S電子天平（感量0.1 mg）。

1.2 材料

射干苷（批號(hào)：111632-200602），購(gòu)自中國(guó)食品藥品檢定研究院。薄層板為硅膠GF254手鋪板及預(yù)制板；硅膠GF254產(chǎn)地：青島海洋化工廠；預(yù)制板產(chǎn)地：（1）煙臺(tái)市化工研究所（批號(hào)：20150320），（2）德國(guó)默克公司（批號(hào)：HX54736129）。試劑試藥均為分析純，水為超純水。

1.3 樣品

金菊五花茶顆粒樣品3批：⑴廣州萊泰制藥有限公司（批號(hào)：160617）；⑵廣東嘉應(yīng)制藥股份有限公司（批號(hào)：20150501）；⑶廣西方略集團(tuán)龍州制藥有限公司（批號(hào)：1505001）。葛花樣品11批，購(gòu)自北京同仁堂（亳州）飲片有限責(zé)任公司、河北漢草堂藥業(yè)有限公司等藥企及安國(guó)、亳州中藥材市場(chǎng)，來源覆蓋了葛花主要產(chǎn)區(qū)。樣品經(jīng)河北省藥品檢驗(yàn)研究院段吉平主任藥師鑒定為正品。

2 結(jié) 果

2.1 試驗(yàn)方法

取金菊五花茶顆粒10 g，研細(xì)，加甲醇30 mL，超聲處理30分鐘，濾過，濾液濃縮至5 mL，作為供試品溶液。取射干苷對(duì)照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1 mL含1 mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法（《中國(guó)藥典》2015年版通則0502）試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5 μL，分別點(diǎn)于同一硅膠GF254薄層板上，以三氯甲烷-甲醇-水（13:7:2）的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈（254 nm）下檢視。

2.2 專屬性考察

按金菊五花茶顆粒的處方比例，取葛花以外的其余5種藥味，粉碎后照“2.1”項(xiàng)下供試品溶液制備方法制成陰性對(duì)照溶液。取3批金菊五花茶顆粒樣品，分別按“2.1”項(xiàng)下方法制成供試品溶液。吸取供試品溶液、對(duì)照品溶液與陰性對(duì)照溶液各5μl，按“2.1”項(xiàng)下方法進(jìn)行試驗(yàn)。結(jié)果供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相對(duì)應(yīng)的位置上，均顯相同顏色的斑點(diǎn)；在供試品和對(duì)照品色譜所顯斑點(diǎn)相對(duì)應(yīng)的位置上，陰性對(duì)照溶液無斑點(diǎn)。結(jié)果表明陰性對(duì)照溶液無干擾。（見圖1）

圖1 金菊五花茶顆粒薄層鑒別色譜圖硅膠GF254預(yù)制板（德國(guó)默克公司）

2.3 耐用性考察

吸取供試品溶液、對(duì)照品溶液各5 μL，按照“2.1”項(xiàng)下方法，分別使用不同來源的薄層板，在不同溫度、相對(duì)濕度下進(jìn)行試驗(yàn)。結(jié)果表明，在不同溫度濕度下，色譜的分離效果均較好，說明溫濕度對(duì)本法的影響較?。ㄒ妶D2）；使用進(jìn)口預(yù)制板、國(guó)產(chǎn)預(yù)制板、手鋪板，供試品色譜與對(duì)照品色譜的斑點(diǎn)均較清晰，說明不同來源的薄層板對(duì)本法無明顯影響。（見圖3）

圖2 不同溫濕度條件下的金菊五花茶顆粒薄層鑒別色譜圖

圖3 不同來源薄層板的金菊五花茶顆粒薄層鑒別色譜圖

3 討 論

3.1 供試品的提取

考察了加熱回流與超聲提取兩種方法。取同一供試品，分別采用加熱回流30分鐘和超聲30分鐘進(jìn)行提取，按同法試驗(yàn)，結(jié)果表明超聲法提取的供試品色譜所顯斑點(diǎn)更佳。因此采用超聲提取方式。

3.2 有的文獻(xiàn)中將葛花所含的射干苷描述為鳶尾苷，兩者應(yīng)為同一物質(zhì)

射干苷對(duì)照品標(biāo)簽的英文名稱為“Belamcandin（Tectoridin）”。

3.3 將11批葛花樣品粉碎后

分別取0.5 g，照“2.1”項(xiàng)下供試品溶液制備方法提取后同法進(jìn)行薄層色譜分析。結(jié)果11批葛花樣品色譜均顯與射干苷對(duì)照品相對(duì)應(yīng)的的斑點(diǎn)。

3.4 如以葛花作為對(duì)照

因所顯斑點(diǎn)較多，陰性對(duì)照溶液在與葛花藥材色譜中1～2處相應(yīng)的位置處也顯有斑點(diǎn)，存在干擾；同時(shí)葛花對(duì)照藥材目前沒有商品供應(yīng)，因此選擇以射干苷作為對(duì)照進(jìn)行鑒別。

[1]衛(wèi)生部藥典委員會(huì).衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)[S].中藥成方制劑.第十冊(cè),1992:90.

[2]國(guó)家中醫(yī)藥管理局.中華本草[M].第十一卷.上海：上海科學(xué)技術(shù)出版社,1999:619-620.

[3]張國(guó)峰,吳 瑕,等.HPLC法同時(shí)測(cè)定野葛花中4種異黃酮成分的含量[J].沈陽(yáng)藥科大學(xué)學(xué)報(bào),2009,26(01):40-44.