杜冰曌++楊鑫瑤++馮曉++尹旭+張和新歌++趙鳳+高增平++屠鵬飛+柴興云

[摘要]嶺南特色藥材崗梅為冬青科冬青屬梅葉冬青的根和莖，具有清熱解毒、生津止渴、利咽消腫、散瘀止痛之功效，民間多用于治療風(fēng)熱感冒、急慢性咽喉炎、咽喉腫痛等疾病?，F(xiàn)代研究表明，崗梅的化學(xué)成分以三萜皂苷為主，也含有一定的酚酸和少量甾體及單萜。藥理研究顯示，崗梅提取物具有抗炎、抗病毒、抗腫瘤、調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝等活性。該文對(duì)崗梅的傳統(tǒng)應(yīng)用、化學(xué)成分及藥理活性進(jìn)行整理，以期為系統(tǒng)的藥效物質(zhì)研究、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提升及資源進(jìn)一步開發(fā)利用提供參考。

[關(guān)鍵詞]崗梅； 冬青屬； 三萜皂苷； 藥理活性； 綜述

崗梅為冬青屬植物梅葉冬青Ilex asprella （Hook et Arn） Champ ex Benth的干燥根及莖，性苦、微甘、涼。歸肺、脾、胃經(jīng)[1]，具有清熱解毒、生津止渴、利咽消腫、散瘀止痛之功效，臨床用于治療風(fēng)熱感冒、急慢性咽喉炎、肺熱咳嗽、咽喉腫痛、跌打瘀癰等病癥。崗梅既是感冒靈顆粒、外感顆粒、青梅感冒沖劑等多種清熱解毒類中成藥的重要原料之一，又是復(fù)方崗梅沖劑、復(fù)方崗梅合劑、復(fù)方土牛膝糖漿等醫(yī)院制劑的組成藥物，也是嶺南地區(qū)王老吉涼茶、沙溪涼茶等的重要原料，市場(chǎng)需求大[2]。

梅葉冬青為落葉灌木，高約1～4 m，具長(zhǎng)枝和宿短枝，長(zhǎng)枝纖細(xì)，栗褐色，無(wú)毛，具淡色皮孔，短枝多皺，具宿存的鱗片和葉痕，形如秤星，又稱為“秤星樹”。梅葉冬青喜溫暖濕潤(rùn)氣候，主要分布在廣東、廣西、湖南、江西、福建、臺(tái)灣等地，常生長(zhǎng)于海拔400～1 000 m的山地疏林或路旁灌叢中[3]。崗梅作為我國(guó)嶺南特色藥材之一，受到不少學(xué)者關(guān)注[2，4]，辛?xí)苑嫉萚1，5]總結(jié)了崗梅提取物及相關(guān)復(fù)方制劑的藥理作用，但針對(duì)崗梅化學(xué)成分、單體化合物活性、質(zhì)量評(píng)價(jià)等整理還不夠系統(tǒng)?；诖耍疚膶?duì)崗梅化學(xué)成分和藥理活性進(jìn)行全面歸納，為其藥效物質(zhì)研究、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提升及資源進(jìn)一步開發(fā)利用做些準(zhǔn)備。

1化學(xué)成分

迄今為止，崗梅中已報(bào)道了分離鑒定的104個(gè)化學(xué)成分，在數(shù)目和含量上皆以三萜皂苷為主，尤其是熊果烷（烏蘇烷）型，亦含有綠原酸、黃酮、苯丙素及木脂素，少量甾體等其他類。崗梅化學(xué)成分結(jié)構(gòu)式1～104，見圖1，2。由表可知，大多數(shù)成分來(lái)自崗梅根，部分來(lái)自崗梅葉中，暫時(shí)無(wú)崗梅莖的化學(xué)研究報(bào)道。

11三萜及皂苷類目前已發(fā)現(xiàn)30種以上類型，主要分四環(huán)三萜和五環(huán)三萜2類[6]，具有抗癌、抗炎、抗過(guò)敏、抗病毒、降血糖、防治心腦血管疾病等作用[7]。

崗梅三萜或皂苷主要為熊果烷型，另有部分齊墩果烷型 （51～63）和其他類型 （64～67），其中23個(gè)為三萜苷元，包括1，4，9，21，29，31～32，39，41，43，46，48，50，52～57，64～67；44個(gè)為皂苷，糖鏈部分包括Xyl，Ara，Glc，GlcA 4種單糖類型。值得注意的是，崗梅含有磺酸化皂苷，其中化合物4，13的磺酸化在苷元上，17，19，24～25，33～34，38的磺酸化在糖上，61在糖和苷元上同時(shí)有磺酸基取代。崗梅皂苷中有28個(gè)以新化合物被發(fā)現(xiàn)，分別為（3β）19hydroxy28oxours12en3yl βDglucopyranosiduronic acid nbutyl ester（15） [8]，ilexasosides A～H （16～19，26，35～37） [12]，asprellanosides C～E （24～25，38） [14]，ilexasprellanosides A～F （5～6，20，58～59，63） [15]，asprellanosides A～B（33，34） [10]，ilexasprellanoside H（40） [19]，asprellic acids A～C（54～56） [9]，asprellcoside A （61）[11]和asprellols A～C（64～66） [13]，提示崗梅化學(xué)成分研究的潛力較大，特別是從崗梅根乙醇提取物的氯仿萃取部位中分離得到的64～66，有一定的結(jié)構(gòu)新穎度，類似于木栓烷型，不同之處在于木栓烷型的C5連甲基，但64～66的甲基連于C10上，64～66也可以歸屬于降熊果烷型[13]。

崗梅三萜1，5，41，51，63對(duì)人腫瘤細(xì)胞株A549有明顯細(xì)胞毒活性[15]，12和33可抗HSV1，其活性可能因C3連接木糖且C23和C24為甲基所致，如果C3位不連木糖，如7和8，或者三萜C23，C24甲基被氧化，如45和47，抗HSV1活性消失[10]。齊墩果烷型化合物54和56對(duì)RPMI7951細(xì)胞系和KB細(xì)胞有強(qiáng)細(xì)胞毒性[9]， 61可抑制流感病毒，并能抑制ADP誘導(dǎo)的體外血小板聚集，且抗聚集作用或由硫基貢獻(xiàn)[11]。

12酚酸類除三萜外，從崗梅中報(bào)道了3個(gè)綠原酸、9個(gè)黃酮、11個(gè)苯丙素和木脂素、6個(gè)其他類共29個(gè)酚酸。

鄧桂球等[17]報(bào)道了崗梅根中的綠原酸（68）、隱綠原酸（69）和3，5O二咖啡?？鼘幩峒柞ィ?0）。因?yàn)榫G原酸類具有較廣泛的抗菌作用，被視為崗梅抑菌活性的藥效物質(zhì)。黃酮類在崗梅葉中報(bào)道相對(duì)較多，包括山柰酚及其葡萄糖苷（71～76）、槲皮素及其糖苷（77～79）

2藥理活性

崗梅有清熱解毒、利咽消腫之功效，臨床用于治療風(fēng)熱感冒、上呼吸道感染等疾病。藥理學(xué)中上述功效與抗炎和鎮(zhèn)痛作用相關(guān)，因此藥理學(xué)研究多圍繞根、莖、葉等不同部位提取物的抗炎作用及相應(yīng)分子機(jī)制，這是當(dāng)前研究崗梅的主要內(nèi)容。此外，也有抗病毒、抗腫瘤、調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝等報(bào)道。

21抗炎組織腫脹是炎癥早期的重要反應(yīng)，在炎癥晚期和慢性炎癥期，則會(huì)形成肉芽組織[28]。研究表明，灌胃給藥崗梅水提物生藥8，16 g·kg-1對(duì)二甲苯致小鼠耳廓腫脹有顯著效果（P< 001），以水提物生藥28，56，112 g·kg-1劑量可顯著抑制角叉菜膠致大鼠足跖腫脹（P<005或P<001）；此劑量在大鼠棉球肉芽腫實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ蜕弦灿酗@著效果（P<005或P<001）；崗梅水提物生藥4，8，16 g·kg-1能明顯抑制醋酸致小鼠毛細(xì)血管通透性增高（P<005或P<001） [29]。崗梅醇提物6，12 g·kg-1對(duì)二甲苯致小鼠耳廓腫脹也有顯著效果（P<005或P<001） [30]；崗梅根、莖、葉、根莖混合醇提物分別灌胃給藥8 g·kg-1于此模型，耳腫脹抑制率分別達(dá)6211%，4395%，5390%，5738%[31]。崗梅根醇提物生藥9 g·kg-1肌肉注射可抑制角叉菜膠致大鼠足跖腫脹和大鼠棉球肉芽腫增生（P<001） [32]；根醇提物12 g·kg-1對(duì)大鼠棉球肉芽腫模型有一定的抑制作用（P<005）；根醇提物6，12 g·kg-1也能明顯抑制醋酸致小鼠毛細(xì)血管通透性增高（P<005或P<001） [30]。

動(dòng)物體內(nèi)實(shí)驗(yàn)表明崗梅水提物和醇提物對(duì)急性炎癥或慢性炎癥都有一定的抑制作用，且根和莖的效果近似，為崗梅根莖相互替代提供了一定的參考[33]。ELISA雙抗體夾心法檢測(cè)感染甲型流感病毒FM1株的小鼠血清中炎癥因子水平，結(jié)果顯示，崗梅根水提物10，20 g·kg-1能明顯升高感

dime1OglucopyranosideC16H28O7葉[22]染病毒小鼠的IFNγ水平（P<001）；10 g·kg-1劑量明顯升高IL10水平（P<001），提示崗梅可升高抗炎細(xì)胞因子水平[34]。流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)感染A/FM/1/47 H1N1病毒小鼠體內(nèi)炎癥因子水平，結(jié)果顯示，崗梅醇提物500 mg·kg-1劑量組與感染組相比，IL6，MCP1和TNFα水平明顯下降（P<005或001），IL10和IFNγ水平明顯增高（P<005或001） [35]，化合物61和83對(duì)H1N1感染的A549細(xì)胞中誘導(dǎo)炎癥反應(yīng)的IP10有抑制作用，EC50分別為66，25 μmol·L-1[11]。上述實(shí)驗(yàn)說(shuō)明崗梅提取物可以抑制病毒感染導(dǎo)致的小鼠肺部炎癥。崗梅根、莖醇提物（生藥5 g·kg-1）灌胃給藥，對(duì)脂多糖致急性咽炎小鼠血清中的NO，MDA有顯著抑制效果（P< 001）當(dāng)給藥劑量相同時(shí)，同一植株的崗梅根、莖藥效無(wú)顯著性差異[33]。

22抗病毒動(dòng)物實(shí)驗(yàn)以肺指數(shù)或肺指數(shù)抑制率以及死亡保護(hù)率為檢測(cè)指標(biāo)。結(jié)果顯示，甲型流感病毒FM1株感染的小鼠經(jīng)崗梅根水提物灌胃給藥，其5，10，20 g·kg-1劑量組小鼠肺指數(shù)變化顯著（P<005或P<001），肺指數(shù)抑制率為181%，304%，325%，陽(yáng)性藥病毒唑（007 g·kg-1）抑制率為340%[34]。H9N2亞型禽流感病毒滴鼻感染的小鼠灌胃給藥崗梅根水提物，5，10 g生藥·kg-1劑量可顯著降低小鼠的肺指數(shù)（P< 001），延長(zhǎng)存活時(shí)間（P< 001） [36]，說(shuō)明崗梅根水提物具有體內(nèi)抗流感病毒作用。

體外實(shí)驗(yàn)方面，崗梅根水提物125 g·L-1濃度能完全抑制MDCK細(xì)胞中甲1型流感病毒FM1株的血凝素，莖的水提物125 g·L-1對(duì)病毒有抑制作用。崗梅根水提物（40，20） g·L-1能抑制A549細(xì)胞中呼吸道合胞病毒（RSV）致細(xì)胞的病變，且40 g·L-1時(shí)可完全抑制，20 g·L-1能抑制90%的病毒。崗梅莖水提物40 g·L-1對(duì)感染RSV病毒的A549細(xì)胞有顯著抑制作用抑制率90%，而20 g·L-1對(duì)RSV病毒無(wú)抑制作用。崗梅根水提物466，233 g·L-1能完全抑制HEL細(xì)胞中腺病毒3型病毒，莖水提物在質(zhì)量濃度550，275 g·L-1能完全抑制腺病毒3型所致的細(xì)胞病變作用。根水提物50 g·L-1無(wú)毒濃度能完全抑制LLCMK2細(xì)胞中副流感病毒3型所致的細(xì)胞病變作用，而莖水提物25 g·L-1無(wú)毒濃度無(wú)明顯抑制副流感病3型作用[37]。

上述表明，崗梅根、莖提取物具有較好的抗病毒潛力，值得進(jìn)一步探索。化合物61，83對(duì)H1N1感染的A549細(xì)胞中神經(jīng)氨酸酶具有抑制作用，EC50分別為41，17 μmol·L-1，陽(yáng)性藥奧司他韋EC50為09 μmol·L-1[11]?；衔?2和33具有抗HSV1病毒活性，TIC分別為014，018 mmol·L-1 [10]。

23抗腫瘤MTT法測(cè)化合物1，5，41，51，63對(duì)人腫瘤細(xì)胞系A(chǔ)549細(xì)胞毒性IC50分別為563，187，324，141，251 μmol·L-1，陽(yáng)性藥5FU的IC50為2896 μmol·L-1[15]?；衔?4對(duì)黑色素瘤細(xì)胞RPMI7951有較強(qiáng)的細(xì)胞毒性，ED50為 062 mg·L-1，56的細(xì)胞毒性微弱，ED50為55 mg·L-1?；衔?4和56均顯示對(duì)人口腔表皮樣癌細(xì)胞KB有細(xì)胞毒性，ED50分別為375，286 mg·L-1[9]。

24調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝崗梅根水煎液915 g·kg-1對(duì)束縛負(fù)荷下高脂飲食性脂肪肝大鼠脂蛋白代謝相關(guān)酶和非酒精性脂肪肝大鼠脂肪酸代謝有一定的干預(yù)作用[3839]。崗梅根總皂苷混懸液440，220，110 mg·kg-1給藥大鼠高血脂模型，血清中總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白膽固醇（LDLC）、血清瘦素（LEP）、白細(xì)胞介素6（IL6）、C反應(yīng)蛋白（CPR）水平顯著降低（P<001），高密度脂蛋白膽固醇（HDLC）和脂聯(lián)素（ADP）水平顯著升高（P<005或P<001），提示具有降血脂作用[40]。

25其他作用包括抗菌、鎮(zhèn)咳、鎮(zhèn)痛、改善免疫、抑制血小板聚集和抗氧化作用，其中抗菌、鎮(zhèn)咳和鎮(zhèn)痛與崗梅利咽消腫，散瘀止痛傳統(tǒng)功效相關(guān)，但目前報(bào)道較少。

在污染菌量（13～14）×106 CFU·mL-1時(shí)，崗梅根、莖水提物對(duì)金黃色葡萄球菌和大腸埃希菌有抑制作用，且莖的殺菌能力略優(yōu)于根[41]。崗梅的水、70%乙醇、60%丙酮提取物對(duì)4種試驗(yàn)菌均顯示一定的抑制活性，其中對(duì)金黃色葡萄球菌作用最強(qiáng)，其次為真菌（白色念珠菌），對(duì)革蘭陰性菌（銅綠假單胞菌和大腸埃希菌）抑菌作用較弱[42]。

崗梅根、莖、葉、及根莖混合醇提取物灌胃給藥氨水致咳喘小鼠模型，8 g·kg-1同一劑量下比較5 min內(nèi)小鼠咳嗽次數(shù)發(fā)現(xiàn)，崗梅根、莖、根莖混合醇提物均有顯著作用（P<005） [32]。

崗梅根水煎液16 g·kg-1可顯著抑制醋酸扭體實(shí)驗(yàn)中小鼠扭體次數(shù)及熱板實(shí)驗(yàn)中給藥15 h后的耐受時(shí)間（P<005），顯示崗梅根的鎮(zhèn)痛效果[43]。

此外，崗梅根水提物能提高病毒感染小鼠外周血CD3+，CD4+，CD8+百分比，升高CD4/CD8比值，即改善病毒感染所導(dǎo)致的細(xì)胞免疫損傷，提高T淋巴細(xì)胞免疫功能[34]?；衔?1對(duì)ADP誘導(dǎo)的血小板聚集有抑制作用，濃度60，80 μmol·L-1時(shí)抑制率分別為38%和47%，陽(yáng)性藥奧扎格雷鈉50 μmol·L-1的抑制率為51%[11]。不同崗梅提取物有一定的抗氧化能力，水提物、70%乙醇提物、60%丙酮提取物對(duì)羥基和DPPH自由基均有一定的清除、還原能力和抑制脂質(zhì)過(guò)氧化能力[42]。根莖比較的實(shí)驗(yàn)表明，崗梅根、莖均有較強(qiáng)的還原能力及清除羥基自由基能力，且莖的還原能力顯著優(yōu)于根[33]。

3討論與展望

冬青科冬青屬植物在全世界約有400多種，我國(guó)有205種[44]，約有30種入藥用，以梅葉冬青I asprella、大葉冬青I latifolia Thunb、毛冬青Ipubescens Hooket Arn以及鐵冬青Irotunda Thunb最為常見，在當(dāng)?shù)赜糜谇鍩峤舛尽⑾?、?zhèn)咳、止痛等[45]。冬青屬化學(xué)成分皆以三萜為主，也有黃酮、木脂素等酚類、植物甾醇、蒽醌等，顯示抗病原微生物、抗炎、抗腫瘤、保護(hù)心腦血管及降糖、降脂等功效[46]。

崗梅是我國(guó)嶺南常用中藥之一，無(wú)論自制涼茶祛暑解渴，還是入藥治療肺熱上火、風(fēng)熱感冒，應(yīng)用較多，尤其作為感冒靈顆粒、外感顆粒等常用中成藥的主要原料，大大增加了藥材消耗量。崗梅傳統(tǒng)以根入藥，但由于根生長(zhǎng)緩慢，近些年因需求量增加導(dǎo)致過(guò)度采挖，野生資源已不能滿足市場(chǎng)所需，因而廣東和湖南兩省將崗梅莖一并入藥，收載于《廣東省中藥材標(biāo)準(zhǔn)》（2004）和《湖南省中藥材標(biāo)準(zhǔn)》（2009）。崗梅研究多圍繞根、莖、葉等不同部位的化學(xué)成分、藥理作用及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)方面，以期在符合傳統(tǒng)用藥的前提下，進(jìn)一步展拓資源，解決原料供應(yīng)這一瓶頸問題，三九藥業(yè)進(jìn)行的崗梅大規(guī)模人工栽培即為有效舉措之一。

三萜皂苷尤其熊果烷型和齊墩果烷型是崗梅主成分，也是發(fā)揮抗炎、抗病毒和抗腫瘤的活性成分。目前化學(xué)研究對(duì)象以根為主，針對(duì)葉的研究較少，而無(wú)崗梅莖化學(xué)研究報(bào)道。藥理研究以水和醇提物進(jìn)行體內(nèi)抗炎實(shí)驗(yàn)較多，有關(guān)鎮(zhèn)痛和鎮(zhèn)咳方面較少。當(dāng)前的進(jìn)展大致揭示了崗梅抑制動(dòng)物炎癥和流感病毒導(dǎo)致的炎癥作用，及相應(yīng)作用機(jī)制初步探索。崗梅單體化合物的藥理學(xué)研究少，除少數(shù)體外篩選外，沒有對(duì)特定單一成分的藥效評(píng)價(jià)及機(jī)制研究。其原因一方面是崗梅研究還不夠深入，另一方面更可能是崗梅中沒有壓倒性優(yōu)勢(shì)成分，而且，三萜苷元結(jié)構(gòu)相似度較高，而三萜皂苷極性大等性質(zhì)特點(diǎn)，增加了單體成分的分離難度，致使難以獲得足夠量進(jìn)行體內(nèi)實(shí)驗(yàn)。

盡管崗梅的臨床應(yīng)用廣，市場(chǎng)用量大，至今卻不是《中國(guó)藥典》收載品種，也缺少相應(yīng)的質(zhì)量評(píng)價(jià)研究。有報(bào)道稱，通過(guò)紅外和指紋圖譜方法比較崗梅根和莖[33，47]，顯示兩者化學(xué)類別相似，且總皂苷含量也接近，彭敏樺等[48]以randialic acid B （21）為對(duì)照品建立了總皂苷含量測(cè)定方法。除此之外，幾乎無(wú)其他相關(guān)的質(zhì)量評(píng)價(jià)報(bào)道。

綜上，結(jié)合崗梅的傳統(tǒng)用藥，加強(qiáng)化學(xué)成分特別是莖的成分研究，同時(shí)開展體內(nèi)藥效評(píng)價(jià)，以闡明崗梅的藥效物質(zhì)，在此基礎(chǔ)上進(jìn)一步建立包括根、莖、葉等多個(gè)部位的質(zhì)量評(píng)價(jià)方法，將是當(dāng)前及今后一段時(shí)間的主要工作。

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[責(zé)任編輯丁廣治]